一种药物组合物制剂的含量测定方法和鉴别方法

发明领域

本发明涉及一种药物组合物制剂的检测方法，特别涉及一种药物组合物制剂的含量测定方法和/或鉴别方法。

背景技术

冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)一直是危害人类健康甚至生命的严重疾病，冠心病的发生，致使相当数量的患者不同程度的丧失劳动能力，既给患者造成生活上的困难，肉体上的痛苦，又给国家、社会带来一系列问题和严重损失。祖国医学认为，冠心病的发生虽为标实，实为本虚，制法上活血祛瘀可治其标，但更应益气固本以补其虚，本发明即是根据这一理论而创立的具有固正扶本，益气活血，行脉止痛的有效中成药。它的研制成功克服了部分药品单纯活血化瘀而耗气上瘾的不良倾向，又避免了部分药品采用名贵紧缺动植物，价格昂贵，不宜推广的不足。

中药的处方成分比较多，是多成分得鉴别，前处理难度比较大，干扰多。本发明检测方法先进，消除了干扰，精密度及重现性好，能够全面的对该药品进行质量控制，保证产品质量的稳定性均一性。

发明内容

本发明的一个目的在于公开一种药物组合物的含量测定方法及其检测方法。

本发明目的是通过如下技术方案实现：

本发明药物组合物制剂的检测方法包括如下鉴别和含量测定中的一种或几种：

含量测定方法：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝25-40∶60-80为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品，精密称定，加甲醇制成每体积份含0.0002-0.0003重量份的溶液，即得对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量的5/9-5/6，加甲醇40-60体积份，超声处理30-90分钟，滤过，药渣及滤器用甲醇洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水20-40体积份微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4-6次，每次用正丁醇5-40体积份，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤2-4次，每次用氨水10-40体积份，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5体积份量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取0.005-0.015体积份、0.01-0.03体积份与供试品溶液0.01～0.02体积份，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算；本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于540μg或不得少于600μg或不得少于900μg；

鉴别方法：

A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量的7/18-7/12，加甲醇20-30体积份，加热回流40-80分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5-2体积份使溶解，作为供试品溶液； 另取黄连对照药材0.04-0.06重量份，加甲醇20-30体积份，加热回流40-80分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5-2体积份使溶解，制成对照药材溶液；取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每体积份含0.0002-0.0008重量份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述三种溶液各0.001-0.003体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-氨水＝11-13∶5-7∶2-4∶2-4∶0.5-1.5为展开剂，置以氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照药材和对照品谱相应的位置上，显相同的黄荧光斑点；

B.取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/6-5/9，加乙醇40-60体积份，加热回流40-80分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水8-12体积份和氨水3-5体积份，混匀，加乙醚提取2-4次，每次10-20体积份，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇1-3体积份，溶解，作为供试品溶液；另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每体积份含0.0005-0.0015重量份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各0.005-0.015体积份，分别点于同一用0.5-2％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮＝8-10∶1-3为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显至斑点显清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点；

C.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/12-7/18，加60-80％乙醇20-30体积份，加热回流40-80分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水8-12体积份使溶解，用稀盐酸调pH值至1-3，用乙酸乙酯振摇提取1-3次，每次8-12体积份，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇0.5-2体积份使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每体积份含0.0005-0.0015重量份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各0.002-0.008体积份，分别点于同一硅胶G薄层.板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸1-3∶2-4∶3-5∶0.2-0.8∶1-3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2-4％三氯化铁乙醇溶液；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点；

D、取葛根素对照品，甲醇制成每体积份含0.0005-0.0015重量份的溶液，作为对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量的7/18-7/12，加甲醇20-30体积份，加热回流40-80分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5-2体积份使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取供试品溶液0.002-0.008体积份及对照品溶液0.002-0.004体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以-甲醇-水＝60-70∶30-40∶8-12的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

本发明药物组合物制剂的检测方法优选包括如下含量测定方法和鉴别方法中的一种或几种：

含量测定方法：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝32∶68为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品，精密称定，加甲醇制成每体积份含0.00025重量份的溶液，即得对照品溶液；取本发 明药物组合物制剂日用制剂量的5/9-5/6，加甲醇50体积份，超声处理60分钟，滤过，药渣及滤器用甲醇洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30体积份微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次用正丁醇依次为30体积份、30体积份、20体积份、20体积份和10体积份，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，每次用氨水30体积份、20体积份和20体积份，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5体积份量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液0.01体积份、0.02体积份与供试品溶液0.01～0.02体积份，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算；本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68014)计，不得少于360μg或不得少于540μg或不得少于600μg或不得少于900μg；

