用于与传染病相关联的炎症病状的方法和组合物与流程

3p、hsa-mir-22-3p、hsa-mir-23a-3p、hsa-mir-23b-3p、hsa-mir-24-1、hsa-mir-24-2、hsa-mir-24-3p、hsa-mir-25、hsa-mir-25-3p、hsa-mir-26a-5p、hsa-mir-27a-3p、hsa-mir-27b、hsa-mir-27b-3p、hsa-mir-29a-3p、hsa-mir-29c-3p、hsa-mir-30a-5p、hsa-mir-30a-5p、hsa-mir-30b-5p、hsa-mir-30c-5p、hsa-mir-30d、hsa-mir-30d-5p、hsa-mir-30e、hsa-mir-30e-5p、hsa-mir-31-3p、hsa-mir-31-5p、hsa-mir-320a、hsa-mir-342-3p、hsa-mir-345-5p、hsa-mir-34a-5p、hsa-mir-361-5p、hsa-mir-376a-3p、hsa-mir-376c-3p、hsa-mir-423-3p、hsa-mir-423-5p、hsa-mir-424-5p、hsa-mir-484、hsa-mir-486-1、hsa-mir-486-2、hsa-mir-486-5p、hsa-mir-570-3p、hsa-mir-574-3p、hsa-mir-663a、hsa-mir-874-3p、hsa-mir-92a-1、hsa-mir-92a-2、hsa-mir-92a-3p、hsa-mir-92b-3p、hsa-mir-93、hsa-mir-93-5p、hsa-mir-940、hsa-mir-99a-5p、和hsa-mir-99b-5p。
6.本文还公开了任一前述方面的组合物，其中一种或多种生物分子抑制缓激肽途径(例如，通过抑制缓激肽2的翻译)、血管紧张素转化酶2(ace 2)受体，抑制跨膜蛋白酶、丝氨酸2(tmprss2)酶、抑制激肽释放酶b1、和/或抑制il-1β、il-6、tnf-α、gm-csf、或m-csf。
7.在一方面，本文公开了前述任一方面的组合物，其中该msc分泌组进一步包括前列腺素e2(pge2)、转化生长因子β1(tgf-β1)、肝细胞生长因子(hgf)、基质细胞衍生因子-1(sdf-1)、一氧化氮、吲哚胺2,3-双加氧酶、白介素-4(il-4)、il-6、白介素-10(il-10)、il-1受体拮抗剂和可溶性tnf-α受体、胰岛素样生长因子、成纤维细胞生长因子(fgf)1-23(尤其是fgf1和fgf2)、骨形态生成蛋白(bmp)1-15、表皮生长因子(egf)、转化生长因子-α(tgf-α)巨噬细胞刺激蛋白(msp)、血小板衍生生长因子(plgf)、血管内皮生长因子(vegf)、巨噬细胞集落刺激因子(m-csf)、胰岛素、粒细胞集落刺激因子(g-csf)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(gm-csf)、雌激素、和/或甲状腺激素。
8.本文还公开了、减少、抑制、降低、改善和/或预防受试者的微生物感染(如例如，病毒、细菌、真菌或寄生虫感染)或其症状(包含但不限于微生物诱导的细胞因子风暴、微生物引发的缓激肽风暴、和/或急性呼吸窘迫综合征)的方法，包括对受试者施用任一前述方面所述的组合物。
9.一方面，本文公开了、减少、抑制、降低、改善和/或预防任一前述方面所述的微生物感染或其症状的方法，其中微生物感染包括选自由以下组成的病毒组的病毒的感染：单纯疱疹病毒-1、单纯疱疹病毒-2、水痘-带状疱疹病毒、eb病毒、巨细胞病毒、人类疱疹病毒-6、天花病毒、水泡性口炎病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、鼻病毒、冠状病毒(包含但不限于禽冠状病毒(ibv)、猪冠状病毒hku15(porcov hku15)、猪流行性腹泻病毒(pedv)、hcov-229e、hcov-oc43、hcov-hku1、hcov-nl63、sars-cov、sars-cov-2或mers-cov)、甲型流感病毒、乙型流感病毒、麻疹病毒、多瘤病毒、人乳头状瘤病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、柯萨奇病毒、基孔肯亚病毒、登革病毒、腮腺炎病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病毒、劳斯氏肉瘤病毒、呼肠孤病毒、黄热病毒、埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙热病毒、东方马脑炎病毒、日本脑炎病毒、圣路易脑炎病毒、墨累溪谷热病毒、西尼罗河病毒、裂谷热病毒、a组轮状病毒、b组轮状病毒、c组轮状病毒、辛德毕斯病毒、猴免疫缺陷病毒、人类t细胞白血病病毒1型、汉坦病毒、风疹病毒、猴免疫缺陷病毒、人类免疫缺陷病毒1型、和人类免疫缺陷病毒2型。
10.本文还公开了、减少、抑制、降低、改善和/或预防任一前述方面所述的微生物
感染或其症状的方法，其中微生物感染包括选自由以下组成的细菌组的细菌的感染：结核分支杆菌(mycobacterium tuberculosis)、牛分支杆菌(mycobacterium bovis)、牛分支杆菌菌株bcg(mycobacterium bovis strain bcg)、bcg亚株、鸟分枝杆菌(mycobacterium avium)、细胞内分支杆菌(mycobacterium intracellular)、非洲分枝杆菌(mycobacterium africanum)、堪萨斯分枝杆菌(mycobacterium kansasii)、海鱼分枝杆菌(mycobacterium marinum)、溃疡分枝杆菌(mycobacterium ulcerans)、鸟分枝杆菌副结核亚种(mycobacterium avium subspecies paratuberculosis)、嵌合体分枝杆菌(mycobacterium chimaera)、星形诺卡菌(nocardia asteroides)、其他诺卡菌种(nocardia species)、嗜肺军团菌(legionella pneumophila)、其他军团菌种(legionella species)、鲍曼不动杆菌(acetinobacter baumanii)、伤寒沙门氏菌(salmonella typhi)、肠道沙门氏菌(salmonella enterica)、其他沙门氏菌种(salmonella species)、鲍氏志贺菌(shigella boydii)、痢疾志贺菌(shigella dysenteriae)、宋内志贺菌(shigella sonnei)、福氏志贺菌(shigella flexneri)、其他志贺菌种(shigella species)、鼠疫耶尔森菌(yersinia pestis)、溶血巴斯德菌(pasteurella haemolytica)、多杀巴斯德菌(pasteurella multocida)、其他巴斯德菌种(pasteurella species)、胸膜肺炎放线杆菌(actinobacillus pleuropneumoniae)、单核细胞增生李斯特菌(listeria monocytogenes)、伊氏利斯特菌(listeria ivanovii)、流产布鲁氏菌(brucella abortus)、其他布鲁氏菌种(brucella species)、反刍动物考德里体(cowdria ruminantium)、伯氏疏螺旋体(borrelia burgdorferi)、禽鲍特菌(bordetella avium)、百日咳鲍特菌(bordetella pertussis)、支气管败血鲍特菌(bordetella bronchiseptica)、创口鲍特菌(bordetella trematum)、欣氏鲍特菌(bordetella hinzii)、彼得里鲍特菌(bordetella petrii)、副百日咳鲍特菌(bordetella parapertussis)、亚洲耐药病原菌监测网鲍特菌(bordetella ansorpii)其他鲍特菌种(bordetella species)、鼻疽伯克霍尔德菌(burkholderia mallei)、类鼻疽伯克霍尔德菌(burkholderia pseudomallei)、洋葱伯克霍尔德菌(burkholderia cepacia)、肺炎衣原体(chlamydia pneumoniae)、沙眼衣原体(chlamydia trachomatis)、鹦鹉热衣原体(chlamydia psittaci)、贝纳柯克斯体(coxiella burnetii)、立克次体菌(rickettsial)种、埃立克体菌种(ehrlichia species)、金黄葡萄球菌(staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(staphylococcus epidermidis)、肺炎链球菌(streptococcus pneumoniae)、化脓链球菌(streptococcus pyogenes)、无乳链球菌(streptococcus agalactiae)、大肠埃希菌(escherichia coli)、弧菌(vibrio cholerae)、弯曲杆菌种(campylobacter species)、脑膜炎奈瑟菌(neisseria meningitidis)、淋病奈瑟菌(neisseria gonorrhoeae)、铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)、其他假单胞菌种(pseudomonas species)、流感嗜血杆菌(haemophilus influenzae)、杜克雷嗜血杆菌(haemophilus ducreyi)、其他嗜血杆菌种(hemophilus species)、破伤风梭菌(clostridium tetani)、其他梭菌种(clostridium species)、小肠结肠炎耶尔森菌(yersinia enterocolitica)、其他耶尔森菌种(yersinia species)、和支原体菌种(mycoplasma species)。一方面，细菌不是杆菌(bacillus anthracis)。
11.一方面，本文还公开了、减少、抑制、降低、改善和/或预防任一前述方面所述
的微生物感染或其症状的方法，其中微生物感染包括选自由以下真菌组成的组的真菌的感染：白念珠菌(candida albicans)、新型隐球菌(cryptococcus neoformans)、荚膜组织胞浆菌(histoplasma capsulatum)、烟曲霉菌(aspergillus fumigatus)、粗球孢子菌(coccidioides immitis)、巴西副球孢子菌(paracoccidioides brasiliensis)、皮炎芽生菌(blastomyces dermatitidis)、卡氏肺孢菌(pneumocystis carinii)、马尔尼菲青霉菌和链格孢菌(alternaria alternata)。
12.本文还公开了、减少、抑制、降低、改善和/或预防任一前述方面所述的微生物感染或其症状的方法，其中微生物感染包括选自由以下寄生生物组成的组的寄生虫的寄生虫感染：刚地弓形虫(toxoplasma gondii)、恶性疟原虫(plasmodium falciparum)、间日疟原虫(plasmodium vivax)、三日疟原虫(plasmodium malariae)、其他疟原虫物种(plasmodium species)、痢疾变形虫(entamoeba histolytica)、福氏耐格里变形虫(naegleria fowleri)、西伯鼻孢子虫(rhinosporidium seeberi)、兰伯氏贾第虫(giardia lamblia)、蠕形住肠蛲虫(enterobius vermicularis)、格里氏蛲虫(enterobius gregorii)、人蛔虫(ascaris lumbricoides)、十二指肠钩虫(ancylostoma duodenale)、美洲钩虫(necator americanus)、隐孢子虫(cryptosporidium spp.)、布氏锥虫(trypanosoma brucei)、克氏锥虫(trypanosoma cruzi)、利什曼原虫(leishmania major)、其他利什曼虫物种(leishmania species)、阔节裂头绦虫(diphyllobothrium latum)、短膜壳绦虫(hymenolepis nana)、缩小膜壳绦虫(hymenolepis diminuta)、细粒棘球绦虫(echinococcus granulosus)、多房棘球绦虫(echinococcus multilocularis)、福氏棘球绦虫(echinococcus vogeli)、少节棘球绦虫(echinococcus oligarthrus)、阔节裂头绦虫(diphyllobothrium latum)、华支睾吸虫(clonorchis sinensis)、泰国睾吸虫(clonorchis viverrini)、肝片吸虫(fasciola hepatica)、巨片吸虫(fasciola gigantica)、枝双腔吸虫(dicrocoelium dendriticum)、布氏姜片虫(fasciolopsis buski)、横川吸虫(metagonimus yokogawai)、泰国肝吸虫(opisthorchis viverrini)、猫肝吸虫(opisthorchis felineus)、华支睾吸虫(clonorchis sinensis)、阴道毛滴虫(trichomonas vaginalis)、棘阿米巴物种(acanthamoeba species)、间插血吸虫(schistosoma intercalatum)、埃及裂体吸虫(schistosoma haematobium)、日本裂体吸虫(schistosoma japonicum)、曼氏裂体吸虫(schistosoma mansoni)、其他裂体吸虫物种(schistosoma species)、雷根毛毕吸虫(trichobilharzia regenti)、螺旋旋毛虫(trichinella spiralis)、布氏旋毛虫(trichinella britovi)、纳氏旋毛虫(trichinella nelsoni)、乡土旋毛虫(trichinella nativa)和痢疾变形虫(entamoeba histolytica)。
附图说明
13.并入本说明书中并且构成本说明书的一部分的附图展示若干实施例，并且与描述一起展示了所公开的组合物和方法。
14.图1a、1b和1c示出了通过透射电子显微镜法(tem)捕获的一组代表性图像，示出了存在于根据本发明的实施例的组合物的样品内的ev的大小分布；
15.图2a、2b、2c和2d是一组表示捕获的外泌体颗粒的数量的图表；
16.图3a、3b、3c和3d是一组cd63捕获的外泌体的显微图像；
17.图4是来自park等人(2020)发布在biorxiv上的图表，示出了mirna被预测结合sars-cov-2rna基因组；
18.图5是本发明组合物的多个作用机制的示意图；并且
19.图6是表明图1的组合物对cov-2活病毒复制的直接影响的坐标图。
