叶幼荣，张 健，赵舜旺，等．猪ＭＹＬ２基因多态性及其在肌肉组织中的差异表达［Ｊ］．江苏农业科学，２０２２，５０（２４）：１３１－１３５． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０２２．２４．０１９
猪ＭＹＬ２基因多态性及其在肌肉组织中的差异表达
叶幼荣１，２，３，张 健１，２，３，赵舜旺１，２，徐士军１，２，刘振东１，２，强巴央宗１，２，３，商 鹏１
，２，３
（１．西藏农牧学院，西藏林芝８６００００；２．西藏特农牧资源研发省部共建协同创新中心，西藏林芝８６００００；
３．西藏自治区林芝藏猪农业科技园区，西藏林芝８６００００）
摘要：肌球蛋白轻链－２（ｍｙｏｓｉｎｌｉｇｈｔｃｈａｉｎ２，ＭＹＬ２）是哺乳动物横纹肌中的一种主要肌小节蛋白，对动物正常生长发育起重要调控作用，为探究猪ＭＹＬ２基因的多态性及其在横纹肌中ｍＲＮＡ表达规律，以藏猪（ＴＰ）和大约克猪（ＹＹ）作为试验动物，采用Ｓａｎｇ
ｅｒ测序法对ＭＹＬ２基因５′非翻译区（５′ＵＴＲ）进行单核苷酸多态性（ＳＮＰ）的筛选与基因分型，并预测分析ＭＹＬ２基因ＳＮＰｓ位点突变前后转录因子功能特性；同时，采用ＲＴ－ｑＰＣＲ技术检测ＭＹＬ２基因在３０、９０、１８０日龄时ＴＰ和ＹＹ的心肌和背最长肌组织中的ｍＲＮＡ相对表达量。结果显示，ＭＹＬ２基因启动子区域存在２个ＳＮＰｓ且２个品种间基因频率差异极显著（Ｐ＜０．０１），产生４个新增转录因子结合位点，这些位点调控横纹肌的收缩、肌纤维类型的维持、肌肉细胞的增殖分化等过程；ＭＹＬ２基因的ｍＲＮＡ水平随日龄增长而升高，且３个日龄ＴＰ心肌和背最长肌组织中的表达量均极显著高于ＹＹ（Ｐ＜０．０１）。综上表明，猪ＭＹＬ２基因ＳＮＰｓ位点与心肌和背最长肌ｍＲＮＡ的差异表达相关，研究结果可为研究藏猪生长发育的分子调控机制提供一定的理论依据。 关键词：ＭＹＬ２基因；ＳＮＰ；藏猪；转录因子；相对表达量 中图分类号：Ｓ８２８．２ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－１３０２（２０２２）２４－０１３１－０６
收稿日期：２０２２－０２－０９
基金项目：西藏自治区重大科技专项项目（编号：ＸＺ２０２１０１ＺＤ０００５Ｎ）；林芝市巴宜区重点研发计划（编号：２０２１－ＧＸ－ＳＹ－０１）；四川省区域创新合作项目（编号：
２０２０ＹＦＱ００２９）。作者简介：叶幼荣（１９８９—），女，河南信阳人，硕士，讲师，主
要从事动物遗传育种与繁殖学研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｅｙｏｕｒｏｎｇ＠ｘｚａ．ｅｄｕ．ｃｎ。通信作者：商 鹏，博士，副教授，主要从事动物功能基因组研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｎｅｍｏｓｈｐｍｈ＠１２６．ｃｏｍ。
肌球蛋白轻链－２（ＭＹＬ２）是哺乳动物横纹肌中的一种肌小节蛋白，约１９ｋｕ，属钙结合蛋白超家族、肌球蛋白轻链家族成员，主要调节肌钙蛋白和
肌球蛋白亚基［１－２］
。早期针对ＭＹＬ２的研究主要集
中在心肌上，ＭＹＬ２基因突变后可导致心肌增生且
引起肥厚性和扩张型心肌病［３－４］
，且ＭＹＬ２基因在
严重心脏病患者心肌中的表达量最低，其次为慢性心脏病患者，在正常人心脏中的表达量最高，且呈
显著差异［５］。据了解，ＭＹＬ２是调控Ⅱ型肌球蛋白