鉴别方法：

A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量的7/18-7/12，加甲醇25体积份，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1体积份使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.05重量份，加甲醇25体积份，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1体积份使溶解，制成对照药材溶液；取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每体积份含0.0005重量份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述三种溶液各0.002体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-氨水＝12∶6∶3∶3∶1为展开剂，置以氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照药材和对照品谱相应的位置上，显相同的黄荧光斑点；

B.取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/6-5/9，加乙醇50体积份，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10体积份和氨水4体积份，混匀，加乙醚提取3次，每次15体积份，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2体积份，溶解，作为供试品溶液；另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每体积份含0.001重量份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各0.01体积份，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮＝9∶2为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显至斑点显清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点；

C.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/12-7/18，加70％乙醇25体积份，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水10体积份使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次10体积份，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1体积份使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每体积份含0.001重量份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各0.005体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸2∶3∶4∶0.5∶2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点；

D、取葛根素对照品，甲醇制成每体积份含0.001重量份的溶液，作为对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量的7/18-7/12，加甲醇25体积份，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1体积份使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取供试品溶液0.005体积份及对照品溶液0.003体积份，分别点于同一硅 胶G薄层板上，以-甲醇-水＝65∶35∶10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

本发明所指药物组合物制剂的原料药组成及配比如下(按重量份)：

黄芪    100-150重量份    党参    80-120重量份

丹参    60-100重量份     葛根    60-100重量份

山楂              60-100重量份       当归    40-70重量份

延胡索(或炙延胡索)40-70重量份        人参    20-30重量份

甘草(或炙甘草)    20-30重量份。

本发明药物组合物制剂的原料药组成优选配比为(按重量份)：

黄芪              140重量份党参90重量份

丹参              90重量份        葛根    70重量份

山楂              70重量份        当归    45重量份

延胡索(或炙延胡索)45重量份        人参    22重量份

甘草(或炙甘草)    28重量份。

本发明药物组合物制剂的原料药组成优选配比为(按重量份)：

黄芪              110重量份       党参    110重量份

丹参              70重量份        葛根    90重量份

山楂              90重量份        当归    65重量份

延胡索(或炙延胡索)65重量份        人参    28重量份

甘草(或炙甘草)    22重量份。

本发明药物组合物制剂的原料药组成优选配比为(按重量份)：

黄芪                      120重量份       党参          100重量份

丹参                      80重量份        葛根          80重量份

山楂                      80重量份        当归          60重量份

人参                      25重量份        甘草(或炙甘草)25重量份

延胡索(或炙延胡索)        60重量份。

上述本发明药物组合物制剂的原料药还可以加入下述原料药(按重量份)：

淫羊藿            60-100重量份            地黄        40-70重量份

黄连              40-70重量份             灵芝        40-70重量份。

上述本发明药物组合物制剂的原料药还可以加入下述原料药(按重量份)优选配比为(按重量份)：

淫羊藿            80重量份                地黄        60重量份

黄连              60重量份                灵芝        60重量份。

以上九味或十三味药按照常规方法可以制成临床可接受的剂型，如片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、控释制剂、注射剂。

本药物组合物制剂的制备方法可以是：

以上九味，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余黄芪加水煎煮1-3次，每次1-3小时，(优选2次，第一次2小时，第二次1.5小时)，合并 煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90-95℃，优选90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90-95℃，优选90℃)的清膏，与上述药粉混合，制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、控释制剂、注射剂。

本发明十三味原料药药物组合物的制备方法：

以上十三味药，人参、黄连、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余八味与剩余黄芪加水煎煮1-3次，每次1-3小时，(优选2次，第一次2小时，第二次1.5小时)，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90～95℃，优选90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90～95℃，优选90℃)的清膏，与上述药粉混合，制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、控释制剂、注射剂。

本发明上述十三味原料药制备方法中，其中所述的回收乙醇并浓缩至90℃时相对密度可以替换为1.20～1.22。

本发明所述的重量份与体积份的比例为克/毫升。本发明药物组合物含量测定方法可以应用于组合物的各种剂型，如片剂、胶囊、口服液、滴丸、喷雾剂、颗粒剂等临床可接受的剂型，由于不同剂型的制剂每日用制剂量中所含的相当生药量是相同的，因此各个剂型在进行含量测定时，所选用样品量可统一折算为每日用制剂量，本含量测定方法所述的每日用制剂量是指每日使用的总片数、总粒数或总丸数等。

