一种益生菌葡萄籽面膜及其制备方法

本发明涉及护肤品技术领域，具体涉及一种益生菌葡萄籽面膜及其制备方法。

在皮肤表面存在的正常菌中，一类对人体有益的正常菌被称为益生菌，益生 菌会在人体皮肤粘膜表面特定部位粘附和繁殖，形成一层自然的菌膜，是非特异性的局部 保护膜，可以帮助皮肤抵御致外来病菌的侵袭，益生菌的存在与人体免疫系统的完善是 密切相关的，不仅与人体保持平衡状态，而且与其他菌之间也相互制约，以维持相对的平 衡。目前对于益生菌的研究，其功能最强大的产品主要是各类微生物组成的复合活性益生 菌，并广泛应用于生物工程、工农业、美容护肤以及生命健康领域。现有市场中，各种补水保 湿、美白祛斑、抗衰老面膜主要有化学面膜和天然产物面膜，且很多面膜内含有酒精等刺激 性成分，对皮肤伤害较大，效果不太理想，而利用活性益生菌制备的面膜改善皮肤微生态平 衡在市场上非常罕有，中国专利《一种含益生菌发酵液的美白面膜液及其制备方法》(专利 公开号：CN107802522A)公开了一种利用酶解和生物发酵方法制备具有高抗氧化活性的抗 氧化肽，并与其他辅料制备高抗氧化的美白面膜液，专利《一种益生菌芦荟面膜的制备方 法》(专利公开号：CN105853303A)公开了一种将芦荟益生菌发酵液与化妆品辅助原料按比 例混合加工制作成膏状的面膜，目前市面上尚没有含有益生菌抗衰老抗氧化的面膜。

为了解决上述问题，本发明提供了一种益生菌葡萄籽面膜及其制备方法，取葡萄 籽添加地衣芽孢杆菌益生菌进行发酵制备葡萄籽发酵液，并与辅助原料混合制备成面膜， 具有补水保湿、美白、抗氧化的功效，能够延缓皮肤老化，增加皮肤弹性，使皮肤变得光滑细 腻、紧致白皙。

本发明可以通过以下技术方案来实现：

一种益生菌葡萄籽面膜，由以下重量份原料组成：甘油3-5份、EDTA0.03-0.05份、 聚乙二醇-4003-5份、甜菜碱0.3-0.6份、PEG-40氢化蓖麻油0.1-0.3份、羟乙基纤维- 1000.3-0.5份、水至100份、葡萄籽发酵液8-10份、海藻糖3-5份、VC乙基醚0.3-0.5份、D-泛 醇0.3-0.5份、透明质酸0.05-0.15份、苯氧乙醇0.4-0.6份、甲基异噻唑啉酮0.03-0.05份。

优选地，所述一种益生菌葡萄籽面膜，由以下重量份原料组成：甘油3.5-4.5份、 EDTA 0.035-0.045份、聚乙二醇-4003.5-4.5份、甜菜碱0.4-0.5份、PEG-40氢化蓖麻油 0.15-0.25份、羟乙基纤维-1000.35-0.45份、水至100份、葡萄籽发酵液8.5-9.5份、海藻糖 3.5-4.5份、VC乙基醚0.35-0.45份、D-泛醇0.35-0.45份、透明质酸0.08-0.12份、苯氧乙醇 0.45-0.55份、甲基异噻唑啉酮0.035-0.045份。

优选地，所述一种益生菌葡萄籽面膜，由以下重量份原料组成：甘油4份、EDTA 0.04份、聚乙二醇-4004份、甜菜碱0.45份、PEG-40氢化蓖麻油0.2份、羟乙基纤维-1000.4 份、水至100份、葡萄籽发酵液9份、海藻糖4份、VC乙基醚0.4份、D-泛醇0.4份、透明质酸0.1 份、苯氧乙醇0.5份、甲基异噻唑啉酮0.04份。

优选地，所述葡萄籽发酵液的制备方法为：

a.将葡萄籽从酿酒后的葡萄渣中分离出来，按料液比为1:10加入0.05mol/L氢氧 化钠溶液中，在80℃水浴中浸泡30min，重复浸泡三次，再用清水冲洗干净，干燥粉碎过40目 筛，得到葡萄籽粉；

b.将斜面保存的地衣芽孢杆菌转接在平板上，培养24h后，将单菌落接入装液量 20/100ml的种子培养液中，于32℃，150r/min，振荡培养14-16h，将种子液以10％接种量接 入装液量60/250ml的产酶培养基中，于34℃，150r/min，振荡培养8h，得到地衣芽孢杆菌和 碱性蛋白酶混合液；