稳定性和细胞完整性所必需的，在成肌细胞增殖中
也可能发挥一定作用［
６－７］
，基于腺嘌呤核苷三磷酸（ＡＴＰ）酶活性维持的肌纤维类型也会在ＭＹＬ２调控
下发生转化［８－９］
，提示ＭＹＬ２基因参与调控哺乳动
物肌肉的正常生理活动和生长发育。
ＭＹＬ２基因在小鼠、羊、牛等动物肌肉生长功能
上有较多研究，但在青藏高原地区藏猪（ＴＰ）和大约克猪（ＹＹ）心肌、背最长肌上的研究鲜有报道。ＴＰ作为我国特有的地方猪种长期生活在高海拔地区，具有生长缓慢、瘦肉率低、适应高寒低氧环境的生
物学特性［１０］
。引进瘦肉型猪种ＹＹ则以屠宰率高、
生长快等特性而著名。本研究以生活在海拔３０００ｍ高原地区的ＴＰ和ＹＹ为试验动物，采用Ｓａｎｇｅｒ测序技术对ＭＹＬ２基因５′非翻译区（５′ＵＴＲ）进行单核苷酸多态性（ＳＮＰ）分析，并采用实时荧光定量ＰＣＲ（ＲＴ－ｑＰＣＲ）技术对２种猪心肌和背最长肌组织中ＭＹＬ２基因ｍＲＮＡ的相对表达量进行检测，以期为后续研究藏猪生长发育分子调控机制提供一定理论依据。１ 材料与方法１．１ 试验材料
本试验于２０２０年９—１２月，在西藏农牧学院动
物遗传育种与繁殖实验室完成，选择海拔３０００ｍ的西藏林芝地区的藏猪（ＴＰ）和大约克猪（ＹＹ）为试验动物，分别来源于西藏自治区林芝藏猪农业科技园区和林芝宇高生态开发有限公司。选择３０、９０、１８０日龄健康状况良好、同一日龄体型大小相近的ＴＰ和ＹＹ各８头，宰后采集心肌、背最长肌置于含
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有ＲＮＡ保存液的样品管中，投入液氮保存备用。另采集５５头ＴＰ和５６头ＹＹ的耳组织用于ＤＮＡ提取，保存于７５％乙醇中备用。
１．２ ＤＮＡ、ＲＮＡ提取及ｃＤＮＡ制备
采用苯酚抽提法分别提取１１１份耳组织总ＤＮＡ，用ＴＥ溶液溶解后，采用１％琼脂糖凝胶电泳验证其质量，使用超微量分光光度计（ＮａｎｏＤｒｏｐ２０００）检测其浓度，提取合格的ＤＮＡ于－２０℃保存备用。采用Ｔｒｉｚｏｌ法分别提取３个日龄藏猪和大约克猪心肌和背最长肌组织的总ＲＮＡ，溶解于ＲＮａｓｅ－ＦｒｅｅｄｄＨ
２
Ｏ中，使用超微量分光光度计（ＮａｎｏＤｒｏｐ２０００）检测其浓度，用１％琼脂糖凝胶电泳验证其质量，提取合格的ＲＮＡ于－８０℃保存备用。
采用ＦａｓｔｋｉｎｇｃＤＮＡ第１链合成试剂盒说明书对ＲＮＡ进行反转录，采用ＮａｎｏＤｒｏｐ２０００分光光度计检测ｃＤＮＡ浓度，所得合格的ｃＤＮＡ于－２０℃冰箱保存备用。
１．３ 引物设计与合成
１．３．１ ＳＮＰｓ筛选与基因分型引物设计 从ＧｅｎＢａｎｋ下载猪的ＭＹＬ２基因（ＮＣ＿０１０４５６）５′ＵＴＲ的ＤＮＡ序列，运用ＰｒｉｍｅｒＰｒｅｍｉｅｒ５．０软件设计该段序列的引物，序列信息见表１，送至生工生物工程（上海）股份有限公司进行合成，溶于ＴＥ溶液后，置
于４℃保存。
表１ ＭＹＬ２基因５′ＵＴＲＰＣＲ引物序列
名称扩增区域引物序列（５′→３′）退火温度
（℃）
产物大小
（ｂｐ）
ＭＹＬ２－５′ＵＴＲ－１１９４～－８４５Ｆ：ＡＡＧＴＧＧＧＡＡＡＴＧＡＴＧＧＧＧＡ；Ｒ：ＴＧＴＴＡＴＴＴＧＴＧＧＣＴＴＡＴＧＧＧＧ６０１０３９ＭＹＬ２－５′ＵＴＲ－２－４３４～－１５４６Ｆ：ＣＡＴＣＴＡＣＣＣＣＴＴＧＴＣＡＣＧＡ；Ｒ：ＴＣＣＣＣＴＣＴＣＴＣＡＣＣＴＣＣＴＴ６０１１１２ＭＹＬ２－５′ＵＴＲ－３－１３９９～－２２４３Ｆ：ＴＣＡＣＡＴＡＧＡＧＣＣＣＡＣＴＴＣＡＡＡ；Ｒ：ＧＡＧＣＡＴＴＴＴＴＣＣＧＣＣＡＧＴＴ６２８４４ＭＹＬ２－５′ＵＴＲ－４－１９０５～－２８２２Ｆ：ＴＧＴＡＧＧＴＣＧＣＡＧＡＣＡＡＧＧＣ；Ｒ：ＣＡＣＣＡＧＧＧＡＣＡＴＴＣＴＧＡＴＴＴＧ６１９１７ 注：扩增区域以起始密码子为起点，起始密码子上游为负，下游为正。
