动物模型的建立

急性呼吸窘迫综合征(RDS)模型建立
一、模拟疾病的名称
急性呼吸窘迫综合征(RDS
二、模型对象
家兔(体重2-3kg),组织呈淡红,表面光滑
三、动物模型的原理
油酸是一种毒性很强的脂肪酸,注入后首先通过神经、体液因素使肺微血管强烈收缩。随后,由于脂肪栓子阻塞肺毛细血管,造成肺微循环障碍;油酸尚可直接刺激血管,损伤血管内皮细胞及肺泡上皮,增加通透性,导致间质水肿,出血等病理改变。还有人指出,油酸有破坏肺泡表面活性物质的作用。
四、方法和实验步骤
方法:用油酸法制备RDS模型                                          关于该模型复制方法,除国内外多数采用的油酸法外,尚有静脉注射致死量大肠杆菌内毒素、出血性休克、高浓度氧吸入等等。但目前认为用油酸法制备RDS模型比较理想,因为这种模型的病理形态及病理生理的改变和临床所见者甚为相似,具有某些临床RDS的特点,可以做为临床研究的对象。从病理上说,注射油酸与临床诱发RDS的因素差异较大;诱发RDS的因素多种多样,表现在肺并无特异性,且本法变化迅速,典型,简便易行,故不失为一种较理想的方法。
实验步骤:                                                          1、取体重2-3kg的家兔,将动物背位固定于实验台上,在2%普鲁卡因局部麻醉下分离一侧颈总动脉以备取血用。                                    2、待动物安静后观察其一般状态,着重观察呼吸运动、舌粘膜颜,并记录呼吸频率。由颈总动脉取血1ml(注射针管预先用20mg%肝素盐水冲洗),用丹麦radiomete微量血气分析仪测定PaO2PCO2pH,并计算肺泡-动脉氧分压差(A-aDO2)。                                                        3、用结核菌素注射器从耳缘静脉注射油酸(化学纯,分子量282.47),剂量为0.08ml/kg                                                          4、注射后除观察呼吸频率、呼吸运动等一般变化外,分别于306090120分钟时取血抗裂抹面砂浆1ml,重复测定血气及A-aDO2变化,与注射油酸前相比较。        5、注射油酸后3小时将动物放血处死,开胸
取肺,用生理盐水冲洗其表面血液,并用滤纸吸去表面水分,然后在普通药物天平上称重,计算肺系数。          6、肉眼观察肺组织大体变化后,将标本用热镀锌合金10%中性福尔马林固定液固定,按常规作病理切片镜检。
A-aDO2计算公式:
                                                                              动脉血PCO2
 A - aDO2 =〔(大气压-水蒸气压)× 吸入气氧浓度- ──────〕- PaO2 =
呼吸商
                      40
    〔(760-47× 0.21 - ──〕- PaO2 = 98 - PaO2
                                      0.8
五、模型成功的评价标准
家兔正常组织呈淡红,表面光滑,实验兔肺组织呈暗褐,有点状或片状出血、小灶性坏死,多数动物气管内有粉红泡沫样液体,肺体积增大。曾测定20例实验兔肺系数,平均值为10.41±2.94,明显大于正常值,提示有显著肺水肿。
     肺重量(g)
肺系数=──────           
            体重(kg)数据监控
注射油酸后肺泡与动脉分压差明显加大。A-aDO2正常值在吸空气条件下为100mmHg,差值加大提示肺泡氧弥漫入动脉血发生障碍,是诊断RDS的重要依据。RDS时因肺水肿、充血、出血等影响通气与血流灌注比率,增加了无效灌注,导致重低氧血症,这种情况不能单纯用提高吸入氧分数(FiO2)纠正。
六、试验结果借鉴
所有实验动物注射油酸前呼吸频率在4060/分之间,注入油酸后10分钟左右最快,可
140/新型秸秆气化炉分;2小时后仍保持呼吸过速,但已有减慢趋势。此外动物有明显吸气性呼吸困难,有的在60分钟自鼻腔溢出淡红泡沫样液体,类似临床急性肺水肿。
注射油酸后血气突出变化是PaO2明显下降,60120分钟时PaO2比开始下降30mmHg左右。PCO2涂布刮刀pH值变化不大,但在实验过程中一般可看到初期PCO2值偏低,pH值偏高,后期则相反,可能与机体代谢情况及呼吸频率变化有关。
镜检可见部分肺泡呈代偿性扩张,部分肺泡萎陷显示局部不张,肺泡内有水肿液及出血,偶可见有透明膜形成。
七、注意事项
实验室废液桶应注意必须保证油酸准确注入于血管内,因油酸总量甚微,如稍有外溢则影响很大。处死动物以放血为好。取肺时应将心肺提起,结扎并离断腔静脉及主动脉,并于气管分叉上1mm处再结扎一线,从上端剪断气管,最后连同心肺血管全部结扎离断,务求准确得出肺重量。如此模型作实验用,则可根据实验要求延长动物存活时间或调整油酸剂量。
                                     
七、参考文献
:组织工程试验造模
http//baike/view/2463025.htm    百度百科
生命经纬-----生命科学------动物学    生命科学及交叉学科研究

本文发布于:2024-09-21 23:37:34,感谢您对本站的认可!

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