一种外毛根鞘移植手术白癜风的新方法

本发明涉及毛囊移植技术领域，具体涉及含有毛囊黑素干细胞的外毛根鞘移植移植微创手术白癜风的新方法以及本发明外毛根鞘的制备方法。

1、白癜风流行病学调查

白癜风(vitiligo)是一种原发性的、局限性或泛发性的皮肤黏膜素脱失症，我国古医书中称白癜风为“白驳风”。一般肤越深的人发病率越高，黄种人介于白种人与黑种人之间。我国人中患病率0.1%~2.7%，大约有2000万，全球大约有1亿白癜风患者。白癜风为常见的后天性限局性或泛发性皮肤素脱失病，主要是皮肤的黑素细胞功能消失引起的。虽然本病不影响患者的身体健康和生理活动，但由于影响外观容貌，给患者带来极大的精神压力和心理负担，对患者的生活学习工作等方面都带来负面影响，从而影响了病人的生活质量，甚至阻碍患者的社会交往与择业就业。因此，寻一种安全、有效、快捷的白癜风方法具有重要的社会和经济意义。

2、白癜风国内外技术情况

近年来，随着分子生物学等基础学科的迅猛发展，西医在研究该病的病因、发病机理及诊治方面均取得了进步；但白癜风的发病机制至今仍不完全清楚。白癜风是一种以局部表皮黑素细胞减少,形成白斑为特征的后天性素减退性皮肤病。其发病机理尚未阐明,遗传及免疫因素在发病中起重要作用。目前支持白癜风是自身免疫性疾病的证据：发现了与免疫功能或自身免疫性疾病密切相关的易感基因和候选基因,如SLEV1、AIS1、HLA等基因;体液免疫和细胞免疫机制均参与了白癜风发病;白癜风患者常合并其他自身免疫性疾病;临床上使用免疫调节疗法白癜风取得了较好的疗效，但是易于复发。方面，光化学疗法、皮质类固醇激素应用、自体表皮移植、皮肤磨削术、308mn准分子激光等新疗法不断出现，但大都疗效不确切或副作用较大且费用较高。尽管22年前已有单株毛囊移植术白癜风的临床报导：Na 等采用单株毛囊移植对 21 例白癜风患者进行（实际是移植了外毛根鞘的微小片段），但是采用单株毛囊移植存在速度偏慢的缺点，且供体毛囊来源有限，不能满足大面积白癜风的移植需要。近期还有培养表皮黑素细胞悬液稳定期白癜风患者的报导，但是因为皱褶和五官部位悬液无法固定，导致疗效不确定或者尚处于试验阶段副作用太大而不被患者接受；目前亦有人工组织工程白癜风的报导，适用于大面积白癜风患者，但是手术后复不均匀，费用昂贵，易复发，故鲜有人采用。无论悬液还是组织工程的方法，移植区都需要对表皮进行磨削令患者痛苦不堪，加重了术后表皮坏死的风险，故不能广泛应用于临床。有研究显示白癜风患者对各种疗法的无效率可高达50%以上。近年来研究发现外毛根鞘内含有无素性黑素细胞（amelanotic melanocyte，AMMC），黑素细胞干细胞和前黑素细胞统称为AMMC，而前黑素细胞是黑素细胞干细胞向黑素细胞的过度态。毛囊黑素细胞干细胞(melanocytestem cells，McSCs）定位于毛囊恒定部位(毛囊的上1/3)最下端的隆突区，多处于静息状态，具有慢周期性，具有维持自我更新的能力，是典型的再生型干细胞代表。2002年Nishimura 等通过对黑素母细胞的增殖进行研究，发现表皮表达的干细胞因子在外毛根鞘与表皮之间建立了一条通道，黑素母细胞沿着这条通道从毛囊迁移到表皮。因此如何将外毛根鞘中的毛囊黑素细胞干细胞从外毛根鞘中游离出来是本发明的核心。基于我们海口仁术皮肤科门诊部有限公司发明了“移植完整的外毛根鞘白癜风”，并且无需磨皮，就可实现白癜风多毛囊口和皮脂腺开口周围复，甚至毛囊复，最终实现治愈白癜风。

本发明制备的含有黑素细胞干细胞的外毛根鞘，定位后移植到适合黑素干细胞生长的特定层次（因与本发明无关，层次未公开，该层次是毛囊黑素细胞干细胞的天然培养基），彻底解决了白癜风黑素细胞的来源问题。该技术通过提取少量毛囊就可真正实现了大面积白癜风的目的。其一次手术治愈率可高达90%以上。

