噻吩衍生物

噻吩衍生物

发明背景

本发明的目的在于发现具有有价值的性质的新型化合物，特别是可用于制备药物的那些。

本发明涉及将抑制HIF-2α (缺氧诱导因子)的噻吩衍生物。本发明的化合物因此可用于疾病如癌症。

本发明还提供了制备这些化合物的方法、包含这些化合物的药物组合物及利用包含这些化合物的药物组合物疾病的方法。

向组织充足的氧供应对于维持哺乳动物细胞功能和生理至关重要。组织的氧供应不足是许多其中血流量不足以提供足够的氧合的病理生理状况的特征，例如缺血性病症、癌症和动脉粥样硬化。组织的缺氧(低氧)环境会激活信号级联放大，这驱动事件如血管生成(新血管生成)、葡萄糖代谢和细胞存活/死亡中牵连的多种基因的转录的诱导或阻遏。这种缺氧转录反应的关键在于转录因子，即缺氧诱导因子(HIF)。

HIF在多种癌症中通过缺氧依赖和独立机制而失调，并且表达与患者预后不良相关。缺氧诱导因子(HIF)，包括HIF-1α和HIF-2α，是介导细胞对氧供应减少的反应的转录因子。这些蛋白质在缺氧(低氧)下变得稳定并随后激活基因的表达以促进细胞存活和增殖。HIF蛋白在许多类型的癌症中均被激活并已牵连在癌症的发生、发展和转移中。HIF-2α的作用在透明细胞肾细胞癌(ccRCC)中尤其重要。在大多数ccRCC肿瘤中，靶向HIF-2α以降解的肿瘤抑制von Hippel-Lindau蛋白(pVHL)将失活，导致HIF-2α的积累和驱动肾癌肿瘤发生的基因的转录。包括肾细胞癌在内的某些癌症显示出高水平的HIF-2α和对HIF-2α信号传导的依赖性。

在膀胱、乳腺、结肠、肝脏、卵巢、胰腺、前列腺和肾脏的各种人类肿瘤以及与肿瘤相关的巨噬细胞中都已检测到HIF-2α蛋白。

本发明的化合物在包括生物化学、生物物理和细胞测定在内的多种相关环境中显示出对HIF-2α的高活性。

已发现，根据本发明的化合物及其盐具有非常有价值的药理学性质，同时具有良好的耐受性。

宿主或患者可属于任何哺乳动物物种，例如灵长类物种，特别是人类；啮齿动物，包括小鼠、大鼠和仓鼠；兔子；马、牛、狗、猫等。动物模型对于实验研究很有意义，为人类疾病的提供模型。

特定细胞对用根据本发明的化合物的敏感性可通过体外试验来确定。通常，将细胞的培养物与各种浓度的根据本发明的化合物合并一段时间，该时间足以允许活性剂如抗IgM诱导细胞反应如表面标志物的表达，通常在约一小时至一周之间。体外试验可使用来自血液或来自活检样品的培养细胞进行。所表达的表面标志物的量使用识别该标志物的特异性抗体通过流式细胞术来评估。

剂量随所使用的特定化合物、特定的疾病、患者状况等而异。剂量通常足以大幅减少目标组织中不希望的细胞体，同时维持患者的生存能力。通常继续直至发生细胞负担的大幅减少，例如至少约50%的减少，并可继续直到体内基本上不再检测到不希望的细胞。

现有技术

用于癌症的其他HIF-2α抑制剂描述于WO 2018/031680 A1、WO 2015/035223A1、WO 2016/145045 A1、WO 2016/145032 A1、WO 2016/144825 A1、WO 2016/144826 A1和WO 2016/168510 A1中。

H. Cho等人. Nature, Vol. 539, 2016, 107-122 (doi:10.1038/nature19795)和W. Chen等人. Nature, Vol. 539, 2016, 112-130 (doi:10.1038/nature19796)描述了HIF-2α拮抗剂的临床前靶向疗效研究。

S.E. Wilkins ChemMedChem, 2016, 11, 773-786描述了对HIF-2α靶向途径的综述。

发明内容

本发明涉及式I的化合物

其中

R1表示A、Ar、Cyc、Het、COA或CN，

R2表示SO2A、SOA、SA、SO2NHA、SO2NA2、S(=NH,=O)A、S(=NH)2A、NO2、Hal、CN、A、Het1、COOH或COOA，

R3表示H或Hal，

R4表示H或Hal，

A表示具有1-6个C-原子的无支链或支链烷基，其中1-7个H原子可被替换为OH、F、Cl和/或Br和/或其中一个或两个不相邻的CH2基团可被替换为O和/或NH基团，

Cyc是具有3、4、5、6或7个C-原子的环状烷基，

Ar表示苯基，其是未取代的或被Hal、A、[C(R5)2]pOR5、O[C(R5)2]pOR5、[C(R5)2]pN(R5)2、O[C(R5)2]pN(R5)2、[C(R5)2]pHet1、NO2、CN、[C(R5)2]pCOOR5、O[C(R5)2]pCOOR5、CON(R5)2、NR5COA、NR5SO2A、SO2N(R5)2、S(O)2A、COHet1、O[C(R5)2]pHet1、NHCOOA、NHCON(R5)2、NHCOO[C(R5)2]mN(R5)2、NHCOO[C(R5)2]pHet1、NHCONH[C(R5)2]mN(R5)2、NHCONH[C(R5)2]pHet1、OCONH[C(R5)2]mN(R5)2、OCONH[C(R5)2]pHet1、S(O)2Het1和/或COA一取代、二取代或三取代，

Het表示具有1至4个N、O和/或S原子的单环或双环芳族不饱和或饱和杂环，其可以是未取代的或被Hal、A、NH2、NHA、NA2、COOH、COOA、CONH2、CONHA、CONA2、CONHAr、S(O)mA、NHCH2Ar1、CN、OH和/或OA一取代、二取代或三取代，

Het1表示具有1至4个N、O和/或S原子的单环或双环芳族不饱和或饱和杂环，其可以是未取代的或被Hal、A、COOA、NH2、NHA和/或NA2一取代、二取代或三取代，

Ar1表示未取代或被Hal、A、OH和/或OA一取代、二取代或三取代的苯基，

R5表示H或具有1、2、3或4个C-原子的烷基，

Hal表示F、Cl、Br或I，

n表示1、2或3，

m表示1、2或3，

p表示0、1、2、3或4，

及其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体，包括它们所有比率的混合物。

本发明还涉及这些化合物的旋光形式(立体异构体)、对映异构体、外消旋体、非对映异构体以及水合物和溶剂化物。

此外，本发明涉及式I化合物的药学上可接受的衍生物。

术语化合物的溶剂化物用于描述惰性溶剂分子向化合物上的加合，所述加合因它们的相互吸引力而形成。溶剂化物为例如一水合物或二水合物或醇盐。

应理解，本发明还涉及盐的溶剂化物。

术语药学上可接受的衍生物例如是指根据本发明的化合物的盐以及所谓的前药化合物。

如本文所用并且除非另有说明，否则术语“前药”是指式I化合物的衍生物，其可在生物学条件下(体外或体内)水解、氧化或以其他方式反应以提供活性化合物、特别是式I化合物。前药的实例包括但不限于式I化合物的衍生物和代谢物，其包括可生物水解的部分如可生物水解的酰胺、可生物水解的酯、可生物水解的氨基甲酸酯、可生物水解的碳酸酯、可生物水解的酰脲和可生物水解的磷酸酯类似物。在某些实施方案中，具有羧基官能团的化合物的前药为羧酸的低级烷基酯。羧酸酯通过酯化分子上存在的任何羧酸部分而方便地形成。前药通常可使用熟知的方法制备，如Burger's Medicinal Chemistry and DrugDiscovery第6版 (Donald J. Abraham编辑, 2001, Wiley)和Design and Applicationof Prodrugs (H.Bundgaard编辑, 1985, Harwood Academic Publishers Gmfh)所描述的那些。

表述“有效量”表示在组织、系统、动物或人中引起例如研究人员或医师所寻求或期望的生物学或医学反应的药剂或药物活性成分的量。

另外，表述“有效量”表示与尚未接受该量的相应受试者相比具有以下结果的量：

改善疾病、综合征、病况、主诉、病症或副作用的、治愈、预防或消除，或者也减少疾病、主诉或病症的进展。

表述“有效量”也涵盖对增加正常生理功能有效的量。

本发明还涉及式I化合物的混合物的用途，例如两种非对映异构体例如以比率1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:10、1:100或1:1000的混合物。

这些混合物特别优选立体异构化合物的混合物。

“互变异构体”是指彼此平衡的化合物的异构形式。异构形式的浓度将取决于发现该化合物的环境并可取决于例如该化合物是固体还是在有机或水溶液中而不同。

本发明涉及式I化合物及其盐，并涉及制备式I化合物及其药学上可接受的盐、溶剂化物、互变异构体和立体异构体的方法，特征在于

a)

使式II的化合物

其中R2、R3、R4和n具有权利要求1中所指示的含义并且X为F、Cl、Br或I，

与式III的化合物

L-R1 III

其中R1具有权利要求1中所指示的含义，并且L表示H、硼酸或硼酸酯基团，

反应，或

b)

使式IV的化合物

其中R1、R2、R3、R4和n具有权利要求1中所指示的含义，

与NaBH4反应

和/或

将式I的碱或酸转化为其盐之一。

除非另有明确说明，否则在上文和下文，基团R1、R2、R3、R4和n具有针对式I所指示的含义。

A表示烷基，其是无支链(直链)或支链的，并具有1、2、3、4、5、6、7或8个C原子。A优选表示甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基，此外还表示戊基、1-、2-或3-甲基丁基、1,1-、1,2-或2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、己基、1-、2-、3-或4-甲基戊基、1,1-、1,2-、1,3-、2,2-、2,3-或3,3-二甲基丁基、1-或2-乙基丁基、1-乙基-1-甲基丙基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-或1,2,2-三甲基丙基，更优选例如三氟甲基。

A非常特别优选表示具有1、2、3、4、5或6个C原子的烷基，优选甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、三氟甲基、五氟乙基或1,1,1-三氟乙基。

此外，A优选表示CH2OCH3、CH2CH2OH或CH2CH2OCH3。

此外，A优选表示具有1-6个C-原子的无支链或支链烷基，其中1-5个H原子可被替换为OH和/或F。

R1优选表示Ar或Het。

R2优选表示SO2A，最优选SO2CH3。

R3优选表示H或F。

R4优选表示H或F。

Cyc表示环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基。

不管进一步的取代如何，Het表示例如2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-异噁唑基、2-、4-或5-噻唑基、3-、4-或5-异噻唑基、2-、3-或4-吡啶基、2-、4-、5-或6-嘧啶基，更优选1,2,3-三唑-1-、-4-或-5-基、1,2,4-三唑-1-、-3-或5-基、1-或5-四唑基、1,2,3-噁二唑-4-或-5-基、1,2,4-噁二唑-3-或-5-基、1,3,4-噻二唑-2-或-5-基、1,2,4-噻二唑-3-或-5-基、1,2,3-噻二唑-4-或-5-基、3-或4-哒嗪基、吡嗪基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、4-或5-异吲哚基、吲唑基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并异噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并异噻唑基、4-、5-、6-或7-苯并-2,1,3-噁二唑基、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基、1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基、3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基、5-或6-喹喔啉基、2-、3-、5-、6-、7-或8-2H-苯并-1,4-噁嗪基、吡咯并吡啶基、嘌呤基，进一步优选1,3-苯并二茂-5-基、1,4-苯并二氧六环-6-基、2,1,3-苯并噻二唑-4-或-5-基、2,1,3-苯并噁二唑-5-基、氮杂双环[3.2.1]-辛基或二苯并呋喃基。

杂环基团也可被部分或完全氢化。

不管进一步的取代如何，Het因此还可表示例如2,3-二氢-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基、2,5-二氢-2-、-3-、-4-或5-呋喃基、四氢-2-或-3-呋喃基、1,3-二氧戊环-4-基、四氢-2-或-3-噻吩基、2,3-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基、2,5-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基、1-、2-或3-吡咯烷基、四氢-1-、-2-或-4-咪唑基、2,3-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡唑基、四氢-1-、-3-或-4-吡唑基、1,4-二氢-1-、-2-、-3-或-4-吡啶基、1,2,3,4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-或-6-吡啶基、1-、2-、3-或4-基、2-、3-或4-吗啉基、四氢-2-、-3-或-4-吡喃基、1,4-二氧六环基、1,3-二氧六环-2-、-4-或-5-基、六氢-1-、-3-或-4-哒嗪基、六氢-1-、-2-、-4-或-5-嘧啶基、1-、2-或3-哌嗪基、1,2,3,4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-喹啉基、1,2,3,4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-异喹啉基、2-、3-、5-、6-、7-或8-3,4-二氢-2H-苯并-1,4-噁嗪基，更优选2,3-、3,4-、2,3-亚乙基二氧苯基、3,4-亚乙基二氧苯基、3,4-(二氟亚甲基二氧)苯基、2,3-二氢苯并呋喃-5-或6-基、2,3-(2-氧代亚甲基二氧)苯基或另外3,4-二氢-2H-1,5-苯并二氧杂环庚-6-或-7-基，更优选2,3-二氢苯并呋喃基、2,3-二氢-2-氧代呋喃基、3,4-二氢-2-氧代-1H-喹唑啉基、2,3-二氢苯并噁唑基、2-氧代-2,3-二氢苯并噁唑基、2,3-二氢苯并咪唑基、1,3-二氢吲哚、2-氧代-1,3-二氢吲哚或2-氧代-2,3-二氢苯并咪唑基。

