一种免疫染机

本发明属于检测设备技术领域，具体涉及的是应用于医院病理组织切片中的一种免疫染机。

免疫染是利用抗原与抗体特异性结合的原理，检测特定蛋白（抗原）的表达情况，是发现机体在生理或病理状态下功能变化最常用的方法之一，最常用的是免疫组织化学染和免疫荧光染。在实验过程中，经常需要研究至少两种抗原/蛋白在同一细胞或组织标本中的表达，以便明确它们各自的定位或共表达情况。目前最常采用的方法是流式细胞术，但这种技术需要的细胞量较大，且经过固定和石蜡包埋的组织用于流式细胞术检测效果不佳，不能准确显示各种抗原在组织和细胞在体内的自然分布状况。如果组织标本量极少（如细针穿刺标本）或组织内待检测细胞量极少，则很难进行流式细胞术检测。通过在组织切片上对同一标本进行多次免疫染来研究多种抗原的表达，则能解决这个问题。例如，对组织切片进行抗原A的免疫荧光染后，由于抗原与抗体的结合为并不牢固的非共价结合，可以把组织放入缓冲液中，适当加热，就可使已经与抗原A结合的抗体及相应的显剂脱离下来，又可以进行抗原B的免疫荧光染，采用同样的方法还能进行抗原C、抗原D的染。目前已经出现针对组织切片的多重免疫染技术，即对同一组织切片进行一次染，研究多种抗原表达，如一种基于同种属来源第一抗体的免疫荧光双重标记方法（CN201410099873.2），这种方法的缺点是，在具体实施过程中，需要进行标记的抗原常不仅仅是两种，多数情况下是5-10种，甚至达20余种，这种多重染方法不能满足需要，需要进行多次染。当然，可将多重染与多次染方法结合起来，能提高工作效率。另外，在多次染过程中，需要对组织切片进行每次染后拍照，将多次的染照片进行比对，才能弄清楚同一个细胞究竟表达哪些抗原，因而，所提供的装置还要便于在显微镜下拍照。本申请者已经公开一种用于对组织切片进行多次免疫染的载片夹（201520587855.9），提供一种便于手工或机器全自动化操作的用于对组织切片进行多次免疫染的载片夹，为了克服手工操作带来的劳动量增加及不易标准化等不足，有必要提供一种具备多次免疫染和图像采集功能的全自动免疫染仪。

本发明的目的在于提供一种免疫染机，其所要解决的技术问题在于：采用现有免疫染仪无法对同一组织切片进行多次免疫染，无法对同一组织切片进行交替的免疫染和图像采集。

为解决上述技术问题，本发明提供一种免疫染机，其包括：框架及支撑装置、免疫染装置、图像采集装置、加热装置和控制系统。

所述框架及支撑装置，由四根大框架安装螺栓和相应的大框架安装螺母将上盖板、下盖板、左盖板、右盖板、前盖板、后盖板和载片夹安放板安装在一起，形成以载片夹安放板分隔为上下两部分的长方体盒状结构。所述载片夹安放板呈“H”形，包括一条横梁和两条臂。

所述免疫染装置，包括微量移液器、移液器移动载架、上液压缸、纵向液压缸、移液器液压缸、中液压缸、下液压缸、吸液管载片、载片夹和真空泵、框架上部上导轨和框架上部下导轨及筒形载体。筒形载体安装在载片夹安放板横梁上面靠右侧的部位，用于储存载液。在上盖板上以从左向右的方向开一个条形的窗，用于安装移液器移动载架在框架上部上导轨和框架上部下导轨上。所述上液压缸从左向右安装在上盖板上，用于推动移液器移动载架左右位移；纵向液压缸从上向下安装在上盖板上，用于推动移液器移动载体上下位移；移液器液压缸安装在移动载体上，可推动微量移液器取液推杆，实现微量移液器取液及吹液功能；中液压缸从左向右安装在载片夹安放板的横梁下面靠近左侧的部位，用于推动吸液管载片至载片夹安放板所安放载片夹的正下方以及相应的复位。所述载片夹安装在载片夹安放板上筒形载体的左侧。1-20张载片夹大小一致，与载片夹安放板的预留安装部位吻合，所有载片夹以同方向呈线状整齐横向并列排列。所述各个液压缸均安装独立的位移传感器。