１．３．２ 荧光定量引物设计 从ＧｅｎｅＢａｎｋ下载ＭＹＬ２基因（ＮＭ＿２１３７９１．２）的ｍＲＮＡ序列，以β－ａｃｔｉｎ（ＡＹ５５００６９）为内参基因，运用ＰｒｉｍｅｒＰｒｅｍｉｅｒ５．０软件设计荧光定量引物，序列信息见表２，送至生工生物工程（上海）股份有限公司进行合成，溶于ＴＥ溶液后，置于４℃保存。
表２ ＭＹＬ２基因荧光定量引物序列
基因登录号引物序列退火温度
（℃）
产物大小
（ｂｐ）
β－ａｃｔｉｎＡＹ５５００６９Ｆ：５′－ＴＣＴＧＧＣＡＣＣＡＣＡＣＣＴＴＣＴＡ－３′；Ｒ：５′－ＡＡＧＧＴＣＴＣＧＡＡＣＡＴＧＡＴＣＴＧ－３′５８１２７ＭＹＬ２ＮＭ＿００１２７８７７３．１Ｆ：５′－ＧＣＧＧＡＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＡＧＧ－３′；Ｒ：５′－ＣＣＡＣＴＣＡＣＣＣＡＡＡＧＧＣＡＡＧ－３′５８１６９
１．４ 基因分型与转录因子预测
以ＴＰ和ＹＹ２个品种猪单个个体总ＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ特异性扩增，选取ＴＰ和ＹＹ各１０个ＰＣＲ产物，送至生物公司进行混池测序，运用ＣｈｒｏｍａｓＰｒｏ软件对测序结果进行ＳＮＰｓ位点筛选，根据筛选结果将个体数量扩大至ＴＰ５５个、ＹＹ５６个，送至生物公司进行单个个体测序，根据分析结果统计各ＳＮＰｓ的基因型频率和基因频率。同时，通过在线网站（ｈｔｔｐ：／／ｊａｓｐａｒ．ｇｅｎｅｒｅｇ．ｎｅｔ／）预测各ＳＮＰｓ结合的转录因子变化。
１．５ ＭＹＬ２基因ｍＲＮＡ的相对表达量检测
分别以３个日龄、２个品种猪心肌和背最长肌组织的ｃＤＮＡ为模板（ｎ＝３），以β－ａｃｔｉｎ为内参基因，采用ＳＹＢＲＧｒｅｅｎＭｉｘ定量ＰＣＲ试剂盒（北京天根生化科技有限公司）对目的基因ＭＹＬ２在心肌、背最长肌中ｍＲＮＡ的表达水平进行实时荧光定量检测，采用２－ΔΔＣＴ法计算ＭＹＬ２基因ｍＲＮＡ相对表达量。１．６ 数据统计分析
用ＳＰＳＳ２６．０软件对ＭＹＬ２基因的ｍＲＮＡ相对表达量进行单因素方差分析，并进行最小显著差异法（ＬＳＤ）多重比较，分析结果以“平均数±标准差”表示；对ＭＹＬ２基因ＳＮＰｓ位点的基因频率、基因型频率进行卡方检验；其中，Ｐ＜０．０５表示差异显著，Ｐ＜０ ０１表示差异极显著，Ｐ＞０．０５表示无显著差异。
２ 结果与分析
２．１ ＳＮＰｓ位点筛选
利用ＣｈｒｏｍａｓＰｒｏ软件将测序结果与ＧｅｎＢａｎｋ中下载的猪ＭＹＬ２基因的ＤＮＡ原始序列进行比对，在ＭＹＬ２基因５′ＵＴＲ起始密码子上游３０００ｂｐ启
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动子区域共发现２个ＳＮＰｓ位点。由图１可知，－１０２５ｂｐ处发现Ｔ／Ｃ突变，记为Ｔ－１０２５Ｃ；－１９３５ｂｐ处发现Ｇ／Ａ突变，记为Ｇ－１９３５Ａ。２．２ 基因频率和基因型频率
由表３可知，在ＭＹＬ２基因５′ＵＴＲ启动子区域
发现２个ＳＮＰｓ位点，分别为Ｔ－１０２５Ｃ和Ｇ－１９３５Ａ，在ＴＰ与ＹＹ２个品种间的等位基因频率和基因型频率均存在极显著差异（