不管进一步的取代如何，Het1表示例如2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-异噁唑基、2-、4-或5-噻唑基、3-、4-或5-异噻唑基、2-、3-或4-吡啶基、2-、4-、5-或6-嘧啶基，更优选1,2,3-三唑-1-、-4-或-5-基、1,2,4-三唑-1-、-3-或5-基、1-或5-四唑基、1,2,3-噁二唑-4-或-5-基、1,2,4-噁二唑-3-或-5-基、1,3,4-噻二唑-2-或-5-基、1,2,4-噻二唑-3-或-5-基、1,2,3-噻二唑-4-或-5-基、3-或4-哒嗪基、吡嗪基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、4-或5-异吲哚基、吲唑基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并异噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并异噻唑基、4-、5-、6-或7-苯并-2,1,3-噁二唑基、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基、1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基、3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基、5-或6-喹喔啉基、2-、3-、5-、6-、7-或8-2H-苯并-1,4-噁嗪基、吡咯并吡啶基、嘌呤基，进一步优选1,3-苯并二茂-5-基、1,4-苯并二氧六环-6-基、2,1,3-苯并噻二唑-4-或-5-基、2,1,3-苯并噁二唑-5-基、氮杂双环[3.2.1]-辛基或二苯并呋喃基。

杂环基团也可被部分或完全氢化。

不管进一步的取代如何，Het1因此还可表示例如2,3-二氢-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基、2,5-二氢-2-、-3-、-4-或5-呋喃基、四氢-2-或-3-呋喃基、1,3-二氧戊环-4-基、四氢-2-或-3-噻吩基、2,3-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基、2,5-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基、1-、2-或3-吡咯烷基、四氢-1-、-2-或-4-咪唑基、2,3-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡唑基、四氢-1-、-3-或-4-吡唑基、1,4-二氢-1-、-2-、-3-或-4-吡啶基、1,2,3,4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-或-6-吡啶基、1-、2-、3-或4-基、2-、3-或4-吗啉基、四氢-2-、-3-或-4-吡喃基、1,4-二氧六环基、1,3-二氧六环-2-、-4-或-5-基、六氢-1-、-3-或-4-哒嗪基、六氢-1-、-2-、-4-或-5-嘧啶基、1-、2-或3-哌嗪基、1,2,3,4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-喹啉基、1,2,3,4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-异喹啉基、2-、3-、5-、6-、7-或8-3,4-二氢-2H-苯并-1,4-噁嗪基，更优选2,3-、3,4-、2,3-亚乙基二氧苯基、3,4-亚乙基二氧苯基、3,4-(二氟亚甲基二氧)苯基、2,3-二氢苯并呋喃-5-或6-基、2,3-(2-氧代亚甲基二氧)苯基或另外3,4-二氢-2H-1,5-苯并二氧杂环庚-6-或-7-基，更优选2,3-二氢苯并呋喃基、2,3-二氢-2-氧代呋喃基、3,4-二氢-2-氧代-1H-喹唑啉基、2,3-二氢苯并噁唑基、2-氧代-2,3-二氢苯并噁唑基、2,3-二氢苯并咪唑基、1,3-二氢吲哚、2-氧代-1,3-二氢吲哚或2-氧代-2,3二氢苯并咪唑基。

Het优选表示具有1至4个N、O和/或S原子的单环芳族杂环，其可以是未取代的或被Hal、A、CN、OH和/或OA一取代、二取代或三取代。

Het特别优选表示吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基或嘧啶基，它们中的每一个可以是未取代的或被Hal、A和/或CN一取代、二取代或三取代。

Ar表示例如苯基、邻-、间-或对-甲苯基、邻-、间-或对-乙基苯基、邻-、间-或对-丙基苯基、邻-、间-或对伞花烃基、邻-、间-或对-叔丁基苯基、邻-、间-或对-羟基苯基、邻-、间-或对-硝基苯基、邻-、间-或对-氨基苯基、邻-、间-或对-(N-甲基氨基)苯基、邻-、间-或对-(N-甲基氨基羰基)苯基、邻-、间-或对-乙酰氨基苯基、邻-、间-或对-甲氧基苯基、邻-、间-或对-乙氧基苯基、邻-、间-或对-乙氧基羰基苯基、邻-、间-或对-(N,N-二甲基氨基)苯基、邻-、间-或对-(N,N-二甲基氨基羰基)苯基、邻-、间-或对-(N-乙基氨基)苯基、邻-、间-或对-(N,N-二乙基氨基)苯基、邻-、间-或对-氟苯基、邻-、间-或对-溴苯基、邻-、间-或对-氯苯基、邻-、间-或对-(甲基磺酰氨基)苯基、邻-、间-或对-(甲基磺酰基)苯基、邻-、间-或对-氰基苯基、邻-、间-或对-羧基苯基、邻-、间-或对-甲氧基羰基苯基、邻-、间-或对-氨基磺酰基苯基、邻-、间-或对-(苄基氨基)苯基，更优选2,3-、2,4-、2,5-、2,6-、3,4-或3,5-二氟苯基、2,3-、2,4-、2,5-、2,6-、3,4-或3,5-二氯苯基、2,3-、2,4-、2,5-、2,6-、3,4-或3,5-二溴苯基、2,4-或2,5-二硝基苯基、2,5-或3,4-二甲氧基苯基、3-硝基-4-氯苯基、3-氨基-4-氯-、2-氨基-3-氯-、2-氨基-4-氯-、2-氨基-5-氯-或2-氨基-6-氯苯基、2-硝基-4-N,N-二甲基氨基-或3-硝基-4-N,N-二甲基氨基苯基、2,3-二氨基苯基、2,3,4-、2,3,5-、2,3,6-、2,4,6-或3,4,5-三氯苯基、2,4,6-三甲氧基苯基、2-羟基-3,5-二氯苯基、对-碘苯基、3,6-二氯-4-氨基苯基、4-氟-3-氯苯基、2-氟-4-溴苯基、2,5-二氟-4-溴苯基、3-溴-6-甲氧基苯基、3-氯-6-甲氧基苯基、3-氯-4-乙酰氨基苯基、3-氟-4-甲氧基苯基、3-氨基-6-甲基苯基、3-氯-4-乙酰氨基苯基或2,5-二甲基-4-氯苯基。

Ar特别优选表示未取代或被Hal和/或CN一取代、二取代或三取代的苯基。

特别优选的式I化合物为

。

在整个本发明中，所有出现不止一次的基团可相同或不同，即彼此独立。

式I化合物可具有一个或多个手性中心并因此可以各种立体异构形式存在。式I涵盖所有这些形式。

相应地，本发明特别涉及其中所述基团中的至少之一具有上面指示的优选含义中之一的式I化合物。化合物的一些优选基团可由以下子式Ia至Ik表示，其符合式I并且其中未更详细指定的基团具有针对式I所指示的含义，但其中

在Ia中，R1表示Ar或Het；

在Ib中，R2表示SO2A；

在Ie中，R3表示H或F，R4表示H或F；

在If中，A表示具有1-6个C-原子的无支链或支链烷基，其中1-5个H原子可被替换为OH和/或F；

在Ig中，Ar表示苯基，其是未取代的或被Hal和/或CN一取代、二取代或三取代；

在Ih中，Het表示具有1至4个N、O和/或S原子的单环芳族杂环，其可以是未取代的或被Hal、A、CN、OH和/或OA一取代、二取代或三取代；

在Ii中，Het表示吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基或嘧啶基，它们中的每一个可以是未取代的或被Hal、OH、OA、A和/或CN一取代、二取代或三取代；

在Ij中，R1表示Ar或Het，

R2表示SO2A，

R3表示H或Hal，

R4表示H或Hal，

A表示具有1-6个C-原子的无支链或支链烷基，其中1-5个H原子可被替换为OH和/或F，

Ar表示苯基，其是未取代的或被Hal和/或CN一取代、二取代或三取代，

Het表示具有1至4个N、O和/或S原子的单环芳族杂环，其可以是未取代的或被Hal、A、CN、OH和/或OA一取代、二取代或三取代，

Hal表示F、Cl、Br或I，

n表示1、2或3；

及其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体，包括它们所有比率的混合物。

另外，式I化合物及用于其制备的起始材料通过本身已知的方法制备，如文献中所述(例如，在标准著作中，如Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie [Methodsof Organic Chemistry], Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart)，确切地讲，在已知并适合于所述反应的反应条件下进行。这里也可使用这里未更详细提及的本身已知的变体。

式II和III的起始化合物是公知的。然而，如果它们是新颖的，则可通过本身已知的方法来制备它们。

式I的化合物可优选通过使式II的化合物与式III的化合物反应来获得。

在式III的化合物中，L优选表示H、。

该偶联通常在高温下使用钯催化剂、碱和惰性溶剂进行。催化剂和反应条件的综述可见于文献中[参见例如S. Kotha等人., Tetrahedron 2002, 58, 9633-9695; T. E.Barder等人., J. Am. Chem. Soc. 2005, 127, 4685-4696]。该反应中优选的催化剂为四(三苯基膦)-钯(0)或PdCl2(PPh3)2。优选的碱为以水溶液采用的碳酸钠。该反应在在反应条件下呈惰性的有机溶剂如1,4-二氧六环、ACN、DMF或DMSO中或在水中或在这些溶剂的混合物中进行。优选地，该反应在1,4-二氧六环和水或ACN和水的混合物中进行。该反应通常在+100℃至+250℃之间、优选在+110℃至+150℃的温度下进行。加热优选通过单模微波装置进行。该反应通常在惰性气体气氛下、优选在氩气下进行。

此外，式I的化合物可优选通过使式IV的化合物与复合氢化物如NaBH4在惰性溶剂如MeOH或THF中反应获得。该反应通常在0℃至75℃之间、优选在10℃至40℃的温度下进行。

药用盐及其他形式

根据本发明的所述化合物可以其最终的非盐形式使用。另一方面，本发明还涵盖这些化合物以其药学上可接受的盐的形式的用途，其药学上可接受的盐可通过本领域已知的程序衍生自各种有机和无机酸和碱。式I化合物的药学上可接受的盐形式大部分是通过常规方法制备的。如果式I化合物包含羧基基团，则可通过使化合物与合适的碱反应以给出相应的碱加成盐来形成其合适的盐之一。这样的碱为例如碱金属氢氧化物，包括氢氧化钾、氢氧化钠和氢氧化锂；碱土金属氢氧化物，如氢氧化钡和氢氧化钙；碱金属醇盐，例如乙醇钾和丙醇钠；及各种有机碱，如、二乙醇胺和N-甲基谷氨酰胺。同样包括式I化合物的铝盐。就式I的某些化合物来说，可通过用药学上可接受的有机和无机酸例如卤化氢(如氯化氢、溴化氢或碘化氢)、其他无机酸及其相应的盐如硫酸盐、硝酸盐或磷酸盐等及烷基磺酸盐和单芳基磺酸盐如乙磺酸盐、甲苯磺酸盐和苯磺酸盐以及其他有机酸及其相应的盐如乙酸盐、三氟乙酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐、抗坏血酸盐等处理这些化合物来形成酸加成盐。相应地，式I化合物的药学上可接受的酸加成盐包括以下：乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、精氨酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐(苯磺酸盐(besylate))、硫酸氢盐、亚硫酸氢盐、溴化物、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、辛酸盐、氯化物、氯苯甲酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、磷酸二氢盐、二硝基苯甲酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、甲酸盐、半乳糖酸盐(来自粘酸)、半乳糖醛酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、甘油磷酸盐、半琥珀酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、马尿酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、碘化物、羟乙磺酸盐、异丁酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、偏磷酸盐、甲磺酸盐、甲基苯甲酸盐、磷酸一氢盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、苯基乙酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、膦酸盐、邻苯二甲酸盐，但这并不代表限制。