附图说明

图1黄芪甲苷对照品溶液液相谱图；

图2本发明药物组合物制剂供试品溶液液相谱图；

图3缺黄芪阴性对照溶液液相谱图；

图4黄芪甲苷标准曲线图

本发明所要解决的技术问题在于改进原有的质量标准，提高产品质量的可控性。本发明所研究的药物组合物是由黄芪、党参、丹参、葛根等药材组成，黄芪作为本方的君药，其主要成分黄芪甲苷也是本品的有效成分，为了控制本发明药物组合物制剂的质量，保证其疗效，我们采用高效液相-蒸发光散射检测法测定了黄芪甲苷在该制剂中的含量，并对其测定方法进行了研究。通过本发明的含量测定方法和鉴别方法，提高了产品稳定性，有利于工业化生产的质量控制。

下面实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。

实验例1：

仪器采用Agilent 1100高效液相谱仪；Allerch ELSD-2000蒸发光散射检测器；METTLER TOLEDO AT201电子天平；1810-B型石英双重纯水蒸馏器。

材料采用根据实施例1制成的本发明药物组合物片剂；黄芪甲苷(中国药品生物制品检定所，批号：110781-200512)；乙腈(谱纯)；其他试剂为分析纯。取本品小片20片或大片10片，糖衣片除去包衣，精密称定，研细，取约3g，加甲醇50ml，超声处理1小时(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次(30ml，30ml，20ml，20ml，10ml)，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次(30ml，20ml，20ml)，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。按处方 组成，取除黄芪外的其他药材，按制备工艺要求制成不含黄芪的阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，即得对照品溶液。

本法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(32∶68)为流动相；蒸发光散射检测器。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000。按上述谱条件对供试品溶液、黄芪甲苷对照品溶液、阴性对照溶液进行谱分析，谱图见图1、2、3，表明阴性对照液对测定基本无干扰，供试品液中黄芪甲苷峰与杂质峰分离良好，不干扰测定。

实验例2  线形关系考察

精密吸取黄芪甲苷对照品溶液(1.032mg/ml)1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0μl，注入液相谱仪，以进样量的常用对数值作为横坐标，峰面积的常用对数值为纵坐标进行回归计算。

表1  黄芪甲苷线性关系

结果表明：黄芪甲苷在1.032-10.32μg范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系。线性回归方程：Y＝1.198X+5.9861，R2＝0.9998。标准曲线见图4。

实验例3  精密度试验

精密吸取对照品溶液10μl，按上述条件，重复进样6次，峰面积积分值平均为2958381，RSD％为0.29％。表明本方法精密度较好。结果见表2。

表2  精密度试验结果

实验例4  稳定性试验

同一供试品溶液，按上述条件，分别于配制后0、1、2、3、8小时进样，每次进样量为20μl，测定峰面积积分值平均为4271362，RSD％为0.40％，结果见表3。

表3  黄芪甲苷稳定性试验结果

说明黄芪甲苷在8小时内基本稳定。

实验例5  重复性试验

取同一批供试品6份，按供试品溶液制备方法制成供试品溶液，进样测定，结果见表4，平均含量为64.22g/片，RSD％为1.07％，表明本法有良好的重现性。

表4  重复性试验结果

实验例6  加样回收率试验

精密称取已知含量的本发明药物组合物片剂样品6份(含黄芪甲苷64.22μg/片)，各加入已知浓度的黄芪甲苷对照品溶液1ml(0.772mg/ml)，按供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，按上述条件，测定其含量，计算回收率，结果见表5。

表5  回收率试验

实验例7  样品测定

取供试品，按供试品溶液制备及谱条件项下进行提取、制备、进样，以外标法计算含量，结果见表6。

表6  样品含量测定

根据上述结果，暂定本品每片含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，小片不得少于30μg，大片不得少于60μg。

