菌悬液的制备
施药处理
书立
白僵菌侵染黄粉虫的实验步骤
1、将-4℃保存的白僵菌风叶
25±1℃、相对湿度80%±10%下用PDA培养基扩繁培养7天左右。 2、待完全产孢后,用含0.1%吐温80湿润剂的0.003 mol/L KH2PO4缓冲液将分生孢子粉湿润、洗脱,磁力搅拌器搅拌混匀,并过滤除去菌丝和杂质。沼气储气罐
3、用血球计数板在显微镜下计数孢子数,测出其浓度,再用无菌水分别稀释成孢子浓度梯度为109、108、107、106、105个/mL的悬浮液备用。
4、采用浸渍法将黄粉虫虫体浸入孢子悬浮液中1秒,对照组浸渍无菌水处理。 5、浸渍后放于灭菌滤纸上爬行尽快吸干其身上多余的悬浮液,吸干后把试虫放入培养皿中,(25±1球头挂环)℃、相对湿度80%±10%饲养。
6、每个处理浓度3个重复,每个重复5头(2个浓度用虫)。
7永磁接触器>去毛刺工具、施药后每3d记录一次死虫数,连续调查5次。将死虫挑出保湿培养,记录僵虫数。