前列地尔组合药物及其制备质量控制和用途

前列地尔组合药物及其制备质量控制和用途

技术领域

本发明涉及一种前列地尔组合药物及其制备质量控制和用途。

背景技术

前列地尔，曾用名前列腺素E₁，简称PGE₁。属内源物，生理活性广且 高效。用于和预防冠心病和心肌梗塞、脑梗塞、高血压、高血脂、动脉硬 化症、脉管炎、肿瘤；还可肝炎、糖尿病血管病变及肾功能不全；对难治 愈的支气管哮喘、胰腺炎、胃溃疡、椎底供血不足有奇效。具有用药量小、是 广谱药物且疗效确切、半衰期短、体内不积聚、无损害性的毒副作用的特点， 将是百年不倒良药。但由于其化学性质活泼，制剂质量稳定性差，含量递降影 响疗效和产生副作用，因此含量递降和注射疼痛、冰箱储运是前列地尔制剂的 三大国际难题。现有技术为了克服注射疼痛，制成剂量极小乳剂，10μg/支， 甚至5μg/支的靶向制剂。其实上述疾病，大多是属于全身血液质量病变和血管 病变、内脏病变在身体局部的反映，靶向制剂意义不大，更需大剂量前列 地尔制剂对全身血液、血管、内脏全面。而且我国已进入老年人社会，患 上述疾病的人口数量大，因此，制造出含量稳定、注射不疼痛、不需冰箱储运 大剂量前列地尔制剂，对提高我国人民身体健康水平和生活质量，更具有显著 的社会效益和经济效益，以造福于人民。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术制备的前列地尔制剂剂量太小、注射疼痛、 含量递降、冰箱储运的四大缺陷。

本发明是通过以下技术方案来实现发明目的：

本发明一种前列地尔组合药物的各组份原料的重量比如下：

(1)高纯度前列地尔 0.77-2.31

(2)赖氨匹林∶水杨酸钠重量比为90-95∶5-10混合物 210-300

(1)右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精

重量比12-18∶1混合物混合物 500-580

(4)二巯丁二钠 2.00-3.00

(5)喷替酸 10-15

(6)针剂用活性炭(已活化) 50-60

(7)0.05M磷酸盐缓冲液pH值5.0-7.5 8000-9000

本发明的前列地尔组合药物配方优势有：

高纯度前列地尔为主要活性成分，纯度为99.5％以上，本发明研究发现， 除了现有本发明人的在先发明专利(专利号：200810127055.3)的专利技术 规定其不含杂质氢醌和铁离子等高价金属离子外，更重要的是不能含有前列腺 A₁和前列腺素B₁杂质，这是利用本发明人的在先发明专利(专利号： 00109233.2)的专利技术精制前列地尔原料药所得。现行药典规定的前列腺 素A₁％≤3％，而前列腺素B₁％没有规定(前列地尔原料药有规定而制剂没规定)， 本发明研究发现，限定杂质含量：前列腺素A₁％≤0.1％，前列腺素B₁≤0.1％，只 有这样才可消除前列地尔含量递降，因为本发明研究发现前列腺素A₁可蛻变为 前列腺素B₁，而前列腺素B₁由于分子结构内存在p-π-π共轭结构，即其五元 环及环外有O＝C-C＝C-C＝C共轭体系，在光和空气作用下其五元环易氧化开环， 双键断裂形成酮或羧酸，这些酮和羧酸不仅可轻易地氧化前列地尔，而且羧酸 可周期性地催化前列地尔蜕变为前列腺素A₁和前列腺素B₁，所以前列地尔含量 递降，本研究发现高纯度前列地尔在没有杂质干扰下，室温下是稳定的，本研 究还发现纯前列地尔扩张血管仅是膨胀感，可忍受，而前列地尔杂质，尤其是 前列腺A₁和酮类、羧酸类杂质对血管刺激则是疼痛难忍。

赖氨匹林和水杨酸钠混合物为刚性赋形剂，又是前列地尔的助溶剂和保护 剂，本研究发现尤其是水杨酸钠和赖氨匹林组合的保护作用使前列地尔稳定， 可能是两者分子协调地对前列地尔两个羟基的氢键作用，使前列地尔羟基不易 脱水，从而不易蜕变为前列腺素A₁和前列腺素B₁，从而阻断了前列地尔的周期 性的含量递变，使前列地尔制剂进入质量稳定，注射不疼痛，可室温下储存良 性循环。这里的赖氨匹林或可用阿司匹林精氨酸盐，其在组合药物中重量比和 赖氨匹林同。