下述实施例均能实现上述实验例的效果。

具体实施方式

实施例1：

黄芪120g         党参100g        丹参80g

葛根80g          淫羊藿80g      山楂80g

地黄60g          当归60g        黄连60g

延胡索60g        灵芝60g        人参25g

炙甘草25g；

取原料药中的人参、黄连、醋延胡索、山楂与一半量的黄芪，粉碎成细粉，其余八味原料药与剩余黄芪加水煎煮2次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至90℃时相对密度为1.06～1.12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至90℃时相对密度为1.20～1.22的清膏，与上述药粉混合，制成颗粒，干燥，压制成1000片(小片)，包糖衣或薄膜衣片，或压制成500片(大片)，包薄膜衣，即得。小片每片重0.3g，每日服用3次，一次4～6片；大片每片重0.6g，每日服用3次，一次2～3片；

含量测定方法：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝32∶68为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品，精密称定，加甲醇制成每ml含0.00025g的溶液，即得对照品溶液；取实施例1制备的本发明药物组合物片剂，糖衣片除去包衣，精密称定，研细，取3g，加甲醇50ml，超声处理60分钟，滤过，药渣及滤器用甲醇洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次用正丁醇依次为30ml、30ml、20ml、20ml和10ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，每次用氨水30ml、20ml和20ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液0.01ml、0.02ml与供试品溶液0.01～0.02ml，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，含黄芪以黄芪甲苷(C41H68014)计为600μg；

鉴别方法：

A.取实施例1制备的本发明药物组合物片剂，糖衣片除去包衣，精密称定，研细，取2g，加甲醇25ml，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.05g，加甲醇25ml，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，制成对照药材溶液；取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每ml含0.0005g的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述三种溶液各0.002ml，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-氨水＝12∶6∶3∶3∶1为展开剂，置以氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照药材和对照品谱相应的位置上，显相同的黄荧光斑点；

B.取实施例1制备的本发明药物组合物片剂，糖衣片除去包衣，精密称定，研细，取3g，加乙醇50ml，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml和氨水4ml，混匀，加乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2ml，溶解，作为供试品溶液；另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每ml含0.001g的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各0.01ml，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮＝9∶2为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显至斑点显清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点；

C.取实施例1制备的本发明药物组合物片剂，糖衣片除去包衣，精密称定，研细，取2g，加70％乙醇25ml，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水10ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每ml含0.001g的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各0.005ml，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸2∶3∶4∶0.5∶2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点；

D、取葛根素对照品，甲醇制成每ml含0.001g的溶液，作为对照品溶液；取实施例1制备的本发明药物组合物片剂，糖衣片除去包衣，精密称定，研细，取2g，加甲醇25ml，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；照药典附 录VI B的薄层谱法试验，吸取供试品溶液0.005ml及对照品溶液0.003ml，分别点于同一硅胶G薄层板上，以-甲醇-水＝65∶35∶10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

实施例2：

黄芪    120g       党参    100g

丹参    80g        葛根    80g

山楂    80g        当归    60g

延胡索  60g        人参    25g

甘草    25g

以上九味，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余黄芪加水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90-95℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90-95℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成片剂，小片素片0.3g，大片素片0.6g。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝32∶68为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇50ml，超声处60分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为30ml、30ml、20ml、20ml、10ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为30ml、20ml、20ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于540μg。

实施例3：

黄芪          110g           党参    110g

丹参          70g            葛根    90g

山楂          90g            当归    65g

延胡索        65g            人参    28g

甘草(或炙甘草)22g

以上九味，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余黄芪加水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90-95℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90-95℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成胶囊剂。

鉴别：

取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加乙醇50ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml、氨水4ml，混匀，加乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显至斑点显清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm紫光灯下检视。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝32∶68为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇50ml，超声处60分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为30ml、30ml、20ml、20ml、10ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为30ml、20ml、20ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于600μg或不得少于360μg。

实施例4：

黄芪        120g           党参         100g

丹参        80g            葛根         80g

山楂        80g            当归         60g

人参        25g            甘草(或炙甘草)25g

炙延胡索    60g

以上九味，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余黄芪加水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成颗粒剂。

鉴别：

取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加70％乙醇25ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水10ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝32∶68为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇50ml，超声处60分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为30ml、30ml、20ml、20ml、10ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为30ml、20ml、20ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于540μg。

实施例5：

黄芪        140g       党参    90g    丹参    90g

葛根        70g        山楂    70g    当归    45g

炙延胡索    45g        人参    22g    甘草    28g

淫羊藿      80g        地黄    60g    黄连    60g

灵芝        60g

以上十三味药，人参、黄连、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余八味与剩余黄芪加水煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成口服液体制剂。

