4800 Plus MALDI TOF/TOF操作规程剥离力测试方法
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待测样品在检测前需进行脱盐纯化处理,蛋白应进行充分透析,多肽和寡核苷酸样品可以采用ZipTip等脱盐柱进行纯化脱盐。 二 基质溶液的配制
一般采用α-氰基-4-羟基肉桂酸(简称CHCA),纯度在98%以上,用50%乙腈水溶液(经等体积谱纯乙腈和去离子水配制而成)配制成终浓度为10mg/mL的溶液,于4℃储存备用。
三 点靶
每个点样孔点样0.3-0.5μL,具体视样品浓度而定,样品可以先与等体积基质溶液混匀后点板,也可以先点样品,待样品干燥后在样品上覆盖等体积的基质溶液。
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pgl3 四 进靶
进靶之前先对目标靶板进行命名,方法:依次点击“File”-“New”-“Spot set”,打开“Spot set”创建流程,按上面的方法依次对“Spot set”和“Plate”进行命名,然后根据靶板的类型选择“Spot set”的模板。用洗耳球将样品靶上的灰尘吹净,将靶板放入“Sample loading chamber”,点击“Load plate”按钮开始进板。
五 检测
眼模 根据待测样品的性质及检测目的打开相应的“Acquisition method”和“processing method”,点击软件操作界面上的“Set as active”按钮其激活,点击“Turn on/off High Voltage”按钮打开高压和激光,待仪器预热30min后可进行检测。检测之前,先选取样品点周围至少4个校正点校正靶板。采样时,将激光移至样品孔,点击“Start/stop Active Acquisition Method ”按钮进行采样。
六 关机
检测完毕后,点击“Eject Plate”将板退出,待板进入到“Sample loading chamber”后,点击“Turn on/off High Voltage”按钮关闭高压和激光。
七 维护与保养
1.关机程序:计算机-仪器电源-机械泵(仪器电源关闭半小时后才能关闭机械泵),开机程序与以上相反。
2.机械泵维护:每半年换一次泵油,另外不定期排除机械泵的泵油。
3.一到两周清理一次空气过滤网。
4.时常清理“KDYTTSample loading chamber”。