(10)申请公布号
(43)申请公布日 (21)申请号 201510283248.8
(22)申请日 2015.05.28
A23K 1/00(2006.01)
A23K 1/14(2006.01)
A23K 1/175(2006.01)
A23K 1/16(2006.01)
A23K 1/18(2006.01)
C12N 1/20(2006.01)C12N 1/18(2006.01)C12R 1/865(2006.01)C12R 1/125(2006.01)C12R 1/10(2006.01)C12R 1/23(2006.01)C12R 1/25(2006.01)
(71)申请人沈阳博善英胜生物技术有限公司
地址110064 辽宁省沈阳市沈北新区佳阳路
20-1号
(72)发明人潘军 薛德林 苏全 马春平
周琳琳 张伟强
(74)专利代理机构沈阳科苑专利商标代理有限
公司 21002
代理人马驰
(54)发明名称
的方法
(57)摘要
本发明公开了一种利用啤酒酵母泥生产微生
物发酵湿饲料的方法。以豆粕、玉米浆干粉、玉米
胚芽粕、麦麸、米糠为固体发酵原料，以啤酒酵母
内红瞄准镜芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌为辅助菌种，
四种菌的种子液混合，加入到固体发酵原料中，经
充分搅拌混合，放入到厌氧容器中承装发酵或者
放到发酵床上堆置发酵，经过96h ～120h 发酵过
程，直接作为饲料或者经过60℃低温烘干再经粉
汇聚路由器
碎机粉碎到60目，得到利用啤酒酵母泥生产的
微生物发酵湿饲料；本发明生产微生物发酵湿饲
料，生产工艺简单、费用低廉、节能环保，产品质量
好，促进养殖动物生长明显。(51)Int.Cl.
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书5页 说明书14页CN 106260504 A 2017.01.04
C N 106260504
A
1.一种利用啤酒酵母泥生产微生物发酵湿饲料的方法，其特征在于：以豆粕、玉米浆干粉、玉米胚芽粕、麦麸、米糠为固体发酵原料，以啤酒酵母泥中活酵母菌为主要菌种，以枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌为辅助菌种，生产微生物发酵湿饲料；啤酒酵母泥中加入培养基经种子液培养；枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌经固体种子培养和液体种子培养，将啤酒酵母泥种子液和四种菌的种子液按照重量比例混合，加入到固体发酵原料中，经充分搅拌混合，放入到厌氧容器中承装发酵或者放到发酵床上堆置发酵，经过96h～120h厌氧固体发酵过程或者有氧厌氧固体发酵过程，直接作为饲料，或者经过50℃～60℃低温烘干再经粉碎机粉碎到40目～60目，得到利用啤酒酵母泥生产的微生物发酵湿饲料；
固体发酵原料组成为：豆粕20～30重量份、玉米浆干粉20～30重量份、玉米胚芽粕20～30重量份、麦麸20～30重量份、米糠20～30重量份；
啤酒酵母泥种子液、枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液、嗜酸乳杆菌种子液、植物乳杆菌种子液的重量份数百分比为：啤酒酵母泥种子液50～60重量份；枯草芽孢杆菌种子液10～20重量份、地衣芽孢杆菌种子液10～20重量份、嗜酸乳杆菌种子液10～20重量份、植物乳杆菌种子液10～20重量
份，经混合，得微生物菌种混合液；
发酵原料与枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液、嗜酸乳杆菌种子液、植物乳杆菌种子液的混合液的重量份数比为：发酵原料100～120份，混合液40～60份。
2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：啤酒酵母泥种子液活菌数30个亿/ml以上、枯草芽孢杆菌种子液活菌数为100个亿/ml以上、地衣芽孢杆菌种子液活菌数为100个亿/ml以上、嗜酸乳杆菌种子液活菌数为50个亿/ml以上；植物乳杆菌种子液活菌数为50个亿/ml以上；