此外，根据本发明的化合物的碱盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁(III)盐、铁(II)盐、锂盐、镁盐、锰(III)盐、锰(II)盐、钾盐、钠盐和锌盐，但这无意于代表限制。在上面提及的盐中，优选铵盐；碱金属盐的钠盐和钾盐，及碱土金属盐的钙盐和镁盐。衍生自药学上可接受的有机无毒碱的式I化合物的盐包括以下的盐：伯胺、仲胺和叔胺，取代的胺，还包括天然存在的取代的胺，环胺，和碱性离子交换树脂，例如精氨酸，甜菜碱，，氯普鲁卡因，胆碱，N,N'-二苄基乙二胺(苄星)，二环己胺，二乙醇胺，二乙胺，2-二乙基氨基乙醇，2-二甲基氨基乙醇，乙醇胺，乙二胺，N-乙基吗啉，N-乙基，葡糖胺，氨基葡萄糖，组氨酸，海巴明，异丙胺，利多卡因，赖氨酸，甲葡胺，N-甲基-D-葡糖胺，吗啉，哌嗪，，多胺树脂，普鲁卡因，嘌呤，可可碱，三乙醇胺，TEA，三甲胺，三丙胺和三(羟甲基)甲胺(氨丁三醇)，但这无意于代表限制。

含碱性含氮基团的本发明化合物可使用试剂如以下试剂季铵化：(C1-C4)烷基卤化物，例如甲基、乙基、异丙基和叔丁基氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二(C1-C4)烷基酯，例如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯和硫酸二戊酯；(C10-C18)烷基卤化物，例如癸基、十二烷基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基氯化物、溴化物和碘化物；和芳基(C1-C4)烷基卤化物，例如苄基氯和苯乙基溴。根据本发明的水溶性和油溶性化合物都可使用这样的盐来制备。

优选的上述药用盐包括乙酸盐、三氟乙酸盐、苯磺酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、半琥珀酸盐、马尿酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、羟乙磺酸盐、扁桃酸盐、甲葡胺、硝酸盐、油酸盐、膦酸盐、新戊酸盐、磷酸钠、硬脂酸盐、硫酸盐、磺基水杨酸盐、酒石酸盐、硫代苹果酸盐、甲苯磺酸盐和氨丁三醇，但这无意于代表限制。

特别优选盐酸盐、、氢溴酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、磷酸盐、硫酸盐和琥珀酸盐。

式I的碱性化合物的酸加成盐通过使游离碱形式与足够量的所需酸接触从而使得以常规方式形成盐来制备。可通过使盐形式与碱接触并以常规方式分离游离碱来再生游离碱。就某些物理性质如在极性溶剂中的溶解度而言，游离碱形式在某些方面不同于其相应的盐形式；然而，就本发明的目的而言，盐在其他方面对应于其各自的游离碱形式。

如上所述，式I化合物的药学上可接受的碱加成盐用金属或胺如碱金属和碱土金属或有机胺形成。优选的金属为钠、钾、镁和钙。优选的有机胺为N,N'-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基-D-葡糖胺和普鲁卡因。

根据本发明的酸性化合物的碱加成盐通过使游离酸形式与足够量的所需碱接触从而使得以常规方式形成盐来制备。可通过使盐形式与酸接触并以常规方式分离游离酸来再生游离酸。就某些物理性质如在极性溶剂中的溶解度而言，游离酸形式在某些方面不同于其相应的盐形式；然而，就本发明的目的而言，盐在其他方面对应于其各自的游离酸形式。

如果根据本发明的化合物含不止一个能够形成这种类型的药学上可接受的盐的基团，则本发明也涵盖多盐。典型的多盐形式包括例如酒石酸氢盐、二乙酸盐、二富马酸盐、二甲葡胺、二磷酸盐、二钠和三盐酸盐，但这并不意在代表限制。

关于上述内容，可以看出，就目前而言，表述“药学上可接受的盐”被用来指一种活性成分，其包含呈其盐之一的形式的式I化合物，特别是如果该盐形式与活性成分的游离形式或更早使用的活性成分的任何其他盐形式相比赋予活性成分改善的药代动力学性质的话。活性成分的药学上可接受的盐形式还可首次为该活性成分提供所需的更早不具有的药代动力学性质，并可甚至就其在体内的功效而言对该活性成分的药效学具有积极影响。

同位素

此外，意图是式I化合物包括其同位素标记形式。除了化合物的一个或多个原子已被替换为原子质量或质量数不同于通常自然存在的原子的原子质量或质量数的一个或多个原子的事实外，式I化合物的同位素标记形式与该化合物相同。易于商购获得并可通过熟知的方法并入到式I化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，分别例如2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F和36Cl。含一个或多个上述同位素和/或其他原子的其他同位素的式I化合物或其药学上可接受的盐意在是本发明的一部分。可以许多有益的方式使用同位素标记的式I化合物。例如，已向其中并入例如放射性同位素如3H或14C的同位素标记的式I化合物适合于药剂和/或底物组织分布测定。这些放射性同位素，即氚(3H)和碳-14 (14C)，由于制备简单和可检测性优异而特别优选。向式I化合物中并入较重的同位素，例如氘(2H)，将因该同位素标记化合物较高的代谢稳定性而具有优势。较高的代谢稳定性直接对应于增加的体内半衰期或较低的剂量，这在大多数情况下将代表本发明的优选实施方案。同位素标记的式I化合物通常可通过进行本文的合成方案和相关描述中、实施例部分中和制备部分中公开的程序，用容易获得的同位素标记反应物替换非同位素标记反应物来制备。

出于通过一级动力学同位素效应来操纵化合物的氧化代谢的目的，也可向式I化合物中并入氘(2H)。一级动力学同位素效应是由同位素核的交换导致的、继而是由该同位素交换后形成共价键所需的基态能量的变化引起的化学反应速率的变化。较重的同位素的交换通常会导致化学键的基态能量的降低并因此导致速率限制键断裂中速率的降低。如果沿多产物反应的坐标在鞍点区域中或附近发生键断裂，则产物分布比率可被显著改变。说明如下：如果氘在不可交换的位置与碳原子键合，则速率差kM/kD = 2-7将是典型的。如果该速率差被成功地应用于易氧化的式I化合物，则该化合物在体内的分布可被大大改变并导致改善的药代动力学性质。

在发现和开发剂时，本领域技术人员试图优化药代动力学参数，同时保留所需的体外性质。可合理地假定许多具有不良药代动力学特性的化合物都易于氧化代谢。当前可用的体外肝微粒体测定法提供了关于这种类型的氧化代谢过程的有价值的信息，这继而允许合理设计通过抵抗这样的氧化代谢而具有改善的稳定性的氘代的式I化合物。由此获得式I化合物的药代动力学特性的显著改善，并可根据体内半衰期(t1/2)、最大效果浓度(Cmax)、剂量反应曲线下的面积(AUC)和F的增加及根据降低的清除率、剂量和材料成本来定量表示。

以下意在说明上述内容：作为其中各种氢原子组合被替换为氘原子以至于这些氢原子中的一些、大多数或全部被替换为氘原子的一系列类似物，制备具有多个潜在的氧化代谢攻击位点(例如苄基氢原子和与氮原子键合的氢原子)的式I化合物。半衰期的确定使得能够有利且准确地确定对氧化代谢的抵抗性的改善程度。以这种方式，确定了由于这种类型的氘-氢交换，母体化合物的半衰期可延长多达100%。

式I化合物中的氘-氢交换也可用于实现起始化合物的代谢物谱的有利修改以减少或消除不希望的有毒代谢物。例如，如果有毒代谢物是通过氧化性碳-氢(CH)键裂解而产生的，则可合理地假定，即使该特定的氧化不是速率决定步骤，氘代的类似物也将大大减少或消除不需要的代谢物的产生。关于氘-氢交换的现有技术的进一步信息可见于例如以下中：Hanzlik等人., J. Org. Chem. 55, 3992-3997, 1990；Reider等人., J. Org. Chem.52, 3326-3334, 1987, Foster, Adv. Drug Res. 14, 1-40, 1985；Gillette等人,Biochemistry 33(10) 2927-2937, 1994；和Jarman等人. Carcinogenesis 16(4), 683-688, 1993。

本发明还涉及药剂，其包含至少一种式I化合物和/或其药学上可接受的盐、溶剂化物和立体异构体(包括它们所有比率的混合物)及任选地赋形剂和/或佐剂。

药物制剂可以剂量单位的形式施用，每剂量单位包含预定量的活性成分。取决于所的病况、施用的方法及患者的年龄、体重和身体状况，这样的单位可包含例如0.5mg至1g、优选1mg至700mg、特别优选5mg至100mg根据本发明的化合物，或者药物制剂可以剂量单位的形式施用，每剂量单位包含预定量的活性成分。优选的剂量单位制剂为包含如上所指示的日剂量或分剂量或者其相应部分的活性成分的那些。此外，可使用制药领域中公知的方法来制备这种类型的药物制剂。

可使药物制剂适应于经由任何所需的合适方法施用，例如通过经口(包括颊或舌下)、直肠、鼻、局部(包括颊、舌下或透皮)、阴道或肠胃外(包括皮下、肌内、静脉内或皮内)方法。可使用制药领域已知的所有方法来制备这样的制剂，例如通过将活性成分与赋形剂或佐剂合并。

适应于经口施用的药物制剂可以单独的单元施用，如例如以胶囊剂或片剂；粉末剂或颗粒剂；在水性或非水性液体中的溶液剂或混悬剂；可食用泡沫剂或泡沫食品；或水包油液体乳剂或油包水液体乳剂。

因此，例如，在以片剂或胶囊剂的形式经口施用的情况下，可将活性成分组分与经口、无毒且药学上可接受的惰性赋形剂如例如乙醇、甘油、水等合并。粉末剂通过将化合物粉碎至合适的细小尺寸并将其与以类似方式粉碎的药物赋形剂如例如可食用的碳水化合物如例如淀粉或甘露醇混合来制备。同样可存在调味剂、防腐剂、分散剂和染料。

胶囊剂通过如上所述制备粉末混合物并用其填充成型的明胶壳来制备。可在填充操作之前向粉末混合物中添加助流剂和润滑剂，如例如高分散硅酸、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙或呈固体形式的聚乙二醇。同样可加入崩解剂或增溶剂如例如琼脂、碳酸钙或碳酸钠以便在服用胶囊后提高药剂的利用率。

另外，如果需要或必要，同样可向混合物中并入合适的粘结剂、润滑剂和崩解剂以及染料。合适的粘结剂包括淀粉、明胶、天然糖(如例如葡萄糖或β-乳糖)、由玉米制成的甜味剂、天然和合成橡胶(如例如阿拉伯树胶、黄芪胶或藻酸钠)、羧甲基纤维素、聚乙二醇、蜡等。这些剂型中使用的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。片剂可例如通过制备粉末混合物、将混合物制粒或干压、添加润滑剂和崩解剂并将整个混合物压制成片剂来配制。通过将以合适的方式粉碎的化合物与如上所述的稀释剂或碱以及任选地与粘结剂(如例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮)、溶解阻滞剂(如例如石蜡)、吸收促进剂(如例如季盐)和/或吸收剂(如例如膨润土、高岭土或磷酸二钙)混合，来制备粉末混合物。粉末混合物可通过用粘结剂如例如糖浆、淀粉糊、阿拉伯胶浆(acadia mucilage)或者纤维素或聚合物材料的溶液润湿并将其压过筛网来制粒。作为制粒的替代方法，可使粉末混合物通过压片机，得到形状不均匀的团块，将所述团块破碎以形成颗粒。颗粒可通过添加硬脂酸、硬脂酸盐、滑石或矿物油来润滑，以防止粘到片剂铸模上。然后将经润滑的混合物压制成片剂。还可将根据本发明的化合物与自由流动的惰性赋形剂合并，然后直接压制成片剂而不进行制粒或干压步骤。可存在由虫胶密封层、糖或聚合物材料的层以及蜡的光泽层组成的透明或不透明保护层。可向这些包衣添加染料以便能够区分不同的剂量单位。

口服液如例如溶液剂、糖浆剂和酏剂可以剂量单位的形式制备，以使得给定的量包含预定量的化合物。糖浆剂可通过将化合物溶解在具有合适的调味剂的水溶液中来制备，而酏剂则使用无毒的醇媒介物来制备。混悬剂可通过将化合物分散在无毒的媒介物中来配制。同样可添加增溶剂和乳化剂，如例如乙氧基化的异硬脂醇和聚氧乙烯山梨糖醇醚、防腐剂、调味添加剂如例如薄荷油或天然甜味剂或糖精或其他人造甜味剂等。

如果需要，可将用于经口施用的剂量单位制剂包封在微胶囊中。制剂还可以使得释放被延长或延迟的方式制备，如例如通过将微粒材料包覆或包埋在聚合物、蜡等中。

式I化合物及其药用盐、互变异构体和立体异构体也可以脂质体递送系统的形式施用，如例如小的单层囊泡、大的单层囊泡和多层囊泡。脂质体可由各种磷脂形成，如例如胆固醇、硬脂胺或磷脂酰胆碱。