右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量比12-18∶1混合物为粘性赋形剂， 把前列地尔组合药物各组份粘合在一起形成光洁、白、漂亮的块状冻干剂(不 会产生粉末状的冻干粉)，同时又是前列地尔保护剂，本发明的固体制剂中，小 分子的前列地尔被包含在大分子的2-羟丙基-β-环糊精中，而这两者又被分 散和包裹在更大分子的右旋糖酐40中，使前列地尔不被光、氧化剂氧化，不会 转变为前列腺素A₁和前列腺素B₁，2-羟丙基-β-环糊精还增大前列地尔溶解 度，但其用量尽量小，因为其用量大于本发明规定量，就有溶血副作用；

二巯丁二钠为优良的前列地尔的抗氧剂，用量小，抗氧剂或是亚硫酸氢钠， 或两者混和物，亚硫酸氢钠毒性比二巯丁二钠大，用量要小些，即在前列地尔 组合药物中重量比在1.0-1.2有抗氧效果，两者的混合物在前列地尔组合药物 中重量比为2-4.0。

喷替酸(Pentetic Acid)是络合辅料和水中金属离子，避免前列地尔被 氧化。

磷酸盐缓冲液的使用是为了使前列地尔溶解，为磷酸二氢钾盐或钠盐的缓 冲液，或用注射用水代替磷酸盐缓冲液，在配方中注射用水重量比和磷酸盐缓 冲液等同。

本发明还提供所述前列地尔组合药物的制备方法：

操作过程及工艺条件：

(1)西林瓶理瓶、清洗、灭菌

将5ml西林瓶由传递柜经紫外灯灭菌后运入理瓶室，在理瓶室进行理瓶， 把理好的西林瓶放到洗瓶室的固定位置；把GMSU-400W隧道式灭菌烘箱后面的 排风口挡板开至一半，启动电加热按钮，预热区、高温区、冷却区温度开始逐渐 上升；当烘箱内预热区温度达到250℃、高温区温度达到预置温度350℃、冷却 区温度达到220℃，洗瓶机即可投入生产。PCX-IV型洗瓶机用热纯化水，XCQ-VI 型洗瓶机用注射用水，启动PLC程控器，完成粗洗、精洗的全部过程，取精洗 后的西林瓶，检测西林瓶是否洗净、有无可见异物；烘箱在运行过程中，温度 保持在350±5℃；西林瓶洗净后至灭菌放置时间不超过4小时，西林瓶灭菌后 至使用放置时间不超过16小时；

(2)胶塞清洗、灭菌

将装5ml胶塞小盒打开，将盒内的合格证取出，并剔除不合格胶塞之后， 将胶塞装入料桶中；纯化水、注射用水压力0.1-0.2MPa，真空压力-0.06MPa以 下，压缩空气0.4-0.6MPa，纯蒸汽0.2MPa以上。真空进料，待所有胶塞被吸入 后，盖上“加料、取样口盖”；纯化水喷淋粗洗10分钟，超声波漂洗15分钟， 注射用水精洗25分钟，取样进行可见异物检测，如检测不合格，则点动“重新 精洗”按钮，继续自动精洗全过程；加入二甲硅油，二甲硅油加入量为10ml， 温度上升至加热温度85℃后，硅化10分钟，冲洗时间5分钟；当灭菌温度逐渐 上升到设置的123℃后，灭菌开始计时，灭菌时间30分钟；真空干燥8分钟， 当烘干温度逐渐上升至105℃后，热风干燥10分钟，再真空干燥5分钟，当逐 步降温冷却至60℃后，出料；胶塞灭菌后至使用放置时间不超过16小时；

(3)铝塑盖清洗、轧盖

将5ml铝塑盖拿到铝盖清洗间，先剔除不合格的铝盖，将合格铝塑盖放入 清洗槽中，用热纯化水进行清洗；将已清洗的铝塑盖平铺于盘中放入JRSH型净 化热风循环烘箱，于110℃，干燥灭菌3小时后放置备用，其灭菌后至使用放置 时间不超过16小时；

(4)配液

活性炭和右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量比12-18∶1混合物的处 理：

将针剂用活性炭放入1000ml烧杯中，在烘箱中于180℃温度下保温2.5小 时除菌、除热原、除水，降温至室温并密封备用；

按配方量称取右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量比12-18∶1混合物 重量，加入注射注射用水配成右旋糖酐6％(w/w)的溶液，搅拌溶解，按右旋糖 酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量比12-18∶1混合物重量加入10％(w％w)活性 炭，加入赖氨匹林和水杨酸钠，不需搅拌，于121℃灭菌15分钟，下步配料用 需用的磷酸盐缓冲液或注射用水也一同灭菌；冷却至60±5℃，趁热用0.22μm 滤膜的滤芯过滤，滤器、滤筒、管件、滤芯应在滤前放在注射用水中同右旋糖 酐40一起灭菌、过滤后，滤液密封，冷却20℃±2℃；