所述载片夹如专利（一种用于对组织切片进行多次免疫染的载片夹：201520587855.9）所述，由无透明塑料制成，上片为筛状，与一种用于对组织切片进行多次免疫染的载片夹的差别在于下片的边缘有至少一个出液孔，该出液孔与上片与下片之间的缝隙相通，使上片和下片之间的液体可以通过这个孔被吸掉，上片与下片之间承载组织切片。

所述图像采集装置，包括下液压缸、框架下部下导轨、框架下部上导轨、数字病理切片扫描系统移动载体和数字病理切片扫描系统。所述框架下部下导轨、框架下部上导轨以从左向右的方向安装在下盖板上，所述数字病理切片扫描系统移动载体安装在框架下部下导轨和框架下部上导轨上，所述数字病理切片扫描系统安装在数字病理切片扫描系统移动载体上，所述下液压缸安装在数字病理切片扫描系统移动载体的左侧，用于推动数字病理切片扫描系统到达载片夹所在位置及相应的复位。所述数字病理切片扫描系统与传统数字病理切片扫描系统的差别在于：所采用的显微镜为倒置显微镜，可提供至少白、红、绿和蓝四种光源。

所述主控制器获取各液压缸的位移传感器数据，并通过调节对应液压缸电磁阀实现各液压缸的精确控制；

所述主控制器将数字病理切片扫描系统移动至载片夹位置后发送指令给扫描仪开始扫描，扫描的数据传输至PC机处理，一个样本扫描完成后主控制器将扫描仪移动至下一个样本位置，并再次发送指令个扫描仪，使其重新开始扫描。

所述主控制器获取温度传感器数据并通过调节加热装置实现对样本周围温度的控制。所述加热装置安装在下板上，温度传感器安装在框架内，使框架内的温度控制在37℃（工作环境温度必须低于37℃）。

工作原理及过程：

在工作时，将承载了组织切片（石蜡切片需经脱水）的载片夹放置于载片夹安放板的预设位置，将载液加注到筒形载体中；根据拟吸取的载液所在位置，上液压缸驱动移液器移动载架使微量移液器沿左右方向位移，在到达筒形载体上方后，纵向液压缸推动移液器移动载体使微量移液器向下位移，使移液器的吸头下降到达载液，移液器液压缸向上拉起微量移液器取液推杆，实现微量移液器取液功能；然后由纵向液压缸驱动移液器移动载体使微量移液器向上位移，使移液器的吸头上升而离开载液，由上液压缸推动移液器移动载架使微量移液器向右位移，当移动至拟加注载液的载片夹所在位置，纵向液压缸推动移液器移动载架使微量移液器向下位移至接近载片夹，由移液器液压缸向下推微量移液器取液推杆，将液体准确的加注到组织切片上。经过设定的一定时间后，中液压缸推动吸液管载片至载片夹的正下方，真空泵开启，吸去载片夹内的载液，然后可以类似的步骤进行下一种载液的加注。若拟进行图像采集，下液压缸驱动数字病理切片扫描系统至载片夹所在位置，并在扫描完成后下液压缸驱动数字病理切片扫描系统复位。在完成图像采集后，再进行下一步操作。在整个过程中，主控制器通过获取各液压缸的位移传感器数据而精确控制对应液压缸电磁阀；精确控制数字病理切片扫描系统移动至载片夹位置及相应的扫描过程，扫描的数据传输至PC机处理；获取温度传感器数据并通过调节加热装置实现对样本周围温度的控制。

