磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法

磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
0.01M PBS 
PBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4pH 7.2)
PBS缓冲液(pH7.27.4):NaCl 137mmol/LKCl 2.7mmol/LNa2HPO4 4.3mmol/L KH2PO4 1.4mmol/L
7.9g NaCl0.2g KCl0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L保存4冰箱中即可。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制: 
0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml
0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml
各种浓度PB(pH=7.4)的配制:
先配 0.2M PB (pH=7.4100ml):取19ml 0.2mol/L NaH2PO4 81ml 0.2mol/L Na2HPO4, 即可。
然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可,如:
0.1M PBPH=7.4 矿泉水瓶盖:取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。 
若需要 NaCl的话,加入 NaCl 0.9%g/100ml)即可。
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB100ml)配方
pH      0.2M NaH2PO4ml        0.2M Na2HPO4ml
5.7            93.5                          6.5
5.8             92                             8           
5.9            90                             10
6.0            87.7                          12.3
6.1            85                            15
6.2             81.5                          18.5
6.3             77.5                          22.5
6.4            73.5                          26.5
6.5            68.5                          31.5
6.6            62.5                          37.5
6.7            56.5                          43.5
6.8            51                            49
6.9              45                           55
7.0              38                           62
7.1              33                          67
7.2            28                            72
7.3              23                           77
7.4              19ml                         81ml
7.5              16                           84
7.6              13                           87
7.7            10.5                          90.5
7.8              8.5                          91.5
7.9            7                              93
8.0            5.3                          94.7
 
0.01M 汽车空气干燥器磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法

称取8g NaCl0.2g KCl1.44g Na2HPO40.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4冰箱中。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
 PH            7.6      7.4        7.2        7.0 
H2O      1000    1000    1000    1000 
NaCl        8.5      8.5        8.5        8.5 
Na2HPO4 2.2      2.2      2.2        2.2 
NaH2PO4 0.1      0.2      0.3        0.4
根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
 
PBS缓冲液 
称取NaCl 8gKCl 0.2gNa2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBST缓冲液 
300μl Tween-20 加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用。现用现配。 
如果是把所有固体加大十倍,配置为浓缩液,工作时候十倍稀释,那么,在刚配好浓缩液时,PH6.5左右,明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调,但是有更方便的方法。 
十倍稀释以后,PH自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试,配好之后再测一次
 
PH8.0PBS配方详细
1. NaCl 137mmol/LKCl 2.7mmol/LNa2HPO4 4.3mmol/L KH2PO4 1.4mmol/L 
2. 向烧杯中加入约隔离端子800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 滴加浓盐酸将pH值调节至8.0,然后加入去离子水将溶液定容至1 L
4. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1 mM CaCl20.5 mM MgCl2
0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer SolutionPBS)的配制:
    甲液:0.05mol/L Na2HPO4溶液 :称取磷酸氢二钠9.465g 7.099g,加蒸 馏水至1000ml ;
    乙液:0.05mol/L KH2P04溶液: 称取磷酸二氢钾, 9.07g 6.803g,加蒸馏水至1000m1 
    将甲乙液分装在棕瓶内,于4冰箱中保存,用时甲、乙两液各按不同比例混合,即可得所需pH的缓冲液,见下表: 
pH    甲液ml  乙液mI 
5.29  2.5      97.5 
5.59  5.0      95.0 
5.91  10.0    90.0 
6.24  20.0    80.0 
6.47  30.0    70.0 
6.64  40.0    60.0 
6.81  50.0    50.0 
6.98  60.0    40.0 
7.17  70.0    30.0 
7.38  80.0    20.0 
7.73  90.0    10.0 
8.04  95.0      5.0 
你要配制pH=6.8PBS,可用甲、乙液各50ml混合即可。
磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g,0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml,用水稀释至100ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.6) 取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g,加水使溶解成400ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.8) 0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml,用水稀释至1000ml,摇匀,即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.0) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液机组式柔印机29.1ml,用水稀释至100ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.2) 0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml,加
新沸过的冷水稀释至200ml,摇匀,即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.3) 取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml,调节pH值至7.3,即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.4) 取磷酸二氢钾1.36g 0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml,用水稀释至200ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.6) 取磷酸二氢钾27.22g,加水使溶解成1000ml,取50ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml,再加水稀释至4g手机电子围栏200ml卫生间储物盒,即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.8) 甲液:取磷酸氢二钠35.9g,加水溶解,并稀释至500ml

本文发布于:2024-09-23 06:26:19,感谢您对本站的认可!

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