式I化合物及其盐、互变异构体和立体异构体也可使用单克隆抗体作为化合物分子偶联的单个载体来递送。也可将化合物与作为靶向药剂载体的可溶性聚合物偶联。这样的聚合物可涵盖被棕榈酰基团取代的聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟丙基甲基丙烯酰氨基苯酚、聚羟乙基天冬酰氨基苯酚或聚环氧乙烷聚赖氨酸。所述化合物还可与适于实现药剂的受控释放的一类可生物降解聚合物偶联，可生物降解聚合物例如为聚乳酸、聚ε-己内酯、聚、聚原酸酯、聚缩醛、聚二羟基吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两亲性嵌段共聚物。

适应于透皮施用的药物制剂可以作为独立的膏药施用以与受体的表皮长时间、紧密接触。因此，例如，如Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986)中一般性地所述，可通过离子电渗疗法从膏药递送活性成分。

适应于局部施用的药物化合物可被配制为软膏剂、乳膏剂、混悬剂、洗剂、粉末剂、溶液剂、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂或油剂。

为了眼睛或其他外部组织，例如口和皮肤，制剂优选作为局部软膏剂或乳膏剂施用。在配制成软膏剂的情况下，活性成分可与石蜡或水混溶性乳膏基料一起采用。或者，可将活性成分配制成具有水包油乳膏基料或油包水基料的乳膏剂。

适应于局部施加到眼睛的药物制剂包括滴眼剂，其中将活性成分溶解或悬浮在合适的载体中，特别是水性溶剂中。

适应于在口中局部施加的药物制剂涵盖含片、锭剂和漱口剂。

适应于直肠施用的药物制剂可以栓剂或灌肠剂的形式施用。

其中载体物质为固体的适应于鼻腔施用的药物制剂包含粒度例如在20-500微米的范围内的粗粉，其以其中吸鼻烟、即通过经由从保持靠近鼻子的含粉末容器的鼻部通道快速吸入的方式施用。用于以液体作为载体物质的鼻腔喷雾剂或滴鼻剂施用的合适制剂涵盖在水或油中的活性成分溶液剂。

适应于通过吸入施用的药物制剂涵盖细粒粉尘或薄雾，这些粉尘或薄雾可由具有气雾剂、雾化器或吹入器的各种类型加压分配器生成。

适应于阴道施用的药物制剂可以作为阴道栓剂、棉塞、乳膏、凝胶、糊剂、泡沫剂或喷雾制剂施用。

适应于肠胃外施用的药物制剂包括水性和非水性无菌注射溶液剂，其包含抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和溶质，通过它们，制剂与待的受体的血液等渗；以及水性和非水性无菌混悬剂，其可包含悬浮介质和增稠剂。这些制剂可在单剂量或多剂量容器中施用，例如密封的安瓿和小瓶，并以冷冻干燥(冻干)状态保存，使得仅需要在使用前即刻添加无菌载液，例如用于注射目的的水。根据配方制备的注射溶液剂和混悬剂可从无菌粉末剂、颗粒剂和片剂制备。

不言而喻，除了上文特别提及的组分外，制剂还可包含就特定的制剂类型而言本领域中常用的其他剂；因此，例如，适于经口施用的制剂可包含调味剂。

式I化合物的有效量取决于许多因素，包括例如动物的年龄和体重、需要的确切的病况及其严重程度、制剂的性质和施用的方法，并最终由医生或兽医确定。然而，根据本发明的化合物的有效量通常在每天0.1至100mg/kg受体(哺乳动物)体重的范围内，特别是通常在每天1至10mg/kg体重的范围内。因此，体重为70kg的成年哺乳动物每天的实际量通常在70至700mg之间，其中该量可以作为每天单剂量、或通常以每天一系列分剂量(如例如二、三、四、五或六)施用，使得总日剂量相同。其盐或溶剂化物或生理功能衍生物的有效量可确定为根据本发明的化合物本身的有效量的分数。可假定相似的剂量适合于上述其他病况的。

这种类型的联合可借助于的各个组分的同时、连续或分开的分配来实现。这种类型的联合产品采用根据本发明的化合物。

本发明还涉及药剂，其包含至少一种式I化合物和/或其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体(包括它们所有比率的混合物)及至少一种其他药剂活性成分。

本发明还涉及一种由以下的独立包装组成的套装(试剂盒)：

(a) 有效量的式I化合物和/或其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体，包括它们所有比率的混合物，和

(b) 有效量的其他药剂活性成分。

套装包含合适的容器，如盒子、单个瓶子、袋子或安瓿。套装可例如包含分开的安瓿，每个安瓿含有效量的式I化合物和/或其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体(包括它们所有比率的混合物)及有效量的其他药剂活性成分，呈溶解或冻干形式。

如本文所用，“”指的是完全或部分减轻与病症或疾病相关的症状，或者减慢或停止那些症状的进一步发展或恶化，或者在有患上该疾病或病症的风险的受试者中防止或预防该疾病或病症。

与式(I)化合物有关的术语“有效量”可指能够在患有本文公开的疾病(如炎性病况、免疫学病况、癌症或代谢病况)或有患上该疾病的风险的受试者中完全或部分减轻与病症或疾病相关的症状、或者减慢或停止那些症状的进一步发展或恶化、或者防止或预防该疾病或病症的量。

在一个实施方案中，式(I)化合物的有效量为抑制细胞中的HIF-2α的量，如例如在体外或体内。在一些实施方案中，与未经处理的细胞中HIF-2α的活性相比，式(I)化合物的有效量将细胞中的HIF-2α抑制10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或99%。例如在药物组合物中，式(I)化合物的有效量可处于将发挥所需作用的水平；例如，在用于经口和肠胃外施用二者的单位剂量中，约0.005mg/kg受试者体重至约10mg/kg受试者体重。

用途

本发明的化合物适合作为哺乳动物、尤其是人类癌症中的药物活性成分。

本发明涵盖式I化合物和/或其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体用于制备用于或预防癌症的药剂的用途。

此外，本发明涵盖用于用于用途的式I化合物和/或其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体，其用于或预防癌症。

还涵盖式I化合物和/或其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体用于制备用于在哺乳动物中或预防HIF-2α诱导的疾病或HIF-2α诱导的病况的药剂的用途，其中对于这种方法，向需要这样的的患病哺乳动物施用有效量的根据本发明的化合物。量随具体的疾病而异，并可由本领域技术人员无需过度努力即可确定。

本发明具体涉及式I化合物及其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体(包括它们所有比率的混合物)用于其中HIF-2α的抑制、调节和/或调制抑制起作用的疾病的。

本发明具体涉及式I化合物及其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体(包括它们所有比率的混合物)，其用于HIF-2α的抑制。

式I化合物可用于或预防的代表性癌症包括但不限于：头、颈、眼、口、咽喉、食道、支气管、喉、咽、胸、骨、肺、结肠、直肠、胃、前列腺、膀胱、子宫、子宫颈、乳腺、卵巢、睾丸或其他生殖器官、皮肤、甲状腺、血液、淋巴结、肾脏、肝脏、胰腺、脑、中枢神经系统的癌症，实体瘤和血源性肿瘤。

此外，式I化合物可用于或预防的代表性癌症包括成胶质细胞瘤、肾细胞癌(RCC)和透明细胞肾细胞癌(ccRCC)。

此外，本发明涵盖用于用途的式I化合物和/或其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体，用于或预防von Hippel-Lindau (VHL)疾病。

此外，本发明涵盖用于用途的式I化合物和/或其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体，用于或预防心血管疾病。

优选地，本发明涉及一种癌症的方法，其包括向有此需要的受试者施用有效量的根据本发明的式I化合物。

特别优选地，本发明涉及一种方法，其中所述疾病为癌症，其中所述施用与至少一种其他活物剂的施用是同时、依次或交替的。

所公开的式I化合物可与包括抗癌剂在内的其他已知的剂组合施用。如本文所用，术语“抗癌剂”涉及出于癌症的目的而施用给患有癌症的患者的任何剂。

上文定义的抗癌可作为单一疗法应用，或除本文公开的式I化合物外还可涉及常规手术或放射疗法或药物疗法。这样的药物疗法，例如化学疗法或靶向疗法，可包括以下抗肿瘤剂中的一种或多种，但优选一种：

烷化剂

如六甲蜜胺(altretamine)、苯达莫司汀(bendamustine)、白消安(busulfan)、卡莫司汀(carmustine)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、氮芥(chlormethine)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、达卡巴嗪(dacarbazine)、异环磷酰胺(ifosfamide)、英丙舒凡(improsulfan)、托西酸酯(tosilate)、洛莫司汀(lomustine)、美法仑(melphalan)、二溴甘露醇(mitobronitol)、二溴卫矛醇(mitolactol)、尼莫司汀(nimustine)、雷莫司汀(ranimustine)、替莫唑胺(temozolomide)、塞替派(thiotepa)、曲奥舒凡(treosulfan)、氧氮芥(mechloretamine)、卡波醌(carboquone)；

阿帕齐醌(apaziquone)、福莫司汀(fotemustine)、葡磷酰胺(glufosfamide)、帕利伐米(palifosfamide)、哌泊溴烷(pipobroman)、曲磷胺(trofosfamide)、乌拉莫司汀(uramustine)、TH-3024、VAL-0834；

铂化合物

如卡铂(carboplatin)、顺铂(cisplatin)、依他铂(eptaplatin)、米铂水合物(miriplatine hydrate)、奥沙利铂(oxaliplatin)、洛铂(lobaplatin)、奈达铂(nedaplatin)、吡铂(picoplatin)、沙铂(satraplatin)；洛铂(lobaplatin)、奈达铂(nedaplatin)、吡铂(picoplatin)、沙铂(satraplatin)；

DNA改变剂

如氨柔比星(amrubicin)、比生(bisantrene)、地西他滨(decitabine)、米托蒽醌(mitoxantrone)、丙卡巴肼(procarbazine)、曲贝替定(trabectedin)、氯法拉滨(clofarabine)；

安吖啶(amsacrine)、溴他利星(brostallicin)、匹杉琼(pixantrone)、拉罗莫司汀(laromustine)1,3；

拓扑异构酶抑制剂

如依托泊苷(etoposide)、伊立替康(irinotecan)、雷佐生(razoxane)、索布佐生(sobuzoxane)、替尼泊苷(teniposide)、托泊替康(topotecan)；

氨萘非特(amonafide)、贝洛替康(belotecan)、依利醋铵(elliptinium acetate)、伏利拉辛(voreloxin)；

微管修饰剂

如卡巴他赛(cabazitaxel)、多西紫杉醇(docetaxel)、艾日布林(eribulin)、伊沙匹隆(ixabepilone)、紫杉醇(paclitaxel)、长春碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)、长春瑞滨(vinorelbine)、长春地辛(vindesine)、长春氟宁(vinflunine)；

福他布林(fosbretabulin)、替司他赛(tesetaxel)；

抗代谢物

如天冬酰胺酶(asparaginase)3、阿扎胞苷(azacitidine)、左亚叶酸钙(calciumlevofolinate)、卡培他滨(capecitabine)、克拉屈滨(cladribine)、阿糖胞苷(cytarabine)、依诺他滨(enocitabine)、氟脲苷(floxuridine)、氟达拉滨(fludarabine)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、吉西他滨(gemcitabine)、巯嘌呤(mercaptopurine)、甲氨蝶呤(methotrexate)、奈拉滨(nelarabine)、培美曲塞(pemetrexed)、普拉曲沙(pralatrexate)、硫唑嘌呤(azathioprine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)、卡莫氟(carmofur)；

去氧氟尿苷(doxifluridine)、艾西拉宾(elacytarabine)、雷替曲塞(raltitrexed)、沙帕他滨(sapacitabine)、替加氟(tegafur)2,3、三甲曲沙(trimetrexate)；

抗癌抗生素

如博来霉素(bleomycin)、放线菌素D(dactinomycin)、多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、伊达比星(idarubicin)、左旋咪唑(levamisole)、米替福新(miltefosine)、丝裂霉素C(mitomycin C)、罗米地辛(romidepsin)、链佐星(streptozocin)、戊柔比星(valrubicin)、净司他丁(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)、柔红霉素(daunurobicin)、普卡霉素(plicamycin)；