本发明与现有技术相比的有益效果是：能对同一组织切片进行多次免疫染；能对同一组织切片进行交替的免疫染和图像采集。

图1为本发明的正剖视结构图；

图2为本发明的左侧视图；

图3为本发明的右侧视图；

图4为本发明的载片夹安放板结构形状图；

图5为本发明的载片夹结构图；

图6为本发明的各液压缸安装方式图；

图7为本发明的控制结构模块示意图。

图中：1、大框架安装螺栓；2、大框架安装螺母；3、上液压缸；4~7、上液压缸安装螺钉；8、框架上部上导轨；9、框架上部上导轨安装螺钉；10~13、纵向液压缸安装螺钉；14~17、纵向液压缸安装螺钉；18、纵向液压缸；19、移动载架；20、移液器移动载体；21、框架上部下导轨；22、大框架安装螺母；23、大框架安装螺栓；24、移液器液压缸；25、移液器液压缸安装螺钉；26、微量移液器；27、移液器安装条；28、移液器安装螺钉；29、载液及筒形载体；30、右盖板；31、下盖板；32、加热装置；33、框架下部下导轨；34、框架下部上导轨；35、框架下部导轨安装螺钉；36、数字病理切片扫描系统移动载体；37~38、数字病理切片扫描系统安装螺钉；39、数字病理切片扫描系统；40、真空泵安装支架；41、真空泵；42、中液压缸支架；43、下液压缸；44、中液压缸横支架；45、中液压缸；46、载片夹安放板；47、吸液总管；48、中液压缸安装螺钉；49、吸液管载片；50、吸液橡胶管；51、左盖板；52、上盖板；53、载片夹；54、上片；55、下片；56、出液孔；57、组织切片。

下面结合附图对本发明的实施方式做进一步描述：

本发明所述框架及支撑装置，由四根大框架安装螺栓1和相应的大框架安装螺母2将上盖板52、下盖板31、左盖板51、右盖板30、前盖板、后盖板和载片夹安放板46安装在一起，形成以载片夹安放板46分隔为上下两部分的长方体盒状结构。所述载片夹安放板46呈“H”形，包括一条横梁和两条臂。

所述免疫染装置，包括微量移液器26、移液器移动载架19、上液压缸3、纵向液压缸18、移液器液压缸24、中液压缸45、下液压缸43、吸液管载片49、载片夹53和真空泵41、框架上部上导轨8和框架上部下导轨21及筒形载体29。筒形载体29安装在载片夹安放板46横梁上面靠右侧的部位。在上盖板52上以从左向右的方向开一个条形的窗，用于安装移液器移动载架19在框架上部上导轨8和框架上部下导轨21上。所述上液压缸3从左向右安装在上盖板52上；纵向液压缸18从上向下安装在上盖板52上；移液器液压缸24安装在移液器移动载体20上；中液压缸45从左向右安装在载片夹安放板46的横梁下面靠近左侧的部位；所述载片夹53安装在载片夹安放板46的横梁上筒形载体29的左侧；20张载片夹53大小一致，与载片夹安放板46的预留安装部位吻合，所有载片夹53以同方向呈线状整齐横向并列排列；所述各个液压缸均安装独立的位移传感器。

所述载片夹53，由无透明塑料制成，上片54为筛状，下片55仅在边缘有一个出液孔56，该出液孔与上片54与下片55之间的缝隙相通，上片54与下片55之间承载组织切片57。

所述图像采集装置，包括下液压缸43、框架下部下导轨33、框架下部上导轨34、数字病理切片扫描系统移动载体36和数字病理切片扫描系统39。所述框架下部下导轨33、框架下部上导轨34以从左向右的方向安装在下盖板上31，所述数字病理切片扫描系统移动载体36安装在框架下部下导轨33、框架下部上导轨34上，所述数字病理切片扫描系统39安装在数字病理切片扫描系统移动载体36上，下液压缸43安装在数字病理切片扫描系统移动载体36的左侧。所述数字病理切片扫描系统39采用的显微镜为倒置显微镜，可提供白、红、绿和蓝四种光源。

所述主控制器获取各液压缸的位移传感器数据并对各个液压缸进行精确控制，将数字病理切片扫描系统39获取的数据传输至PC机处理；所述主控制器获取温度传感器数据并通过调节加热装置32实现对样本周围温度的控制。所述加热装置32安装在下盖板31上，温度传感器安装在框架内，使框架内的温度控制在37℃；所述一种免疫染机的工作环境温度为室温。