c.按料液比为1:12加入50％混合液，于34℃，150r/min，振荡培养，经4800r/min离 心30min，取上清液即为葡萄籽发酵液。

优选地，所述海藻糖是从酿酒酵母中提取的。

一种益生菌葡萄籽面膜的制备方法，包括以下步骤：

(1)取羟乙基纤维素用水预分散，加入透明质酸，加热至75℃搅拌溶解，再加入甘 油、聚乙二醇-400、PEG-40氢化蓖麻油搅拌均匀；

(2)取葡萄籽发酵液、海藻糖、甜菜碱、VC乙基醚和D-泛醇混合，在50℃下混合加入 步骤(1)的溶液中；

(3)将苯氧乙醇、甲基异噻唑啉酮在45℃以下加入步骤(2)溶液中，搅拌均匀，即得 到本发明的益生菌葡萄籽面膜。

本发明所述各主要功效成分作用机理如下：

葡萄籽是葡萄酒和其他葡萄制品生产中的下脚料，含有多种活性成分如蛋白质、 油脂、多酚、矿物质及维生素等，具有保健、美容之功效，其所含活性物质原花青素具有较强 的抗氧化活性，能够清除体内自由基，保护结构组织不被自由基破坏，从而起到延缓衰老的 作用。

益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，是定植于人体肠道、皮肤、生殖系统内， 能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。 益生菌的生长对人体皮肤具有多重作用，能够参与皮肤皮脂腺代谢，中和皮肤上的碱性 物质，抑制有害微生物的定植、生长和繁殖，并对机体表皮起了保护作用，且与其他菌批 次相互依赖，相互制约，形成稳定的生物屏障，提高皮肤免疫功能，保护机体的健康，另外， 益生菌生长会分解产生磷脂、固醇类、角质蛋白等成分，可以被皮肤细胞吸收，促进皮肤细 胞生长，延缓老化和减少皱纹产生。

海藻糖是一种稳定的非还原性双糖，既是一种贮藏性糖类，又是应激代谢的重要 产物，其性质非常稳定，分子量小，易于被皮肤吸收，进入细胞内发挥其独特的水替代应激 因子作用和保护细胞膜的功能，提高细胞的抗干燥、抗冷冻能力，从而提高皮肤适应环境的 能力。

本发明具备以下有益效果：

(1)本发明利用地衣芽孢杆菌和碱性蛋白酶发酵葡萄籽，提高葡萄籽中活性成分 的功效作用，促进其发挥抗氧化作用，清除自由基，并使发酵液中富含地衣芽孢杆菌和蛋白 酶等益生菌，有益于皮肤健康，增加皮肤弹性，预防皮肤老化；

(2)本发明所用的海藻糖是从酿酒酵母中提取出来的，不仅提高了海藻糖的功能 活性，维持活性物质的稳定，还增添了酿酒酵母中的有益成分，促进皮肤的吸收利用，达到 补水保湿效果；

(3)本发明制备的益生菌葡萄籽面膜中，富含对人体有益的益生菌，在人体皮肤黏 膜表面形成一层自然的菌膜，帮助皮肤抵御致外来病菌的侵袭，与其他菌相互制约，维持 相对平衡，提高皮肤免疫功能，保护机体的健康；

(4)本发明的益生菌葡萄籽面膜中，葡萄籽富含抗氧化物质，具有较强的抗氧活 性，能清除体内自由基，防止黑素沉淀，而海藻糖与透明质酸联合应用，能增强面膜补水 保湿效果，且葡萄籽发酵液中还含有有益于皮肤的益生菌，能维持皮肤细菌平衡，促进皮肤 细胞生长，使得皮肤细腻光滑，有弹性，并能有效抵抗皮肤老化，延缓衰老。

图1：使用本发明益生菌葡萄籽面膜后的皮肤含水量变化

图2：使用本发明益生菌葡萄籽面膜后的皮肤TEWL值变化

图3：使用本发明益生菌葡萄籽面膜后的皮肤弹性变化

为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结 合具体实施例，进一步阐述本发明。

本发明一种益生菌葡萄籽面膜实施例1-5配方如表1所示：

表1

优上述葡萄籽发酵液的制备方法为：

a.将葡萄籽从酿酒后的葡萄渣中分离出来，按料液比为1:10加入0.05mol/L氢氧 化钠溶液中，在80℃水浴中浸泡30min，重复浸泡三次，再用清水冲洗干净，干燥粉碎过40目 筛，得到葡萄籽粉；