阿柔比星(aclarubicin)、培洛霉素(peplomycin)、吡柔比星(pirarubicin)；

激素/拮抗剂

如阿巴瑞克(abarelix)、阿比特龙(abiraterone)、比卡鲁胺(bicalutamide)、布舍瑞林(buserelin)、卡普睾酮(calusterone)、氯烯雌醚(chlorotrianisene)、地加瑞克(degarelix)、地塞米松(dexamethasone)、雌二醇(estradiol)、氟可龙(fluocortolone)、氟甲睾酮(fluoxymesterone)、氟他胺(flutamide)、氟维司(fulvestrant)、戈舍瑞林(goserelin)、组氨瑞林(histrelin)、亮丙瑞林(leuprorelin)、甲地孕酮(megestrol)、米托坦(mitotane)、那法瑞林(nafarelin)、诺龙(nandrolone)、尼鲁米特(nilutamide)、奥曲肽(octreotide)、泼尼松龙(prednisolone)、雷洛昔芬(raloxifene)、他莫昔芬(tamoxifen)、α促甲状腺激素(thyrotropin alfa)、托瑞米芬(toremifene)、曲洛司坦(trilostane)、曲普瑞林(triptorelin)、己烯雌酚(diethylstilbestrol)；

阿考比芬(acolbifene)、达那唑(danazol)、地洛瑞林(deslorelin)、环硫雄醇(epitiostanol)、orteronel、恩扎鲁胺(enzalutamide)1,3；

芳香酶抑制剂

如氨鲁米特(aminoglutethimide)、阿那曲唑(anastrozole)、依西美坦(exemestane)、法倔唑(fadrozole)、来曲唑(letrozole)、睾内酪(testolactone)；

福美坦(formestane)；

小分子激酶抑制剂

如克唑替尼(crizotinib)、达沙替尼(dasatinib)、厄洛替尼(erlotinib)、伊马替尼(imatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、尼洛替尼(nilotinib)、帕唑帕尼(pazopanib)、瑞戈非尼(regorafenib)、鲁索替尼(ruxolitinib)、索拉非尼(sorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)、凡他尼布(vandetanib)、威罗菲尼(vemurafenib)、波舒替尼(bosutinib)、吉非替尼(gefitinib)、阿昔替尼(axitinib)；

阿法替尼(afatinib)、阿利替(alisertib)、达拉菲尼(dabrafenib)、达克替尼(dacomitinib)、地那西利(dinaciclib)、度维替尼(dovitinib)、恩扎妥林(enzastaurin)、尼达尼布(nintedanib)、乐伐替尼(lenvatinib)、利尼伐尼(linifanib)、林西替尼(linsitinib)、马赛替尼(masitinib)、米哚妥啉(midostaurin)、莫替沙尼(motesanib)、奈拉替尼(neratinib)、奥兰替尼(orantinib)、哌立福辛(perifosine)、泊那替尼(ponatinib)、雷多替尼(radotinib)、瑞格替(rigosertib)、替匹法尼(tipifarnib)、替万替尼(tivantinib)、替沃扎尼(tivozanib)、曲美替尼(trametinib)、哌吗替(pimasertib)、丙氨酸布立尼布(brivanib alaninate)、西地尼布(cediranib)、阿帕替尼(apatinib)4、S-苹果酸卡博替尼(cabozantinib S-malate)1,3、依鲁替尼(ibrutinib)1,3、埃克替尼(icotinib)4、buparlisib2、西帕替尼(cipatinib)4、考比替尼(cobimetinib)1,3、代拉里斯(idelalisib1,3)、菲卓替尼(fedratinib)1、XL-6474；

光敏剂

如甲氧(methoxsalen3)；

卟吩姆钠(porfimer sodium)、他拉泊芬(talaporfin)、替莫泊芬(temoporfin)；

抗体

如阿仑单抗(alemtuzumab)、贝索单抗(besilesomab)、本妥昔单抗(brentuximabvedotin)、西妥昔单抗(cetuximab)、地舒单抗(denosumab)、伊匹木单抗(ipilimumab)、奥法木单抗(ofatumumab)、帕木单抗(panitumumab)、利妥昔单抗(rituximab)、托西莫单抗(tositumomab)、曲妥单抗(trastuzumab)、贝伐单抗(bevacizumab)、培妥单抗(pertuzumab)2,3；

卡妥索单抗(catumaxomab)、依洛珠单抗(elotuzumab)、依帕珠单抗(epratuzumab)、法利珠单抗(farletuzumab)、莫加利珠单抗(mogamulizumab)、奈昔木单抗(necitumumab)、尼妥珠单抗(nimotuzumab)、奥滨尤妥珠单抗(obinutuzumab)、奥卡拉妥珠单抗(ocaratuzumab)、奥戈伏单抗(oregovomab)、雷莫芦单抗(ramucirumab)、利妥木单抗(rilotumumab)、司妥昔单抗(siltuximab)、托珠单抗(tocilizumab)、扎芦木单抗(zalutumumab)、扎木单抗(zanolimumab)、马妥珠单抗(matuzumab)、达洛珠单抗(dalotuzumab)1,2,3、奥那妥珠单抗(onartuzumab)1,3、雷妥莫单抗(racotumomab)1、tabalumab1,3、EMD-5257974、阿维单抗(avelumab)、纳武单抗(nivolumab)1,3；

细胞因子

如阿地白介素(aldesleukin)、干扰素α(interferon alfa)2、干扰素α2a(interferonalfa2a)3、干扰素α2b(interferon alfa2b)2,3；

西莫白介素(celmoleukin)、他索纳明(tasonermin)、替西白介素(teceleukin)、奥普瑞白介素(oprelvekin)1,3、重组干扰素β-1a(recombinant interferon beta-1a4)；

药物缀合物

如地尼白介素(denileukin diftitox)、替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan)、碘苄胍I123(iobenguane I123)、泼尼莫司汀(prednimustine)、曲妥单抗-美坦新(trastuzumabemtansine)、雌莫司汀(estramustine)、吉姆单抗(gemtuzumab)、奥佐米星(ozogamicin)、阿柏西普(aflibercept)；

贝辛白介素(cintredekin besudotox)、依度曲肽(edotreotide)、伊珠单抗奥佐米星(inotuzumab ozogamicin)、他那莫单抗(naptumomab estafenatox)、莫奥珠单抗(oportuzumab monatox)、锝(99mTc)阿西莫单抗(arcitumomab)1,3、vintafolide1,3；

疫苗

如sipuleucel3；vitespen3、emepepimut-S3、oncoVAX4、rindopepimut3、troVax4、MGN-16014、MGN-17034；

其他

阿利维A酸(alitretinoin)、贝沙罗汀(bexarotene)、硼替佐米(bortezomib)、依维莫司(everolimus)、伊班膦酸(ibandronic acid)、咪喹莫特(imiquimod)、来那度胺(lenalidomide)、香菇多糖(lentinan)、甲酪氨酸(metirosine)、米法莫肽(mifamurtide)、帕米磷酸(pamidronic acid)、培门冬酶(pegaspargase)、喷司他丁(pentostatin)、sipuleucel3、西佐喃(sizofiran)、他米巴罗汀(tamibarotene)、坦罗莫司(temsirolimus)、沙利度胺(thalidomide)、维A酸(tretinoin)、维莫德吉(vismodegib)、唑来膦酸(zoledronic acid)、伏林司他(vorinostat)；

塞来考昔(celecoxib)、西仑吉肽(cilengitide)、恩替司他(entinostat)、依他硝唑(etanidazole)、ganetespib、伊屈诺昔(idronoxil)、iniparib、伊沙佐米(ixazomib)、氯尼达明(lonidamine)、尼莫唑(nimorazole)、帕比司他(panobinostat)、培维A酸(peretinoin)、普利肽新(plitidepsin)、泊马度胺(pomalidomide)、丙考达唑(procodazol)、地磷莫司(ridaforolimus)、他喹莫德(tasquinimod)、特罗司他(telotristat)、胸腺法新(thymalfasin)、替拉扎明(tirapazamine)、托多司他tosedostat、曲贝德生(trabedersen)、乌苯美司(ubenimex)、伐司朴达(valspodar)、今又生(gendicine)4、溶链菌(picibanil)4、reolysin4、盐酸瑞螺旋霉素(retaspimycinhydrochloride)1,3、trebananib2,3、维鲁利秦(virulizin)4、卡非佐米(carfilzomib)1,3、内皮他丁(endostatin)4、immucothel4、贝林司他(belinostat)3、MGN-17034；

PARP抑制剂

奥拉帕尼(Olaparib)、维利帕尼(Veliparib)

1 Prop. INN (建议的国际非专有名称)

2 Rec. INN (推荐的国际非专有名称)

3 USAN (美国采用的名称)

4 无INN。

以下缩写分别指的是下面的定义：

aq (水性)、h (小时)、g(克)、L (升)、mg (毫克)、MHz(兆赫兹)、min (分钟)、mm (毫米)、mmol (毫摩尔)、mM(毫摩尔浓度)、m.p. (熔点)、eq (当量)、mL (毫升)、µL(微升)、ACN(乙腈)、AcOH (乙酸)、CDCl3 (氘代氯仿)、CD3OD (氘代甲醇)、c-hex (环己烷)、DCC (二环己基碳二亚胺)、DCM (二氯甲烷)、DIC (二异丙基碳二亚胺)、DIEA (二异丙基乙胺)、DMF(二甲基甲酰胺)、DMSO (二甲亚砜)、DMSO-d6 (氘代二甲亚砜)、EDC (1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺)、ESI (电喷雾电离)、EtOAc (乙酸乙酯)、Et2O (二乙醚)、EtOH (乙醇)、HATU (二甲基氨基-([1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)-亚甲基]-二甲基铵六氟磷酸盐)、HPLC (高效液相谱)、i-PrOH (2-丙醇)、K2CO3 (碳酸钾)、LC(液相谱)、MeOH(甲醇)、MgSO4 (硫酸镁)、MS (质谱)、MTBE (甲基叔丁醚)、NaHCO3 (碳酸氢钠)、NaBH4 (硼氢化钠)、NMM (N-甲基吗啉)、NMR (核磁共振)、PE (石油醚)、PyBOP (苯并三唑-1-基氧基三吡咯烷子基鏻六氟磷酸盐)、RT (室温)、Rt(保留时间)、SPE (固相萃取)、TBTU (2-(1-H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐)、TEA (三乙胺)、TFA (三氟乙酸)、THF(四氢呋喃)、TLC (薄层谱)、UV (紫外)、WL (波长)。

在上文和下文，所有温度均以℃指示。在以下实例中，“常规后处理”指的是：根据需要添加水，根据需要将pH调节到2至10之间的值(取决于最终产品的组成)，用EtOAc或DCM萃取混合物，分离各相，用硫酸钠干燥有机相并蒸发，残余物通过硅胶上的谱法和/或通过结晶纯化。在硅胶上的Rf值；洗脱剂：EtOAc/MeOH 9:1。

使用氘代溶剂的残留信号作为内部参考，在Bruker DPX-300、DRX-400、AVII-400上或在500MHz光谱仪上记录1H NMR。相对于残留溶剂信号(对于在DMSO-d6中的1H NMR，δ =2.49ppm)，以ppm为单位报告化学位移(δ)。1H NMR数据报告如下：化学位移(多重性、耦合常数和氢数)。多重性缩写如下：s (单重峰)、d (双重峰)、t (三重峰)、q (四重峰)、m (多重峰)、br (宽峰)。

分析方法

LCMS

方法A

柱：Chromolith® SpeedROD RP18e 50-4.6

流动相：A = 水 + 0.05% HCOOH，B = ACN + 0.04% HCOOH

梯度：开始4%的B，2.8min后100%的B，3.3min后停止

流量：2.4ml/min

波长：220nm

方法B

柱：Shim-pack XR-ODS, 3.0*50 mm, 2.2 µm

流动相：A：水/0.05% TFA，B：ACN/0.05% TFA

梯度：2.0min内从5%的B至100%的B，保持0.5min

流量：1.2mL/min

波长：254nm

方法C

柱：Kinetex EVO C18, 3.0x50 mm, 2.6 µm

流动相：A：具有0.04% NH4OH的水，B：ACN

梯度：2.1min内从10%的B至95%的B，保持0.6min

流量：1.2mL/min

波长：254nm

方法D

柱：CORTECS C18+, 2.1x50 mm, 2.7 µm

流动相：A：具有0.1% FA的水，B：具有0.1% FA的ACN

梯度：到2.0min前从10%的B至100%的B，保持到2.6min，到2.7min前从100%的B至10%的B，2.90min后停止

流量：1.0mL/min

波长：254nm

方法E

柱：CORTECS C18+, 2.1x50 mm, 2.7 µm

流动相：A：具有0.1% FA的水，B：具有0.1% FA的ACN

梯度：到3.0min前从10%的B至100%的B，保持到4.7min，到4.8min前从100%的B至10%的B，5min后停止

流量：1.0mL/min

波长：254nm。

HPLC

方法A

柱：Chromolith® SpeedROD RP18e 50-4.6

流动相：A = 水 + 0.01% TFA，B = ACN + 0.01% TFA

梯度：开始10%的B，3.5min后100%的B，4.8min后10%的B，5.5min后停止

流量：2.75mL/min

波长：220nm

方法B

柱：Atlantis T3, 150x4.6 mm

流动相：A = 水 + 0.05% TFA，B = ACN + 0.05% TFA

梯度：开始5%的B，8min后95%的B，10.2min后5%的B，12min后停止

流量：1.5mL/min

波长：254nm

方法C

柱：Ascentis Express C18 2.7 µm, 100x4.6 mm

流动相：A = 水 + 0.05% TFA，B = ACN + 0.05% TFA

梯度：开始5%的B，8min后95%的B，10.2min后5%的B，12min后停止

流量：1.5mL/min

波长：254nm

方法D

柱：XSELECT HSS T3 100x4.6 mm

流动相：A = 水 + 0.05% TFA，B = ACN + 0.05% TFA

梯度：开始5%的B，8min后95%的B，10.2min后5%的B，12min后停止

流量：1.2mL/min

波长：254nm

方法E

柱：Atlantis HILIC Silica 3μm 100x4.6 mm

流动相：A = 水 + 0.05% TFA，B = ACN + 0.05% TFA

梯度：开始5%的B，8min后95%的B，10.2min后5%的B，12min后停止

流量：1.2mL/min

波长：254nm。

分析手性分离

方法A

HPLC

柱：Lux Amylose-2

流动相：n-庚烷: i-PrOH (20:80)