本发明的目的在于提供含有毛囊黑素干细胞的外毛根鞘移植微创手术白癜风的新方法。采用本公司发明的白癜风毛囊提取器（专利证书号第11005086号）提取并分离出含有黑素干细胞的毛囊完整的外毛根鞘并进行培养，促进毛囊黑素干细胞的分化与增殖，通过培育激活并提高毛囊黑素干细胞活性，促进黑素干细胞向成熟黑素细胞快速转化；然后将功能状态的毛囊黑素干细胞以及外毛根鞘精准移植于白癜风表皮特定层次，从而彻底解决了白斑区的黑素细胞缺失，以解决上述背景技术中的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

毛囊外毛根鞘移植手术白癜风的方法及步骤：

步骤S1，毛囊的提取，采用本公司发明的白癜风毛囊提取器（专利证书号第11005086号）提取一个毛囊单位，提取首选黑单株毛囊。

步骤S2，毛囊的分离，在2-15倍放大镜或电子显微镜下将所述毛囊单位分离出含有黑素干细胞的完整外毛根鞘，其分离与常规毛囊的不同之处在于分离时沿着外毛根鞘的外沿分离，去除毛囊附带的真皮，保留与外毛根鞘相连的全部表皮。

步骤S3，黑素细胞干细胞的体外培养，将提取分离的含有毛囊黑素细胞干细胞的完整外毛根鞘及其毛囊放入本公司发明的毛囊保存冰盒（专利证书号第10098918号）中进行培养，达到增强毛囊黑素细胞干细胞活性，促进其分化增殖并向成熟黑素细胞转化。

步骤S4，毛囊黑素干细胞的移植，以毛囊为依托对完整的外毛根鞘进行定位移植，在本公司发明的毛囊移植的种植定位针（专利证书号第11438879号）定位下，使用白癜风用种植针（专利证书号第11440332号）将含有黑素细胞干细胞的外毛根鞘植入白斑区特定层次，可以彻底解决白癜风黑素细胞的来源问题，从而达到治愈白癜风的目的。

进一步的，所述步骤S1的具体方法为，采用专利白癜风毛囊提取器，尽量提取枕部含有毛囊黑素干细胞的黑单株毛囊。

进一步的，所述步骤S2中，采用专利白癜风毛囊提取器提取毛囊后，在放大镜或者电子显微镜下分离毛囊，在放大2-15倍的状态下分离，准确率高达100%，避免了分离过程中毛囊黑素干细胞和外毛根鞘受损。分离出含有毛囊黑素干细胞部分的完整毛囊外毛根鞘，并去除毛囊附带的真皮，保留与外毛根鞘相连的全部表皮，以增加黑素母细胞迁移通道的长度，增加移植后与特定层次接触的面积，使得更多成熟黑素母细胞从毛囊外毛根鞘迁移到特定层次，以缩短白斑复时间。毛囊与外毛根鞘相连的表皮一直视为多余部分，在毛发移植手术中被废弃，而本发明证实保留的表皮是外毛根鞘的一部分，移植手术后该处最早出现复，证实该部分不仅有成熟黑素细胞，更有正在分化的黑素细胞干细胞，是黑素细胞沿着毛囊外毛根鞘移行通道的一部分。这是本发明有别于其他用途毛囊分离的不同之处，也是体现本发明的创造性之处。

进一步的，所述步骤S3中，采用专利白癜风毛囊提取器提取的含有毛囊黑素干细胞的单株毛囊，放入本公司发明的毛囊保存冰盒（专利证书号第10098918号）中进行培养。

进一步的，所述步骤S4中，毛囊黑素干细胞的移植，以毛囊为依托对含有黑素细胞干细胞的外毛根鞘进行移植，在本公司发明的毛囊移植的种植定位针（专利证书号第11438879号）定位下，使用本公司发明的白癜风用种植针（专利证书号第11440332号）把上述外毛根鞘植入白斑区特定层次，可以彻底解决白癜风黑素细胞的来源问题，从而达到治愈白癜风的目的。

与现有技术相比，本发明的有益效果如下：

1、本发明通过独特的外毛根鞘（含有毛囊黑素细胞干细胞）体外分离与培养技术对毛囊外毛根鞘进行移植白癜风。

2、本发明通过专利设备将毛囊黑素细胞干细胞植入表皮特定层次，无需磨皮，减轻了患者痛苦和缩短了恢复时间，2天后可以正常洗澡；减少了提取的毛囊数量，实现了提取少量毛囊大面积白癜风的需求。毛囊完整的外毛根鞘移植彻底解决了白癜风黑素细胞的来源问题。

3、本发明经过提取得到的毛囊黑素细胞干细胞，具有不受机体内分泌以及激素影响的特性，相当于在白斑区植入了黑素细胞的原料库和加工厂，可以源源不断的产生黑素细胞，保证了术后疗效。不仅促进了黑素干细胞的增殖与分化，而且激活了白斑区无功能状态毛囊黑素干细胞向功能状态转变，可实现多毛囊口或皮脂腺开口复，从而达到祛白目的。