鉴别：

取葛根素对照品，甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加甲醇25ml，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取供试品溶液5μl及上述对照品溶液3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以-甲醇-水＝65∶35∶10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝32∶68为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇50ml，超声处60分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为30ml、30ml、20ml、20ml、10ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为30ml、20ml、20ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液 10μl、20μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于600μg或不得少于900μg。

实施例6：

黄芪          110g       党参    110g

丹参          70g        葛根    90g

山楂          90g        当归    65g

延胡索        65g        人参    28g

甘草(或炙甘草)    22g

淫羊藿        80g        地黄    60g

黄连          60g        灵芝    60g

以上十三味药，人参、黄连、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余八味与剩余黄芪加水煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成滴丸。

鉴别：A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加甲醇25ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄连对照药材0.05mg，加甲醇25ml，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-氨水(12∶6∶3∶3∶1)为展开剂，置以氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置365nm紫光灯下检视。供试品谱中，在与对照药材和对照品谱相应的位置上，显相同的黄荧光斑点。

B.取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加乙醇50ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml、氨水4ml，混匀，加乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显至斑点显清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm紫光灯下检视。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝32∶68为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇50ml，超声处60分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为30ml、30ml、20ml、20ml、10ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤 3次，依次为30ml、20ml、20ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于540μg。

实施例7：

黄芪            120g           党参    100g

丹参            80g            葛根    80g

山楂            80g            当归    60g

人参            25g            甘草    25g

延胡索(或炙延胡索)    60g

淫羊藿          80g            地黄    60g

黄连            60g            灵芝    60g

以上十三味药，人参、黄连、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余八味与剩余黄芪加水煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成口服液体制剂。

鉴别：A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加70％乙醇25ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水10ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

B.取葛根素对照品，甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加甲醇25ml，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取供试品溶液5μl及上述对照品溶液3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以-甲醇-水＝65∶35∶10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝32∶68为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇50ml，超声处理60分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为30ml、30ml、20ml、20ml、10ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗 涤3次，依次为30ml、20ml、20ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于600μg或不得少于540μg。

实施例8：

黄芪        140g               党参    90g

丹参        90g                葛根    70g

山楂        70g                当归    45g

延胡索(或炙延胡索)    45g      人参    22g

甘草        28g

以上九味，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余黄芪加水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成控释制剂。

鉴别：

A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加乙醇50ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml、氨水4ml，混匀，加乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显至斑点显清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm紫光灯下检视。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

B.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加70％乙醇25ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水10ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝32∶68为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇50ml，超声处60分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为30ml、30ml、20ml、20ml、10ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤 3次，依次为30ml、20ml、20ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于600μg或不得少于900μg。

实施例9：

黄芪          110g       党参    110g

丹参          70g        葛根    90g

山楂          90g        当归    65g

延胡索        65g        人参    28g

甘草(或炙甘草)22g

以上九味，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余黄芪加水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90-95℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90-95℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成注射剂。

鉴别：A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加乙醇50ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml、氨水4ml，混匀，加乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显至斑点显清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm紫光灯下检视。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

B.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加70％乙醇25ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水10ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

C.取葛根素对照品，甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加甲醇25ml，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取供试品溶液5μl及上述对照品溶液3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以-甲醇-水＝65∶35∶10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝32∶68 为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇50ml，超声处60分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为30ml、30ml、20ml、20ml、10ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为30ml、20ml、20ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于540μg。

实施例10：

黄芪          110g       党参    110g

丹参          70g        葛根    90g

山楂          90g        当归    65g

延胡索        65g        人参    28g

甘草(或炙甘草)22g

淫羊藿  80g        地黄    60g

黄连    60g        灵芝    60g

以上十三味，人参、黄连、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等八味与剩余黄芪加水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.20-1.22(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成胶囊剂。

取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加甲醇23ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.8ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄连对照药材0.045mg，加甲醇28ml，加热回流45分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.8ml使溶解，制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.7mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述三种溶液各15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-氨水(12∶6∶3∶3∶1)为展开剂，置以氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置365nm紫光灯下检视。供试品谱中，在与对照药材和对照品谱相应的位置上，显相同的黄荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝27∶75为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.23mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇45ml，超声处理85分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水25ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为10ml、35ml、10ml、35ml、8ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为15ml、35ml、17ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量 瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液8μl、15μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于540μg。