(5)将灭菌和滤过后的20℃±2℃右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量 比12-18∶1混合物溶液放入料桶中，加入灭菌磷酸盐缓冲液，调至辅料液重量 等于配方中磷酸盐缓冲液、右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量比12-18∶ 1混合物、赖氨匹林和水杨酸钠四者重量之和(调药液体积受温度波动误差较大， 调药液重量只要车间在地球上地址不变，温度不同重量不变，批与批间含量均 匀度好)，搅拌均匀，先用8％的氢氧化钠溶液调溶液pH值至8.5-8.6，用0.22 μm膜滤芯过滤，除去辅料、活性炭带入辅料液中的金属离子沉淀物、不溶性粒 子，尤其是三价铁离子沉淀物；滤过后的辅料液再用8％盐酸溶液调pH值 5.4-5.5，分别在搅拌下加入喷替酸，加入配方量的二巯丁二钠或亚硫酸氢钠， 分别搅拌溶解完全，再用8％盐酸溶液调pH值至5.0-5.2；

(6)称量配方用量前列地尔原料药，用1∶80(w/v)药用注射剂级无水乙醇 将其溶解后，搅拌下滴加加入至上述药液中，搅拌均匀，溶解完全；将 COMPACT-200型过滤器串连安装好，用0.22μm滤芯进行除菌过滤，滤过完毕， 送样检测前列地尔中间产品含量，前列地尔加入无水乙醇后至检测完毕的配液 的时间不能超过1.5小时；

(7)灌装、半加塞

生产前将硅胶灌液管、灌液针用配制好的2％NaOH溶液浸泡30分钟后用注 射用水冲洗干净，然后用灭菌袋包好，放入湿热灭菌柜中于121℃灭菌30分钟； 规定装量：80μg为1.2ml/支、100μg/支规格的为1.20ml/支，200μg/支规格 的为2.4ml，正式灌装前调好灌装体积(称重法)，灌装过程中每10分钟测定一 次装量差异；灌装好的西林瓶经过机器自动半加塞后进入平盘内；将平盘沿百 级通道送入冻干机组的冻干箱内；整个灌装时间不能超过4小时；

(8)冻干

灌装好的西林瓶都进入冻干箱内，开冷冻干燥机冷冻，当制品温度达到预 冻温度-35℃以下，保温时间达到2小时，对捕水器进行预冷，待到“捕水器” 温度达到-50℃，维持30分钟。对系统抽真空，当冷冻干燥箱内真空度达到10Pa 以下时，开始加热升华，升华过程中，每1小时隔板升温2℃，升温至36℃， 并保持系统真空度不高于20Pa；当制品温度达到36℃且冷冻干燥箱内达到极限 真空(小于2.0Pa)6小时后，水分残留小于1％，升华结束。真空下压塞，使西 林瓶内药物及辅料在真空状态下，不被氧气，不被水分、细菌破坏，冻干周期 20-26小时；

(9)轧盖

打开冷冻干燥箱门(此时冻干箱内压与外压一致)，从冷冻干燥箱中取出已 压塞的注射用前列地尔中间产品，放入传递柜中，关闭传递柜门，打开轧盖室 内的传递柜门，取出注射用前列地尔中间产品。把铝塑盖加入料斗里，将前列 地尔冻干中间产品装满送瓶盘，铝塑盖充满轨道，开始轧盖；轧盖过程中每5 分钟检查一次轧盖是否轧紧，制得前列地尔组合药物的冻干针剂；

(10)取(6)步制得的药液分装到316L不锈钢托盘中，放入冷冻干燥箱中 冷冻干燥，达水分残留小于1％后出箱，将冷冻干燥固体无菌粉碎至60-80目， 再按常法，配加其它辅料或溶液，按药剂学允许的前列地尔组合药物的剂量， 按常法操作可制成前列地尔组合药物的口服制剂，或喷雾剂，或拴剂、或灌肠 剂。

本发明的前列地尔组合药物制备工艺的优势有：

高纯度前列地尔原料药不含前列腺素A₁和前列腺素B₁，还有不含氢醌和铁 离子；

在制备过程中，除菌、除热原、除金属离子、除不溶性粒子彻底，活性炭 用量是右旋糖酐40重量的10％以上，除尽右旋糖酐40中异性大分子物质，以避 免过敏，保证药品质量，保证生产过程中不会使前列地尔变成前列腺素A₁和前 列腺素B₁；

药品、辅料在真空、无水、无细菌西林瓶内保存；

用重量法控制辅料液总重量和控制分装量，可消除量体积法由于温度波动 带来的误差。使制品含量均匀度好，剂量稳定，带来疗效稳定；

综上所述，本发明的前列地尔组合药物达到前列地尔高纯度，达到无菌、 无热原、无不溶性粒子、无金属离子、无氧气、无水、无杂质前列腺素A₁和前 列腺素B₁破坏，不仅质量上乘、疗效稳定，而且达到消除注射疼痛、含量递降、 冰箱储运三大国际难题。