Ｐ＜０．０１）；２个品种内基因的突变均符合Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡（Ｐ＞０．０５）
。
表３ ＭＹＬ２基因５′ＵＴＲ启动子区域ＳＮＰ位点基因型频率及卡方检验结果
ＳＮＰ
位点品种样本量（头）基因频率基因型频率（样本数／频率）ＴＣＴＴＴＣＣＣχ
２
值Ｐ值Ｔ－１０２５Ｃ
ＴＰ５００．００７０．９３００／０．０００７／０．１４０４３／０．８６００．０００１．０００ＹＹ５２
０．７０２
０．２９８
２３／０．４４２
２７／０．５１９
２／０．０３８
１．９０５
０．３８１
ＴＰｖｓＹＹ
χ
２＝７２．１０９；Ｐ＝２．１９７×１０－１６
ＳＮＰ位点品种样本量
（头）基因频率基因型频率（样本数／频率）ＧＡＧＧＧＡＡＡχ２
值Ｐ值Ｇ－１９３５Ａ
ＴＰ５５０．１２７０．８７３１／０．０１８１２／０．２１８４２／０．７６４０．２６４１．０００ＹＹ５６
０．６９６
０．３０４
２５／０．１３１
２８／０．２０２
３／０．２２７
０．９０１
０．６７１
ＴＰｖｓＹＹ
χ
２＝６２．３５０；Ｐ＝２．８９０×１０－１４
２．３ 转录因子预测分析
通过在线网站对５′ＵＴＲ的２个ＳＮＰｓ位点进行转录因子预测发现，Ｔ－１０２５Ｃ、Ｇ－１９３５Ａ突变后产生ＲＯＲＡ、ＮＲ３Ｃ１、ＴＦＡＰ２Ａ、ＦＯＸＡ１等４个新的转录因子结合位点；其中，Ｔ－１０２５Ｃ的突变导致ＳＴＡＴ３、ＺＥＢ１结合位点消失；Ｇ－１９３５Ａ的突变导致ＴＦＡＰ２Ａ、ＴＦＣＰ２Ｌ１结合位点消失。２．４ ＭＹＬ２基因ｍＲＮＡ的相对表达量分析
由图２可知，ＭＹＬ２基因在３０～１８０日龄ＴＰ和ＹＹ心肌、背最长肌组织中的ｍＲＮＡ相对表达量，随着日龄增加而增加；其中，在心肌组织中ＴＰ不同日龄间存在极显著差异（Ｐ＜０．０１）、ＹＹ差异不显著（
Ｐ＞０．０５），在背最长肌组织中ＴＰ和ＹＹ不同日龄间均存在显著差异（Ｐ＜０．０５）。３个日龄的心肌和背最长肌组织中，ＴＰ的ＭＹＬ２基因的表达量均极显著高于ＹＹ（Ｐ＜０．０１）。
３ 讨论与结论
单核苷酸多态性是在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的ＤＮＡ序列多态性，具有高密度
性、高通量分析且遗传稳定性好的优点［１１］
。通过挖
掘不同品种间调控重要经济性状的关键基因的ＳＮＰｓ作为遗传分子标记是可靠且有效的。藏猪为高原本土猪种，生长缓慢、抗逆性强，而大约克猪生长快、瘦肉率高，两者属于不同的经济类型，生物学
特性也不尽相同。ＭＹＬ２磷酸化和Ｃａ２＋结合到肌球
蛋白调节轻链在横纹肌的功能及肌肉生长发育中
发挥着重要的调节作用［１２］。本研究在ＭＹＬ２基因
５′ＵＴＲ启动子区域发现了２个ＳＮＰｓ位点，分别为Ｔ－１０２５Ｃ和Ｇ－１９３４Ａ，且２个ＳＮＰｓ在２个品种猪上的基因型频率和等位基因频率呈现极显著差异（Ｐ＜０．０１）。推测藏猪和大约克猪受ＭＹＬ２基因调
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控的相关性状表现出的不同，有可能与相应位点发生突变有关。
