土壤过氧化氢酶活性测定方法(完整)

1. 试剂配制: 
(1)0.3%过氧化氢溶液压花模具 ①(1100 30%H2O2和水) 
                    ②(0.5molH2O2+49.5ml蒸馏水)
                    ③(1ml30% H2O2+99ml蒸馏水) 
(2)3N硫酸:(10ml硫酸+50ml水) 
(3)0.1N高锰酸钾溶液 :(1.58gKMnO4+100ml蒸馏水) 
2. 高锰酸钾的标定:
准确称取约0.2 g110℃干燥至恒量的基准草酸钠。加入250 mL新煮沸过的冷水、10 mL硫酸,搅拌使之溶解。将草酸钠溶液加热到75~ 85 (即开始冒蒸气时的温度),趁热用待标KMnO4 溶液进行滴定。开始滴定时反应速度很慢,待溶液中产生M n2+后,反应速度加快,
但滴定时仍必须是逐滴加入,至溶液呈粉红,半分钟内不褪即为终点。注意滴定结束时的温度不应低于60℃。
2MnO4- + 5C2O42- + 16H75~ 85 _Mn 普通注塑机射咀头>电源延时器2+葡萄架势 +10CO2 _ + 8H2O
参考:《高锰酸钾标准溶液标定方法的改进及注意事项》王继莲
3. 测定: 
准确称取2 g风干土置100 mL锥形瓶→加入40 mL蒸馏水和5 mL0.3%过氧化氢(现配),另设对照滑石粉母粒 (40 mL蒸馏水和5 mL0.3%过氧化氢)→在往复式振荡机上振荡20 min→加入5 mL3N硫酸(以稳定未分解的H2O2)→用慢速型滤纸过滤,→吸取25 ml滤液,用0.1N高锰酸钾的滴定至淡粉红 
4.结果计算 
土壤的过氧化氢酶活性,以单位土重的0.1N KMnO4毫升数(对照与试验测定的差) 表示。
备注: 
以容量法测H2O2的酶活:Kappen1913)首先介绍硫酸存在下用高锰酸钾滴定剩余的过氧化氢测定酶活。此法根据H2O2与土壤相互作用时,未分解的H2O塑料提手2的数量用容量法(常用高锰酸钾滴定未分解的H2O2)测定H2O2的酶活 
2 KMnO45H2O23H2SO42MnSO4K2SO48H2O5O
土壤H2O2酶促过氧化氢的分解有利于防止它对生物体的毒害作用。

本文发布于:2024-09-23 10:20:11,感谢您对本站的认可!

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