20.图7是坐标图汇编，表明了本发明在与covid-19相关的严重ards患者时的效果。covid-19患者对静脉注射本发明的反应“急性期反应物”(crp、铁蛋白和d-二聚体)和免疫细胞体在iv注射前一天和后第5天。crp、铁蛋白和d-二聚体减少量的平均减少量分别是77％(p《0.001)、43％(p《0.001)和42％(p《0.05)。anc的平均减少量是32％(p《0.001)；淋巴细胞总计数增加了36％(p《0.05)，其中cd3+、cd4+和cd8+t淋巴细胞分别增加了46％(p《0.05)、45％(p《0.05)和46％(p《0.001)。anc，中性粒细胞绝对计数；crp，c反应蛋白。
21.图8是展示一种作用机制的坐标图，该作用机制用于抑制主炎症诱导细胞因子il-1β。
22.图9是展示一种作用机制的坐标图，该作用机制是通过减少中性粒细胞胞外陷阱形成(netosis)来调节中性粒细胞过度活跃的免疫应答。
具体实施方式
23.在公开和描述的本发明的化合物、组合物、制品、装置和/或方法之前，应当理解，除非另外指明，否则所述化合物、组合物、制品、装置和/或方法不限于特定的合成方法或特异性重组生物技术方法，或者除非另外指明，否则不限于特定的试剂，因为所述化合物、组合物、制品、装置和/或方法当然可以变化。还应理解，本文中所使用的术语仅出于描述特定实施例的目的，而不旨在为限制性的。
24.a.定义
25.如说明书和所附权利要求中所使用的，单数形式“一个(a)”、“一个(an)”和“所述(the)”包含复数指示物，除非上下文中另有明确规定。因此，例如，对“药物载剂”的提及包含两种或更多种此类载剂的混合物等。
26.范围在本文中可以被表示为从“约”一个特定值，和/或到“约”另一个特定值。当表达此类范围时，另一个实施例包含从一个特定值和/或到另一个特定值。类似地，当通过使用先行词“约”将值表达为近似值时，将理解特定值形成另一个实施例。进一步应当理解，范围中的每一个端点相对于另一个端点和独立于另一个端点都是重要的。还应当理解，本文公开了许多值，并且除了该值本身之外，本文还将每个值公开为“约”该特定值。例如，如果公开了值“10”，则还公开了“约10”。还应当理解，如本领域的技术人员适当理解的，当公开的值“小于或等于”所述值时，还公开了“大于或等于所述值”以及所述值之间的可能范围。例如，如果公开了值“10”，则还公开了“小于或等于10”以及“大于或等于10”。还应当理解，在整个申请中，数据以多种不同的格式提供，并且该数据代表端点和起始点，以及数据点的任何组合的范围。例如，如果公开了特定的数据点“10”和特定的数据点15，则应当理解，大于、大于或等于、小于、小于或等于、和等于10和15以及在10和15之间被认为是公开的。还应理解，也公开了两个特定单位之间的每个单位。例如，如果公开了10和15，则还公开了11、12、13和14。
27.术语“受试者”在本文中定义为包含动物，如哺乳动物，包含但不限于灵长类动物(例如，人)、牛、马、猪、绵羊、山羊、狗、猫、兔、大鼠、小鼠等。在一些实施例中，受试者是人。
28.对受试者的“施用”包含向受试者引入或递送药剂的任何途径。施用可以通过任何合适的途径进行，包含口服、局部、静脉内、皮下、经皮、透皮、肌内、关节内(intra-joint)、肠胃外、小动脉内、关节内(intraarticular)、皮内、心室内、颅内、腹膜内、病灶内、鼻内、直肠、阴道、通过吸入、经由植入型药盒、肠胃外(例如，皮下、静脉内、肌内、关节内、滑膜内、胸骨内、囊内、腹膜内、肝内、病灶内和颅内注射或输注技术)等。如本文所使用的，“同时施用(concurrent administration)”、“组合施用”、“同时施用(simultaneous administration)”或“同时地施用”意指化合物在同一时间点施用或基本上一个紧接一个施用。在后一种情况下，两种化合物的施用时间足够接近，以至于观察到的结果与所述化合物在同一时间点施用时所获得的结果难以区分。“全身施用”是指经由将药剂引入或递送至受试者身体的广泛区域(例如大于身体的50％)的途径，例如通过进入循环系统或淋巴系统，将药剂引入或递送至受试者。相比之下，“局部施用”是指经由将药剂引入或递送至施用点的区域或紧邻施用点的区域并且不以显著量全身性地引入药剂的途径向受试者引入或递送药剂。例如，局部施用的药剂可在施用点的局部附近容易地检测，但在受试者身体的远侧部分中不可检测或可检测到的量可忽略不计。施用包含自我施用和由另一个人施用。
[0029]“生物相容性”通常是指通常对接受者无毒并且不会对受试者造成显著副作用的材料和其任何代谢物或降解产物。
[0030]“包括”旨在意味着组合物和方法等包含所叙述的要素，但不排除其他要素。当用于定义组合物和方法时，“基本上由
……
组成”应当意指包含所叙述的要素，但排除对组合具有任何重要意义的其他要素。因此，基本上由如本文所定义的要素组成的组合物不会从分离和纯化方法和药学上可接受的载剂(如磷酸盐缓冲盐水、防腐剂等)中排除痕量污染物。“由
……
组成”应当意指排除多于痕量要素的其他成分和用于施用本发明的组合物的大量方法步骤。由这些过渡术语中的每个定义的实施例在本发明的范围内。
[0031]“对照”是在实验中用于比较目的的替代受试者或样品。对照可以是“阳性的”或“阴性的”。
[0032]
药剂的“有效量”是指足以提供期望的效果的药剂的量。“有效”的药剂的量将因受试者而异，这取决于许多因素，如受试者的年龄和一般状况、特定的一种或多种药剂等。因此，不可能总是指定定量的“有效量”。然而，本领域普通技术人员可以使用常规实验确定任何受试者情况下的适当“有效量”。而且，如本文所使用的并且除非另有明确说明，否则药剂的“有效量”还可以指覆盖有效量和预防有效量的量。达到效果所必需的药剂的“有效量”可以根据如受试者的年龄、性别和体重等因素而变化。剂量方案可以调整以提供最佳的应答。例如，可以每天施用若干个分开的剂量，或者剂量可以成比例减少，如情况的迫切情况所指示的。
[0033]“减少”可以指导致更少量的基因表达、蛋白质产量、症状、疾病、组合物、病状或活动的量的任何变化。当利用物质的基因产物的遗传输出相对于不利用所述物质的基因产物的输出较低时，所述物质还应被理解为减少基因的遗传输出。还例如，减少可以是病症症状的使得症状比先前观察到的更少的变化。减少可以是病状、症状、活动、组合物以统计学显
著量的任何个体、中值或平均减少。因此，该减少可以是1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％的减少，只要该减少在统计上是显著的。
[0034]“抑制(inhibit)”、“抑制(inhibiting)”和“抑制(inhibition)”意指减少活性、应答、病状、疾病或其他生物参数。这可以包含但不限于活性、应答、病状或疾病的完全消融。这也可以包含，例如，与天然或对照水平相比，活性、应答、病状或疾病减少10％。因此，与天然或对照水平相比，所述减少可以是10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％或其间的任何减少量。
[0035]
如本文所使用的，“(treat)”、“(treating)”、“(treatment)”及其语法变体包含施用组合物，其旨在或目的是部分或完全预防、延迟、治愈(curing)、治愈(healing)、缓解、减轻(relieving)、改变、补救、改善、改进、稳定、减轻(mitigating)和/或减少一种或多种疾病或病状的强度或频率、疾病、紊乱、损伤或病状的症状、或疾病或病状的潜在病因。根据本发明的可以预防性地(preventively)、预防性地(prophylactically)、缓和性地或补救性地施用。在发病之前(例如，在明显的癌症征兆之前)、在早期发病期间(例如，在癌症的初始征兆和症状之后)或在癌症的确定发展之后，对受试者进行预防性。预防性施用可以在感染症状显现之前的数天或数年内进行。
[0036]
如本文所使用的，术语“预防(prevent)”、“预防(prevening)”、“预防(prevention)”及其语法变体是指部分或完全延迟或阻止疾病和/或其一种或多种伴随症状的发作或复发、或禁止受试者患或再次患病、或减小受试者患或再次患病或其一种或多种伴随症状的风险的方法。
[0037]“药学上可接受的”组分可以指不是生物学上或其他方面不合需要的组分，即，该组分可以并入本发明的药物调配物中并如本文所述施用于受试者，而不引起显著的不合需要的生物效果或不以有害方式与含有它的调配物的任何其他组分相互作用。当针对施用于人而使用时，所述术语通常意味着所述组分已满足所需的毒理学和制造测试标准，或者所述组分包含在美国食品和药物管理局(u.s.food and drug administration)制定的非活性成分指南(inactive ingredient guide)中。
[0038]“药学上可接受的载剂”(有时称为“载剂”)意指可用于制备通常安全且无毒的药物或组合物的载剂或赋形剂，并且包含可接受用于兽医和/或人类药物或用途的载剂。术语“载剂”或“药学上可接受的载剂”可以包含但不限于磷酸盐缓冲盐水溶液、水、乳剂(如油/水或水/油乳剂)和/或各种类型的润湿剂。如本文所使用的，术语“载剂”涵盖但不限于任何任何赋形剂、稀释剂、填料、盐、缓冲液、稳定剂、增溶剂、脂质、稳定剂或本领域公知的用于药物调配物并且如本文进一步描述的其他材料。
[0039]
如在“药理学上活性的”衍生物或类似物中的“药理学上活性的”(或简单地“活性的”)可以指具有与母体化合物相同类型的药理学活性并且程度大致相等的衍生物或类似物(例如，盐、酯、酰胺、缀合物、代谢物、异构体、片段等)。
[0040]“剂”是指具有有益生物效果的任何组合物。有益生物效果包含：效果，例如，病症或其他不期望的生理病状；和预防效果，例如，预防病症或其他不期望的生理病状(例如，非免疫原性癌症)。所述术语还涵盖本文具体提及的有益药剂的药学上可接受的药理学上活性的衍生物，包含但不限于盐、酯、酰胺、前体药剂(proagent)、活性代谢物、
异构体、片段、类似物等。当使用术语“剂”时，或者当具体鉴定特定药剂时，应当理解，所述术语包含药剂本身以及药学上可接受的药理学上活性的盐、酯、酰胺、前体药剂、缀合物、活性代谢物、异构体、片段、类似物等。
[0041]
组合物(例如，包括药剂的组合物)的“有效量”或“有效剂量”是指有效实现所期望的结果的量。在一些实施例中，所期望的结果是控制i型糖尿病。在一些实施例中，所期望的结果是控制肥胖。给定剂的有效量通常将根据如所的病症或疾病的类型和严重程度以及受试者的年龄、性别和体重的因素而变化。该术语还可以指有效促进期望的效果(例如，疼痛(即伤害感受)缓解)的剂的量或剂的递送速率(例如，随时间变化的量)。精确的期望的效果将根据待的病状、受试者的耐受性、待施用的药剂和/或药剂调配物(例如，剂的效力、调配物中药剂的浓度等)以及本领域普通技术人员所理解的各种其他因素而变化。在一些情况下，在数天、数周或数年的时间段内对受试者施用多剂量的组合物后，实现了期望的生物或医学应答。
[0042]
在本说明书和随后的权利要求中，将参考许多术语，这些术语应当被定义为具有以下含义：
[0043]“任选的”或“任选地”意指随后描述的事件或情形可能发生或可能不发生，并且该描述包含其中所述事件或情形发生的情况和其中所述事件或情形不发生的情况。
[0044]
在整个本技术中，参考了各种出版物。这些出版物的公开内容特此通过引用以其整体并入本技术中，以更全面地描述所属领域的现状。对于文献中含有的在文献所依赖的句子中讨论的材料，所公开的参考文献也单独地和具体地通过引用并入本文。
[0045]
b.组合物
[0046]
公开了用于制备所公开的组合物的组分，以及在本文所公开的方法中使用的组合物本身。这些和其他材料在本文中公开，并且应当理解，当公开这些材料的组合、子集、相互作用、组等时，虽然可能没有明确公开这些化合物的每一种不同的单独和集体组合和排列的具体参考，但每一种都在本文中被具体设想和描述。例如，如果公开和论述了特定msc分泌组(包含但不限于本文称为细胞外囊泡分离产物(evip)的msc外泌体(具有或不具有生长因子))，并且论述了包含msc分泌组的大量分子可以进行大量修饰，则具体设想的是msc分泌组的每种组合和排列以及可能的修饰，除非明确指出相反。因此，如果公开了一类分子a、b和c以及公开了一类分子d、e和f以及分子a-d的组合的示例，则即使没有单独地列举每个，每个是单独和共同考虑的含义组合，也认为公开了a-e、a-f、b-d、b-e、b-f、c-d、c-e和c-f。同样，还公开了这些的任何子集或组合。因此，例如，将认为公开了a-e、b-f和c-e的子组。该概念适用于本技术的所有方面，包含但不限于制备和使用所公开的组合物的方法中的步骤。因此，如果存在可以执行的各种另外的步骤，则应当理解这些附加步骤中的每一个都可以用所公开的方法的任何特定实施例或实施例的组合来执行。
[0047]
目前，covid-19正在肆虐世界。据广泛报道，儿童患重病和死于covid-19的可能性较低。最近针对44,672名确诊covid-19感染者的研究发现，10岁以下儿童在那些病例中所占比例不到1％，在1,023例死亡病例中无一人是儿童。直截了当的解释是，儿童首先抵抗了感染，但事实似乎并非如此。儿童和成人一样容易被感染。所以，什么在保护儿童呢？专家怀疑，这可能是因为儿童的免疫系统对这些病毒的反应方式独特。
[0048]
成人covid-19、sars和mers的常见并发症是对冠状病毒的过度免疫应答，并对肺
部造成致命的损伤。导致的液体和免疫细胞泄漏到肺部会导致危急生命的急性呼吸窘迫综合征(ards)问题。即使那些免疫应答试图通过攻击病毒来提供帮助，但是它们最终仍会阻止肺部摄取氧气。由于儿童的免疫系统仍在发育发中，因此一种建议是，当他们感染covid-19或类似疾病时，使他们免受这种被称为细胞因子风暴的危险免疫应答的影响。
[0049]
气道上皮细胞损伤在covid-19的发病机制中也很重要。受伤的肺上皮细胞是炎症介质(如il-6、tnf-α、il-1β、gm-csf和cxcl-8)的来源，它们可能以自分泌和旁分泌的方式起作用。il-6通过调节和促进肌成纤维细胞分化来诱导气道细胞的重塑，这是气道重塑期间纤维化发育的主要原因。这些介质的旁分泌活性至少部分由炎症外泌体介导。
[0050]
急性炎症是covid-19过程的关键病理特征。例如，炎症部位的自然杀伤细胞、肥大细胞、巨噬细胞和单核细胞产生的细胞因子在导致ards的covid-19细胞因子风暴的发展中起关键作用。在慢性和急性肺部疾病状态下都发现了促炎的生物标志物，如细胞因子，这表明在病理发生中具有直接或促进作用。在炎症反应期间产生多种细胞因子。细胞因子通过激活特定信号转导机制以及其他细胞类型的激活来促进炎症过程。细胞因子在细胞外(血液中)和间质隔室中发现，在那里它们可以以自分泌/旁分泌方式激活细胞。据推测，细胞因子水平的增加通过增加伤害性感受器的致敏作用影响和促进covid-19呼吸道症状。当组织在炎症发作期间被肺白细胞入侵或破坏时，数个介质(如白介素-1(il-1)、il-8、il-6和肿瘤坏死因子α(tnf-α)迁移到该地部位。这些介体还包含神经生长因子和前列腺素。这些都导致肺部炎症。
[0051]