ＭＹＬ２可特异性地与肌球蛋白重链结合，是肌节丝最重要的组成部分之一［１３］。ＭＹＬ２在心力衰竭的心脏组织中下调，在严重心力衰竭的组织中下调更低［１４］。在ＭＹＬ２缺失的小鼠中，心房超微结构表现出心房收缩缺陷，在斑马鱼胚胎心脏中，ＭＹＬ２是一种关键的收缩蛋白［１５］。将ＭＹＬ２敲入小鼠模型的研究表明，ＭＹＬ２在跨桥循环动力学和心肌收缩中具有突出作用［１６］。以上研究结果揭示，ＭＹＬ２对动物的心肌收缩力有正调控作用，对维持心脏的功能有重要作用。本研究发现，藏猪不同生长阶段心肌中ＭＹＬ２的ｍＲＮＡ相对表达量均极显著高于大约克猪，推测是由于藏猪在进化过程中，为适应低氧环境心脏功能也较强，其心肌收缩能力亦强于引进的大约克猪。ＭＹＬ２构成肌球蛋白复合组分，为肌肉收缩提供能量［１７－１８］。本研究测定了３个不同日龄藏猪和大约克猪心肌、背最长肌组织中ＭＹＬ２基因ｍＲＮＡ的表达水平，结果显示，随着日龄的增加其表达量呈现逐步增加的趋势，这可能是由于随着年龄和体质量的增长，活动量、活动幅度也随之增加，心肺功能也日趋完善，此过程需要更多该类基因进行磷酸化为肌肉细胞提供更多能量导致的。藏猪属半野生型地方猪种，以放牧为主，活动量大，而大约克猪属培育品种，以圈养为主，活动量较藏猪小。因此，整体趋势上心肌和背最长肌组织中藏猪ＭＹＬ２基因的水平均高于大约克猪。通过ＳＮＰｓ突变位点的转录因子预测发现，Ｔ－１０２５Ｃ位点突变结合的新转录因子视黄
酸受体相关孤儿受体α（ＲＯＲＡ）是一个重要的昼夜节律性调节基因，也是维持心脏功能的关键基因，在小鼠心脏细胞中防御心肌细胞损伤［１９］。最新研究发现，体外心肌细胞缺氧损伤中存在一种新的ＦＧＤ５－ＡＳ１／ｍｉＲ－１９５／ＲＯＲＡ轴，该轴可通过降低氧化损伤而成为抗急性心肌梗死的潜在诊疗靶点［２０］。关联该转录因子预测结果和ＲＴ－ｑＰＣＲ结果可推测，ＭＹＬ２基因对心肌细胞的活力和肌肉收缩起重要正调控作用，随着年龄增长，其表达量也随之增加，这与机体正常生长发育需求和藏猪品种的生物学特性相符。
研究表明，ＭＹＬ２基因在体外培养的小鼠成肌细胞分化中不表达，但在成熟的肌肉组织中表达，当从肌肉细胞中敲除该基因时，其胚胎或初级生长严重异常［２１］。在成纤维细胞中，ＭＹＬ２具有调节肌纤维活动、转化肌纤维类型、影响肌肉生长的作用［２２］。成肌细胞增殖率会由于ＭＹＬ被敲除或阻断后而提高，且形成肌管的时间会延迟，表明ＭＹＬ可促使成肌细胞的终末分化从而对成肌细胞的增殖产生负面影响［２３］。本研究发现，藏猪背最长肌组织中ＭＹＬ２基因ｍＲＮＡ的相对表达量均极显著高于大约克猪，这与脂肪型藏猪和肌肉型大约克猪的生物学特性相一致，也进一步证实了ＭＹＬ２对生长猪肌肉细胞的增殖、分化有负面影响。Ｇ－１９３５Ａ位点突变结合的新转录因子糖皮质激素受体（ＮＲ３Ｃ１）的多态性与肥胖、肌肉力量和皮质醇敏感性有关［２４］。Ｓｈｉｍｉｚｕ等的研究表明，骨骼肌特异性糖皮质激素受体（ＧＲ）敲除（ＧＲｍＫＯ）小鼠的肌肉量增加了，但脂肪组织减少了，同时，伴随着肌肉、肝脏和脂肪组织中基因表达的剧烈变化［２５］。关
联该转录因子预测结果和ＲＴ－ｑＰＣＲ结果可推测ＮＲ３Ｃ１调控ＭＹＬ２基因抑制了猪背最长肌细胞的增殖分化。
本研究发现，ＭＹＬ２基因在藏猪中出现了Ｔ－１０２５Ｃ和Ｇ－１９３５Ａ等２个ＳＮＰｓ位点的突变，前者结合的新转录因子ＲＯＲＡ在增加心肌细胞活力、维持心脏功能、促进肌肉收缩上起重要作用，后者结
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合的新转录因子ＮＲ３Ｃ１对肌纤维类型的维持，抑制肌肉细胞的分化增殖和促进脂肪组织的形成有关键作用。结合本研究中ＲＴ－ｑＰＣＲ的结果可推测，藏猪心肌和背最长肌中转录因子ＲＯＲＡ和ＮＲ３Ｃ１协同调节ＭＹＬ２基因的高表达，维持藏猪较强的心肌收缩能力，同时抑制了背最长肌肌肉细胞的分化增殖，保持了肌肉纤维的完整性。