本发明的前列地尔组合药物质量控制关键点，前列地尔、前列腺素A₁和前 列腺素B₁含量测定及各自含量限度：原料药前列地尔％≥99.5％，由于检验误差， 前列地尔含量可能低于此值，但应在前列地尔含量测定的高效液相图谱上前列 腺素A₁和前列腺素B₁峰积分得到的各自含量值要都≤0.1％。

具体实施方式

实施例1：

本发明一种前列地尔组合药物的各组份原料的重量比如下：

(1)高纯度前列地尔 0.77

(2)赖氨匹林∶水杨酸钠重量比为90-95∶5-10混合物 210

(1)右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精

重量比12-18∶1混合物混合物 500

(4)二巯丁二钠 2.00

(5)喷替酸 10

(6)针剂用活性炭(已活化) 50

(7)0.05M磷酸盐缓冲液pH值5.0-7.5 8000

本发明还提供所述前列地尔组合药物的制备方法：

操作过程及工艺条件：

(1)西林瓶理瓶、清洗、灭菌

将5ml西林瓶由传递柜经紫外灯灭菌后运入理瓶室，在理瓶室进行理瓶， 把理好的西林瓶放到洗瓶室的固定位置；把GMSU-400W隧道式灭菌烘箱后面的 排风口挡板开至一半，启动电加热按钮，预热区、高温区、冷却区温度开始逐渐 上升；当烘箱内预热区温度达到250℃、高温区温度达到预置温度350℃、冷却 区温度达到220℃，洗瓶机即可投入生产。PCX-IV型洗瓶机用热纯化水，XCQ-VI 型洗瓶机用注射用水，启动PLC程控器，完成粗洗、精洗的全部过程，取精洗 后的西林瓶，检测西林瓶是否洗净、有无可见异物；烘箱在运行过程中，温度 保持在350±5℃；西林瓶洗净后至灭菌放置时间不超过4小时，西林瓶灭菌后 至使用放置时间不超过16小时；

(2)胶塞清洗、灭菌

将装5ml胶塞小盒打开，将盒内的合格证取出，并剔除不合格胶塞之后， 将胶塞装入料桶中；纯化水、注射用水压力0.1-0.2MPa，真空压力-0.06MPa以 下，压缩空气0.4-0.6MPa，纯蒸汽0.2MPa以上。真空进料，待所有胶塞被吸入 后，盖上“加料、取样口盖”；纯化水喷淋粗洗10分钟，超声波漂洗15分钟， 注射用水精洗25分钟，取样进行可见异物检测，如检测不合格，则点动“重新 精洗”按钮，继续自动精洗全过程；加入二甲硅油，二甲硅油加入量为10ml， 温度上升至加热温度85℃后，硅化10分钟，冲洗时间5分钟；当灭菌温度逐渐 上升到设置的123℃后，灭菌开始计时，灭菌时间30分钟；真空干燥8分钟， 当烘干温度逐渐上升至105℃后，热风干燥10分钟，再真空干燥5分钟，当逐 步降温冷却至60℃后，出料；胶塞灭菌后至使用放置时间不超过16小时；

(3)铝塑盖清洗、轧盖

将5ml铝塑盖拿到铝盖清洗间，先剔除不合格的铝盖，将合格铝塑盖放入 清洗槽中，用热纯化水进行清洗；将已清洗的铝塑盖平铺于盘中放入JRSH型净 化热风循环烘箱，于110℃，干燥灭菌3小时后放置备用，其灭菌后至使用放置 时间不超过16小时；

(4)配液

活性炭和右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量比12-18∶1混合物的处 理：

将针剂用活性炭放入1000ml烧杯中，在烘箱中于180℃温度下保温2.5小 时除菌、除热原、除水，降温至室温并密封备用；

按配方量称取右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量比12-18∶1混合物 重量，加入注射注射用水配成右旋糖酐6％(w/w)的溶液，搅拌溶解，按右旋糖 酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量比12-18∶1混合物重量加入10％(w％w)活性 炭，加入赖氨匹林和水杨酸钠，不需搅拌，于121℃灭菌15分钟，下步配料用 需用的磷酸盐缓冲液或注射用水也一同灭菌；冷却至60±5℃，趁热用0.22μm 滤膜的滤芯过滤，滤器、滤筒、管件、滤芯应在滤前放在注射用水中同右旋糖 酐40一起灭菌、过滤后，滤液密封，冷却20℃±2℃；

