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手动染流程

1、自来水冲洗组织24小时，固定时间越长，流水冲洗时间延长。

2、组织脱水：梯度酒精

85% 2h

90% 2h

95%（1）2h

95%（2）2h

100% （1）2h

100% （2）2h

3、组织透明：二甲苯

二甲苯（1） 30min

二甲苯（2） 30min

4、浸蜡：

蜡（1） 60min

蜡（2） 120min

5、组织包埋

先将融化的石蜡倒入包埋框，之后用镊子将浸蜡的组织放入，注意包埋面。待蜡块稍凝，移入冰箱或冷台上凝固。

6、组织切片

先修标本，将组织面全部暴露，连续切片，先用毛笔将切片放入展片缸中，用镊子将褶皱处展开，再将切片捞入温水展片缸中，再次展平，之后用载玻片捞起，一般在60℃烘箱中烤片1小时。

7、组织脱蜡至水

二甲苯（1）10min

二甲苯（2）10min

乙醇100%（1）1min

100%（2）1min

95%（1）1min

90%（1）1min

85%（1）1min

8、自来水冲洗2min

9、苏木精染1-5min

10、自来水冲洗1min

11、1%盐酸乙醇分化20秒

12、自来水冲洗1min

13、1%稀氨水反蓝30秒

14、自来水冲洗1min

15、伊红染20-300秒

16、自来水冲洗1min

17、组织脱水/透明

85% 20秒

90% 30秒

95%（1）60秒

95%（2）60秒

100% （1）120秒

100% （2）120秒

二甲苯（1）120秒

二甲苯（2）120秒

18、中性树胶封片

免疫组织化学流程

1、切片脱蜡至水

2、自来水冲洗2min

3、3%或0,3%过氧化氢37℃孵育10min，PBS 3min/3次

4、抗原修复

0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液（PH=6）水浴加热98℃，平衡计时20min。PBS 3min/3次

5、血清封闭，37℃，15-30min，倾去血清，不洗

6、加一抗孵育，37℃2小时，或者4℃过夜。PBS 3min/3次

7、加二抗孵育，37℃，30min。PBS 3min/3次

8、DAB显，1-3min，镜下观察。自来水冲洗，水流勿大，缓慢冲洗3-5min

9、苏木精复染20秒

10、自来水冲洗1min

11、1%稀氨水反蓝30秒

12、自来水冲洗1min

13、组织脱水/透明

85% 20秒

90% 30秒

95%（1）60秒

95%（2）60秒

100% （1）120秒

100% （2）120秒

二甲苯（1）120秒

二甲苯（2）120秒

14、中性树胶封片

本文发布于:2024-09-21 23:27:13，感谢您对本站的认可！

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