4、本发明无需磨皮，适用于所有暴露部位的白癜风，达到了手术微创，术后无创伤，显著优于目前黑素细胞移植技术。

附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的具体实施方式一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。

图1为本发明毛囊外毛根鞘移植术白癜风新方法的流程图：

以下结合附图对本发明的优选实施例进行详细说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。

本发明的技术关键点：含有毛囊黑素细胞干细胞的外毛根鞘体外分离技术：采用白癜风毛囊提取器提取含有毛囊黑素干细胞的单株毛囊，分离出含有表皮的完整外毛根鞘，保留与外毛根鞘相连的全部表皮，以增加黑素母细胞迁移通道的长度，增加移植后与特定层次接触的面积，使得更多成熟黑素母细胞从毛囊外毛根鞘迁移到特定层次，以缩短白斑复时间。毛囊与外毛根鞘相连的表皮一直视为多余部分，在毛发移植手术中别废弃，这是本发明有别于其他用途毛囊分离的不同之处。

实施例一：

如图1所示，本发明提供一种技术方案：含有毛囊黑素干细胞的外毛根鞘移植白癜风的新方法，该技术方法包括以下步骤：

步骤S1，毛囊的提取，采用白癜风提取器提取一个毛囊单位；

步骤S2，毛囊的分离，在电子显微镜下将所述毛囊单位分离出毛囊完整的外毛根鞘；分离出含有表皮的完整外毛根鞘，保留与外毛根鞘相连的全部表皮，以增加黑素母细胞迁移通道的长度，增加移植后与特定层次接触的面积，使得更多成熟黑素母细胞从毛囊外毛根鞘迁移到特定层次，以缩短白斑复时间。这是本发明有别于其他用途毛囊分离的不同之处。

步骤S3，提取的含有毛囊黑素细胞干细胞的完整外毛根鞘，放入特本公司发明的毛囊保存冰盒（专利证书号第10098918号）中进行培养。

步骤S4，含有毛囊黑素干细胞的外毛根鞘的移植，以毛囊为依托对外毛根鞘进行移植，在本公司发明的毛囊移植的种植定位针（专利证书号第11438879号）定位下，使用本公司发明的白癜风用种植针（专利证书号第11440332号）注入白斑区特定层次。

在本实施例中，所述步骤S1的具体方法为，采用白癜风毛囊提取器，提取头部含有毛囊黑素细胞干细胞的黑毛囊。

在本实施例中，所述步骤S2中，提取毛囊后，在电子显微镜下分离出含有黑素干细胞的完整毛囊外毛根鞘，在放大2-15倍的状态下进行分离，准确率高达100%，避免了分离过程中外毛根鞘受损；分离出含有表皮的完整外毛根鞘，保留与外毛根鞘相连的全部表皮，以增加黑素母细胞迁移通道的长度，增加移植后与特定层次接触的面积，使得更多成熟黑素母细胞从毛囊外毛根鞘迁移到特定层次，以缩短白斑复时间。这是本发明有别于其他用途毛囊分离的不同之处。

在本实施例中，所述步骤S3中，提取的含有毛囊黑素细胞干细胞的毛囊外毛根鞘，放入本公司发明的毛囊保存冰盒（专利证书号第10098918号）中进行培养。

在本实施例中，所述步骤S4中，含有毛囊黑素干细胞的外毛根鞘的移植，以毛囊为依托对外毛根鞘进行移植，在毛囊移植的种植定位针（专利证书号第11438879号）定位下，使用白癜风用种植针（专利证书号第11440332号）将外毛根鞘植入白斑区特定层次。

实施例二：

本发明提供的毛囊黑素细胞干细胞移植术白癜风的技术方法，通过实施例一中的技术方法，移植毛囊黑素干细胞到白斑特定层次，促进黑素细胞的增殖与分化及黑颗粒的形成，实现多毛囊口或皮脂腺开口复，从而达到快速祛白目的。

在本实施例中，通过毛囊黑素干细胞悬液移植术白癜风的治愈率达到90%以上。

本发明的技术难点

富含黑素干细胞的外毛根鞘的制备方法是本发明的技术难点，只有精准移植于白斑表皮特定层次，才能实现多毛囊口或皮脂腺开口复，形成白斑复，彻底治愈白癜风。

本发明的原理：本发明借助WOOD灯和皮肤镜成像精准数据报告，分析患者黑素脱失程度及细胞活性，通过特殊提取方式获得含有丰富黑素干细胞的外毛根鞘，移植于白斑表皮特定层次，促进黑素细胞的增殖与分化，实现多毛囊口或皮脂腺开口复，从而达到治愈白癜风的目的，该技术可重建患者白斑区免疫功能，解决黑素细胞失活难题，使白癜风进入微创手术时代。

以上所述仅为本发明的优选实例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。