间充质干细胞(msc)因其调节炎症过程的能力而备受关注。在许多类型的肺创伤中，损伤部位的炎症病状阻碍了局部祖细胞和成熟细胞的自然修复过程。msc经由旁分泌机制提供协助，并经由抗炎和免疫调节机制调节再生环境。响应于炎性分子，如白介素-1(il-1)、il-2、il-6、il-12，肿瘤坏死因子-a(tnf-α)和干扰素-γ(inf-γ)，mscs分泌在许多类型的免疫细胞中具有复杂反馈机制的一系列生长因子和抗炎蛋白。关键的免疫调节细胞因子包含前列腺素2、tgf-β1、hgf、sdf-1、吲哚胺2,3-双加氧酶、il-4、il-10、il-1受体拮抗剂和可溶性肿瘤坏死因子-a受体。msc防止许多炎性免疫细胞(包含t细胞、自然杀伤细胞、b细胞、单核细胞、巨噬细胞和树突细胞)的增殖和功能障碍。
[0052]
msc的主要营养特性是分泌生长因子和外泌体，以诱导细胞增殖和血管生成。外泌体表达有丝分裂蛋白，如转化生长因子-α(tgf-α)、tgf-β、肝细胞生长因子(hgf)、上皮生长因子(egf)、碱性成纤维细胞生长因子(fgf-2)和胰岛素样生长因子-1(fgf-1)。这些增加了成纤维细胞、上皮和内皮细胞分裂。释放血管内皮生长因子(vegf)、igf-1、egf和血管生长素-1以募集内皮谱系细胞并启动血管化。
[0053]
msc经由旁分泌机制提供协助，并经由抗炎和免疫调节机制调节再生环境。响应于炎性分子，如白介素-1(il-1)、il-6、il-2、il-12、肿瘤坏死因子-α(tnf-α)和干扰素-γ(inf-γ)，msc分泌在许多类型的免疫细胞中具有复杂反馈机制的一系列生长因子和抗炎蛋白。关键的免疫调节细胞因子包含前列腺素2、tgf-β1、hgf、sdf-1、一氧化二氮、吲哚胺2,3-双加氧酶、il-4、il-10、il-1受体拮抗剂和可溶性肿瘤坏死因子-α受体。msc防止许多炎性免疫细胞的增殖和功能，包含t细胞、自然杀伤细胞、b细胞、单核细胞、巨噬细胞和树突细胞。尽管跨物种的msc能够调节t细胞活性，但哺乳动物物种的机制并不相同。
[0054]
慢性炎症环境的特征是辅助性t细胞和巨噬细胞类型的持续失衡。msc外泌体通过
减少inf-γ并增加il-4和il-10，间接促进th1细胞向th2细胞的过渡。已恢复的th1/th2平衡已被证明改善软骨、肌肉和其他软组织损伤的组织再生，减轻自身免疫性疾病的症状，并具有抗糖尿病作用。类似地，inf-γ的降低和il-4的分泌促进了巨噬细胞从m1(促炎、抗血管生成和组织生长抑制)转移到m2(抗炎、促重塑和组织愈合)型的转变，这是一种骨骼、肌肉和神经愈合和再生所需的效果。
[0055]
本文公开了一种分泌生物分子(蛋白质，脂质和核糖核酸)和/或包括生物分子的细胞外囊泡的复杂组合物，这些囊泡来自间充质谱系细胞，它们与微生物蛋白(如例如，冠状病毒蛋白质)和/或核酸含量(如例如，微生物核糖核酸含量)直接相互作用，以破坏微生物在受试者中建立感染、感染细胞和/或在细胞内复制的能力，并且它们同时与受感染细胞和免疫应答细胞相互作用以解决过度活跃的应答(如例如，微生物诱导的细胞因子风暴、微生物引发的缓激肽风暴和/或急性呼吸窘迫综合征)。一方面，本文公开了一种组合物，其包括有效量的msc分泌组(如例如，包含但不限于包括msc生长因子、msc外泌体、msc提取物和/或细胞外囊泡的组合物)和一种或多种生物分子(如例如，肽、多肽、蛋白质、sirna、shrna和/或微小rna(mirna))，其选择性地结合到一种或多种微生物免疫原，或抑制微生物寄生宿主的能力，或抑制、减少、降低、改善和/或预防微生物感染引起的一种或多种继发性病状(如例如包括肽、多肽、蛋白质、sirna、shrna、微小rna(mirna)，其同时且协同地作用以直接影响病毒感染和/或复制，和/或响应于微生物感染，同时且协同地作用以调节下游炎症和血管细胞相关的病症)。
[0056]
在一些实施例中，该组合物包括附着于培养塑料并可在培养中分化成多个成熟细胞命运(包含但不限于脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞命运)和/或分泌细胞外囊泡的骨髓间充质细胞，所述分泌细胞外囊泡含有核心蛋白组合物，其包含选自由以下组成的组的核心组合物蛋白的任何组合：铁蛋白、nup85、lamp2、gpr115、丝氨酸蛋白酶抑制剂f1、opn、pai-1、dapp1、组织蛋白酶b、臂板蛋白6c、pdgf rα、分拣蛋白、丝氨酸蛋白酶抑制蛋白b6、dkk-3、血栓调节蛋白、pf4、mif、骨膜蛋白、弗林蛋白酶、timp-1、核心蛋白聚醣、pck1、cd99、cd63、cd9、cd81、运铁蛋白、dcr3、内腔蛋白、timp-2、slitrk5、fap、神经鞘胚素、dppii、ciap-1、正五聚蛋白3、内脏脂肪素、中性肽链内切酶、白蛋白、半乳凝素-1、unc5h3、il-20rβ、srec-ii、jam-c、tnf ri、htpapp-a、enos、msp r、tpp1、lamp1、b2m、ncam-1、hif-1α、st6gal1、cd99-l2、神经丛蛋白a4、emmprin、p53、臂板蛋白7a、nkp80、血清胱抑素b、骨黏附蛋白聚糖、中期因子、钙网蛋白、骨激活素、豆荚蛋白、taz、组织蛋白酶l、rbp4、丝氨酸蛋白酶抑制剂a4、jam-a、mcsf、limpii、opg、il-22、半乳凝素-3、mog、胰蛋白酶3、sirpα、和多配体蛋白聚糖-4；和选自由以下组成的组的至少一种蛋白质：铁蛋白、igfbp-4il-1r6 gstm1、nup85、lamp2、穿膜肽酶a、il-1f10、big-h3、gpr115、tgfb1、肝配蛋白-a4、cd109、丝氨酸蛋白酶抑制剂f1、igfbp-6、hs3st4、氨基肽酶lrap、opn、pai-1、dapp1、gdf-9、组织蛋白酶b、igfbp-2、臂板蛋白6c、igf-2、pdgf rα、分拣蛋白、丝氨酸蛋白酶抑制蛋白b6、dkk-3、cntf、tsp-1、gm-csf ra、血栓调节蛋白、endoglycan、igfbp-3、rgm-c、pf4、mif、tgm4、骨膜蛋白、弗林蛋白酶、timp-1、papp-a、核心蛋白聚醣、、pck1、芳基硫酯酶a、cd99、ca2、prdx4、运铁蛋白、dcr3、gp73、lair2、ulbp-4、内腔蛋白、timp-2、tfpi、sox2、slitrk5、fap、脊骨蛋白、enpp-2、cd97、ctack、整联蛋白α-1、extl3、il-18bpa、pd-l2、psma、il-20ra、乙二醛酶ii、胰蛋白酶1、igf-2r、adamtsl-1、红细胞生成素、神经丛蛋白d1、dnmt3a、bcl-2、cl-p1、肝配蛋
白-b3、fabp6、chi3l1、fcrl5、tff3、神经鞘胚素、dppii、ciap-1、pdgf rb、正五聚蛋白3、血管紧张肽原、卵泡抑素、cf vii、persephin、trail r1、thap11、cd200、clec-2、amigo、igfbp-5、pon1、sox7、galnt10、内脏脂肪素、颗粒蛋白前体、pcsk2、gkn1、il-18、中性肽链内切酶、稳定素-2、il-17rd、白蛋白、卵泡抑素样蛋白1、mmp-10、fkbp51、lrrc4、pref-1、半乳凝素-1、肌钙蛋白c、unc5h3、flrt2、cd314、臂板蛋白6b、纺锤蛋白-4、cd27配体、il-20rβ、臂板蛋白6a、tsk、细胞角蛋白-8、chst3、mcl-1、dppiv、srec-ii、诺里蛋白、jam-c、bcl-10、wnt-4、lsectin、kell、tnf ri、ptp1b、htpapp-a、ido、pdgf-cc、甘丙肽、激活素a、tlr2、scca2、fabp1、enos、shp-1、icos、c1qtnf9、mmp-1、tc-ptp、il-24、gp130、c-myc、lilrb4、bmp-2、、mia、cd34、cd63、cd9、cd81、ifnab r2、磷脂酰肌醇聚糖2、msp r、dscam、蛋白裂解酶、kir2dl3、cd30、唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-10、clec-1、tpp1、泛素+1、angptl4、tweak r、巢蛋白-1、cd2、激肽释放酶1、tslp r、lamp1、troy、vcam-1、唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-11、s100a1、par1、甲状腺过氧化物酶、氨肽酶p2、il-1ri、adam9、osm rβ、血小板反应蛋白-2、smpd1、b2m、mfrp、lrp-6、、st3gal1、ncam-1(cd56)、颗粒酶b、脂联素、il-22bp、tpst2、pd-ecgf、lh、ledgf、cyr61、ulbp-3、ifnb、thsd1、fgf-23、lama4、降脂蛋白、aif、sorcs2、sult2a1、cd39l2、短效胰岛素、hif-1α、ox40配体、pax3、uch-l3、cmasp3、胰岛蛋白、结蛋白、sox9、st6gal1、mep1b、cd99-l2、丛状蛋白a4、轴突导向因子4d、robo2、pdx-1、增殖诱导配体、神经秩蛋白、含kringle跨膜蛋白-2、emmprin、激活素rib、神经连接蛋白2、上皮调节蛋白、ca5a、mmp-12、galnt2、癌胚抗原相关细胞粘附分子-5、vegf r1、dspg3、sorcs1、母系蛋白-2、sfrp-3、p53、ephb3、nck1、臂板蛋白7a、nkp80、催乳素、血清胱抑素b、去乙酰化酶1、fgf-16、fgf r5、nqo-1、臂板蛋白6d、fgf-3、gata-4、vap-a、chst2、冠毛素-2、多配体聚糖-3、jagged 1、akr1c4、嗅质蛋白-2、骨黏附蛋白聚糖、nkp44、甲状腺球蛋白、il-21r、趋化蛋白、epha1、cd48、micb、fgf-5、trance、ces2、ulbp-1、整联蛋白α-5、vamp-2、flrg、网织红细胞中期因子(ret midkine)、cd73、tracp、progrp、颗粒酶h、prx2、p27、唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-6、树突状细胞相关性c型植物血凝素-1、cd51、神经源性基因座缺口同源物蛋白-1、钙网蛋白、dr3、dctn1、cdc25b、骨激活素、ace、ca125、hao-1、psma1、fcrlb、bmp-9、crim1、lif、spink1、ephb6、rgm-b、hs3st1、ror1、cmg-2、4-1bb配体、l1cam-2、p63、组织蛋白酶v、睾丸蛋白聚糖2、磷脂酰肌醇聚糖5、cd6、唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-2、豆荚蛋白、prelp、ces1、taz、nse、teck、htra2、hif-1β、tafa1、足糖萼蛋白、rala、creld2、grap2、sp-d、bid、gfrα-2、神经源性基因座缺口同源物蛋白-3、vegf r3、dll4、tgfb2、light、xiap、st8sia1、组织蛋白酶l、6趋化因子、mis rii、激肽释放酶5、tgm3、fcar、接触蛋白2、cd83、il-1r3、salm4、gba3、robo4、oscar、vegf、igsf3、双糖链蛋白聚糖、neudesin、ilt4、upar、axl、wif-1、il-7rα、gpr56、癌胚抗原相关细胞粘附分子-3、mcemp1、fabp2、神经丛蛋白b3、mepe、激活素riia、ang-2、cochlin、早老蛋白1、nptxr、slam、comt、sphk1、rbp4、连接蛋白1、gusb、巢蛋白2、il-17f、sr-ai、tafa2、n-钙粘蛋白、il-17b、il-17rc、mip-3b、胱抑素c、胱抑素d、amsh、fceri、clec10a、hgf r、ang-1、催乳素受体、fgf-20、cd28、勿动蛋白-a、hsd17b1、il-19、肠激酶、组织蛋白酶e、tslp、tcn2、gdf-15、表皮形态发生素、grk5、pd-1、丝氨酸蛋白酶抑制剂a4、adam23、nov、半乳糖凝集素-2、轴突蛋白3β、tlr3、去乙酰化酶2、numb、il-28rα、il-33、lin28、fcrl1、klf4、nkp30、淋巴细胞趋化蛋白、血清胱抑素sn、jam-a、钙网蛋白-2、erbb4、bmp-8、il-27ra、fas、il-4ra、激肽释放酶14、母
mir-138-5p、hsa-mir-139-5p、hsa-mir-140、hsa-mir-140-3p、hsa-mir-145-5p、hsa-mir-146a、hsa-mir-146a-5p、hsa-mir-148a-3p、hsa-mir-152-3p、hsa-mir-15a-5p、hsa-mir-15b-5p、hsa-mir-16-1、hsa-mir-16-2、hsa-mir-16-5p、hsa-mir-17-5p、hsa-mir-181a-5p、hsa-mir-191-5p、hsa-mir-193a-5p、hsa-mir-193b-3p、hsa-mir-197-3p、hsa-mir-199a-3p、hsa-mir-199a-5p、hsa-mir-199b-5p、hsa-mir-19a-3p、hsa-mir-19b-3p、hsa-mir-20a-5p、hsa-mir-203a、hsa-mir-203a-3p、hsa-mir-214-3p、hsa-mir-21、hsa-mir-21-3p、hsa-mir-21-5p、hsa-mir-221、hsa-mir-221-3p、hsa-mir-222、hsa-mir-222-3p、hsa-mir-22-3p、hsa-mir-23a-3p、hsa-mir-23b-3p、hsa-mir-24-1、hsa-mir-24-2、hsa-mir-24-3p、hsa-mir-25、hsa-mir-25-3p、hsa-mir-26a-5p、hsa-mir-27a-3p、hsa-mir-27b、hsa-mir-27b-3p、hsa-mir-29a-3p、hsa-mir-29c-3p、hsa-mir-30a-5p、hsa-mir-30a-5p、hsa-mir-30b-5p、hsa-mir-30c-5p、hsa-mir-30d、hsa-mir-30d-5p、hsa-mir-30e、hsa-mir-30e-5p、hsa-mir-31-3p、hsa-mir-31-5p、hsa-mir-320a、hsa-mir-342-3p、hsa-mir-345-5p、hsa-mir-34a-5p、hsa-mir-361-5p、hsa-mir-376a-3p、hsa-mir-376c-3p、hsa-mir-423-3p、hsa-mir-423-5p、hsa-mir-424-5p、hsa-mir-484、hsa-mir-486-1、hsa-mir-486-2、hsa-mir-486-5p、hsa-mir-570-3p、hsa-mir-574-3p、hsa-mir-663a、hsa-mir-874-3p、hsa-mir-92a-1、hsa-mir-92a-2、hsa-mir-92a-3p、hsa-mir-92b-3p、hsa-mir-93、hsa-mir-93-5p、hsa-mir-940、hsa-mir-99a-5p、和hsa-mir-99b-5p。
[0059]
在一些实施例中，该组合物包括mirna(如hsa-mir-19a-3p、hsa-mir-19b-3p)，其可以有效抑制缓激肽受体2的翻译，这对于激活缓激肽信号传递至关重要，而该信号传递负责对冠状病毒感染的严重血管反应。
[0060]