波长：254nm

流量：1mL/min

方法B

SFC

柱：Lux Amylose-1

流动相：CO2: i-PrOH + 0.5% DEA (88:12)

波长：220nm

流量：5mL/min

方法C

方法：SFC

柱：ChiralPak AS-H

流动相：CO2: i-PrOH + 0.5% DEA (85:15)

波长：220nm

流量：5mL/min

方法D

方法：HPLC

柱：ChiralPak IA-3

流动相：Hex(0.1%DEA)/EtOH = 1:1

波长：254nm

流量：1.0mL/min

方法E

方法：HPLC

柱：ChiralPak IA-3

流动相：Hex(0.1%DEA)/EtOH = 4:1

波长：254nm

流量：1.0mL/min

方法F

方法：HPLC

柱：ChiralPak IA-3

流动相：Hex(0.1%DEA)/EtOH = 7:3

波长：254nm

流量：1.0mL/min

方法G

方法：SFC

柱：ChiralPak IC, 3*100mm, 3µm

助溶剂：MeOH + 0.1% DEA

波长：220nm

流量：2mL/min。

制备手性分离

方法A

HPLC

柱：Lux Amylose-2

流动相：n-庚烷: i-PrOH (20:80)

波长：254nm

流量：20ml/min。

生物活性

Alphascreen蛋白质蛋白质相互作用测定：

为了评估HIF-2α和HIF-1β的PAS B结构域的相互作用的功能破坏，建立了AlphaScreen测定法。该测定法在384孔浅灰Perkin Elmer微量滴定板中进行，总体积为7µl。将人recHis6Gb1-TEV-GEFKGL-HIF2α(240-350aa)-G (fc 143nM)和人rec ARNT His6Gb1-TEV-GEFKGL-ARNT(356-470aa)-FLAG-E362R (fc 143nM)与目标化合物(fc 1nM至30µM)在20mMHepes、150mM NaCl、0.05% Tween 20、 2mM DTT、0.1% (w/v) BSA、0.3% DMSO中于pH 7.5和23℃下一起温育15min。通过添加AlphaLISA®抗-FLAG受体珠(fc 20µg/ml)和AlphaScreen®镍螯合物供体珠(fc 9µg/ml) (均来自Perkin Elmer)进行蛋白质蛋白质相互作用的检测并在黑暗中于23℃下将反应温育240min。如果供体珠和受体珠由于HIF2α PAS B与HIF-1β PAS B结构域的相互作用而彼此紧邻，则在680nm下激发后将在615nm处产生发光信号。从Alphascreen信号的损失来直接计算化合物的PPI破坏活性。AlphaScreen信号使用Envision多模式读取器(Perkin Elmer LAS Germany GmbH)测量。使用的对照值为无抑制剂的反应。在不存在HIF-1β的情况下确定所使用的药理学零值。使用来自GeneData的测定分析仪计算抑制值(IC50)。

在测定中，化合物抑制HIF-2α，其中IC50为A < 50nM，50 ≤ B ≤ 1000nM，且C >1000nM，如下表中所示：

实施例 AlphaScreen 25a C 26a A 27a C 28a C 29a B 30a A 13a A 31a B 32a A 33a A 34a A 36a C 23a A 37a C 38a B 39a C 40a C 41a A 42a A 43a C 44a A 35a C 45a A 46a C 47a C 48a C 49a C 50a C 51a C 54a C 55a A 56a B 57a C 58a C 59a C 61a B 62a B 63a A 64a A 65a C 66a C 67a A 68a B

ITC

使用来自MicroCal / Malvern (UK)的VP-ITC微热量计进行ITC测量。对于所有滴定实验，蛋白质和相应的化合物均在pH 7.5的30mM HEPES缓冲剂、150mM NaCl和5mM β-巯基乙醇中配制。通过重组过表达和多步谱纯化制备蛋白质HIF2a (240-350)-G。从浓缩的DMSO储备溶液使用化合物。注射器中的最终蛋白质浓度为100μM。用缓冲剂将在DMSO中的10mM配体储备溶液稀释至10μM浓度并装载到样品池中。将所有缓冲剂调节至1% (v/v) DMSO的最终浓度。在装载量热池和注射器之前对滴定物溶液和滴定剂溶液二者脱气。ITC滴定在303K的恒定温度下进行。ITC数据分析使用MicroCal / Malvern (UK)作为标准仪器软件供给的基于Origin 7 (OriginLab Cooperation Northampton, USA)的量热定制软件进行。集成热数据用一位点结合模型拟合，以确定结合的亲和力、焓和化学计量的表观值。

在测定中，化合物结合HIF-2α，其中KD为A < 50nM，50 ≤ B ≤ 1000nM，C >1000nM，如下表中所示：

实施例 ITC 25a C 26a B 27a C 28a C 29a B 30a B 13a B 31a C 32a B 33a B 34a B 23a B 37a C 38a B 41a B 42a B 43a C 44a B 63a B 64a B 55a B 45a A

细胞机制测定：786-O HRE-luc2P报告子测定

设计该报告子测定法来监测HIF2α-HIF1β复合物与生理相关细胞系中称为缺氧反应元件(HRE)的特定DNA片段的结合。786-O HRE-luc2P细胞源自786-O人肾细胞腺癌细胞系，通过稳定整合在HRE序列的控制下驱动荧光素酶的表达的HRE Luc报告子构建体(pGL4.42[luc2P/HRE/Hygro] Vector, Promega, 目录号E4001)而得到。HRE存在于受缺氧诱导因子调节的各种基因的启动子中。786-O细胞仅表达HIF2α。因此，该报告子测定法允许通过测定所产生的荧光素酶的活性来监测HIF2α-HIF1β活性。细胞培养在补充有10% FBS、丙酮酸钠、青霉素/链霉素、谷氨酰胺、200μg/ml潮霉素金的RPMI培养基中进行。

在具有透明底部的384孔白不透明微量滴定板(Greiner Bio-one,Frickenhausen)中进行该测定。将786-O HRE-luc2P细胞以4×104个细胞/ml重悬于不含潮霉素的新鲜的经预先温热的培养基(RPMI, 10% FBS, SP, P/S, Q)中。在微量滴定板中分配每孔50μl的细胞悬浮液(2000个细胞)并在5% CO2温育箱中于37℃下温育过夜。用Labcyte Echo分配器(fc 0.2% DMSO，从10µM开始以9种浓度稀释的原始溶液)添加化合物。将板在5% CO2温育箱中于37℃下温育48h。之后，每孔添加45μl经预先温热的ONE-GloTM EX试剂。将板在1200rpm下的轨道摇床上放置3分钟。密封板并用Tecan Spark 20M酶标仪测量发光(终点测量读数时间为0.1秒)。将值相对于DMSO对照和无细胞的孔(仅培养基对照)归一化。发光的减少与HIF2α活性的抑制直接相关。通过GraphPad Prism计算IC50值和%效果值。

在测定中，化合物抑制HIF-2a，其中IC50为A< 50nM，50 ≤ B ≤ 1000nM，且C >1000nM，如下表中所示：

实施例 HRE-luc2P报告子测定 26a C 30a C 13a B 31a C 32a C 33a C 34a B 36a C 23a C 37a C 38a C 45a C 46a C 47a C 48a C 54a C 55a C 56a C 61a C 62a C 63a C 64a C

合成

通用程序A

3-(2,5-二氯噻吩-3-基)丙酸(2)的合成

向在250mL圆底烧瓶中的3-(噻吩-3-基)丙酸(6.00g, 36.49mmol, 1.00当量, 95%)中加入甲苯(70mL)和SO2Cl2 (11.92g, 83.90mmol, 2.30当量, 95%)。所得溶液于69℃下搅拌4h。然后通过加入100mL水/冰淬灭反应并用4×100mL EtOAc萃取。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发溶剂。残余物经由柱谱法纯化，用0-8%的EtOAc/PE洗脱，得到8.89g 3-(2,5-二氯噻吩-3-基)丙酸，为无固体。

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.00 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 2.75-2.70(m, 2H), 2.54-2.48 (m, 2H)；LC-MS (方法D): [M-H]- = 222.75, Rt = 0.89min。

3-(2,5-二氯噻吩-3-基)丙酰氯(3)的合成

向在经氮气吹扫的250mL圆底烧瓶中的3-(2,5-二氯噻吩-3-基)丙酸(8.89g,36.89mmol, 1.00当量, 93.4%)中加入氯化亚砜(80.00mL, 1.05mol, 28.40当量, 95%)。所得溶液于25℃下搅拌3h。然后减压浓缩混合物，得到8.32g 3-(2,5-二氯噻吩-3-基)丙酰氯，为橙油，其不经进一步纯化即使用。

1,3-二氯-5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(4)的合成

在经氮气吹扫的500mL圆底烧瓶中将3-(2,5-二氯噻吩-3-基)丙酰氯(8.32g,32.04mmol, 1.00当量, 93.8%)溶解在DCM (80mL)中并将溶液冷却至0-5℃。缓慢加入AlCl3 (35.98g, 256.3mmol, 8.00当量, 95%)。所得混合物于25℃下搅拌5h。然后将其倒入1L水/冰中并用3×300mL EtOAc萃取。合并有机层，用硫酸钠干燥并蒸发溶剂。残余物经由柱谱法纯化，用EtOAc (0-10%)/PE洗脱，得到4.02g 1,3-二氯-5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮，为浅黄固体。

1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 3.01-2.95 (m, 2H), 2.87-2.81 (m, 2H)；LC-MS(方法D): [M+H]+ = 206.80, Rt = 0.95min。

1,3-二氯-5-氟-5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(5)的合成

向在250mL圆底烧瓶中的1,3-二氯-5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(4.10g, 18.8mmol,1.00当量, 95%)中加入1,3-二氯-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(4.10g, 18.8mmol,1.00当量, 95%)、选择性氟试剂(selectfluor) (10.52g, 28.2mmol, 1.50当量, 95%)、MeOH (50mL)和浓硫酸(564.7mg, 5.64mmol, 0.30当量, 98%)。反应于69℃下搅拌48h。在起始材料完全转化后，加入水(30mL)并将所得混合物于69℃下搅拌4h。然后用3×100mLEtOAc萃取，合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物经由柱谱法纯化，用EtOAc/PE (1:10)洗脱，得到4.5g 1,3-二氯-5-氟-5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮，为无固体。

LC-MS (方法D): [M+H]+ = 224.75, Rt = 0.94min。

叔丁基({1,3-二氯-5-氟-4H-环戊并[c]噻吩-6-基}氧)二甲基硅烷(6)的合成

向经氮气吹扫的250mL圆底烧瓶中加入1,3-二氯-5-氟-5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(4.30g, 16.2mmol, 1.00当量, 85%)、DCM (60mL)、TEA (11.9mL, 81.2mmol, 5.00当量,95%)和TBSOTf (5.42g, 19.5mmol, 1.20当量, 95%)。所得溶液于0℃下搅拌3h并然后真空浓缩。残余物经由柱谱法直接纯化，用EtOAc/PE (1:100)洗脱，得到6.0g叔丁基({1,3-二氯-5-氟-4H-环戊并[c]噻吩-6-基}氧)二甲基硅烷，为无固体。

1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.24 (d, J = 3.1 Hz, 2H), 1.03 (s, 9H),0.27 (d, J = 1.7 Hz, 6H)。