所述发酵原料中各物质的质量含水量为豆粕10％、玉米浆干粉10％、玉米胚芽粕10％、麦麸10％、米糠10％；所述发酵原料的总质量含水量为10％。
3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：
固体发酵原料中的豆粕、玉米浆干粉、玉米胚芽粕、麦麸、米糠比例为：豆粕20重量份、玉米浆干粉20重量份、玉米胚芽粕20重量份、麦麸皮20重量份、米糠20重量份；
啤酒酵母泥种子液、枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液、嗜酸乳杆菌种子液、植物乳杆菌种子液的重量份数百分比为：啤酒酵母泥种子液60份；枯草芽孢杆菌种子液10份、地衣芽孢杆菌种子液10份、嗜酸乳杆菌种子液10份、植物乳杆菌种子液10份，经混合，得微生物菌种混合液；
发酵原料与微生物菌种混合液的重量比为发酵原料100份，混合液40份。
4.按照权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于：具体包括以下步骤：
(1)发酵原料的制备：按要求比例将豆粕、玉米浆干粉、玉米胚芽粕、麦麸、米糠充分搅拌混合，得到发酵原料；
(2)啤酒酵母泥种子液的制备：将新鲜啤酒酵母泥接种到含有葡萄糖、玉米浆干粉、硫酸锌、硫酸亚铁、磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钠、硫酸锰和纯净水制成的培养基中，经过48h～64h通气培养，得到啤酒酵母泥种子液；
啤酒酵母泥培养基和培养条件：所述啤酒酵母泥接种到含有终质量浓度葡萄糖2％～3％、玉米浆干粉2％～3％、硫酸锌0.1％～0.2％、硫酸亚铁0.1％～0.2％、磷酸氢二钾
0.1％～0.2％、硫酸镁0.1％～0.2％、氯化钠0.1％～0.2％、硫酸锰0.1％％～0.2％％的纯净水制成的培养基中，用磷酸或氢氧化钠调pH值至5.0～6.0，啤酒酵母泥接种量的重量百分比为20％～30％，在温度28℃～32℃，经过48h～64h通气培养，得到啤酒酵母泥种子液；
(3)枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液、嗜酸乳杆菌种子液、植物乳杆菌种子液的制备：将经过活化的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌斜面菌种分别进行单菌落分离、纯
化，得到枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌的单菌落种子；再分别进行固体种子培养和液体种子培养，得到枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液、嗜酸乳杆菌种子液、植物乳杆菌种子液；
(4)按啤酒酵母泥种子液50～60重量份；枯草芽孢杆菌种子液10～20重量份、地衣芽孢杆菌种子液10～20重量份、嗜酸乳杆菌种子液10～20重量份、植物乳杆菌种子液10～20重量份的比例，将啤酒酵母泥种子液、枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液、酒酿酵母菌种子液、嗜酸乳杆菌种子液混合，接种到发酵原料中，发酵原料100～120份，混合液40～60份，进行固体发酵培养；
1)放入到厌氧容器中承装发酵，厌氧固体发酵96h后，得到利用啤酒酵母泥生产的微生物发酵湿饲料；
①有氧厌氧固体发酵阶段(0小时～24小时)：将混合种子液接种到粉碎成50目固体发酵原料中，混合搅拌均匀放入到厌氧容器中承装，压实，密封，发酵原料与外界不能有空气交流，能产生二氧化碳等气体，要及时排出；24小时后属于厌氧发酵，温度升高后，维持平衡升高，控制温度30℃～35℃，质量含水量35％～40％，开始分解发酵料中的产物；
②厌氧固体发酵阶段(24小时～96小时)：当温度升到最高点35℃～40℃时，发酵料继续分解，温度开始下降，质量含水量30％～35％，水活度降低，PH值下降到4以下，发酵达到终点，质量含水量25％