在一些实施例中，该组合物包括微小rna，该微小rna可抑制激肽释放酶b1(如hsa-mir-24-3p)和参与缓激肽前体蛋白的蛋白水解消化以生成缓激肽肽的其他激肽释放酶蛋白的翻译。
[0061]
在一些实施例中，该组合物的生物分子包括微小rna含量，该微小rna含量可以通过使用血管紧张素转化酶2(ace 2)受体蛋白或通过阻断通过病毒结合到ace 2受体蛋白结合的过程激活的蛋白质的活性，来抑制参与使病毒融合到细胞膜的细胞蛋白的翻译。例如，可以抑制跨膜蛋白酶，即丝氨酸2(tmprss2)酶。需要tmprss2才能使sars-cov-2突起蛋白与ace 2受体相互作用并启动膜融合。示例性微小rna含量可能包含人类mirna序列hsa-let-7a-5p、hsa-let-7b-5p、hsa-let-7c-5p、hsa-let-7g-5p、hsa-let-7i-5p、hsa-mir-214-3p、和hsa-mir-27a-3p，它们在tmprss2中的mrna中都具有结合部位。
[0062]
在一些实施例中，该组合物的生物分子包括可以抑制缓激肽途径的蛋白质的微小rna。例如，微小rna序列hsa-let-7a-5p、hsa-let-7b-5p、hsa-let-7c-5p、hsa-let-7g-5p、hsa-let-7i-5p、hsa-let-7i、hsa-mir-106a-5p、hsa-mir-106b-5p、hsa-mir-15a-5p、hsa-mir-15b-5p、hsa-mir-16-5p、hsa-mir-17-5p、hsa-mir-20a-5p、hsa-mir-23a-3p、hsa-mir-23b-3p、hsa-mir-24-1、hsa-mir-24-2、hsa-mir-25-3p、hsa-mir-92a-3p、hsa-mir-92b-3p、和hsa-mir-93-5p可结合并阻止透明质酸合成酶2的翻译，从而阻止肺中透明质酸复合物的形成。透明质酸复合物阻碍肺泡内的氧交换。
[0063]
在一些实施例中，该组合物的生物分子包括可抑制细胞因子风暴的微小rna含量、蛋白质含量或其组合。该组合物可通过以下方式抑制细胞因子风暴：(i)通过结合那些蛋白
质的mrna序列来抑制细胞因子蛋白的翻译，(ii)空间阻碍配体/受体的相互作用，(iii)酶促改变配体或受体来抑制它们的促炎作用，或(iv)激活抑制促炎细胞因子的抑制蛋白、脂质或rna序列，如但不限于il-1β、il-6、tnf-α、gm-csf、m-csf。例如，人类mirna序列hsa-let-7a-5p、hsa-let-7b-5p、hsa-let-7c-5p、hsa-let-7g-5p、hsa-let-7i-5p、和hsa-mir-547-3p能够结合il-6mrna，而hsa-mir-130a-3p和hsa-mir-181a-5p可以抑制tnf-α的翻译。
[0064]
应当理解并在本文中设想的是，msc分泌组包括外泌体和生长因子。生长因子和外泌体可以是异体或自体的。生长因子和外泌体可以来源于人体的任何细胞，如外胚层细胞、内胚层细胞或中胚层细胞。例如，msc分泌组可包括间充质干细胞(msc)衍生生长因子、msc衍生外泌体、或msc衍生生长因子和外泌体两者。在一些实施例中，该方法进一步包括在外泌体和生长因子中添加至少一种添加剂。具体地，在适当的伤口愈合条件下，msc可以产生可为炎症性肺病提供的适当的剂，如外泌体和生长因子。在一方面，本文公开了组合物，其中该msc分泌组组合物进一步包括前列腺素e2(pge2)、转化生长因子β1(tgf-β1)、肝细胞生长因子(hgf)、基质细胞衍生因子-1(sdf-1)、一氧化氮、吲哚胺2,3-双加氧酶、白介素-4(il-4)、il-6、白介素-10(il-10)、il-1受体拮抗剂和可溶性tnf-α受体、胰岛素样生长因子、成纤维细胞生长因子(fgf)1-23(尤其是fgf1和fgf2)、骨形态生成蛋白(bmp)1-15、表皮生长因子(egf)、转化生长因子-α(tgf-α)巨噬细胞刺激蛋白(msp)、血小板衍生生长因子(plgf)、血管内皮生长因子(vegf)、巨噬细胞集落刺激因子(m-csf)、胰岛素、粒细胞集落刺激因子(g-csf)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(gm-csf)、雌激素、和/或甲状腺激素。
[0065]
如上所述，该组合物包括蛋白质和微小rna，其中一些蛋白质和微小rna可嵌入脂膜或被脂膜包围，以形成尺寸范围为约》20nm至约200nm大小的囊泡。本发明内的泡囊数量在悬浮时每毫升可达约100万至约1000亿个泡囊，或者在作为冻干粉配制时可达约1000万至约1万亿个泡囊。
[0066]
1.药物载剂/药物产品的递送
[0067]
如以上所描述的，组合物也可以在药学上可接受的载剂中体内施用。“药学上可接受的”意指不是生物学上或其他方面不期望的材料，即，该材料可以与核酸或载体一起施用于受试者，而不引起任何不期望的生物学效果或以有害的方式与含有它的药物组合物的任何其他组分相互作用。如本领域的技术人员所熟知的，载剂将被自然地选择来最小化活性成分的任何降解并且最小化受试者中的任何不良副作用。
[0068]
组合物可以口服、肠胃外(例如，静脉内)、通过肌内注射、通过腹膜内注射、透皮、体外、局部等施用，包含局部鼻内施用或通过吸入剂施用。如本文所使用的，“局部鼻内施用”意指组合物通过鼻孔中的一个或两个递送到鼻和鼻道中，并且可以包括通过雾化机制或液滴机制或通过核酸或载体的气雾化的递送。通过吸入剂施用组合物可以是经由喷雾或液滴机制的递送通过鼻或口，如例如，定量雾化吸入器、干粉吸入器、雾化器、蒸发装置等。递送还可以经由插管法直接到达呼吸系统的任何区域(例如，肺)。根据受试者的物种、年龄、体重和一般状况、所的过敏性病症的严重程度、所使用的具体的核酸或载体、其施用方式等，所需组合物的确切量将随受试者而变化。因此，不可能为每种组合物指定确切的量。然而，鉴于本文的教导，本领域的普通技术人员仅使用常规实验便可以确定适当的量。
[0069]
组合物的肠胃外施用(如果使用的话)通常通过注射来表征。可以以常规形式(液体溶液或悬浮液、适合于在注射前溶解或悬浮于液体中的固体形式或乳剂形式)制备注射
剂。用于肠胃外施用的最近修订的方法涉及使用缓释或持续释放系统，使得维持恒定的剂量。参见例如美国专利第3,610,795号，其通过引用并入本文。
[0070]
这些材料可以在溶液、悬浮液中(例如，并入微粒、脂质体或细胞中)。这些可以经由抗体、受体或受体配体靶向特定的细胞类型。以下参考文献是使用此技术将特异性蛋白质靶向肿瘤组织的实例(senter等人《生物共轭化学(bioconjugate chem.)》,2:447-451,(1991)；bagshawe,k.d.,《英国癌症杂志(br.j.cancer)》,60:275-281,(1989)；bagshawe等人《英国癌症杂志》,58:700-703,(1988)；senter等人《生物共轭化学》,4:3-9,(1993)；battelli等人《癌症免疫学与免疫疗法(cancer immunol.immunother.)》,35:421-425,(1992)；pietersz和mckenzie,《免疫学评论(immunolog.reviews)》,129:57-80,(1992)；以及roffler等人,《生物化学药理学(biochem.pharmacol.)》,42:2062-2065,(1991))。媒剂如“隐形(stealth)”和其他抗体缀合的脂质体(包含脂质介导的靶向结肠癌的药物)、受体介导的通过细胞特异性配体对dna的靶向、针对淋巴细胞指导的肿瘤靶向以及在体内对鼠神经胶质瘤细胞的高度特异性性逆转录病毒靶向。以下参考文献是使用此技术将特异性蛋白质靶向肿瘤组织的实例(hughes等人,《癌症研究(cancer research)》,49:6214-6220,(1989)；以及litzinger和huang,《生物化学与生物物理学报(biochimica et biophysica acta)》,1104:179-187,(1992))。通常，受体涉及组成型或配体诱导的内吞作用的路径。这些受体聚集在网格蛋白涂覆的凹坑中，经由网格蛋白涂覆的囊泡进入细胞，穿过其中对受体进行分类的酸化的内体，并且然后循环到细胞表面，变成在细胞内储存，或在溶酶体中降解。内化路径具有多种功能，如营养吸收、活化蛋白的去除、大分子的清除、病毒和毒素的机会性进入、配体的解离和降解以及受体水平调控。根据细胞类型、受体浓度、配体类型、配体价和配体浓度，许多受体遵循超过一种细胞内路径。已经综述了受体介导的内吞作用的分子和细胞机制(brown和greene,《dna和细胞生物学(dna and cell biology)》10:6,399-409(1991))。
[0071]
a)药学上可接受的载剂
[0072]
包含抗体的组合物可以与药学上可接受的载剂组合在上使用。
[0073]
以下中描述了合适的载剂和其调配物：《雷明顿：药学科学与实践(remington:the science and practice of pharmacy)》(第19版)a.r.gennaro编辑，宾夕法尼亚州伊斯顿市的麦克出版公司(mack publishing company,easton,pa)1995。通常，在调配物中使用适量的药学上可接受的盐，以使调配物等渗。药学上可接受的载剂的实例包含但不限于盐水、林格氏溶液和右旋糖溶液。溶液的ph优选地为约5至约8，并且更优选地为约7至约7.5。另外的载剂包含持续释放制剂，如含有抗体的固体疏水聚合物的半透性基质，该基质为成型制品的形式，例如膜、脂质体或微粒。对本领域技术人员来说显而易见的是，某些载剂可能是更优选的，这取决于例如施用途径和所施用的组合物的浓度。
[0074]
药物载剂是本领域技术人员已知的。这些最典型的将是用于向人类施用药物的标准载剂，包含如无菌水、盐水和处于生理ph的缓冲溶液等溶液。所述组合物可以肌内地或皮下地施用。其他化合物将根据本领域的技术人员使用的标准程序施用。
[0075]
除了所选分子之外，药物组合物还可以包含载剂、增稠剂、稀释剂、缓冲液、防腐剂、表面活性剂等。药物组合物还可以包含一种或多种活性成分，如抗微生物剂、抗炎剂、麻醉剂等。
[0076]
取决于需要局部还是全身以及待的区域，可以以许多方式施用药物组合物。施用可以是局部(包含眼部、阴道、直肠、鼻内)、口服、吸入或肠胃外施用，例如通过静脉滴注、皮下、腹膜内或肌内注射。所公开的抗体可以静脉内、腹膜内、肌肉内、皮下、腔内或透皮施用。
[0077]
肠胃外施用的制剂包含无菌的水性或非水性溶液、悬浮液和乳液。非水性溶剂的实例是丙二醇、聚乙二醇、植物油(如橄榄油)以及可注射有机酯(如油酸乙酯)。水性载剂包含水、醇性/水溶液、乳液或悬浮液，包含盐水和缓冲介质。肠胃外媒介物包含氯化钠溶液、林格氏右旋糖、右旋糖和氯化钠、乳酸林格氏或固定油。静脉内媒介物包含液体和营养补充剂、电解质补充剂(如基于林格氏右旋糖的那些)等。也可以存在防腐剂和其他添加剂，如例如抗微生物剂、抗氧化剂、螯合剂和惰性气体等。
[0078]
用于局部施用的调配物可以包含油膏剂、洗剂、乳膏剂、凝胶剂、滴剂、栓剂、喷雾剂、液体剂和散剂。常规的药物载剂、水性、粉末或油性基质、增稠剂等可能是必要的或期望的。
[0079]
用于口服施用的组合物包含粉末或颗粒剂、在水或非水性介质中的悬浮液或溶液、胶囊、囊剂或片剂。增稠剂、调味剂、稀释剂、乳化剂、分散助剂或粘合剂可能是期望的。
[0080]
一些组合物可能呈药学上可接受的酸加成盐或碱加成盐形式施用，所述酸加成盐或碱加成盐是通过与以下各酸反应形成：无机酸，如盐酸、氢溴酸、过氯酸、硝酸、硫氰酸、硫酸和磷酸；和有机酸，如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、顺丁烯二酸和反丁烯二酸；或通过与以下各碱反应形成：无机碱，如氢氧化钠、氢氧化铵、氢氧化钾；和有机碱，如单烷基胺、二烷基胺、三烷基胺和芳基胺以及被取代的乙醇胺。
[0081]
b)性用途
[0082]
用于施用组合物的有效剂量和方案可以凭经验测定，并且进行此类测定在本领域的技术范围内。施用组合物的剂量范围是足够大到以产生其中病症症状受影响的期望效果的剂量范围。剂量不应大到引起不良副作用，如不想要的交叉反应、过敏反应等。通常，剂量将随着患者的年龄、病状、性别和疾病程度、施用途径或者其他药物是否包含在方案中而变化，并且可以由本领域的技术人员确定。在任何禁忌症的情况下，可以由个体医师调整剂量。剂量可以变化，并且可以每天一次或多次剂量施用来施用，持续一天或数天。可以在文献中到针对给定类别的药物产品的适当剂量的指导。例如，可以在有关抗体用途的文献中到选择适当的抗体剂量的指南，例如，《单克隆抗体手册(handbook of monoclonal antibodies)》,ferrone等人编辑，新泽西州帕克里奇诺伊斯出版社(noges publications,park ridge,n.j.),(1985)第22章和第303-357页；smith等人《人诊断和疗法中的抗体(antibodies in human diagnosis and therapy)》,haber等人编辑，纽约雷文出版社(raven press,new york)(1977)第365-389页。根据上文所提及的因素，单独使用的抗体的典型日剂量范围可以在每天约1μg/kg体重到至多100mg/kg体重或更多。
[0083]
c.间充质干细胞
[0084]
如自始至终所指出的，本文公开的组合物可以利用间充质干细胞(msc)衍生的msc分泌组和/或生长因子。虽然异体细胞msc iv输注已被广泛采用，但关于异体细胞制剂存在许多安全和监管方面的问题。iv输注活体msc的固有问题包含细胞被困在肺部，导致细胞在24小时内死亡。此细胞死亡产生的细胞碎片被运送到肝脏和脾脏，在那里被处
理掉。目前来自骨髓浓缩物的自体只能递送几千个msc。虽然异体扩大的msc iv输注可以递送数亿个活体msc，但它们被困在肺部并死亡。将外源dna引入接受者的长期影响尚不清楚，而且引入大量外源dna是否会致癌的问题也出现了。
[0085]
现有的含在骨髓、骨髓浓缩物、滑膜衍生间充质干细胞(msc)、或脂肪衍生基质血管组分(svf)或来自脐带、胎盘或羊膜的各种产后产物、扩增的msc培养物的自体和异体msc目前被用于伤口、骨科病症和脊柱病症。为避免被免疫系统识别，未分化的msc表达低至中等水平的人类白细胞抗原(hla)i类和低水平的hla ii类。这种特性使供体msc具有所谓的“隐身”能力，使其在异体中不被宿主免疫系统发现。然而，i类抗原存在于可检测水平上，并且ii类抗原的表达可被inf-γ诱导。在动物研究和人体临床试验中已经报道了数个异体msc排斥和慢性免疫应答的病例。这整个问题可以通过仅使用间充质干细胞分泌组来避免，包含但不限于生长因子、蛋白质、肽、糖胺聚糖、蛋白聚糖、趋化因子、细胞因子、提取物、细胞外囊泡、和/或从条件生长培养基中收集的外泌体。非细胞msc产物与细胞msc产物的对比
[0086]
实际上，在本公开之前，还没有开发出可用于这些应用的活性msc生长因子产物。因此，一方面，本文公开了msc分泌组组合物(包含但不限于包括msc生长因子、msc外泌体、msc提取物和/或细胞外囊泡的组合物)以用于、抑制、减少、降低、改善和/或预防微生物感染、所述感染的症状、或继发性病状(如例如，微生物引发的细胞因子风暴、微生物感染引发的缓激肽风暴、和/或微生物感染引发的急性呼吸窘迫综合征)，所述组合物包括(i)生长因子粉状添加剂，其包括间充质干细胞(msc)衍生制剂(包含但不限于msc分泌组组合物)和(ii)药学上可接受的载剂。