1,3-二氯-5,5-二氟-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(7)的合成

向经氮气吹扫的500mL圆底烧瓶中加入叔丁基({1,3-二氯-5-氟-4H-环戊并[c]噻吩-6-基}氧)二甲基硅烷(3.00g, 7.25mmol, 1.00当量, 82%)、选择性氟试剂 (4.06g,10.9mmol, 1.50当量, 95%)和ACN (100mL)。反应混合物于0℃下搅拌3h。滤出固体并真空浓缩滤液。然后经由柱谱法纯化残余物，用EtOAc/PE (1:20)洗脱，得到1.8g 1,3-二氯-5,5-二氟-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮，为黄固体。

1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.31 (t, J = 12.9 Hz, 2H)。

1-氯-5,5-二氟-3-(甲基硫烷基)-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(8)的合成

向经氮气吹扫的100mL圆底烧瓶中加入1,3-二氯-5,5-二氟-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(900mg, 3.33mmol, 1.00当量, 90%)、(甲基硫烷基)钠(285mg, 3.86mmol, 1.16当量, 95%)和THF (30 mL)。反应混合物于RT下搅拌3h。然后它通过加入30mL水/冰淬灭。所得混合物用3×30mL EtOAc萃取。合并有机层，用硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物经由柱谱法纯化，用EtOAc/PE (1:30)洗脱，得到450mg 1-氯-5,5-二氟-3-(甲基硫烷基)-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮，为黄固体。

LC-MS (方法D): [M+H]+ = 254.80, Rt = 1.05min。

1-氯-5,5-二氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(9)的合成

于RT下在氮气氛下向1-氯-5,5-二氟-3-(甲基硫烷基)-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(1.17g, 4.36mmol, 1当量, 95%)在MeOH中的搅拌着的溶液中逐份加入过硫酸氢钾(Oxone)(6.2g, 35.0mmol, 8.03当量, 95%)。所得混合物在氮气氛下于RT下搅拌过夜。过滤所得混合物并用EtOAc (4×20mL)洗涤滤饼。减压浓缩滤液。残余物通过硅胶柱谱法纯化，用PE/EtOAc (5:1)洗脱，得到1.1g 1-氯-5,5-二氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮，为无固体。

1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.51-3.35 (m, 5H)。

1-氯-5,5-二氟-3-甲磺酰-5,6-二氢螺[环戊并[c]噻吩-4,2'-[1,3]二氧戊环](10)的合成

于RT下向在100mL圆底烧瓶中的1-氯-5,5-二氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(2.5g, 7.85mmol, 1当量, 90%)中加入DMF (30mL)、K2CO3 (2.4g, 16.5mmol, 2.10当量, 95%)和2-溴乙烷-1-醇(2.1g, 15.96mmol, 2.03当量, 95%)。所得混合物于RT下搅拌2h。然后用100mL EtOAc稀释并用水(3×100mL)洗涤。用硫酸钠干燥有机相并减压浓缩。残余物经由柱谱法纯化，用(PE/EtOAc 3:1)洗脱，得到2.5g 1-氯-5,5-二氟-3-甲磺酰-5,6-二氢螺[环戊并[c]噻吩-4,2'-[1,3]二氧戊环]，为无固体。

1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.49-4.44 (m, 2H), 4.29-4.25 (m, 2H), 3.30-3.19 (m, 5H)；LC-MS (方法D): [M+H]+ = 330.95, Rt = 0.87min。

1-(3-氯-5-氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-5,6-二氢螺[环戊并[c]噻吩-4,2'-[1,3]二氧戊环] (11)的合成

向RT下在20mL密封管中的1-氯-5,5-二氟-3-甲磺酰-5,6-二氢螺[环戊并[c]噻吩-4,2'-[1,3]二氧戊环] (300mg, 1.36mol, 1当量, 90%)中加入(3-氯-5-氟苯基)硼酸(173mg, 1.71mol, 1.26当量, 95%)、Pd(PPh3)4 (104mg, 0.14mmol, 0.11当量, 95%)、Na2CO3 (144mg, 2.15mmol, 1.58当量, 95%)、二氧六环(8mL)和H2O (1mL)。所得混合物经受三个真空/氮气冲洗循环并在氮气氛下于80℃搅拌1h。真空浓缩所得混合物。残余物通过制备-TLC用3:1的PE/EtOAc纯化，得到150mg 1-(3-氯-5-氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-5,6-二氢螺[环戊并[c]噻吩-4,2'-[1,3]二氧戊环]，为无固体。

LC-MS (方法D): [M+H]+ = 424.85, Rt = 1.16min。

1-(3-氯-5-氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮 (12)的合成

向在50mL圆底烧瓶中的1-(3-氯-5-氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-5,6-二氢螺[环戊并[c]噻吩-4,2'-[1,3]二氧戊环] (150mg, 1.27mmol, 1当量, 90%)中加入DCM (6mL)、HClO4 (2mL, 50mmol, 39当量, 95%)。反应混合物于RT下搅拌2h。然后用50mL DCM稀释。有机相用50mL NaHCO3水溶液洗涤，用硫酸钠干燥并真空浓缩，得到120mg 1-(3-氯-5-氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮，为黄固体。

LC-MS (方法D): [M+H]+ = 380.85, Rt = 1.0min。

1-(3-氯-5-氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇 (13)的合成

于RT下在氮气氛下向1-(3-氯-5-氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(120mg, 0.19mmol, 1当量, 60%)在THF (5mL)中的搅拌着的溶液中逐份加入NaBH4 (30mg, 0.75mmol, 4当量, 95%)。所得混合物于RT下搅拌2h并通过于RT下加水(10mL)来淬灭。所得混合物用EtOAc (3×10mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并减压浓缩。粗产物(100mg)通过制备-HPLC在以下条件(制备-HPLC-015)下纯化：柱，XBridgeShield RP18 OBD Column, 30*150mm, 5um；流动相，水(10mmol/L NH4HCO3+0.1% NH3.H2O)和ACN (在8min内从40%的相B至65%)；检测器：UV。这产生1-(3-氯-5-氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇(15mg, 21%)，为无固体。

LC-MS (方法D): [M+Na]+ = 405.10, Rt = 1.54min。

1-(3-氯-5-氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇 (13)的手性拆分

通过手性制备-HPLC在以下条件下分离300mg 1-(3-氯-5-氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇(13)：柱：CHIRALPAK IA, 2.12*15 cm, 5 µm；流动相A：Hex，流动相B：EtOH；流速：20mL/min；梯度：7min内50 B至50 B；220/254nm；Rt1：3.3min；Rt2：4.9min。这产生143.9mg (4S)-1-(3-氯-5-氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇，为白固体，熔点为130-132℃。

13a：1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ = 7.48 (s, 1H), 7.41-7.26 (m, 2H), 5.18(dd, J = 11.5, 3.2 Hz, 1H), 3.69-3.43 (m, 2H), 3.38 (s, 3H)；LC-MS (方法D): Rt= 1.38min, [M-HF-H]- = 360.7；HPLC (方法D): 纯度>99%, Rt 6.79min；手性HPLC (方法D): >99% ee, Rt 1.21min, (13b：>99% ee, Rt = 1.94min)。

通用程序B

3-(甲基硫烷基)-4-氧代-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-1-甲酸乙酯(14)的合成

在配有搅拌棒、温度计和隔膜的250mL三颈圆底烧瓶中，将1,3-环己二酮(10g,89.19mmol)溶解在DMF (75mL)中并加入碳酸钾(36.98g, 267.5mmol)。混合物于RT下搅拌15min。加入二硫化碳(6.44mL, 107.02mmol)并将混合物于RT下搅拌20min。随后，在20-25℃下在3h时间内逐滴加入乙酯(9.50mL, 89.19mmol)在DMF (85mL)中的溶液，并将所得红棕混合物于RT下搅拌30min。将混合物冷却至0-5℃并在15min时间内逐滴加入(5.6mL, 89.19mmol)。将红棕混合物于0-5℃下再搅拌60min。将混合物缓慢温热至RT并搅拌过夜。将深棕的反应混合物倒入1.6L冰/水中，然后用3×DCM萃取。合并有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干。棕油状残余物通过快速谱法以两次运行纯化。产量：12.86g红棕固体。

HPLC (方法A): 纯度98.0%, Rt = 2.77min；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 271.0,Rt = 2.34min。

3-(甲基硫烷基)-4-氧代-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-1-甲酸(15)的合成

在配有搅拌棒和冷凝器的100mL圆底烧瓶中，将3-(甲基硫烷基)-4-氧代-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-1-甲酸乙酯(25.88g, 86.05mmol)悬浮在EtOH (65mL)中并加入氢氧化钠水溶液NaOH (2M, 64.54mL, 129.08mmol)。将混合物加热至70℃并搅拌45min。形成棕溶液。将混合物冷却至RT并用HCl (2M, 64.54mL, 129.08mmol)酸化至pH 3。形成浅黄沉淀物。过滤并用水、少量的ACN和MTBE洗涤。滤饼于50℃下真空干燥过夜。产量：22.5g浅黄固体。

HPLC (方法A): 纯度98.1%, Rt = 2.05min；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 242.9,Rt = 1.73min。

3-(甲基硫烷基)-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(16)的合成

在配有搅拌棒和冷凝器的250mL圆底烧瓶中，将3-(甲基硫烷基)-4-氧代-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-1-甲酸(22.5g, 91.09mmol)和铜粉(2.2g, 34.61mmol)置于烧瓶中并悬浮在喹啉(60mL)中。将混合物加热至回流(浴温245℃)并搅拌45min。将深棕的反应混合物冷却至RT，用HCl (2M, 800mL)淬灭并搅拌10min。混合物用3×120mL DCM萃取。合并有机层，用水和饱和NaHCO3洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发溶剂。油状残余物通过快速谱法纯化。产量：16.9g棕油。

HPLC (方法A): 纯度98.0%, Rt = 2.34min；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 199.0,Rt = 2.036min。

1-溴-3-(甲基硫烷基)-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(17)的合成

在配有搅拌棒、温度计和隔膜的250mL两颈圆底烧瓶中，将3-(甲基硫烷基)-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(16.9g, 83.52mmol)溶解在DCM (175mL)中并冷却至0-5℃。加入N-溴琥珀酰亚胺(16.351g, 91.87mmol)并将混合物于0-5℃下搅拌1h。黄混浊溶液用50mLDCM稀释，用水洗涤两次并用饱和NaHCO3溶液洗涤一次，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发溶剂。将固体残余物悬浮在MBTE中，过滤，用少量MBTE洗涤并干燥。产量：20g灰固体。

HPLC (方法A): 纯度>99%, Rt = 2.89min；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 276.8,Rt = 2.46min。

1-溴-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(18)的合成

在配有搅拌棒和隔膜的100mL圆底烧瓶中，将1-溴-3-(甲基硫烷基)-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(6.54g, 23.5mmol)、偏高碘酸钠(15.08g, 70.5mmol)和氯化钌(III)(731.14mg; 3.525mmol)悬浮在ACN (5mL)、DCM (30mL)和水(20mL)中。混合物于RT下搅拌1h。反应混合物经硅藻土过滤并将滤饼用DCM洗涤三次。用水和饱和NaHCO3溶液洗涤滤液，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发溶剂。固体残余物通过快速谱法纯化。产量：6.42g浅黄固体。

HPLC (方法A): 纯度97.5%, Rt = 2.28min；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 308.9,Rt = 1.96min。

1-溴-5-氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(19)的合成

在配有搅拌棒、冷凝器和隔膜的250mL圆底烧瓶中，将1-溴-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(6.42g, 20.76mmol)溶解在MeOH (75mL)中。于氩气下加入选择性氟试剂(15.49g, 41.5mmol)和水(25mL)，然后加入硫酸(98%, 553µL, 10.38mmol)。将混合物加热至66℃并搅拌过夜。起始材料未完全转化并加入另外的MeOH (30mL)、水(15ml)和硫酸(98%, 0.277mL, 5.19mmol)。黄溶液于66℃下搅拌24h。将反应混合物冷却至RT并蒸发直至仅留下水相。用50mL水稀释水性残余物并用EtOAc萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发溶剂。残余物经由快速谱法纯化，产生黄固体：产量：4.77g。

HPLC (方法A): 纯度98.7%, Rt = 2.21min；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 326.8,Rt = 1.92min。

[(1-溴-5-氟-3-甲磺酰-6,7-二氢-2-苯并噻吩-4-基)氧](叔丁基)二甲基硅烷(20)的合成

在配有搅拌棒和隔膜的50mL圆底烧瓶中，将1-溴-5-氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(1.75g, 5,35mmol)溶解在DCM (30mL)中，并于氩气下加入TEA (3.74mL, 26,74mmol)。然后向溶液中缓慢加入叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(1.88mL,8.02mmol)。棕溶液于RT下搅拌过夜。由于起始材料未完全转化，故加入1,2-二氯乙烷(8mL)和另外的叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(1.25mL, 5.35mmol)，将混合物加热至回流并搅拌24h。反应混合物用50mL DCM稀释，用水、5%的柠檬酸溶液和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发溶剂。棕油状残余物经由快速谱法纯化，产生黄固体。产量：1.96g。