实施例11：

黄芪    120g       党参    100g

丹参    80g        葛根    80g

山楂    80g        当归    60g

人参      25g        甘草    25g

延胡索    60g

淫羊藿    80g        地黄    60g

黄连      60g        灵芝    60g

以上十三味，人参、黄连、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等八味与剩余黄芪加水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.20-1.22(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成颗粒剂。

取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加乙醇45ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水9ml、氨水4ml，混匀，加乙醚提取3次，每次13ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各7μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显至斑点显清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm紫光灯下检视。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝27∶75为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.23mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇45ml，超声处理85分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水25ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为10ml、35ml、10ml、35ml、8ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为15ml、35ml、17ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液8μl、15μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于540μg。

实施例12：

黄芪    140g        党参    90g

丹参        90g                葛根    70g

山楂        70g                当归    45g

延胡索(或炙延胡索)    45g      人参    22g

甘草        28g

以上九味药，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余五味与剩余黄芪加水煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成口服液体制剂。

取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加75％乙醇23ml，加热回流45分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水11ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次9ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇0.8ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各7μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝27∶75为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.23mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇45ml，超声处85分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水25ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为10ml、35ml、10ml、35ml、8ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为15ml、35ml、17ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液8μl、15μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于600μg或不得少于900μg。

实施例13：

黄芪    110g        党参    110g

丹参          70g        葛根    90g

山楂          90g        当归    65g

延胡索        65g        人参    28g

甘草(或炙甘草)22g

以上九味药，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余五味与剩余黄芪加水煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成滴丸。

取葛根素对照品，甲醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加甲醇28ml，加热回流45分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1.8ml使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取供试品溶液3μl及上述对照品溶液3.5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以-甲醇-水＝65∶35∶10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝27∶75为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.23mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇45ml，超声处85分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水25ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为10ml、35ml、10ml、35ml、8ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为15ml、35ml、17ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液8μl、15μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于540μg。

实施例14：

黄芪    140g       党参    90g

丹参    90g        葛根    70g

山楂        70g                当归    45g

延胡索(或炙延胡索)    45g      人参    22g

甘草        28g

以上九味药，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余五味与剩余黄芪加水煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成口服液体制剂。

鉴别：A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加乙醇45ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水9ml、氨水4ml，混匀，加乙醚提取3次，每次13ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各7μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显至斑点显清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm紫光灯下检视。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝27∶75 为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.23mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇45ml，超声处理85分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水25ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为10ml、35ml、10ml、35ml、8ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为15ml、35ml、17ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液8μl、15μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于600μg或不得少于900μg。

实施例15：

黄芪    110g       党参    110g

丹参    70g        葛根    90g

山楂          90g        当归    65g

延胡索        65g        人参    28g

甘草(或炙甘草)22g

以上九味，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余黄芪加水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成控释制剂。

鉴别：A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加75％乙醇23ml，加热回流45分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水11ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次9ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇0.8ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各7μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

B.取葛根素对照品，甲醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加甲醇28ml，加热回流45分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1.8ml使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取供试品溶液3μl及上述对照品溶液3.5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以-甲醇-水＝65∶35∶10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝27∶75为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.23mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组 合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇45ml，超声处理85分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水25ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为10ml、35ml、10ml、35ml、8ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为15ml、35ml、17ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液8μl、15μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于540μg。

实施例16：

黄芪        120g           党参          100g

丹参        80g            葛根          80g

山楂        80g            当归          60g

人参        25g            甘草(或炙甘草)25g

延胡索(或炙延胡索)    60g

以上九味，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余黄芪加水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(905℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成注射剂。

鉴别：

A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加75％乙醇23ml，加热回流45分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水11ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次9ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇0.8ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各7μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝27∶75为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.23mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇45ml，超声处理85分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水25ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为10ml、35ml、10ml、35ml、8ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为15ml、35ml、17ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液8μl、15μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于540μg。

实施例17：

黄芪        140g               党参    90g

丹参        90g                葛根    70g

山楂        70g                当归    45g

延胡索(或炙延胡索)45g          人参    22g

甘草        28g

淫羊藿      80g                地黄    60g

黄连        60g                灵芝    60g

以上十三味，人参、黄连、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等八味与剩余黄芪加水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.20-1.22(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成片剂。

鉴别：A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加甲醇23ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.8ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄连对照药材0.045mg，加甲醇28ml，加热回流45分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.8ml使溶解，制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.7mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述三种溶液各15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-氨水(12∶6∶3∶3∶1)为展开剂，置以氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置365nm紫光灯下检视。供试品谱中，在与对照药材和对照品谱相应的位置上，显相同的黄荧光斑点。