[0087]
如上所述，msc是多潜能细胞，其具有分化成多种细胞类型(包含肌细胞、软骨细胞、脂肪细胞和成骨细胞)的能力。通常，这些细胞可以在胎盘、脐带血、脂肪组织、骨髓或羊水(包含血管周围组织)中到。如本文所使用的，“msc”是指非终末分化细胞，包含但不限于多潜能干细胞、多潜能基质细胞、基质血管细胞、周细胞、血管周细胞、基质细胞、多能细胞、多潜能细胞、脂肪衍生成纤维细胞样细胞、脂肪衍生基质血管成分、脂肪衍生msc、骨髓衍生成纤维细胞样细胞、骨髓衍生基质血管成分、骨髓衍生msc、组织衍生成纤维细胞样细胞、成体干细胞、成体基质细胞、角化细胞、和/或黑素细胞。
[0088]
早就认识到，msc除了具有分化潜能外，还具有免疫调节能力，从而表达多种不同的细胞因子和生长因子。如本文所使用的，“msc制剂”或“msc分泌组组合物”是指这样一种组合物，其包括msc生长因子、msc外泌体、细胞外囊泡、细胞外囊泡分离产物(evip)、或从人类msc、成纤维细胞样细胞和非人类动物msc(包含但不限于来自马、牛、猪、绵羊、非人灵长类动物、狗、猫、兔、大鼠和小鼠的msc)获取的msc和/或msc裂解物的非细胞提取物。在实施例中，msc可来源于将应用该组合物的患者(自体的)或来源于另一个体(异体的)。可以对msc进行培养扩增以收集条件培养基或以增加用于裂解物的细胞数量或在并入本公开的组合物之前，新近使用。
[0089]
msc分泌组组合物(包含但不限于包括msc生长因子、msc外泌体、msc提取物和/或细胞外囊泡的组合物)可包括约0.00001重量％至约20重量％(如约0.01重量％至约10重量％)的间充质干细胞(msc)提取物、msc外泌体或msc生长因子制剂。msc制剂可包括msc条件培养基或来自细胞培养扩增的msc的msc裂解物。在一些实施例中，该组合物可进一步包
括约0.01重量％至约10重量％的以msc或msc谱系细胞生长为条件的无细胞培养基，其中细胞在正常高氧培养条件下培养或在人工伤口愈合条件下培养。
[0090]
如本文所公开的，可以选择性刺激用于生产公开的msc添加剂(包含生长因子分泌组组合物冷冻或粉末状添加剂)的msc，以产生msc生长因子、分泌组、细胞因子、趋化因子、间充质干细胞蛋白、肽、糖胺聚糖、细胞外基质(ecm)、蛋白聚糖、分泌组、和外泌体。生长因子和外泌体可以来源于人体中的任何细胞，如外胚层细胞、内胚层细胞、或中胚层细胞。如本文所使用的，msc生长因子包含但不限于前列腺素e2(pge2)、转化生长因子β1(tgf-β1)、肝细胞生长因子(hgf)、基质细胞衍生因子-1(sdf-1)、一氧化氮、吲哚胺2,3-双加氧酶、白介素-4(il-4)、il-6、白介素-10(il-10)、il-1受体拮抗剂和可溶性tnf-α受体、胰岛素样生长因子、成纤维细胞生长因子(fgf)1-23(尤其是fgf1和fgf2)、骨形态生成蛋白(bmp)1-15、表皮生长因子(egf)、转化生长因子-α(tgf-α)巨噬细胞刺激蛋白(msp)、血小板衍生生长因子(plgf)、血管内皮生长因子(vegf)、巨噬细胞集落刺激因子(m-csf)、胰岛素、粒细胞集落刺激因子(g-csf)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(gm-csf)、以及激素，其包含雌激素和甲状腺激素。
[0091]
如上所述，msc的培养可以在正常的高氧培养条件下进行，或在伤口愈合的低氧条件下进行。高氧条件可包括大约21％的氧气，在该条件下，存在或不存在血清补充剂，而低氧条件可包括约1％至约5％的氧气，在该条件下，存在炎性细胞因子、血管生成因子、减少的血清、减少的葡萄糖或这些元素的各种组合。减少的营养和代谢物复合环境可能会触发培养的细胞以引起伤口愈合，并触发抗炎ecm蛋白以及生长因子以引导组织愈合。直接组织愈合可能是以新ecm蛋白(如胶原蛋白和糖胺聚糖(gag))以及生长因子和细胞因子的形式。一方面，msc制剂(如例如，msc分泌组组合物)包括msc生长因子、msc外泌体、和/或从标准高氧培养条件(例如21％的氧气)下培养的msc或人工伤口愈合条件(如例如，在炎性细胞因子、血管生成因子和减少的葡萄糖存在的情况下，0.1％至约5％的氧气)下培养的msc中获取的msc或msc裂解物的细胞提取物。
[0092]
如本文所公开的，人工伤口愈合条件模拟了实际伤口的生长条件，在这种情况下，存在营养物供给的减少和通常由局部血液循环的破坏造成的废物清除的减少。这为细胞创造了恶劣的环境，直到新血管产生，并且血液循环恢复。因此，用于培养msc的人工伤口愈合条件可以包含以下生长条件中的一种或多种：降低葡萄糖可用性、降低氧张力、减小ph和升高温度。
[0093]
在一方面，相对于正常对照，可降低葡萄糖可用性。改良以减少葡萄糖但不损伤细胞的培养基可减少0％至50％的葡萄糖，更优选地，减少5％至40％的葡萄糖。例如，msc人工伤口愈合培养条件可包括减少约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50％的葡萄糖，如减少约5％至约15％、约10％至约20％、约15％至约25％、约20％至约30％、或约25％至约35％的葡萄糖。
[0094]
一方面，氧张力可以降低到低氧条件下的氧水平。正常大气中的氧气大约为21％，并且任何降低都被认为是低氧的。因此，一方面，msc可在0.0％至20.9％氧气、约0.1％至约0.5％氧气、约0.1至约2.0％氧气、约0.1％至约5.0％氧气、约0.5％至5.0％氧气、约1.0％至约10％氧气、约5.0％至约10.0％氧气下培养；并且在人工伤口愈合条件下，在约10.0％
至约15.0％氧气下培养。优选地，在msc伤口愈合培养条件下，氧张力为约0.5％至20.5％氧气，如例如，0、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.7、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10、10.5、11、11.5、12、12.5、13、13.5、14、14.5、15、15.5、16、16.5、17、17.5、18、18.5、19、19.5、20或20.5％氧气。
[0095]
ph也可以在人工伤口愈合条件下减小。生理ph保持非常紧密，并且通常非常接近中性ph＝7.2
±
0.2(7.0-7.4)。然而，在伤口中，酸性环境的ph可为6.2
±
0.2(即ph为6.0至约6.4)。因此，在人工伤口愈合培养条件下，ph可为约6.0至约7.4，例如，约6.0至约6.4、约6.2至约6.4、约6.2至约6.6、约6.4至约6.6、约6.4至约6.8、或约6.6至约7.0，如6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3或7.4。
[0096]
在人工伤口愈合培养条件下，可以升高培养环境的温度，以模拟伤口部位的温度升高。生理稳态温度维持在37℃(98.6℉)。轻微的增加或减少会引起细胞代谢的显著变化。将37℃以上的温度升高到约40℃(104℉)的任何温度都可以创造“发烧的”环境。因此，在上方面，msc的人工伤口愈合培养条件可包括:约35℃至约39℃、约35℃至约36℃、约36℃至约37℃、约37℃至约38℃、约38℃至约39℃、约39℃至约40℃。一方面，人工伤口愈合培养的温度可以是35.0、35.1、35.2、35.3、36.4、35.5、35.6、35.7、35.8、35.9、36.0、36.1、36.2、36.3、36.4、36.5、36.6、36.7、36.8、36.9、37.0、。37.1、37.2、37.3、37.4、37.5、37.6、37.7、37.8、37.9、38.0、38.1、38.2、38.3、38.4、38.5、38.6、38.7、38.8、38.9、39.0、39.1、39.2、39.3、39.4、39.5、39.6、39.7、39.8、39.9、或40.0℃。
[0097]
一方面，msc分泌组组合物(包含但不限于包括msc生长因子、msc外泌体、msc提取物和/或细胞外囊泡的组合物)可以进一步包括保护涂层(例如，冷冻保护剂低聚糖和蛋白质溶液)，以减少生长因子的降解。应当理解并在本文中设想的是，可将保护涂层设计成聚合物。“聚合物”是指高相对分子量的有机化合物，天然的或合成的，其结构可以用重复的小单位(单体)来表示。聚合物的非限制性实例包含聚乙烯、橡胶、纤维素。合成聚合物通常是由单体加成或缩聚形成的。术语“共聚物”是指由两个或更多个不同的重复单元(单体残基)形成的聚合物。举例来说，并不受限制，共聚物可以是交替共聚物、无规共聚物、嵌段共聚物或接枝共聚物。还应设想的是，在某些方面，嵌段共聚物的各种嵌段本身可以包括共聚物。术语“聚合物”涵盖所有形式的聚合物，包含但不限于天然聚合物、合成聚合物、均聚物、杂聚物或共聚物、加聚物等。一方面，凝胶基质可以包括共聚物、嵌段共聚物、二嵌段共聚物、和/或三嵌段共聚物。
[0098]
一方面，保护涂层可以包括生物相容性聚合物。一方面，生物相容性聚合物可以交联。这种聚合物还可以用来将脂肪褐变剂和/或脂肪调节剂缓慢释放到组织中。如本文所使用的，生物相容性聚合物包含但不限于多糖；亲水性多肽；聚(氨基酸)，如聚-l-谷氨酸(pgs)、γ-聚谷氨酸、聚-l-天冬氨酸、聚-l-丝氨酸、或聚-l-赖氨酸；聚乙二醇和聚(环氧烷烃)，如聚乙二醇(peg)、聚丙二醇(ppg)和聚环氧乙烷(peo)；聚(氧乙基多元醇)；聚(烯醇)；聚乙烯吡咯烷酮)；聚(羟烷基甲基丙烯酰胺)；聚(甲基丙烯酸羟烷基酯)；多糖；聚羟酸；聚
乙烯醇，多羟基酸，如聚乳酸、聚乙醇酸、和聚(乳酸-共-乙醇酸)；聚羟基脂肪酸，如聚3-或聚4-；聚己内酯；聚原酸酯；聚酸酐；聚磷腈；聚(丙交酯-共-己内酯)；聚碳酸酯，如酪氨酸聚碳酸酯；聚酰胺(包含合成和天然聚酰胺)、多肽、和聚(氨基酸)；聚酰胺酯；聚酯；聚对二氧杂环己酮；聚烷基烯烃酯(poly(alkylene alkylates))；疏水性聚醚；聚氨酯；聚醚酯；聚缩醛；聚氰基丙烯酸酯；聚丙烯酸酯；聚甲基丙烯酸甲酯；聚硅氧烷；聚氧乙烯/聚氧丙烯共聚物；聚缩酮；聚磷酸盐；聚羟基戊酸；聚草酸烯烃酯；聚琥珀酸烯烃酯；聚(马来酸)、及其共聚物。生物相容性聚合物还可包含聚酰胺、聚碳酸酯、聚亚烷基(polyalkylenes)、聚亚烷基二醇、聚(环氧烷烃)、聚亚烷基对苯二酸酯、聚乙烯醇(pva)、甲基丙烯酸酯pva(m-pva)、聚乙烯醚、聚乙烯酯、聚乙烯卤化物、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙交酯、聚硅氧烷、聚氨酯及其共聚物，烷基纤维素、羟烷基纤维素、纤维素醚、纤维素酯、硝酸纤维素、丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯聚合物、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丁基甲基纤维素、醋酸纤维素、丙酸纤维素、乙酸丁酸纤维素、邻苯二甲酸乙酸纤维素、羧基乙基纤维素、三乙酸纤维素、纤维素硫酸钠盐、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸乙酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)、聚(甲基丙烯酸异丁酯)、聚(甲基丙烯酰酸己酯)、聚(甲基丙烯酸异癸酯)、聚(甲基丙烯酸月桂酯)、聚(甲基丙烯酰酸苯酯)、聚(丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸异丙酯)、聚(丙烯酸异丁酯)、聚(丙烯酸十八酯)、聚乙烯、聚丙烯、聚(乙二醇)、聚(环氧乙烷)、聚对苯二甲酸乙二酯、聚(乙烯醇)、聚(酸乙烯酯、聚氯乙烯、聚苯乙烯和聚乙烯吡咯烷酮、其衍生物、线性和支化共聚物及其嵌段共聚物、及其共混物。示例性生物降解聚合物包含聚酯、聚(原酸酯)、聚(乙烯胺)、聚(己内酯)、聚()、聚(羟基戊酸酯)、聚酸酐、聚(丙烯酸)、聚乙交酯、聚(氨基甲酸酯)、聚碳酸酯、聚磷酸酯、聚磷腈、其衍生物、线性和支化共聚物及其嵌段共聚物、及其混合物。
[0099]
在一些实施例中，保护涂层包括单糖的碳水化合物结构以及碳水化合物聚合物，如双糖或多糖，包含但不限于非还原多或双糖及其任何组合。可用于保护涂层的碳水化合物的实例包括葡萄糖、醛糖(d-阿洛糖、d-阿卓糖、d-甘露糖等)、吡喃葡萄糖、五羟基己醛、α-d-吡喃葡糖基-d-葡萄糖、α-d-吡喃葡糖基-二水化合物、β-d-吡葡亚硝脲单元的聚合物、β-d-呋喃果糖基α-d-吡喃葡萄苷(无水/二水合物)、β-d-吡喃半乳糖基-d-葡萄糖、α-d-吡喃葡糖基-α-d-吡喃葡萄苷(无水/二水合物)、半乳糖、戊糖(核糖、木糖、来苏糖)、右旋糖、十二碳单十水合物(dodecacarbon monodecahydrate)、左旋糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、海藻糖、琼脂糖、d-半乳糖基-β-(1-4)-酐-l-半乳糖基、纤维素、β-d-吡葡亚硝脲单元的聚合物、和淀粉，以及多羟基醇、多元醇、糖醇、赤藓糖醇、多羟糖醇、丙三醇、木糖醇、和山梨醇。
[0100]
在一些实施例中，保护涂层含有生物相容和/或生物降解聚酯或聚酸酐，如聚(乳酸)、聚(乙醇酸)、和聚(乳酸-共-乙醇酸)。颗粒可含有以下聚酯中的一种或多种：均聚物，其包含乙醇酸单元(本文简称“pga”)和乳酸单元，如聚l-乳酸、聚d-乳酸、聚d,l-乳酸、聚l-丙交酯、聚d-丙交酯、和聚-d,l-丙交酯5(本文统称为“pla”)，和己内酯单体，如聚(e-己内酯)、(本文统称为“pcl”)；和共聚物，其包含乳酸和乙醇酸单元，如各种形式的聚(乳酸-共-乙醇酸)和聚(丙交酯-共-乙交酯)，其特征在于乳酸：乙醇酸(本文统称为“plga”)的比值；和聚丙烯酸酯，及其衍生物。示例性聚合物还包含聚乙二醇(peg)和前述聚酯的共聚物，如各种形式的plga-peg或pla-peg共聚物，本文统称为“peg化聚合物”。在某些实施例中，peg区域可与聚合物共价相关，以通过可裂解的连接体产生“peg化聚合物”。一方面，聚合物包
括至少60、65、70、75、80、85、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、或99％的缩醛侧基。
[0101]
本文公开的三嵌段聚合物包括核心聚合物，如例如聚乙二醇(peg)、聚醋酸乙烯酯、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)、聚氧化乙烯(peo)、聚(乙烯基吡咯烷酮-共-醋酸乙烯酯)、聚甲基丙烯酸酯、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯蓖麻油、聚己内酰胺、聚乳酸、聚乙醇酸、聚(乳酸-乙醇酸)、聚(乳酸-共-乙醇酸)(plga)、纤维素衍生物，如羟甲基纤维素、羟丙基纤维素等。
[0102]
可用于本文公开的保护涂层的二嵌段共聚物的实例包括聚合物，如例如，聚乙二醇(peg)、聚醋酸乙烯酯、聚乙烯醇(pva)、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)、聚氧化乙烯(peo)、聚(乙烯基吡咯烷酮-共-醋酸乙烯酯)、聚甲基丙烯酸酯、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯蓖麻油、聚己内酰胺、聚乳酸、聚乙醇酸、聚(乳酸-乙醇酸)、聚(乳酸-共-乙醇酸)(plga)。