b.将斜面保存的地衣芽孢杆菌转接在平板上，培养24h后，将单菌落接入装液量 20/100ml的种子培养液中，于32℃，150r/min，振荡培养14-16h，将种子液以10％接种量接 入装液量60/250ml的产酶培养基中，于34℃，150r/min，振荡培养8h，得到地衣芽孢杆菌和 碱性蛋白酶混合液；

c.按料液比为1:12加入50％混合液，于34℃，150r/min，振荡培养，经4800r/min离 心30min，取上清液即为葡萄籽发酵液。

上述海藻糖是从酿酒酵母中提取的。

上述一种益生菌葡萄籽面膜的制备方法，包括以下步骤：

(1)取羟乙基纤维素用水预分散，加入透明质酸，加热至75℃搅拌溶解，再加入甘 油、聚乙二醇-400、PEG-40氢化蓖麻油搅拌均匀；

(2)取葡萄籽发酵液、海藻糖、甜菜碱、VC乙基醚和D-泛醇混合，在50℃下混合加入 步骤(1)的溶液中；

(3)将苯氧乙醇、甲基异噻唑啉酮在45℃以下加入步骤(2)溶液中，搅拌均匀，即得 到本发明的益生菌葡萄籽面膜。

对比例1

与实施例1的区别在于，原料配方中没有添加葡萄籽发酵液。

对比例2

与实施例1的区别在于，原料配方中没有添加海藻糖。

对比例3

与实施例1的区别在于，原料配方中没有添加葡萄籽发酵液和海藻糖。

功效验证

试验例1

选取小鼠雌雄各半，随机分为对照组，实施例1-5组合对比例1-3组，每组正常喂 食，实验前在鼠背相同位置上脱毛至裸露面积约为6×6cm，每天在裸露皮肤上均匀涂敷面 膜液，连续30天，30天后麻醉处死小鼠，剪取背部脱毛涂抹区皮肤组织块0.5g，经预冷0.9％ 氯化钠溶液漂洗后除去皮下脂肪和其他结缔组织，用滤纸拭干，然后制备成10％皮肤组织 匀浆，测定SOD活性，羟基自由基清除能力和MDA含量，其结果如表2所示：

表2各组小鼠皮肤组织SOD活性、MDA含量和羟基自由基清除能力比较

由表2可知，与对照组相比，实施例组与对比例组SOD活性和羟基自由基清除能力 均较高，MDA含量较少，但实施例组差异更显著，说明实施例组制备的面膜具有较强的SOD活 性及羟基自由基清除能力，能降低体内MDA含量，抗氧化活性较强，从而具有抗衰老作用。

试验例2

选取健康人士，在每晚洁面后，敷用面膜15-20min，按摩吸收后无需洁面和涂抹其 他化妆品，连续8周，在使用0、2、4、6、8周时测定皮肤角质层含水量，测定经皮水分流失及测 定皮肤弹性，

图1使用面膜8周后皮肤角质层含水量变化

如图1所示，同0周值相比，使用面膜2周，皮肤含水量有显著改善，由52.8上升为 60.2，上升率为14％，具有极显著意义，4周、6周和8周的皮肤角质层含水量持续上升，8周皮 肤含水量为67.8，比0周值上升28.4％，具有极显著意义，说明本发明制备的面膜具有稳定、 持久、快速的补水效果，能够提高皮肤含水量，减少皮肤皱纹和细纹的产生。

图2使用面膜8周后TEWL值(g/hm2)变化

由图2可知，使用皮肤水分流失仪测量皮肤经皮水分流失值(TEWL值)，0周TEWL值 最高，为18g/hm2，使用面膜2周、4周、6周和8周，TEWL值呈现下降趋势，使用面膜8周的TEWL 值为16.2，较0周TEWL值降低10％，具有极显著统计学意义，说明使用本发明制备的面膜能 够显著降低皮肤TEWL值，改善皮肤状态，修复皮肤屏障，减缓皮肤衰老。

图3使用面膜8周后皮肤弹性值变化

由图3可知，使用面膜0周-8周，皮肤弹性R2值呈现逐渐上升趋势，同0周皮肤弹性 R2值为0.662相比，8周皮肤弹性R2值为0.734，上升10.88％，具有极显著统计学意义，说明 使用本发明制备的面膜，能够提高皮肤弹性，减少皮肤细纹和皱纹的产生，减缓衰老。

综上所述，本发明制备的益生菌葡萄籽面膜能够活化皮肤细胞，增强皮肤弹性，减 少皱纹和细纹的产生，且温和无刺激，能够清除自由基，具有较强的抗氧化作用，从而能够 延缓衰老，具有抗衰老作用。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并 不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员 来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保 护范围。