植物组织培养中常见问题与对策

植物组织培养中常见问题与对策
作者:祁建国
来源:《现代园艺》2012年第16装配式隔墙板期
        摘要:从植物组织培养中常见的污染褐化、玻璃化现象等问题入手,分析了其形成的原因,并结合自身工作经验提出针对性的解决策略,对植物的组织快繁和工厂化育苗具有一定的参考意义和借鉴价值。
        n-苯基咔唑关键词:组织培养;污染;褐化;黄化
多媒体教室中控系统        1 污染问题及对策
        1.1 污染原因分析
        控制污染是组培过程中的首要技术。造成污染的原因很多,如外植体的种类、取材的季节、时间、预处理方法、消毒药剂的种类、浓度、消毒时间以及消毒方法、培养基和器皿灭菌、操作人员、工作环境的要求、超净工作台的工作质量等都与污染密切相关。一般来说,组培污染源分为3大类:材料带菌、接种污染、培养过程感染。
        1.2 对策
        选择合理的外植体种类、取材的季节、时间、初代接种选取大小适宜的外植体。在组培中应选取带菌较少或不带菌体的材料作为外植体。对母株预处理,改善植株栽培环境,对母株喷布杀菌剂或抗生素。改变灭菌方法,使用真空减压灭菌、多次消毒灭菌、混合消毒液、灼烧等。在培养基中加入其它抑菌剂。切分潜在的带菌材料时,要保证所用的接种工具已经过彻底的消毒;继代培养时确保污染的材料应给予丢弃。针对接种污染,要做到紫外灯接种室消毒,清洗超净工作台;接种工具、材料不要与酒精灯、超净工作台铁网面、台面接触;接种人员接种时用酒精棉擦手或用浓度为75 %的酒精喷洒双手,接种时应穿上无菌的白大衣,戴上帽子和口罩;无菌室要注重平时除湿和熏蒸消毒工作。培养过程中要定期对培养室进行消毒处理,及时清除污染材料,污染的材料及仪器必须经过药液消毒后方可使用。
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        2 褐化问题及控制措施光敏三极管
        2.1 人工智能建站褐化概念及原因分析
        褐化是指在植物组织培养过程中,外植体在诱导脱分化或再分化时,自身组织由其表面向培养基释放褐物质,以致培养基逐渐变成褐,外植体也随之进一步变褐而死亡的现象。褐化一般分为2种:由于细胞受胁迫或其它不利条件影响所造成的细胞死亡而形成的褐化现象;由于酚类物质被多酚氧化酶氧化所引起的褐化。影响褐化的因素一般与基因型、外植体情况、培养条件、培养基有关。如温度对褐化影响很大,高温能使 多酚氧化酶的活性提高,促进酚类氧化;而低温可以抑制酚类化合物的合成,降低多酚氧化酶活性,减少酚类氧化,从而减轻褐化。

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标签:污染   消毒   褐化   接种   外植体   培养   培养基
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