～30％，粒度≤50目，得到利用啤酒酵母泥生产微生物发酵湿饲料；
2)或者放到发酵床上堆置发酵，有氧厌氧固体发酵120小时后，低温烘干再经粉碎，得到利用啤酒酵母泥生产的微生物发酵湿饲料；
①有氧厌氧固体发酵阶段(0小时～48小时)：接种后的固体发酵原料放到发酵床上时，发酵料内含有一定的溶解氧，24小时内有氧发酵，经过24小时后，发酵料内的溶解氧消耗完，为厌氧固体发酵；此阶段不翻到，不通风，温度升高后，维持平衡升高，控制温度35℃～45℃，质量含水量35％～40％，开始分解发酵料中的产物；
②有氧固体发酵阶段(48小时～64小时)：48小时后，当发酵料温度升到最高点45℃～50℃时，开始翻倒发酵料并通风，温度开始下降，质量含水量30％～35％，水活度变低；继续分解发酵料中的产物；
③厌氧固体发酵阶段(64小时～120小时)：发酵料经过64小时后，控制温度在35℃～45℃，质量含水量25％～30％，继续分解发酵料中的产物；发酵时间到120小时，质量含水量20％～25％，发酵达到终点，在洁净条件下，经过负压流化床50℃～60℃低温烘干，再经粉碎机粉碎到50目～60目，得到利用啤酒酵母泥生产的微生物发酵湿饲料。
5.按照权利要求4所述的方法，其特征在于：啤酒酵母泥最佳的培养基和培养条件：所述啤酒酵母泥接种到含有终质量浓度葡萄糖3％、玉米浆干粉2％、硫酸锌0.1％、硫酸亚铁
0.1％、磷酸氢二钾0.1％、硫酸镁0.1％、氯化钠0.1％、硫酸锰0.2％％的纯净水制成的培养基中，用磷酸或氢氧化钠调pH值至5.0，啤酒酵母泥接种量为30％，在温度28℃条件下，经过48小时通气培养，得到啤酒酵母泥种子液。
化妆笔6.按照权利要求4所述的方法，其特征在于：1)放入到厌氧容器中承装发酵，厌氧固体发酵96h后，得到利用啤酒酵母泥生产的微生物发酵湿饲料；
①有氧厌氧固体发酵阶段(0小时～24小时)：将混合种子液接种到粉碎成50目固体发酵原料中，混合搅拌均匀放入到厌氧容器中承装，压实，密封，发酵原料与外界不能有空气交流，能产生二氧化碳等气体，要及时排出；24小时后属于厌氧发酵，温度升高后，维持平衡升高，控制温度35℃，质量含水量35％，开始分解发酵料中的产物；
②厌氧固体发酵阶段(24小时～96小时)：当温度升到最高点40℃时，发酵料继续分解，温度开始下降，质量含水量30％，水活度降低，PH值下降到4以下，发酵达到终点，质量含水量25％，粒度≤60目，得到利用啤酒酵母泥生产微生物发酵湿饲料。
7.按照权利要求6所述的方法，其特征在于：放到发酵床上堆置发酵，有氧厌氧固体发酵120小时后，低温烘干再经粉碎，得到利用啤酒酵母泥生产的微生物发酵湿饲料；
①有氧厌氧固体发酵阶段(0小时～48小时)：接种后的固体发酵原料放到发酵床上时，发酵料内含有一定的溶解氧，24小时内有氧发酵，经过24小时后，发酵料内的溶解氧消耗完，为厌氧固体发酵；此阶段不翻到，不通风，温度升高后，维持平衡升高，控制温度45℃，质量含水量35％，开始分解发酵料中的产物；滑水鞋
②有氧固体发酵阶段(48小时～64小时)：48小时后，当发酵料温度升到最高点50℃时，开始翻倒发酵料并通风，温度开始下降，质量含水量30％，水活度变低；继续分解发酵料中的产物；
③厌氧固体发酵阶段(64小时～120小时)：发酵料经过64小时后，控制温度在35℃，质量含水量30％，继续分解发酵料中的产物；发酵时间到120小时，质量含水量25％，发酵达到终点，在洁净条件下，经过负压流化床60℃低温烘干，再经粉碎机粉碎到60目，质量含水量≤10％，得到利用啤酒酵母泥生产的微生物发酵湿饲料。电机线束
8.按照权利要求4所述的方法，其特征在于：
枯草芽孢杆菌种子液的制备：
1)单菌落分离：将经活化的枯草芽孢杆菌斜面菌种在盛有新配置的含有牛肉膏0.5％、蛋白胨1％、琼脂粉2％的枯草芽孢杆菌培养基的培养皿上涂布，在恒温培养箱中30℃培养，得到枯草芽孢杆菌单菌落种子；
玻璃包装箱2)固体种子培养：枯草芽孢杆菌单菌落种子在盛有新配置的含有牛肉膏0.5％、蛋白胨1％、琼脂粉2％的枯草芽孢杆菌的200ml茄形扁瓶中接种，在恒温培养箱中30℃培养，得到枯草芽孢杆菌固体种子；
