肝脏淋巴细胞分离protocol
1. 腹腔注射100uL/只小鼠麻醉；
密封油
2. 用约20mL PBS从下腔静脉处灌洗（肾，肺，肝均变白，肝脏灌注也可）；
3. 取10cm细胞培养皿，加入10mL 10% FBS+DMEM，将滤网浸于其中，取出的肝组织置于滤网中；深度水产
门槛记5. 从皿中吸取细胞悬液到50mL离心管，补加PBS至30mL；
6. 50g离心3min，上清转移至新管；
7. 1500rpm X 5min离心，2.5mL DMEM重悬细胞。
支撑梁8. 准备percoll：
6mL 100% percoll + 660uL 10X PBS配成90% percoll
冰点渗透压4mL 90% percol + 1.12mL DMEM配成70% percoll
2.5mL细胞重悬液+ 2mL 90% percoll配成40% percoll；
9. 将40% percoll细胞悬液沿管壁缓缓加入70% percoll中；
10. 2000rpm离心20min，brake和accelerate都设为level 1；
11. 吸取中间层细胞，PBS补加到10mL，400g离心10分钟；
12. 弃上清，加1mL红细胞裂解液，裂解2min 13. 补加PBS到10mL，终止裂解，400g离心10分钟
14. 将细胞重悬到合适体积，计数，用于下游分析
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