B.取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加乙醇45ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水9ml、氨水4ml，混匀，加乙醚提取3次，每次13ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各7μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显至斑点显清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm紫光灯下检视。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

C.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加75％乙醇23ml，加热回流45分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水11ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次9ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇0.8ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各7μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

D.取葛根素对照品，甲醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液；取本发明 药物组合物制剂日用制剂量7/15，加甲醇28ml，加热回流45分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1.8ml使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取供试品溶液3μl及上述对照品溶液3.5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以-甲醇-水＝65∶35∶10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝27∶75为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.23mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇45ml，超声处理85分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水25ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为10ml、35ml、10ml、35ml、8ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为15ml、35ml、17ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液8μl、15μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于600μg或不得少于900μg。

实施例18：

黄芪        120g           党参          100g

丹参        80g            葛根          80g

山楂        80g            当归          60g

人参        25g            甘草(或炙甘草)25g

延胡索(或炙延胡索)60g

以上九味药，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余药味与剩余黄芪加水煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成滴丸。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝38∶65为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.28mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇55ml，超声处35分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水35ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为28ml、10ml、7ml、35ml、15ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为38ml、12ml、30ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液12μl、25μl与供试品溶液10～20μ1，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于600μg或不得少于900μg。

实施例19：

黄芪        140g               党参    90g

丹参        90g                葛根    70g

山楂        70g                当归    45g

延胡索(或炙延胡索)45g          人参    22g

甘草        28g

淫羊藿      80g                地黄    60g

黄连        60g                灵芝    60g

以上十三味药，人参、黄连、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余八味与剩余黄芪加水煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成口服液体制剂。

取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加乙醇55ml，加热回流46分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml、氨水4ml，混匀，加乙醚提取3次，每次18ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各14μl，分别点于同一用1.8％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显至斑点显清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm紫光灯下检视。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝38∶65为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.28mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇55ml，超声处35分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水35ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为28ml、10ml、7ml、35ml、15ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为38ml、12ml、30ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液12μl、25μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于600μg或不得少于900g。

实施例20：

黄芪          110g           党参    110g

丹参          70g            葛根    90g

山楂          90g            当归    65g

延胡索        65g            人参    28g

甘草(或炙甘草)22g

淫羊藿    80g        地黄    60g

黄连      60g        灵芝    60g

以上十三味，人参、黄连、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等八味与剩余黄芪加水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成控释制剂。

取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加65％乙醇28ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水9ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次11ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1.8ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝38∶65为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.28mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇55ml，超声处理35分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水35ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为28ml、10ml、7ml、35ml、15ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为38ml、12ml、30ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液12μl、25μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于540μg。

实施例21：

黄芪    120g           党参    100g

丹参    80g            葛根    80g

山楂    80g            当归    60g

人参              25g            甘草(或炙甘草)25g

延胡索(或炙延胡索)60g

淫羊藿            80g            地黄          60g

黄连              60g            灵芝          60g

以上十三味，人参、黄连、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等八味与剩余黄芪加水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90-95℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度 1.26-1.32(90-95℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成注射剂。

取葛根素对照品，甲醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加甲醇22ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.8ml使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取供试品溶液7μl及上述对照品溶液2.5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以-甲醇-水＝65∶35∶10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝38∶65为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.28mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇55ml，超声处理35分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水35ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为28ml、10ml、7ml、35ml、15ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为38ml、12ml、30ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液12μl、25μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于540μg。

实施例22：

黄芪    140g       党参    90g

丹参    90g        葛根    70g

山楂        70g                当归    45g

延胡索(或炙延胡索)45g          人参    22g

甘草        28g

以上九味，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余黄芪加水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.20-1.22(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成片剂。

取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加65％乙醇28ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水9ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次11ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1.8ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝38∶65 为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.28mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇55ml，超声处35分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水35ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为28ml、10ml、7ml、35ml、15ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为38ml、12ml、30ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液12μl、25μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于540μg。

实施例23：

黄芪    140g       党参    90g

丹参    90g        葛根    70g

山楂        70g            当归    45g

延胡索(或炙延胡索)45g      人参    22g

甘草        28g

以上九味，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余黄芪加水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.20-1.22(90℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成胶囊剂。

鉴别：A取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加65％乙醇28ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水9ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次11ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1.8ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