(5)将灭菌和滤过后的20℃±2℃右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量 比12-18∶1混合物溶液放入料桶中，加入灭菌磷酸盐缓冲液，调至辅料液重量 等于配方中磷酸盐缓冲液、右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量比12-18∶ 1混合物、赖氨匹林和水杨酸钠四者重量之和(调药液体积受温度波动误差较大， 调药液重量只要车间在地球上地址不变，温度不同重量不变，批与批间含量均 匀度好)，搅拌均匀，先用8％的氢氧化钠溶液调溶液pH值至8.5-8.6，用0.22 μm膜滤芯过滤，除去辅料、活性炭带入辅料液中的金属离子沉淀物、不溶性粒 子，尤其是三价铁离子沉淀物；滤过后的辅料液再用8％盐酸溶液调pH值 5.4-5.5，分别在搅拌下加入喷替酸，加入配方量的二巯丁二钠或亚硫酸氢钠， 分别搅拌溶解完全，再用8％盐酸溶液调pH值至5.0-5.2；

(6)称量配方用量前列地尔原料药，用1∶80(w/v)药用注射剂级无水乙醇 将其溶解后，搅拌下滴加加入至上述药液中，搅拌均匀，溶解完全；将 COMPACT-200型过滤器串连安装好，用0.22μm滤芯进行除菌过滤，滤过完毕， 送样检测前列地尔中间产品含量，前列地尔加入无水乙醇后至检测完毕的配液 的时间不能超过1.5小时；

(7)灌装、半加塞

生产前将硅胶灌液管、灌液针用配制好的2％NaOH溶液浸泡30分钟后用注 射用水冲洗干净，然后用灭菌袋包好，放入湿热灭菌柜中于121℃灭菌30分钟； 规定装量：80μg为1.2ml/支、100μg/支规格的为1.20ml/支，200μg/支规格 的为2.4ml，正式灌装前调好灌装体积(称重法)，灌装过程中每10分钟测定一 次装量差异；灌装好的西林瓶经过机器自动半加塞后进入平盘内；将平盘沿百 级通道送入冻干机组的冻干箱内；整个灌装时间不能超过4小时；

(8)冻干

灌装好的西林瓶都进入冻干箱内，开冷冻干燥机冷冻，当制品温度达到预 冻温度-35℃以下，保温时间达到2小时，对捕水器进行预冷，待到“捕水器” 温度达到-50℃，维持30分钟。对系统抽真空，当冷冻干燥箱内真空度达到10Pa 以下时，开始加热升华，升华过程中，每1小时隔板升温2℃，升温至36℃， 并保持系统真空度不高于20Pa；当制品温度达到36℃且冷冻干燥箱内达到极限 真空(小于2.0Pa)6小时后，水分残留小于1％，升华结束。真空下压塞，使西 林瓶内药物及辅料在真空状态下，不被氧气，不被水分、细菌破坏，冻干周期 20-26小时；

(9)轧盖

打开冷冻干燥箱门(此时冻干箱内压与外压一致)，从冷冻干燥箱中取出已 压塞的注射用前列地尔中间产品，放入传递柜中，关闭传递柜门，打开轧盖室 内的传递柜门，取出注射用前列地尔中间产品。把铝塑盖加入料斗里，将前列 地尔冻干中间产品装满送瓶盘，铝塑盖充满轨道，开始轧盖；轧盖过程中每5 分钟检查一次轧盖是否轧紧，制得前列地尔组合药物的冻干针剂。