3)液体种子培养：将枯草芽孢杆菌固体种子按质量分数为10％的接种量接种到种子罐培养基中，经培养，得到枯草芽孢杆菌种子液；
所述种子罐培养基以重量百分比计为：玉米浆干粉2.0％～4.0％、硫酸铵0～0.2％、磷酸氢二钾0～0.2％，余量为水；种子罐灭菌条件，0.08～0.10MPa、115～121℃、18～20min；种子罐培养条件，罐压0.01～0.08MPa、通气量100:100～100:200vvm、转速100～200rpm、温度28℃～32℃、时间48～64h；枯草芽孢杆菌种子液中含枯草芽孢杆菌活菌数
≥100亿cfu/ml；
所述种子罐最佳培养基以重量百分比计为：玉米浆干粉4.0％、硫酸铵0.2％、磷酸氢二钾0.2％，余量为水；种子罐灭菌条件，0.08～0.10MPa、121℃、20min；种子罐培养条件，罐压0.08MPa、通气量100:200vvm、转速200rpm、温度32℃、时间48h；枯草芽孢杆菌种子液中含枯草芽孢杆菌活菌数≥100亿cfu/ml；
地衣芽孢杆菌种子液的制备：
1)单菌落分离：将经活化的地衣芽孢杆菌斜面菌种在盛有新配置的含有牛肉膏0.5％、蛋白胨1％、琼脂粉2％的地衣芽孢杆菌培养基的培养皿上涂布，在恒温培养箱中30℃培养，得到地衣芽孢杆菌单菌落种子；
2)固体种子培养：地衣芽孢杆菌单菌落种子在盛有新配置的含有牛肉膏0.5％、蛋白胨1％、琼脂粉2％的地衣芽孢杆菌的200ml茄形扁瓶中接种，在恒温培养箱中30℃培养，得到地衣芽孢杆菌固体种子；
3)液体种子液培养：将地衣芽孢杆菌固体种子按质量分数为10％～20％的接种量接种到液体种子罐培养基中，经培养，得到地衣芽孢杆菌种子液；
所述种子罐培养基以重量百分比计为：玉米浆干粉2.0％～4.0％、硫酸铵0～0.2％、磷酸氢二钾0～0.2％，余量为水；种子罐灭菌条件，0.08～0.10MPa、115～121℃、18～20min；种子罐培养条件，罐压0.01～0.08MPa、通气量100:100～100:200vvm、转速100～200rpm、温度28℃～32℃、时间48～64h；玉米浆干粉2.0～4.0％、硫酸铵0～0.2％、磷酸氢；地衣芽孢杆菌种子液中含地衣芽孢杆菌活菌数≥100亿cfu/ml；
所述种子罐最佳培养基以重量百分比计为：玉米浆干粉4.0％、硫酸铵0.2％、磷酸氢二钾0.2％，余量为水；种子罐灭菌条件，0.08～0.10MPa、121℃、20min；种子罐培养条件，罐压0.08MPa、通气量100:200vvm、转速200rpm、温度32℃、时间48h；地衣芽孢杆菌种子液中含地衣芽孢杆菌活菌数≥10
0亿cfu/ml；
嗜酸乳杆菌种子液的制备：
1)单菌落分离：将经活化的嗜酸乳杆菌斜面菌种在盛有新配置的葡萄糖1.5％、牛肉膏0.5％、蛋白胨0.5％、酵母膏0.5％、乙酸钠0.5％、琼脂粉2％培养基的培养皿上涂布，在恒温培养箱中36℃培养，得到嗜酸乳杆菌单菌落种子；
2)固体种子培养：嗜酸乳杆菌单菌落种子在盛有新配置的葡萄糖1.5％、牛肉膏0.5％、蛋白胨0.5％、酵母膏0.5％、乙酸钠0.5％、琼脂粉2％培养基的200ml茄形扁瓶中接种，在恒温培养箱中36℃培养，得到嗜酸乳杆菌固体种子；
3)液体种子培养：将嗜酸乳杆菌固体种子按质量分数为10％的接种量接种到种子罐培养基中，经培养，得到嗜酸乳杆菌种子液；
所述种子罐培养基以重量百分比计为：葡萄糖1.0％～2.0％、玉米浆干粉2.0％～4.0％、硫酸铵0～0.2％、磷酸氢二钾0～0.2％，乙酸钠0.5％、余量为水；种子罐灭菌条件：罐压0.08～0.10MPa、温度115～121℃、时间18～20min；培养条件：罐压0.01～0.10MPa、通气量100:50～100:100vvm、转速80～120rpm、温度30℃～36℃、时间48～64h；嗜酸乳杆菌种子液中含嗜酸乳杆菌活菌数≥50亿cfu/ml；
所述种子罐最佳培养基以重量百分比计为：
葡萄糖2.0％、玉米浆干粉2.0％、硫酸铵0.2％、磷酸氢二钾0.2％，乙酸钠0.5％、余
豫公网安备41160202000603
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