B.取葛根素对照品，甲醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加甲醇22ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.8ml使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取供试品溶液7μl及上述对照品溶液2.5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以-甲醇-水＝65∶35∶10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝38∶65为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.28mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组 合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇55ml，超声处理35分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水35ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为28ml、10ml、7ml、35ml、15ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为38ml、12ml、30ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液12μl、25μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68014)计，不得少于600μg或不得少于800μg。

实施例24：

黄芪          110g           党参    110g

丹参          70g            葛根    90g

山楂          90g            当归    65g

延胡索        65g            人参    28g

甘草(或炙甘草)22g

以上九味，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余黄芪加水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90-95℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90-95℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成颗粒剂。

鉴别：

A取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加乙醇55ml，加热回流46分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml、氨水4ml，混匀，加乙醚提取3次，每次18ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各14μl，分别点于同一用1.8％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显至斑点显清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm紫光灯下检视。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

B.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加65％乙醇28ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水9ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次11ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1.8ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝38∶65为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.28mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组 合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇55ml，超声处35分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水35ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为28ml、10ml、7ml、35ml、15ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为38ml、12ml、30ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液12μl、25μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于500μg。

实施例25：

黄芪        120g           党参          100g

丹参        80g            葛根          80g

山楂        80g            当归          60g

人参        25g            甘草(或炙甘草)25g

延胡索(或炙延胡索)60g

以上九味药，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余五味与剩余黄芪加水煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90～95℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1.32(90～95℃)的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成口服液体制剂。

鉴别：

A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加乙醇55ml，加热回流46分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml、氨水4ml，混匀，加乙醚提取3次，每次18ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各14μl，分别点于同一用1.8％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显至斑点显清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm紫光灯下检视。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

B.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加65％乙醇28ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水9ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次11ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1.8ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

C.取葛根素对照品，甲醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加甲醇22ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.8ml使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取供试品溶液7μl及上述对照品溶液2.5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以-甲醇-水 ＝65∶35∶10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝38∶65为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.28mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇55ml，超声处理35分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水35ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为28ml、10ml、7ml、35ml、15ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为38ml、12ml、30ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液12μl、25μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于400μg。

实施例26：

黄芪    120g        党参    100g

丹参        80g            葛根          80g

山楂        80g            当归          60g

人参        25g            甘草(或炙甘草)25g

延胡索(或炙延胡索)60g

以上九味药，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余五味与剩余黄芪加水煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90～95℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至温度为90℃，相对密度为1.20的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成口服液体制剂。

鉴别：

A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加乙醇55ml，加热回流46分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml、氨水4ml，混匀，加乙醚提取3次，每次18ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各14μl，分别点于同一用1.8％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显至斑点显清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm紫光灯下检视。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

B.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加65％乙醇28ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水9ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次11ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1.8ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-三 氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

C.取葛根素对照品，甲醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加甲醇22ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.8ml使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取供试品溶液7μl及上述对照品溶液2.5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以-甲醇-水＝65∶35∶10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝38∶65为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.28mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇55ml，超声处35分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水35ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为28ml、10ml、7ml、35ml、15ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为38ml、12ml、30ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液12μl、25μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于400μg。

实施例27：

黄芪        120g           党参          100g

丹参        80g            葛根          80g

山楂        80g            当归          60g

人参        25g            甘草(或炙甘草)25g

延胡索(或炙延胡索)60g

以上九味药，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余五味与剩余黄芪加水煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1.12(90～95℃)，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至温度为90℃，相对密度为1.22的清膏，与上述药粉混合，按常规制法制成口服液体制剂。

鉴别：

A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加乙醇55ml，加热回流46分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml、氨水4ml，混匀，加乙醚提取3次，每次18ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各14μl，分别点于同一用1.8％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显至斑点显清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm紫光灯下检视。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜 的荧光斑点。

B.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加65％乙醇28ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水9ml使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次11ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1.8ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液。照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯--乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

C.取葛根素对照品，甲醇制成每1ml含1.3mg的溶液，作为对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/15，加甲醇22ml，加热回流75分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.8ml使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄层谱法试验，吸取供试品溶液7μl及上述对照品溶液2.5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以-甲醇-水＝65∶35∶10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。

含量测定：

照高效液相谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝38∶65为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.28mg的溶液，即得对照品溶液；取发明药物组合物制剂日用制剂量5/8，加甲醇55ml，超声处理35分钟(功率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水35ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，依次为28ml、10ml、7ml、35ml、15ml，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，依次为38ml、12ml、30ml，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液12μl、25μl与供试品溶液10～20μl，注入液相谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于400μg。