[0103]
一方面，保护涂层含有(即，被封装的，封装组合物可进一步包括卵磷脂或水解卵磷脂作为载剂或作为封装材料。如本文所使用的，卵磷脂和/或水解卵磷脂涂层包含了包括磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、和磷脂酸的涂层。卵磷脂的来源可以是植物或动物来源。
[0104]
一方面，用于形成通过将msc添加剂放置于封装溶液中形成的保护涂层的任何聚合物、单糖、双糖或多糖可以在适当的浓度下以形成保护性涂层。例如，聚合物、单糖、双糖或多糖可以是0.01mm至10.0m浓度之间的任何浓度，例如约0.01m至约0.1m、约0.1mm至约1.0m、约1.0m至约10.0m。示例性浓度包括0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.4、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、225、250、275、300、325、350、375、400、450、500、600、700、800、900mm、1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2、3、4、5、6、7、8、9、10m。
[0105]
一方面，本文公开的msc分泌组组合物(包含但不限于包括msc生长因子、msc外泌体、msc提取物和/或细胞外囊泡的组合物)可包括通常在制药领域发现的任何已知成分，如抗自由基剂；杀菌剂；螯合剂；防腐剂；碱化或酸化剂；香料；表面活性剂；填充剂；天然产物或天然产物的提取物，如芦荟或绿茶提取物；维生素；或料。可与粉末结合的其他成分可包含抗氧化剂，这可以从多种抗氧化剂中选择。合适的抗氧化剂包含维生素，如维生素c(l-抗坏血酸、抗坏血酸-2磷酸酯镁盐、抗坏血酸棕榈酸酯、四己基癸醇抗坏血酸酯)、维生素e(三烯生育酚)、维生素a(视黄醇、视黄醛、视黄酸、前维生素a类胡萝卜素，如β-胡萝卜素)、n-乙酰氨基葡萄糖、或氨基葡萄糖的其他衍生物。其他成分可包含至少一种必需脂肪酸，如ω-3、ω-6和ω-9多不饱和脂肪酸，如亚油酸(la)、γ-亚油酸(gla)、α-亚油酸(ala)、二同-y-亚麻酸(dgla)、花生四烯酸(ara)等。脂肪酸可来源于各种来源，包含月见草油、黑加仑子油、琉璃苣油、或gla改性红花籽。其他成分可包含富含血小板的纤维蛋白基质、支持ecm生产和透明质酸生产的至少一种成分(如n-乙酰葡糖胺或葡糖胺的其他衍生物)、超低分子量(ulmw)透明质酸、硫酸软骨素、或硫酸角蛋白。
[0106]
生产msc分泌组组合物可以包括：培养从供体中收集的msc以在选自由以下培养条件组成的组的培养条件下形成培养基：正常高氧培养条件和包含氧气和营养减少的伤口愈合低氧条件；通过调节细胞生长条件，刺激培养的细胞以选择性地分泌所需的抗炎蛋白、肽、糖胺聚糖、蛋白聚糖外泌体和分泌组；收集聚集混合物、将聚集混合物与封装溶液结合、
并冷冻聚集混合物，其中聚集混合物包括外泌体、肽、蛋白质、细胞因子、生长因子、细胞外基质(ecm)、蛋白聚糖、糖胺聚糖、和选自人类msc、动物msc、多潜能基质细胞、成纤维细胞(fibroblast)和成纤维细胞(fibroblast cell)的趋化因子；将聚集混合物与封装溶液(如低聚糖，如海藻糖溶液或蛋白质溶液)结合，并将混合物冷冻；以及对冷冻的混合物进行冻干或冷冻干燥，形成干粉。替代地，msc可被裂解以收集培养过程中的所有msc，从而形成提取的裂解物；将提取的裂解物浓缩，并将提取的裂解物与封装溶液(如低聚糖，如海藻糖溶液或蛋白质溶液)结合，并将混合物冷冻；以及对冷冻的混合物进行冻干或冷冻干燥，形成干粉。该粉含有高度浓缩的镇痛msc分泌组和外泌体以及抗炎特异性的细胞外基质成分。
[0107]
该方法还可以包含过滤-灭菌、浓缩、冷冻或冷冻干燥msc条件培养基。另外，msc培养基可以在冷冻前与冷冻保护剂结合。
[0108]
有各种方法用于裂解msc。裂解可通过添加低渗溶液或重复冻融过程来破坏细胞膜来实现。此外，细胞可在附着于培养表面或悬浮液中被裂解。细胞也可以被酶促释放和/或通过机械均质裂解。
[0109]
刺激msc以选择性地分泌所需的抗炎蛋白、肽、糖胺聚糖、蛋白聚糖、外泌体和分泌组可以通过调节细胞生长条件来实现，如细胞融合、培养基补充、营养补充、氧水平、在这些条件下的培养时间、细胞传代数或其组合等。
[0110]
d.微生物感染和/或其症状的方法
[0111]
一方面，应当理解并在本文中设想的是，所公开的包括有效量的msc分泌组(如例如，包含但不限于包括msc生长因子、msc外泌体、msc提取物和/或细胞外囊泡的组合物)和一种或多种生物分子(如例如，肽、多肽、蛋白质、sirna、shrna和/或微小rna(mirna))，其选择性地结合到一种或多种微生物免疫原，或抑制微生物寄生宿主的能力，或抑制、减少、降低、改善和/或预防微生物感染引起的一种或多种继发性病状(如例如包括肽、多肽、蛋白质、sirna、shrna、微小rna(mirna)，其同时且协同地作用以直接影响病毒感染和/或复制，和/或响应于微生物感染，同时且协同地作用以调节下游炎症和血管细胞相关的病症)。因此，本文公开了、减少、抑制、降低、改善和/或预防受试者的微生物感染(如例如，病毒、细菌、真菌或寄生虫感染)或其症状(包含但不限于微生物诱导的细胞因子风暴、微生物引发的缓激肽风暴、和/或急性呼吸窘迫综合征)的方法，包括对受试者施用本文公开的任何组合物。例如，本文公开了、减少、抑制、降低、改善和/或预防受试者的微生物感染(如例如，病毒、细菌、真菌或寄生虫感染)或其症状(包含但不限于微生物诱导的细胞因子风暴、微生物引发的缓激肽风暴、和/或急性呼吸窘迫综合征)的方法，包括对受试者施用组合物，该组合物包括有效量的msc分泌组(如例如，包含但不限于包括msc生长因子、msc外泌体、msc提取物和/或细胞外囊泡的组合物)和一种或多种生物分子(如例如，肽、多肽、蛋白质、sirna、shrna和/或微小rna(mirna))，其选择性地结合到一种或多种微生物免疫原，或抑制微生物寄生宿主的能力，或抑制、减少、降低、改善和/或预防微生物感染引起的一种或多种继发性病状(如例如包括肽、多肽、蛋白质、sirna、shrna、微小rna(mirna))。
[0112]
如上所述，在公开的方法中使用的组合物可以包括附着于培养塑料并可在培养中分化成多个成熟细胞命运(包含但不限于脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞命运)和/或分泌细胞外囊泡的骨髓衍生间充质细胞，所述分泌细胞外囊泡含有核心蛋白组合物，其包含选
自由以下组成的组的核心组合物蛋白的任何组合：铁蛋白、nup85、lamp2、gpr115、丝氨酸蛋白酶抑制剂f1、opn、pai-1、dapp1、组织蛋白酶b、臂板蛋白6c、pdgf rα、分拣蛋白、丝氨酸蛋白酶抑制蛋白b6、dkk-3、血栓调节蛋白、pf4、mif、骨膜蛋白、弗林蛋白酶、timp-1、核心蛋白聚醣、pck1、cd99、cd63、cd9、cd81、运铁蛋白、dcr3、内腔蛋白、timp-2、slitrk5、fap、神经鞘胚素、dppii、ciap-1、正五聚蛋白3、内脏脂肪素、中性肽链内切酶、白蛋白、半乳凝素-1、unc5h3、il-20rβ、srec-ii、jam-c、tnf ri、htpapp-a、enos、msp r、tpp1、lamp1、b2m、ncam-1、hif-1α、st6gal1、cd99-l2、神经丛蛋白a4、emmprin、p53、臂板蛋白7a、nkp80、血清胱抑素b、骨黏附蛋白聚糖、中期因子、钙网蛋白、骨激活素、豆荚蛋白、taz、组织蛋白酶l、rbp4、丝氨酸蛋白酶抑制剂a4、jam-a、mcsf、limpii、opg、il-22、半乳凝素-3、mog、胰蛋白酶3、sirpα、和多配体蛋白聚糖-4；和选自由以下组成的组的至少一种蛋白质：铁蛋白、igfbp-4il-1r6 gstm1、nup85、lamp2、穿膜肽酶a、il-1f10、big-h3、gpr115、tgfb1、肝配蛋白-a4、cd109、丝氨酸蛋白酶抑制剂f1、igfbp-6、hs3st4、氨基肽酶lrap、opn、pai-1、dapp1、gdf-9、组织蛋白酶b、igfbp-2、臂板蛋白6c、igf-2、pdgf rα、分拣蛋白、丝氨酸蛋白酶抑制蛋白b6、dkk-3、cntf、tsp-1、gm-csf ra、血栓调节蛋白、endoglycan、igfbp-3、rgm-c、pf4、mif、tgm4、骨膜蛋白、弗林蛋白酶、timp-1、papp-a、核心蛋白聚醣、、pck1、芳基硫酯酶a、cd99、ca2、prdx4、运铁蛋白、dcr3、gp73、lair2、ulbp-4、内腔蛋白、timp-2、tfpi、sox2、slitrk5、fap、脊骨蛋白、enpp-2、cd97、ctack、整联蛋白α-1、extl3、il-18bpa、pd-l2、psma、il-20ra、乙二醛酶ii、胰蛋白酶1、igf-2r、adamtsl-1、红细胞生成素、神经丛蛋白d1、dnmt3a、bcl-2、cl-p1、肝配蛋白-b3、fabp6、chi3l1、fcrl5、tff3、神经鞘胚素、dppii、ciap-1、pdgf rb、正五聚蛋白3、血管紧张肽原、卵泡抑素、cf vii、persephin、trail r1、thap11、cd200、clec-2、amigo、igfbp-5、pon1、sox7、galnt10、内脏脂肪素、颗粒蛋白前体、pcsk2、gkn1、il-18、中性肽链内切酶、稳定素-2、il-17rd、白蛋白、卵泡抑素样蛋白1、mmp-10、fkbp51、lrrc4、pref-1、半乳凝素-1、肌钙蛋白c、unc5h3、flrt2、cd314、臂板蛋白6b、纺锤蛋白-4、cd27配体、il-20rβ、臂板蛋白6a、tsk、细胞角蛋白-8、chst3、mcl-1、dppiv、srec-ii、诺里蛋白、jam-c、bcl-10、wnt-4、lsectin、kell、tnf ri、ptp1b、htpapp-a、ido、pdgf-cc、甘丙肽、激活素a、tlr2、scca2、fabp1、enos、shp-1、icos、c1qtnf9、mmp-1、tc-ptp、il-24、gp130、c-myc、lilrb4、bmp-2、、mia、cd34、cd63、cd9、cd81、ifnab r2、磷脂酰肌醇聚糖2、msp r、dscam、蛋白裂解酶、kir2dl3、cd30、唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-10、clec-1、tpp1、泛素+1、angptl4、tweak r、巢蛋白-1、cd2、激肽释放酶1、tslp r、lamp1、troy、vcam-1、唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-11、s100a1、par1、甲状腺过氧化物酶、氨肽酶p2、il-1ri、adam9、osm rβ、血小板反应蛋白-2、smpd1、b2m、mfrp、lrp-6、、st3gal1、ncam-1(cd56)、颗粒酶b、脂联素、il-22bp、tpst2、pd-ecgf、lh、ledgf、cyr61、ulbp-3、ifnb、thsd1、fgf-23、lama4、降脂蛋白、aif、sorcs2、sult2a1、cd39l2、短效胰岛素、hif-1α、ox40配体、pax3、uch-l3、cmasp3、胰岛蛋白、结蛋白、sox9、st6gal1、mep1b、cd99-l2、丛状蛋白a4、轴突导向因子4d、robo2、pdx-1、增殖诱导配体、神经秩蛋白、含kringle跨膜蛋白-2、emmprin、激活素rib、神经连接蛋白2、上皮调节蛋白、ca5a、mmp-12、galnt2、癌胚抗原相关细胞粘附分子-5、vegf r1、dspg3、sorcs1、母系蛋白-2、sfrp-3、p53、ephb3、nck1、臂板蛋白7a、nkp80、催乳素、血清胱抑素b、去乙酰化酶1、fgf-16、fgf r5、nqo-1、臂板蛋白6d、fgf-3、gata-4、vap-a、chst2、冠毛素-2、多配体聚糖-3、jagged 1、akr1c4、嗅质蛋白-2、骨黏附蛋白聚糖、nkp44、甲状腺球
r、trail r3、胰蛋白酶3、arsb、lif rα、baff r、cd157、颗粒酶a、2b4、esam、il-1r4、cxcl14、il-31、sirpα、尿调制蛋白、ctrc、癌胚抗原相关细胞粘附分子-1、tarc、mip-3a、sdf-1b、nkp46、mcp-3、il-32α、tgfb3folr2、cd58、il-23、cd36、tnfb、shh-n、纤维胶凝蛋白-1、reg4、ilt2、mer、trem-2、flt-3l、cd5、il-6、cd229、胰岛素、突触融合蛋白6、gro、bcl-w、脂质运载蛋白-2、pdgf-aa、il-2ra、血管生成素、lyve-1、cd4、rage、cdnf、短缩素、nap-2、pu.1、edar、adamts13、犬尿氨酸酶、pth1r、ifn-γr1、crkl、b7-1、parc、背侧抑制性轴突导向蛋白、ve-钙粘蛋白、前降钙素、sox15、激肽释放酶11、bcma、树突状细胞相关性c型植物血凝素-2、epcam、hcc-4、tgfa、ip-10、blame、cilp-1、pigf、lox-1、mcp-2、抵抗素、hvem、enpp-7、多配体蛋白聚糖-4、il-2rg、mica、多巴脱羧酶、npdc-1、mcp-4、eg-vegf、糖蛋白v、臂板蛋白4g、il-12p40、总前列腺特异性抗原、il-15、map1d、c1q、tnf4、dtk、内皮糖蛋白、ena-78、reg3a、mip-1b、fgf-17、il-6r、il-8、半乳凝素8、ca4、血清胱抑素e m、fut8、b7-h3、gcp-2、cd40l、mdc、4-1bb、ho-1、sost、s100a13、激肽释放酶7、和il-13。
[0113]