综上所述，猪的ＭＹＬ２基因２个ＳＮＰｓ位点的多态性引起的转录因子变化可能是调控其在心肌和背最长肌中表达的关键作用位点，推测ＭＹＬ２基因是维持藏猪较强的心脏功能和肌肉收缩能力、抑制其肌肉细胞增殖分化的关键候选基因。本研究结果可为后续研究ＭＹＬ２基因在猪生长发育及生物学特性的分子调控机制与分子标记辅助育种中提供一定理论依据。
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［９］Ｖｉｃｅｎｔｅ－ＭａｎｚａｎａｒｅｓＭ，ＭａＸＦ，ＡｄｅｌｓｔｅｉｎＲＳ，ｅｔａｌ．Ｎｏｎ－ｍｕｓｃｌｅｍｙｏｓｉｎⅡｔａｋｅｓｃｅｎｔｒｅｓｔａｇｅｉｎｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎａｎｄｍｉｇｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＮａｔｕｒｅＲｅｖｉｅｗｓＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｅｌｌＢｉｏｌｏｇｙ，２００９，１０（１１）：７７８－７９０．［１０］杨天良，杨雅楠，王 彪，等．藏猪适应高原低氧环境的肺脏血管铸型特征［Ｊ］．中国兽医学报，２０２１，４１（３）：５２６－５３１．
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［１３］Ｓｚｃｚｅｓｎａ－ＣｏｒｄａｒｙＤ，ＧｕｚｍａｎＧ，ＺｈａｏＪ，ｅｔａｌ．ＴｈｅＥ２２ＫｍｕｔａｔｉｏｎｏｆｍｙｏｓｉｎＲＬＣｔｈａｔｃａｕｓｅｓｆａｍｉｌｉａｌｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｉｃｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙｉｎｃｒｅａｓｅｓｃａｌｃｉｕｍｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｏｆｆｏｒｃｅａｎｄＡＴＰａｓｅｉｎｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｉｃｅ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｅｌｌＳｃｉｅｎｃｅ，２００５，１１８（ｐｔ１６）：３６７５－３６８３．［１４］ＬｉＹＨ，ＷｕＧ，ＴａｎｇＱＺ，ｅｔａｌ．Ｓｌｏｗｃａｒｄｉａｃｍｙｏｓｉｎｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｌｉｇｈｔｃｈａｉｎ２（ＭＹＬ２）ｗａｓｄｏｗｎ－ｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｃｈｒｏｎｉｃｈｅａｒｔｆａｉｌｕｒｅｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．ＣｌｉｎｉｃａｌＣａｒｄｉｏｌｏｇｙ，２０１１，３４（１）：３０－３４．
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