实施例2：

本发明一种前列地尔组合药物的各组份原料的重量比如下：

(1)高纯度前列地尔 2.31

(2)赖氨匹林∶水杨酸钠重量比为90-95∶5-10混合物 300

(1)右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精

重量比12-18∶1混合物混合物 580

(4)二巯丁二钠 3.00

(5)喷替酸 15

(6)针剂用活性炭(已活化) 60

(7)0.05M磷酸盐缓冲液pH值5.0-7.5 9000

本发明提供所述前列地尔组合药物的制备方法同实施例1。

实施例3：

本发明一种前列地尔组合药物的各组份原料的重量比如下：

(1)高纯度前列地尔 1.96

(2)赖氨匹林∶水杨酸钠重量比为90-95∶5-10混合物 265

(1)右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精

重量比12-18∶1混合物混合物 530

(4)二巯丁二钠 2.50

(5)喷替酸 12

(6)针剂用活性炭(已活化) 55

(7)0.05M磷酸盐缓冲液pH值5.0-7.5 8600

本发明提供所述前列地尔组合药物的制备方法同实施例1。

实施例4：

本发明一种前列地尔组合药物的各组份原料的重量比如下：

(1)高纯度前列地尔 0.77

(2)赖氨匹林∶水杨酸钠重量比为90-95∶5-10混合物 300

(1)右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精

重量比12-18∶1混合物混合物 500

(4)二巯丁二钠 3.00

(5)喷替酸 10

(6)针剂用活性炭(已活化) 60

(7)0.05M磷酸盐缓冲液pH值5.0-7.5 8000

本发明提供所述前列地尔组合药物的制备方法同实施例1。

实施例5：

本发明一种前列地尔组合药物的各组份原料的重量比如下：

(1)高纯度前列地尔 2.31

(2)赖氨匹林∶水杨酸钠重量比为90-95∶5-10混合物 210

(1)右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精

重量比12-18∶1混合物混合物 580

(4)二巯丁二钠 2.00

(5)喷替酸 15

(6)针剂用活性炭(已活化) 50

(7)0.05M磷酸盐缓冲液pH值5.0-7.5 9000

本发明提供所述前列地尔组合药物的制备方法同实施例1。

实施实例6：

本发明一种前列地尔组合药物的各组份原料的重量比如下：

(1)高纯度前列地尔 0.77

(2)赖氨匹林∶水杨酸钠重量比为90-95∶5-10混合物 210

(1)右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精

重量比12-18∶1混合物混合物 500

(4)二巯丁二钠 2.00

(5)喷替酸 10

(6)针剂用活性炭(已活化) 50

(7)0.05M磷酸盐缓冲液pH值5.0-7.5 8000

本发明还提供所述前列地尔组合药物的制备方法：

操作过程及工艺条件：

(1)配液

活性炭和右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量比12-18∶1混合物的处 理：

将针剂用活性炭放入1000ml烧杯中，在烘箱中于180℃温度下保温2.5小 时除菌、除热原、除水，降温至室温并密封备用；

按配方量称取右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量比12-18∶1混合物 重量，加入注射注射用水配成右旋糖酐6％(w/w)的溶液，搅拌溶解，按右旋糖 酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量比12-18∶1混合物重量加入10％(w％w)活性 炭，加入赖氨匹林和水杨酸钠，不需搅拌，于121℃灭菌15分钟，下步配料用 需用的磷酸盐缓冲液或注射用水也一同灭菌；冷却至60±5℃，趁热用0.22μm 滤膜的滤芯过滤，滤器、滤筒、管件、滤芯应在滤前放在注射用水中同右旋糖 酐40一起灭菌、过滤后，滤液密封，冷却20℃±2℃；

(2)将灭菌和滤过后的20℃±2℃右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量 比12-18∶1混合物溶液放入料桶中，加入灭菌磷酸盐缓冲液，调至辅料液重量 等于配方中磷酸盐缓冲液、右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精重量比12-18∶ 1混合物、赖氨匹林和水杨酸钠四者重量之和(调药液体积受温度波动误差较大， 调药液重量只要车间在地球上地址不变，温度不同重量不变，批与批间含量均 匀度好)，搅拌均匀，先用8％的氢氧化钠溶液调溶液pH值至8.5-8.6，用0.22 μm膜滤芯过滤，除去辅料、活性炭带入辅料液中的金属离子沉淀物、不溶性粒 子，尤其是三价铁离子沉淀物；滤过后的辅料液再用8％盐酸溶液调pH值 5.4-5.5，分别在搅拌下加入喷替酸，加入配方量的二巯丁二钠或亚硫酸氢钠， 分别搅拌溶解完全，再用8％盐酸溶液调pH值至5.0-5.2；

(3)称量配方用量前列地尔原料药，用1∶80(w/v)药用注射剂级无水乙醇 将其溶解后，搅拌下滴加加入至上述药液中，搅拌均匀，溶解完全；将 COMPACT-200型过滤器串连安装好，用0.22μm滤芯进行除菌过滤，滤过完毕， 送样检测前列地尔中间产品含量，前列地尔加入无水乙醇后至检测完毕的配液 的时间不能超过1.5小时；

(4)冻干、分装

取(3)步制得的药液分装到316L不锈钢托盘中，放入冷冻干燥箱中按前 所述方法冷冻干燥，达水分残留量小于1％后出箱，把托盘中药块取出，无菌粉 碎至60-80目，再按常法，不需配加辅料，直接用肠溶胶囊分装成药剂学允许 剂量的前列地尔组合药物肠溶胶囊。

