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mRNA 疫苗合成过程所需原料及成本测算

MRNA 合成过程所需原料及成本测算

（一）国内外 MRNA 新冠疫苗的合成工艺

（二）MRNA 制备过程原料

（三）MRNA 制备过程原料成本测算

（五）原材料供应商情况

mRNA 合成过程所需原料及成本测算

（一）国内外 mRNA 新冠疫苗的合成工艺

参考已发表的文献，BioNTech/辉瑞、Moderna 和艾博生物 mRNA 疫苗的合成工艺如下：

1）BNT162b2–BioNTech/辉瑞

三核苷酸 cap1 类似物（（m27,3′-O真空装）Gppp（m2供墨系统'-O）ApG褥疮防治床垫）（TriLink）垃圾气化和 N1-甲基假尿苷-5′-三磷酸（m1ψTP）（Thermo 压花器Fisher Scientifi水溶性抗氧化剂c）取代尿苷-5′-三磷酸（UTP）的存在下，通过 T7 RNA 聚合酶对 DNA 进行纯化和体外转录。

总结：转录采用一步法，帽子类似物作引物；甲基假尿苷取代尿苷。

2）mRNA-1273–Moderna

利用优化的T7 RNA聚合酶介导的转录反应在体外合成了编码序列优化的mRNA，尿苷被 N1-甲基假尿苷完全取代。转录后，使用牛痘苗封盖酶（新英格兰生物实验室）和痘苗 2′O-甲基转移酶（新英格兰生物实验室）将 Cap 1 结构添加到 5’端。通过 oligo

dT 亲和纯化纯化 mRNA，通过切向流过滤将缓冲液交换到 pH 为 5.0 的醋酸钠中，无菌过滤，并在-20°C 下冷冻，直到进一步使用。

总结：转录采用两步法，需要加帽酶的参与，甲基假尿苷取代尿苷。

3）ARCoV -艾博生物

该 mRNA 在体外使用 T7 RNA 聚合酶介导的转录从质粒ABOP-028（GENEWIZ）的线性化 DNA 模板中产生，该质粒编码 SARS-CoV-2 的密码子优化 RBD 区域，并包含 5’和 3‘的未翻译区域（UTR）和一条 poly-a 尾巴，以未修饰的 NTP 作为原料和 T7 聚合酶体外进行 mRNA 的合成，使用了牛痘加帽系统（Vaccinia Capping System ）

(Novoprotein) 进行加帽。

总结：转录采用两步法，需要加帽酶的参与。

（二）mRNA 制备过程原料

mRNA 制备过程需要用到的主要原料包括质粒 DNA 模板、一系列酶（主要为 7

种酶）以及底物核苷酸等;

1、模板 DNA 所需原料：质粒

图表 3：mRNA 的结构

DNA 模板生产，主要是质粒的生产。编码抗原的 DNA 模板，通过质粒转染到大肠杆菌大规模体内表达，最后提取和纯化携带目的序列的质粒，即得到 DNA 模板。目前质粒的生产提取和纯化工艺很成熟，可以自建生产线或者外包出去，例如辉瑞自建质粒生产工厂，大部分 mRNA 企业外包，Moderna 和国内企业目前是外包。