在一些实施例中，在公开的方法中使用的组合物包括一种或多种生物分子，其可以选择性地结合到微生物抗原(如病毒、细菌、真菌或寄生虫抗原)，阻止其功能和/或酶促处理蛋白质，使其可被宿主免疫系统检测到，以激活病毒免疫应答以使病毒感染细胞的能力丧失。例如，生物分子可以结合到选自由以下组成的组的病毒的病毒抗原：单纯疱疹病毒-1(如例如，糖蛋白d和/或糖蛋白g)、单纯疱疹病毒-2(如例如，糖蛋白d和/或糖蛋白g)、水痘-带状疱疹病毒(如例如，糖蛋白e)、eb病毒(如例如，ebv糖蛋白)、巨细胞病毒(如例如，cmv糖蛋白)、人类疱疹病毒-6、天花病毒、水泡性口炎病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒(包含但不限于乙型肝炎病毒表面抗原)、丙型肝炎病毒(如例如，丙型肝炎e1、e2或e3蛋白)、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、鼻病毒、冠状病毒(包含但不限于来自禽冠状病毒(ibv)、猪冠状病毒hku15(porcov hku15)、猪流行性腹泻病毒(pedv)、hcov-229e、hcov-oc43、hcov-hku1、hcov-nl63、sars-cov、sars-cov-2(包含但不限于b1.351变异株、b.1.1.7变异株和p.1变异株)或mers-cov的刺突或包膜蛋白)、甲型流感病毒(如例如，血凝素(ha)蛋白，其包含ha1和ha2蛋白并包含三聚物ha)、乙型流感病毒(如例如，血凝素(ha)蛋白，其包含ha1和ha2蛋白并包含三聚物ha)、麻疹病毒(如例如，血凝素蛋白)、多瘤病毒、人乳头状瘤病毒、呼吸道合胞病毒(如例如，rsv g蛋白)、腺病毒、柯萨奇病毒、登革病毒(如例如，衣壳蛋白、包膜蛋白、和/或膜前/膜蛋白)、腮腺炎病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病毒(包含但不限于狂犬病毒糖蛋白)、劳斯氏肉瘤病毒、呼肠孤病毒、黄热病毒、寨卡病毒(如例如，衣壳蛋白、包膜蛋白、和/或膜前/膜蛋白)、埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙热病毒、东方马脑炎病毒、日本脑炎病毒、圣路易脑炎病毒、墨累溪谷热病毒、西尼罗河病毒、裂谷热病毒、a组轮状病毒(包含但不限于病毒蛋白4和病毒蛋白7)、b组轮状病毒(包含但不限于病毒蛋白4和病毒蛋白7)、c组轮状病毒(包含但不限于病毒蛋白4和病毒蛋白7)、辛德毕斯病毒、猴免疫缺陷病毒、人类t细胞白血病病毒1型、汉坦病毒、风疹病毒、猴免疫缺陷病毒、人类免疫缺陷病毒1型(如例如，糖蛋白(gp)、包膜蛋白(env)、或gag蛋白)、和人类免疫缺陷病毒2型。例如，本发明中的弗林蛋白酶蛋白的存在可能使脱落病毒颗粒突起蛋白的酶促加工成为直立免疫可检测构象，从而提高免疫应答以降解细胞外病毒颗粒。另外，例如，该组合物可以包括：铁蛋白含量，其有效地通过免疫调节细胞增加il-10的分泌，以抑制过度活跃的免疫细胞活动(统称为细胞因子风暴)；或蛋白pai-1，其可阻止纤溶酶的产生，以抑制“缓激肽风暴”。该
7g-5p、hsa-let-7i-5p、hsa-mir-214-3p、和hsa-mir-27a-3p，它们在tmprss2中的mrna中都具有结合部位。另外，其中该组合物的生物分子包括可以抑制缓激肽途径的蛋白质的微小rna。例如，微小rna序列hsa-let-7a-5p、hsa-let-7b-5p、hsa-let-7c-5p、hsa-let-7g-5p、hsa-let-7i-5p、hsa-let-7i、hsa-mir-106a-5p、hsa-mir-106b-5p、hsa-mir-15a-5p、hsa-mir-15b-5p、hsa-mir-16-5p、hsa-mir-17-5p、hsa-mir-20a-5p、hsa-mir-23a-3p、hsa-mir-23b-3p、hsa-mir-24-1、hsa-mir-24-2、hsa-mir-25-3p、hsa-mir-92a-3p、hsa-mir-92b-3p、和hsa-mir-93-5p可结合并阻止透明质酸合成酶2的翻译，从而阻止肺中透明质酸复合物的形成。透明质酸复合物阻碍肺泡内的氧交换。在本文公开的方法的一些实施例中，该组合物的生物分子包括可抑制细胞因子风暴的微小rna含量、蛋白质含量或其组合。该组合物可通过以下方式抑制细胞因子风暴：(i)通过结合那些蛋白质的mrna序列来抑制细胞因子蛋白的翻译，(ii)空间阻碍配体/受体的相互作用，(iii)酶促改变配体或受体来抑制它们的促炎作用，或(iv)激活抑制促炎细胞因子的抑制蛋白、脂质或rna序列，如但不限于il-1β、il-6、tnf-α、gm-csf、m-csf。例如，人类mirna序列hsa-let-7a-5p、hsa-let-7b-5p、hsa-let-7c-5p、hsa-let-7g-5p、hsa-let-7i-5p、和hsa-mir-547-3p能够结合il-6mrna，而hsa-mir-130a-3p和hsa-mir-181a-5p可以抑制tnf-α的翻译。
[0115]
应当理解并在本文中设想的是，在公开的方法的组合物中使用的msc分泌组包括外泌体和生长因子。生长因子和外泌体可以是异体或自体的。生长因子和外泌体可以来源于人体的任何细胞，如外胚层细胞、内胚层细胞或中胚层细胞。例如，msc分泌组可包括间充质干细胞(msc)衍生生长因子、msc衍生外泌体、或msc衍生生长因子和外泌体两者。在一些实施例中，该方法进一步包括在外泌体和生长因子中添加至少一种添加剂。具体地，在适当的伤口愈合条件下，msc可以产生可为炎症性肺病提供的适当的剂，如外泌体和生长因子。一方面，本文公开了前述任一方面的组合物，其中该msc分泌组组合物进一步包括前列腺素e2(pge2)、转化生长因子β1(tgf-β1)、肝细胞生长因子(hgf)、基质细胞衍生因子-1(sdf-1)、一氧化氮、吲哚胺2,3-双加氧酶、白介素-4(il-4)、il-6、白介素-10(il-10)、il-1受体拮抗剂和可溶性tnf-α受体、胰岛素样生长因子、成纤维细胞生长因子(fgf)1-23(尤其是fgf1和fgf2)、骨形态生成蛋白(bmp)1-15、表皮生长因子(egf)、转化生长因子-α(tgf-α)巨噬细胞刺激蛋白(msp)、血小板衍生生长因子(plgf)、血管内皮生长因子(vegf)、巨噬细胞集落刺激因子(m-csf)、胰岛素、粒细胞集落刺激因子(g-csf)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(gm-csf、雌激素、和/或甲状腺激素。
[0116]
如上所述，微生物感染可包括病毒、细菌、真菌或寄生虫感染。一方面，本文公开了、减少、抑制、降低、改善和/或预防前述任一方面所述的微生物感染或其症状的方法，其中微生物感染包括选自由以下组成的病毒组的病毒的感染：单纯疱疹病毒-1、单纯疱疹病毒-2、水痘-带状疱疹病毒、eb病毒、巨细胞病毒、人类疱疹病毒-6、天花病毒、水泡性口炎病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、鼻病毒、冠状病毒(包含但不限于禽冠状病毒(ibv)、猪冠状病毒hku15(porcov hku15)、猪流行性腹泻病毒(pedv)、hcov-229e、hcov-oc43、hcov-hku1、hcov-nl63、sars-cov、sars-cov-2或mers-cov)、甲型流感病毒、乙型流感病毒、麻疹病毒、多瘤病毒、人乳头状瘤病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、柯萨奇病毒、基孔肯亚病毒、登革病毒、腮腺炎病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病毒、劳斯氏肉瘤病毒、呼肠孤病毒、黄热病毒、埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙热病毒、东方
马脑炎病毒、日本脑炎病毒、圣路易脑炎病毒、墨累溪谷热病毒、西尼罗河病毒、裂谷热病毒、a组轮状病毒、b组轮状病毒、c组轮状病毒、辛德毕斯病毒、猴免疫缺陷病毒、人类t细胞白血病病毒1型、汉坦病毒、风疹病毒、猴免疫缺陷病毒、人类免疫缺陷病毒1型、和人类免疫缺陷病毒2型。
[0117]
本文还公开了、减少、抑制、降低、改善和/或预防任一前述方面所述的微生物感染或其症状的方法，其中微生物感染包括选自由以下组成的细菌组的细菌的感染：结核分支杆菌、牛分支杆菌、牛分支杆菌菌株bcg、bcg亚株、鸟分枝杆菌、细胞内分支杆菌、非洲分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、海鱼分枝杆菌、溃疡分枝杆菌、鸟分枝杆菌副结核亚种、嵌合体分枝杆菌、星形诺卡菌、其他诺卡菌种、嗜肺军团菌、其他军团菌种、鲍曼不动杆菌、伤寒沙门氏菌、肠道沙门氏菌、其他沙门氏菌种、鲍氏志贺菌、痢疾志贺菌、宋内志贺菌、福氏志贺菌、其他志贺菌种、鼠疫耶尔森菌、溶血巴斯德菌、多杀巴斯德菌、其他巴斯德菌种、胸膜肺炎放线杆菌、单核细胞增生李斯特菌、伊氏利斯特菌、流产布鲁氏菌、其他布鲁氏菌种、反刍动物考德里体、伯氏疏螺旋体、禽鲍特菌、百日咳鲍特菌、支气管败血鲍特菌、创口鲍特菌、欣氏鲍特菌、彼得里鲍特菌、副百日咳鲍特菌、亚洲耐药病原菌监测网鲍特菌、其他鲍特菌种、鼻疽伯克霍尔德菌、类鼻疽伯克霍尔德菌、洋葱伯克霍尔德菌、肺炎衣原体、沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体、贝纳柯克斯体、立克次体菌种、埃立克体菌种、金黄葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓链球菌、无乳链球菌、大肠埃希菌、弧菌、弯曲杆菌种、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、铜绿假单胞菌、其他假单胞菌种、流感嗜血杆菌、杜克雷嗜血杆菌、其他嗜血杆菌种、破伤风梭菌、其他梭菌种、小肠结肠炎耶尔森菌、其他耶尔森菌种、和支原体菌种。一方面，细菌不是杆菌。
[0118]
一方面，本文还公开了、减少、抑制、降低、改善和/或预防任一前述方面所述的微生物感染或其症状的方法，其中微生物感染包括选自由以下真菌组成的组的真菌的感染：白念珠菌、新型隐球菌、荚膜组织胞浆菌、烟曲霉菌、粗球孢子菌、巴西副球孢子菌、皮炎芽生菌、卡氏肺孢菌、马尔尼菲青霉菌和链格孢菌。
[0119]
本文还公开了、减少、抑制、降低、改善和/或预防任一前述方面所述的微生物感染或其症状的方法，其中微生物感染包括选自由以下寄生生物组成的组的寄生虫的寄生虫感染：刚地弓形虫、恶性疟原虫、间日疟原虫、三日疟原虫、其他疟原虫物种、痢疾变形虫、福氏耐格里变形虫、西伯鼻孢子虫、兰伯氏贾第虫、蠕形住肠蛲虫、格里氏蛲虫、人蛔虫、十二指肠钩虫、美洲钩虫、隐孢子虫、布氏锥虫、克氏锥虫、利什曼原虫、其他利什曼虫物种、阔节裂头绦虫、短膜壳绦虫、缩小膜壳绦虫、细粒棘球绦虫、多房棘球绦虫、福氏棘球绦虫、少节棘球绦虫、阔节裂头绦虫、华支睾吸虫、泰国睾吸虫、肝片吸虫、巨片吸虫、枝双腔吸虫、布氏姜片虫、横川吸虫、泰国肝吸虫、猫肝吸虫、华支睾吸虫、阴道毛滴虫、棘阿米巴物种、间插血吸虫、埃及裂体吸虫、日本裂体吸虫、曼氏裂体吸虫、其他裂体吸虫物种、雷根毛毕吸虫、螺旋旋毛虫、布氏旋毛虫、纳氏旋毛虫、乡土旋毛虫和痢疾变形虫。
[0120]
e.实例
[0121]
提出以下实例以便向本领域的普通技术人员提供关于如何制备和评估本文所要求保护的化合物、组合物、制品、装置和/或方法的完整公开内容和描述，并且旨在单纯地是示例性的并不旨在限制本公开。已经努力确保关于数字的准确性(例如，量、温度等)，但是应该考虑一些误差和偏差。除非另有说明，否则份是重量份，温度以℃计或者处于环境温
度，并且压力处于大气压或接近大气压。
[0122]
实验表明，在covid-19的严重病历中，本公开的方法大大改善了健康，使得所有测试患者在72小时内避免使用呼吸机或摘掉呼吸机。
[0123]
图1a至1c示出了通过透射电子显微镜法(tem)捕获的代表性图像，其示出了存在于来自生产批号#pv-441-2002c的环鸟苷酸(cgmp)的本发明样品内的ev的大小分布。图1a、1b和1c比例尺分别为200nm、100nm和100nm。图像1、2和3是图1c所示结构的详细视图。单粒子干涉反射成像传感器(sp-iris)是一种用于捕获纳米颗粒图像数据并将信息转换为颗粒大小、浓度和身份的成像系统。一个此类商用系统是nanoview exoview
tm
系统。
[0124]
图2a至2d示出了cd81、cd63和cd9，表示捕获的外泌体。图2a是展示冻干试验批次4411901c结果的图表。图2b是展示预辅料试验批次441901d结果的图表。图2c是展示预辅料试验批次441902a结果的图表。图2d是展示预辅料试验批次441902b结果的图表。所有样本均用荧光标记单克隆抗体染。红表示cd63抗体(ab)，绿表示为cd81 ab，并且蓝表示cd9 ab。图2包含了以下蛋白质的结果。cd9是指在外泌体和质膜ev中表达的蛋白质，是四次穿膜蛋白家族的成员，与整联蛋白相关。cd9调节精卵相互作用、血小板聚集和激活以及细胞黏附。在肌细胞中，cd9与cd81结合，并在肌肉再生过程中抑制肌管的形成。在单核细胞/巨噬细胞中，cd9与cd81和整联蛋白相关，并阻止巨细胞和破骨细胞的形成。cd63是指外泌体中表达的蛋白质，是四次穿膜蛋白家族的成员。cd63作为timp-1的表面受体，激活细胞信号传递级联，促进细胞存活，并激活akt和fak/ptk2通路。cd81是指外泌体中表达的蛋白质，是四次穿膜蛋白家族的成员。在肌细胞中，cd81与cd9结合，并在肌肉再生过程中抑制肌管的形成。在单核细胞/巨噬细胞中，cd81与cd9和整联蛋白相关，并阻止巨细胞和破骨细胞的形成。cd81在b细胞中表达，并参与cd19受体的转运。
[0125]
图3a至3d是一组cd63捕获的外泌体的显微图像。图3a展示了冻干试验批次4411901c。图3b展示了预辅料试验批次441901d。图3c展示了预辅料试验批次441902a。图3d展示了预辅料试验批次441902b。所有图像的分辨率限制为20nm。所有样本均用cd63抗体(红)、cd81 ab(绿)和cd9 ab(蓝)染。纳米颗粒跟踪分析(nta)是一种可视化和分析悬浮颗粒的方法。
[0126]
图4重现了msc分泌组(也在商品名exoflo
tm
下提及过)微小rna含量的列表，如park等人的表1所示。表1突出显示以识别exoflo
tm
中发现的可能直接结合sars-cov-2病毒rna序列的序列。表1的脚注包含下列注释。1.使用pita工具对3'utr结合进行预测。2.为了预测mirna与3'utr和区域的结合，还使用mirdb对整个基因组进行了分析。3.表达(％)表示每个mirna相对于总mirna水平的水平，计算出的mirna cpm/总cpm*100。4.每个mirna预期与sars-cov-2基因组结合的种子位置。5.种子匹配长度。6.种子不匹配长度。7.g和u碱基配对引起的摆动数。8.结合所需的热力学能。能量越低，表示结合预测越强。得分越高，强烈结合的可能性越大。9.mirdb方法的预测得分。根据mirdb，得分》80分的预测目标最有可能被紧密结合。10.与sars-cov-2rna基因组匹配的mirna种子位置起始位点。11.细胞外囊泡(ev)内表达水平的等级。
[0127]
图5是本文论述的多个作用机制的示意图，通过所述作用机制，本发明可以改善冠状病毒感染和随后的症状。
[0128]
图6是病毒毒性抑制(传染性和复制)作为细胞外囊泡浓度的函数的示意图，其表
示在“细胞保护”试验中本发明的组合物对体外活体sars cov-2病毒的剂量反应关系。图6包含虚线，其表示数据的线性回归和指数回归。
[0129]
图7是坐标图汇编，表明了本发明在与covid-19相关的严重ards患者时的效果。临床研究中的生物标记是降低高炎症状态(细胞因子风暴)作用机制的指标。
[0130]
图8是展示一种作用机制的坐标图，该作用机制用于抑制主炎症诱导细胞因子il-1β。covid-19的严重程度与外周血il-1β水平有关。这里示出的是公开的msc分泌组组合物(也在商品名exoflo
tm
下提及过)通过抑制lps(脂多糖或内毒素)刺激的人类外周血单核细胞中的促炎细胞因子il-1β来持续调节炎症的能力，其为用于模拟超免疫反应发生的体外模型，也称为“细胞因子风暴”。
[0131]