实施例7：

本发明一种前列地尔组合药物的各组份原料的重量比如下：

(1)高纯度前列地尔 2.31

(2)赖氨匹林∶水杨酸钠重量比为90-95∶5-10混合物 300

(1)右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精

重量比12-18∶1混合物混合物 580

(4)二巯丁二钠 3.00

(5)喷替酸 15

(6)针剂用活性炭(已活化) 60

(7)0.05M磷酸盐缓冲液pH值5.0-7.5 9000

本发明提供所述前列地尔组合药物的制备方法同实施例6。

实施例8：

本发明一种前列地尔组合药物的各组份原料的重量比如下：

(1)高纯度前列地尔1.36

(2)赖氨匹林∶水杨酸钠重量比为90-95∶5-10混合物 256

(1)右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精

重量比12-18∶1混合物混合物 536

(4)二巯丁二钠 2.27

(5)喷替酸 11

(6)针剂用活性炭(已活化) 57

(7)0.05M磷酸盐缓冲液pH值5.0-7.5 875

本发明提供所述前列地尔组合药物的制备方法同实施例6。

实施例9：

本发明一种前列地尔组合药物的各组份原料的重量比如下：

(1)高纯度前列地尔 0.77

(2)赖氨匹林∶水杨酸钠重量比为90-95∶5-10混合物 300

(1)右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精

重量比12-18∶1混合物混合物 500

(4)二巯丁二钠 3.00

(5)喷替酸 10

(6)针剂用活性炭(已活化) 60

(7)0.05M磷酸盐缓冲液pH值5.0-7.5 8000

本发明提供所述前列地尔组合药物的制备方法。同实施例6。

实施例10：

本发明一种前列地尔组合药物的各组份原料的重量比如下：

(1)高纯度前列地尔 2.31

(2)赖氨匹林∶水杨酸钠重量比为90-95∶5-10混合物 210

(1)右旋糖酐40与2-羟丙基-β-环糊精

重量比12-18∶1混合物混合物 580

(4)二巯丁二钠 2.00

(5)喷替酸 15

(6)针剂用活性炭(已活化) 50

(7)0.05M磷酸盐缓冲液pH值5.0-7.5 9000

本发明提供所述前列地尔组合药物的制备方法同实施例6。

验证性试验：

(一)本发明的前列地尔组合药物不含前列腺素A₁和不含前列腺素B₁的验证 试验(按中国药典2010版规定的前列地尔原料药及制剂检验规定)：

同时测定前列地尔、前列腺素A₁和前列腺素B₁三者含量的谱条件：谱 柱用十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂(4.6mm ×250mm，5μm)；乙腈-0.02mol/L 磷酸二氢钾溶液(pH4.9)体积比40∶60混合液(混合后pH5.1)为流动相， 检测波长为214nm；柱温30-35℃，流速为0.5ml/min，或1.0ml/min，进样量 为20μl，或10μl，前列地尔峰与前列腺素A₁峰的分离度大于4.0；

取前列地尔对照品适量，精密称定，用入25％乙醇水溶液溶解并稀释制成每 ml中含前列地尔100μg的溶液，作为前列地尔对照品溶液，备用；

另取前列腺素A₁杂质对照品适量，精密称定，用25％乙醇水溶液溶解并稀释 制成每ml中含前列腺素A₁为15μg的溶液作为杂质的对照品溶液，备用；

另取前列腺素B₁杂质对照品适量，精密称定，用25％乙醇水溶液溶解并稀释 制成每ml中含前列腺素B₁为5μg的溶液作为杂质的对照品溶液，备用；

取本发明的前列地尔组合药物冻干针剂(100μg/支规格)10支，分别精密 加入25％乙醇水溶液1.00ml，振摇，使内溶物溶解完全，作为供试品溶液备用；

分别取前列地尔对照品溶液、前列腺素A₁和前列腺素B₁杂质对照品溶液各 适量，按(1∶1∶1)比例混合，摇匀，作为系统适用性试验溶液，取20μl注 入液相谱仪，调整谱系统，使前列地尔峰的保留时间为11-13分钟，前列 腺素A₁峰(按中国药典2005版规定其峰保留时间为前列地尔峰保留时间的 2.2-2.7倍)与前列腺素B₁峰(因为前列腺素B₁比前列腺素A₁多一个共 轭双键，所以其峰保留试间在前列腺素A₁之后)的分离度应大于4.0；同时调 节检测灵敏度，使前列腺素B₁峰的高度药为满量程的10％。

分别精密量取供试品溶液、前列腺素A₁、前列腺素B₁杂质对照品液与前列 地尔对照品液各20μl，分别注入液相谱仪，记录供试品溶液的谱图至前列 地尔峰保留时间的4倍以上。按外标法以峰面积分别计算每瓶的含量及10瓶的 平均含量，即得；按平均计算，含前列地尔应为标示量(100μg/支)的90％- 110.0％；供试品溶液的谱图中如有杂质峰，前列腺素A₁和前列腺素B₁均按外 标法计算，分别不得过1.0％和0.3％；其他杂质以前列地尔对照品溶液中的前列 地尔峰面积计算，单个最大杂质不得过1.0％；杂质总量不得过2.0％(小于0.1％ 的谱峰不计)。

前列地尔峰保留时间为11.220min，在图谱上前列腺素A₁和前列腺素B₁ 含量在0.01％以下，因为在前列地尔峰后面无这两个杂质的峰，在前列地尔峰前 面的三个峰为本发明的前列地尔组合药物辅料的特征峰。在三个辅料的特征峰 前面的峰为溶剂和辅料重叠峰。

把流速改为1.0ml/min，进样量为10μl，其他谱条件及操作参数不变， 则前列地尔峰的保留时间为5-6分钟。前列地尔对照品(220.03984μg/ml浓度) 前列地尔峰保留时间为5.887min，在图谱上前列腺素A₁和前列腺素B₁含量在 0.01％以下，因为在前列地尔峰后面无这两个杂质的峰，在前列地尔峰前面的三 个峰为本发明的前列地尔组合药物辅料的特征峰。在三个辅料的特征峰前面的 峰为溶剂和辅料重叠峰。

流速为0.5ml/min时，前列地尔峰保留时间为11.220min，前列腺素A₁和前 列腺素B₁含量在0.01％以下，在前列地尔峰后面无这两个杂质的峰，在前列地尔 峰前面的三个峰是本发明的前列地尔组合药物辅料的特征峰，这三个特征峰的 保留时间分别为：5.396min，7.248min，8.297min，这三个辅料的特征峰前面 的峰为溶剂和辅料重叠峰；

把流速改为1.0ml/min，进样量为10μl，其他谱条件及操作参数不变， 前列地尔峰保留时间为5.887min，前列腺素A₁和前列腺素B₁含量在0.01％以下， 在前列地尔峰后面无这两个杂质的峰，在前列地尔峰前面的三个峰为本发明的 前列地尔组合药物辅料的特征峰，这三个辅料的特征峰的保留时间分别为： 2.735min，3.765min，4.319min，三个辅料的特征峰前面的峰为溶剂和辅料重 叠峰；

需要说明的是，由于国内买不到前列腺素A₁和前列腺素B₁的对照品，需高 价进口(3700元/mg)，所以中国药典2005版规定用前列地尔溶液制 备前列腺素A₁方法，2005半药典及2010版药典对前列地尔制剂中前列 腺素B₁的杂质量没有规定。

(二)药效学验证试验：

1.肿瘤：

选择小鼠肝癌、乳腺癌模型(选择有资质实验动物中心购买或作试验)，体 重19-20g，随机分组，每组20只。

组：本发明药物实施例1-10例依次分为第1-10组；第1-5组用前列 地尔组合药物冻干针剂，每次剂量1000μg/kg，腹腔注射，每天1次；第6-10 组，每次用1500μg/kg剂量的前列地尔组合药物肠溶胶囊口服，每天1次；

对照组：已知抗肝癌药物盐酸表柔比星阳性对照组为第11组，每次剂量 50mg/kg，每天1次，腹腔注射；已知抗乳腺癌药物环磷酰胺阳性对照组为第12 组，每次剂量50mg/kg，每星期1次，腹腔注射；现有技术注射用前列地尔阳性 对照药物为第13组，每次剂量1000μg/kg，腹腔注射，每天1次；

各组均给药3星期，存活的小鼠停药24小时后处死，称量瘤重，计算平均 值；并统计注射疼痛率，注射后小鼠有跳起、尖叫、翻滚、全身抖动等现象之 一者，均判为注射疼痛。

试验结果如下表：

可见，本发明与阳性对照药比：比阳物治癌谱广，疗效高，副作用面 小。

2.脑卒中、降血压、血脂：

选动脉硬化引起的自发性高血压大鼠(SHR)模型，随机分组，每组10只， 给药2周后，血压下降20mmHg以上或下降到正常血压水平为有效；

选脑卒中自发性高血压大鼠(SHRSP)模型，随机分组，每组10只，每天 饮1％盐水，比较空白对照组、阳物对照组、和本发明药物组的死亡率， 给药2周；

给药剂量和方法：

本发明药物实施例1-10例，依次分为第1-10组；其中第1-5组依次用实 施例1-5例发明的前列地尔组合药物，每次剂量为1000μg/kg，腹腔注射给药， 每天1次；其中第6-10组依次用实施例6-10例发明的前列地尔组合药物，每 次剂量为1500μg/kg，口服给药，每天1次；阳物组为第11组，为现有技 术的注射用前列地尔，每次剂量为1000μg/kg，腹腔注射给药，每天1次；空 白对照组为11组，不给药，每天饮1％盐水。

试验结果如表：

可见，本发明药物疗效好，副作用小。

3.乙型肝炎：

动物模型：取1日龄北京雌鸭感染乙型肝炎病毒模型，每组30只；

试验方法：在感染前、感染后7天、给药后第5天和第10天、停药后5 天，分别杀剖三只鸭，取血肝，测定血清DHBV-DNA，计算各组给药后比给药前 的抑制百分率；

分组、给药剂量及方法：以本发明的的前列地尔组合药物给药，依实施例 1-10例依次为第1-10组，阳性对照组是阿德福韦酯给药组。为第11组；本发 明的前列地尔组合药在第1-5组，以每次1000μg/kg剂量腹腔注射，每天1次， 第6-10组以每次1500μg/kg剂量口服给药，每天1次；11个组均给药10天； 统计各组在不同检测时间的DHBV-DNA抑制百分率以及停药后的乙肝复发率。

试验结果如下表：

可见，本发明药物效果显著并且有副作用者少。以上提供实施例，仅是 提供几个具体实例，不影响保护范围。