图9展示了一种作用机制通过减少中性粒细胞胞外陷阱形成(netosis)来调节中性粒细胞过度活跃的免疫应答。示出的是msc分泌组(也在商品名exoflo
tm
下提及过)通过抑制中性粒细胞net形成来抑制病毒或细菌诱导的netosis，并减少net相关微血栓形成的发生率，例如，与sars-cov-2形成相关的微血栓形成，或与细菌感染相关的高水平内毒素形成。因此，net形成的减少与covid-19相关的弥散性血管内凝血(微凝块形成)的减少相关。

技术特征：

1.一种组合物，所述组合物包括有效量的间充质干细胞(msc)分泌组和一种或多种生物分子，所述一种或多种生物分子选择性地结合到一种或多种微生物免疫原；抑制微生物寄生宿主的能力；或抑制、减少、降低、改善和/或预防微生物感染引起的一种或多种继发性病状。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述一种或多种生物分子包括肽、多肽、蛋白质、sirna、shrna或微小rna(mirna)，其同时且协同地作用以直接影响病毒感染和/或复制。3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中所述生物分子包括肽、多肽、蛋白质、sirna、shrna或微小rna(mirna)，其响应于微生物感染而同时且协同地作用以调节下游炎症和血管细胞相关的病症。4.根据权利要求2或3所述的组合物，其中所述一种或多种生物分子包括铁蛋白、pai-1、和/或血栓调节蛋白。5.根据权利要求2或3所述的组合物，其中所述mirna选自由以下mirna组成的组，其包括hsa-let-7a-5p、hsa-let-7b-5p、hsa-let-7c-5p、hsa-let-7d-3p、hsa-let-7e-5p、hsa-let-7g-5p、hsa-let-7i、hsa-let-7i-5p、hsa-mir-100-5p、hsa-mir-103a-3p、hsa-mir-106a-5p、hsa-mir-106b-5p、hsa-mir-10b、hsa-mir-10b-5p、hsa-mir-1246、hsa-mir-1246、hsa-mir-125a-5p、hsa-mir-125b-5p、hsa-mir-130a-3p、hsa-mir-130b、hsa-mir-130b-3p、hsa-mir-132-3p、hsa-mir-136-5p、hsa-mir-138-5p、hsa-mir-139-5p、hsa-mir-140、hsa-mir-140-3p、hsa-mir-145-5p、hsa-mir-146a、hsa-mir-146a-5p、hsa-mir-148a-3p、hsa-mir-152-3p、hsa-mir-15a-5p、hsa-mir-15b-5p、hsa-mir-16-1、hsa-mir-16-2、hsa-mir-16-5p、hsa-mir-17-5p、hsa-mir-181a-5p、hsa-mir-191-5p、hsa-mir-193a-5p、hsa-mir-193b-3p、hsa-mir-197-3p、hsa-mir-199a-3p、hsa-mir-199a-5p、hsa-mir-199b-5p、hsa-mir-19a-3p、hsa-mir-19b-3p、hsa-mir-20a-5p、hsa-mir-203a、hsa-mir-203a-3p、hsa-mir-214-3p、hsa-mir-21、hsa-mir-21-3p、hsa-mir-21-5p、hsa-mir-221、hsa-mir-221-3p、hsa-mir-222、hsa-mir-222-3p、hsa-mir-22-3p、hsa-mir-23a-3p、hsa-mir-23b-3p、hsa-mir-24-1、hsa-mir-24-2、hsa-mir-24-3p、hsa-mir-25、hsa-mir-25-3p、hsa-mir-26a-5p、hsa-mir-27a-3p、hsa-mir-27b、hsa-mir-27b-3p、hsa-mir-29a-3p、hsa-mir-29c-3p、hsa-mir-30a-5p、hsa-mir-30a-5p、hsa-mir-30b-5p、hsa-mir-30c-5p、hsa-mir-30d、hsa-mir-30d-5p、hsa-mir-30e、hsa-mir-30e-5p、hsa-mir-31-3p、hsa-mir-31-5p、hsa-mir-320a、hsa-mir-342-3p、hsa-mir-345-5p、hsa-mir-34a-5p、hsa-mir-361-5p、hsa-mir-376a-3p、hsa-mir-376c-3p、hsa-mir-423-3p、hsa-mir-423-5p、hsa-mir-424-5p、hsa-mir-484、hsa-mir-486-1、hsa-mir-486-2、hsa-mir-486-5p、hsa-mir-570-3p、hsa-mir-574-3p、hsa-mir-663a、hsa-mir-874-3p、hsa-mir-92a-1、hsa-mir-92a-2、hsa-mir-92a-3p、hsa-mir-92b-3p、hsa-mir-93、hsa-mir-93-5p、hsa-mir-940、hsa-mir-99a-5p、和hsa-mir-99b-5p。6.根据权利要求5所述的组合物，其中所述mirna抑制缓激肽途径并且选自由以下组成的组：let-7a-5p、hsa-let-7b-5p、hsa-let-7c-5p、hsa-let-7g-5p、hsa-let-7i-5p、hsa-let-7i、hsa-mir-106a-5p、hsa-mir-106b-5p、hsa-mir-15a-5p、hsa-mir-15b-5p、hsa-mir-16-5p、hsa-mir-17-5p、hsa-mir-20a-5p、hsa-mir-23a-3p、hsa-mir-23b-3p、hsa-mir-24-1、hsa-mir-24-2、hsa-mir-25-3p、hsa-mir-92a-3p、hsa-mir-92b-3p、和hsa-mir-93-5p。7.根据权利要求5所述的组合物，其中所述mirna抑制缓激肽2翻译并且选自由以下组
成的组：hsa-mir-19a-3p、hsa-mir-19b-3p。8.根据权利要求5所述的组合物，其中所述mirna抑制血管紧张素转化酶2(ace2)受体或抑制所述跨膜蛋白酶、丝氨酸2(tmprss2)酶并且是选自由以下组成的组的mirna：hsa-let-7a-5p、hsa-let-7b-5p、hsa-let-7c-5p、hsa-let-7g-5p、hsa-let-7i-5p、hsa-mir-214-3p、和hsa-mir-27a-3p。9.根据权利要求5所述的组合物，其中所述mirna抑制激肽释放酶b1。10.根据权利要求1至9中任一项所述的组合物，其中所述一种或多种生物分子抑制il-1β、il-6、tnf-α、gm-csf、或m-csf并且选自hsa-let-7a-5p、hsa-let-7b-5p、hsa-let-7c-5p、hsa-let-7g-5p、hsa-let-7i-5p、hsa-mir-547-3p、hsa-mir-130a-3p、和hsa-mir-181a-5p。11.根据权利要求1至10中任一项所述的组合物，其中所述msc分泌组进一步包括前列腺素e2(pge2)、转化生长因子β1(tgf-β1)、肝细胞生长因子(hgf)、基质细胞衍生因子-1(sdf-1)、一氧化氮、吲哚胺2,3-双加氧酶、白介素-4(il-4)、il-6、白介素-10(il-10)、il-1受体拮抗剂和可溶性tnf-α受体、胰岛素样生长因子、成纤维细胞生长因子(fgf)1-23(尤其是fgf1和fgf2)、骨形态生成蛋白(bmp)1-15、表皮生长因子(egf)、转化生长因子-α(tgf-α)巨噬细胞刺激蛋白(msp)、血小板衍生生长因子(plgf)、血管内皮生长因子(vegf)、巨噬细胞集落刺激因子(m-csf)、胰岛素、粒细胞集落刺激因子(g-csf)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(gm-csf雌激素、和/或甲状腺激素。12.一种、减少、抑制、降低、改善和/或预防受试者的微生物感染或其症状的方法，所述方法包括对受试者施用权利要求1至11中任一项所述的组合物。13.根据权利要求12所述的、减少、抑制、降低、改善和/或预防微生物感染或其症状的方法，其中所述组合物、抑制、降低、改善和/或预防微生物诱导的细胞因子风暴和/或微生物引发的缓激肽风暴。14.根据权利要求12所述的、减少、抑制、降低、改善和/或预防微生物感染或其症状的方法，其中所述组合物、抑制、降低、改善和/或预防急性呼吸窘迫综合征。15.一种、减少、抑制、降低、改善和/或预防受试者的微生物感染或其症状的方法，所述方法包括对受试者施用有效量的msc分泌组和一种或多种生物分子，所述一种或多种生物分子选择性地结合到一种或多种微生物免疫原；抑制微生物寄生宿主的能力；或抑制、减少、降低、改善和/或预防微生物感染引起的一种或多种继发性病状。16.根据权利要求12至15中任一项所述的、减少、抑制、降低、改善和/或预防微生物感染或其症状的方法，其中所述微生物感染包括选自由以下组成的病毒组的病毒的感染：单纯疱疹病毒-1、单纯疱疹病毒-2、水痘-带状疱疹病毒、eb病毒、巨细胞病毒、人类疱疹病毒-6、天花病毒、水泡性口炎病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、鼻病毒、冠状病毒(包含但不限于禽冠状病毒(ibv)、猪冠状病毒hku15(porcov hku15)、猪流行性腹泻病毒(pedv)、hcov-229e、hcov-oc43、hcov-hku1、hcov-nl63、sars-cov、sars-cov-2或mers-cov)、甲型流感病毒、乙型流感病毒、麻疹病毒、多瘤病毒、乳头状瘤病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、柯萨奇病毒、基孔肯亚病毒、登革病毒、腮腺炎病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病毒、劳斯氏肉瘤病毒、呼肠孤病毒、黄热病毒、埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙热病毒、东方马脑炎病毒、日本脑炎病毒、圣路易脑炎病毒、墨累溪
species)、小肠结肠炎耶尔森菌(yersinia enterocolitica)、其他耶尔森菌种(yersinia species)、和支原体菌种(mycoplasma species)。一方面，所述细菌不是杆菌(bacillus anthracis)。18.根据权利要求12至15中任一项所述的、减少、抑制、降低、改善和/或预防微生物感染或其症状的方法，其中所述微生物感染包括选自由以下真菌组成的组的真菌的感染：白念珠菌(candida albicans)、新型隐球菌(cryptococcus neoformans)、荚膜组织胞浆菌(histoplasma capsulatum)、烟曲霉菌(aspergillus fumigatus)、粗球孢子菌(coccidioides immitis)、巴西副球孢子菌(paracoccidioides brasiliensis)、皮炎芽生菌(blastomyces dermatitidis)、卡氏肺孢菌(pneumocystis carinii)、马尔尼菲青霉菌和链格孢菌(alternaria alternata)。19.根据权利要求12至15中任一项所述的、减少、抑制、降低、改善和/或预防微生物感染或其症状的方法，其中所述微生物感染包括选自由以下寄生生物组成的组的寄生虫的寄生虫感染：刚地弓形虫(toxoplasma gondii)、恶性疟原虫(plasmodium falciparum)、间日疟原虫(plasmodium vivax)、三日疟原虫(plasmodium malariae)、其他疟原虫物种(plasmodium species)、痢疾变形虫(entamoeba histolytica)、福氏耐格里变形虫(naegleria fowleri)、西伯鼻孢子虫(rhinosporidium seeberi)、兰伯氏贾第虫(giardia lamblia)、蠕形住肠蛲虫(enterobius vermicularis)、格里氏蛲虫(enterobius gregorii)、人蛔虫(ascaris lumbricoides)、十二指肠钩虫(ancylostoma duodenale)、美洲钩虫(necator americanus)、隐孢子虫(cryptosporidium spp.)、布氏锥虫(trypanosoma brucei)、克氏锥虫(trypanosoma cruzi)、利什曼原虫(leishmania major)、其他利什曼虫物种(leishmania species)、阔节裂头绦虫(diphyllobothrium latum)、短膜壳绦虫(hymenolepis nana)、缩小膜壳绦虫(hymenolepis diminuta)、细粒棘球绦虫(echinococcus granulosus)、多房棘球绦虫(echinococcus multilocularis)、福氏棘球绦虫(echinococcus vogeli)、少节棘球绦虫(echinococcus oligarthrus)、阔节裂头绦虫(diphyllobothrium latum)、华支睾吸虫(clonorchis sinensis)、泰国睾吸虫(clonorchis viverrini)、肝片吸虫(fasciola hepatica)、巨片吸虫(fasciola gigantica)、枝双腔吸虫(dicrocoelium dendriticum)、布氏姜片虫(fasciolopsis buski)、横川吸虫(metagonimus yokogawai)、泰国肝吸虫(opisthorchis viverrini)、猫肝吸虫(opisthorchis felineus)、华支睾吸虫(clonorchis sinensis)、阴道毛滴虫(trichomonas vaginalis)、棘阿米巴物种(acanthamoeba species)、间插血吸虫(schistosoma intercalatum)、埃及裂体吸虫(schistosoma haematobium)、日本裂体吸虫(schistosoma japonicum)、曼氏裂体吸虫(schistosoma mansoni)、其他裂体吸虫物种(schistosoma species)、雷根毛毕吸虫(trichobilharzia regenti)、螺旋旋毛虫(trichinella spiralis)、布氏旋毛虫(trichinella britovi)、纳氏旋毛虫(trichinella nelsoni)、乡土旋毛虫(trichinella nativa)和痢疾变形虫(entamoeba histolytica)。

技术总结

本文公开了包括间充质干细胞(MSC)制剂和一种或多种生物分子的组合物，以及所述组合物用于微生物感染或与所述感染相关联的症状或继发性病理状态的用途。状或继发性病理状态的用途。状或继发性病理状态的用途。

技术研发人员：

K

受保护的技术使用者：

蒂莱克特生物制剂有限责任公司

技术研发日：

2021.04.22

技术公布日：

2023/3/24