HPLC (方法A): 纯度>99%, Rt = 3.66min；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 440.8,Rt = 3.05min。

1-溴-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(21)的合成

在配有搅拌棒和隔膜的100mL圆底烧瓶中，将[(1-溴-5-氟-3-甲磺酰-6,7-二氢-2-苯并噻吩-4-基)氧](叔丁基)二甲基硅烷(1.96g, 4.44mmol)悬浮在ACN (35mL)中。将混合物冷却至0-5℃并然后于氩气下加入选择性氟试剂(2.05g, 5.77mmol)。混合物于0-5℃下搅拌2.5h，用100mL水稀释并用EtOAc萃取3次。合并有机层，用NaHCO3溶液和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发溶剂。固体残余物经由快速谱法纯化，产生无固体。产量：1.28g。

HPLC (方法A): 纯度92.1%, Rt = 2,49min；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 344.7;Rt = 2.14min。

1-溴-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(22)的合成

在配有搅拌棒和隔膜的5mL玻璃小瓶中，将1-溴-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(0.91g, 2.51mmol)悬浮在MeOH (14mL)中，然后在15min时间内逐份加入NaBH4 (0.19g, 5.03mmol) (放出气体，温度升至30℃)。混合物于RT下再搅拌5min。用1mL饱和NH4Cl溶液淬灭反应，搅拌5min，然后用30mL水稀释并用EtOAc萃取两次。合并有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发溶剂。产量：5.52g灰棕固体。

HPLC (方法A): 纯度97.9%, Rt = 2.53min, LC-MS (方法A): [M-H2O+H]+ =328.8, Rt = 2.08min。

1-溴-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇的手性分离

对映异构体的制备分离通过SFC在Lux Amylose-1柱上进行，用CO2 : i-PrOH + 0.5%DEA (85:15)作为洗脱剂，流速为5ml/min。将收集的具有产物的级分蒸发至干。将产物冻干过夜，获得浅黄固体。

22a：LC-MS (方法A): [M-H2O+H]+ = 328.8, Rt: 2.08min；HPLC (方法A): >99%,Rt = 2.53min；手性SFC (方法C): 98.7% er, Rt = 2.2min (22b：>97.4% ee, Rt =3.61min)。

(S)-1-(3,5-二氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(23a)的合成

将(S)-1-溴-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(50mg,0.113mmol)、3,5-二氟苯基硼酸(26.8mg, 0.170mmol)、碳酸钠(30mg, 0.283mmol)和二氯双(三苯基膦)钯(4.0mg, 0.006mmol)置于5mL玻璃小瓶中并悬浮在ACN (3mL)和水(0.5mL)中。用隔膜密封小瓶并将氩气通过反应混合物鼓泡2min。将混合物加热至60℃并搅拌1h。将反应混合物冷却至RT，用30ml水稀释并用EtOAc萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干。油状残余物经由谱法纯化并将产物冻干过夜。产量：42.9mg无粉末。

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.42-7.34 (m, 3H), 6.84 (d, J = 6.5 Hz,1H), 5.15-5.08 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 3.00-2.94 (m, 2H), 2.47-2.28 (m, 1H),2.25-2.13 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M-H2O+H]+ = 362.9, Rt: 2.33min；HPLC (方法A):>99.8%, Rt = 2.78min；手性SFC (方法B): >99% ee, Rt = 3.52min。

通用程序C

1-(3,5-二氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(24)的合成

将1-溴-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(197.0mg,0.485mmol)、3,5-二氟苯基硼酸(114.9mg, 0.728mmol)、碳酸钠(128.5mg, 1.213mmol)和双(三苯基膦)氯化钯(17.0mg, 0.024mmol)置于12mL玻璃小瓶中并悬浮在ACN (10mL)和水(1.5mL)中。用隔膜密封小瓶并将氩气通过反应混合物鼓泡2min。将混合物加热至60℃并搅拌4h。将反应混合物冷却至RT，用30mL水稀释并用EtOAc萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干。油状残余物通过快速谱法和制备HPLC (Agilent 1260;Waters SunFire C18; 5 µm 30x150 mm column; WL: 220/254 nm)纯化。获得黄粉末。产量：95.1mg。

HPLC (方法A): 纯度88.5%, RT = 2.89min；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 378.9;Rt = 2.33min。

1-(3,5-二氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(23)的合成

将1-(3,5-二氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(95.1mg,0.251mmol)置于12mL玻璃小瓶中并悬浮在MeOH (3mL)中。加入NaBH4 (16.8mg, 0,445mmol)并将混合物于RT下搅拌5min。用1mL饱和的NH4Cl溶液淬灭反应混合物并搅拌5min，然后用30mL EtOAc稀释，用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干。获得1-(3,5-二氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇，为浅黄固体。产量：101mg。

HPLC (方法A): 99.7%, RT = 2.80min；LC-MS (方法A): [M-H2O+H]+ = 362.8,RT = 2.327min。

1-(3,5-二氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(23)的手性拆分

对映异构体的制备分离通过SFC在Lux Amylose-1柱上进行，用CO2 : i-PrOH + 0.5%DEA (88:12)作为洗脱剂，流速为5ml/min。将收集的具有产物的级分蒸发至干。将产物冻干过夜，获得无固体。

23a：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.42-7.34 (m, 3H), 6.84 (d, J = 6.5Hz, 1H), 5.15-5.08 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 3.00-2.94 (m, 2H), 2.47-2.28 (m,1H), 2.25-2.13 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M-H2O+H]+ = 362.9, Rt: 2.33min；HPLC (方法A): >99.8%, Rt = 2.78min；手性SFC (方法B): >99% ee, Rt = 3.52min (23b：>99%ee, Rt = 2.53min)。

已类似地获得以下化合物：

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰-1-苯基-4H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇(25a)

按通用程序A制备；1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ = 7.62-7.32 (m, 5H), 5.31 (dd,J = 11.7, 4.3 Hz, 1H), 3.64-3.33 (m, 3H), 3.32 (s, 3H)；LC-MS (方法B): Rt =1.63min, [M+Na]+ = 353.2；HPLC (方法B): 纯度99.1%, Rt 5.99min; 手性HPLC (方法D): >99% ee, Rt 1.59min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-1-(3,5-二氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇(26a)

按通用程序A制备；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.51-7.29 (m, 3H), 6.88(d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.21-4.96 (m, 1H), 3.88-3.51 (m, 2H), 3.46 (s, 3H)；LC-MS(方法C): Rt = 1.57min, [M-HF-H]- = 345.1；HPLC (方法C): 纯度98.9%, Rt 5.12min；手性HPLC (方法D): >99% ee, Rt 1.83min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-5,5-二氟-1-(2-氟苯基)-3-甲磺酰-4H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇(27a)

按通用程序A制备；1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 7.71 (td, J = 7.8, 1.8 Hz,1H), 7.60-7.53 (m, 1H), 7.49-7.35 (m, 2H), 6.84 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 5.18-5.11 (m, 1H), 3.65- 3.39 (m, 5H)；LC-MS (方法B): Rt = 1.58min, [M+Na]+ =371.2；HPLC (方法D): 纯度99.6%, Rt = 6.18min；手性HPLC (方法E): >99% ee, Rt =2.56min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-5,5-二氟-1-(3-氟苯基)-3-甲磺酰-4H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇(28a)

按通用程序A制备；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.67-7.42 (m, 3H), 7.31(tdd, J = 8.2, 2.4, 1.2 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.14-5.07 (m, 1H),3.77-3.49 (m, 2H), 3.44 (s, 3H)；LC-MS (方法B): Rt = 1.61min, [M+Na]+ = 371.2；HPLC (方法D): 纯度99.8%, Rt = 6.26min；手性HPLC (方法F): >99% ee, Rt =1.98min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-5,5-二氟-1-(4-氟苯基)-3-甲磺酰-4H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇(29a)

按通用程序A制备；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.71 (dd, J = 8.8, 5.3 Hz,2H), 7.36 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 6.79 (d, J =7.0 Hz, 1H), 5.17-5.03 (m, 1H),3.73-3.46 (m, 2H), 3.43 (s, 3H)；LC-MS (方法B): Rt = 1.60min, [M+Na]+ = 371.2；HPLC (方法D): 纯度99.3%, Rt = 6.24min；手性HPLC (方法F): >99% ee, Rt =2.16min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-1-(3,4-二氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇(30a)

按通用程序A制备；1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ = 7.58 (ddd, J= 11.5, 7.6, 1.8Hz, 1H), 7.51-7.34 (m, 2H), 5.17 (dd, J= 11.5, 3.1 Hz, 1H), 3.65-3.40 (m,2H), 3.37 (s, 3H)；LC-MS (方法C): Rt = 1.56min, [M+NH4]+ = 384.1；HPLC (方法D):纯度97.3%, Rt = 6.204min；手性HPLC (方法F): >99% ee, Rt = 1.77min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-1-(3-氯-5-氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇(13a)

按通用程序A制备；1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ = 7.48 (s, 1H), 7.41-7.26 (m,2H), 5.18 (dd, J = 11.5, 3.2 Hz, 1H), 3.69-3.43 (m, 2H), 3.38 (s, 3H)；LC-MS(方法D): Rt = 1.38min, [M-HF-H]- = 360.7；HPLC (方法D): 纯度>99%, Rt =6.79min；手性HPLC (方法D): >99% ee, Rt = 1.21min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

4-[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰-4H,6H-环戊并[c]噻吩-1-基]-2-氟苯甲腈(31a)

按通用程序A制备；1H NMR (300MHz, CD3OD, ppm): δ = 7.91-7.86 (m, 1H), 7.67-7.61 (m, 2H), 5.19 (dd, J = 11.5, 3.1 Hz, 1H), 3.72-3.50 (m, 2H), 3.39 (s,3H)；LC-MS (方法D): Rt = 2.25min, [M-HF-H]- = 351.7；HPLC (方法E): 纯度>99%, Rt= 5.98min；手性HPLC (方法D): >99% ee, Rt = 1.66min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

3-[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰-4H,6H-环戊并[c]噻吩-1-基]苯甲腈(32a)

按通用程序A制备；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.12 (t, J = 1.7 Hz, 1H),8.02-7.87 (m, 2H), 7.70 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.10(ddd, J = 11.0, 6.6, 3.9 Hz, 1H), 3.89-3.53 (m, 2H), 3.45 (s, 3H)；LC-MS (方法C): Rt = 1.41min, [M+Na]+ = 378.2；HPLC (方法D): 纯度98.3%, Rt = 5.73min；手性HPLC (方法D): >99% ee, Rt = 1.83min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

3-[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰-4H,6H-环戊并[c]噻吩-1-基]-5-氟苯甲腈(33a)

按通用程序A制备；1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ = 7.84 (t, J = 1.5 Hz, 1H),7.73 (dt, J = 9.4, 2.1 Hz, 1H), 7.67 (ddd, J = 8.1, 2.4, 1.3 Hz, 1H), 5.19(dd, J = 11.5, 3.2 Hz, 1H), 3.71- 3.46 (m, 2H), 3.39 (s, 3H)；LC-MS (方法D):Rt = 1.19min, [M-HF-H]- = 351.7；HPLC (方法D): 纯度99.1%, Rt = 5.99min；手性HPLC (方法D): >99% ee, Rt = 1.76min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-3-氯-5-[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰-4H,6H-环戊并[c]噻吩-1-基]苯甲腈(34a)

按通用程序A制备；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.12 (dt, J = 8.5, 1.5 Hz,2H), 8.03 (t, J = 1.8 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.10 (ddd, J = 11.2,6.8, 4.0 Hz, 1H), 3.83-3.56 (m, 3H), 3.46 (s, 3H)；LC-MS (方法D): Rt =1.28min, [M-HF-H]- = 367.6；HPLC (方法D): 纯度99.9%, Rt = 6.34min；手性HPLC (方法D): >99% ee, Rt = 1.60min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇(35a)

按通用程序A制备；1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 8.25 (s, 1H), 7.85 (s,1H), 6.70 (s, 1H), 5.05 (dd, J = 11.7, 3.9 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.57-3.41(m, 2H), 3.41 (s, 3H)；LC-MS (方法D): Rt = 0.85min, [M+H]+ = 335.0；HPLC (方法D): 纯度99.0%, Rt = 4.5min；手性HPLC (方法D): 99.8% ee, Rt = 1.93min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4R)-3-甲磺酰-1-苯基-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(36a)

将1-溴-3-(甲基硫烷基)-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(17, 500mg, 1.8mmol)、苯基硼酸频哪醇酯(455mg, 2.2mmol)、碳酸钠(401mg, 3.8mmol)和四(三苯基膦)-钯(0)(41.7mg, 0.036mmol)置于小瓶中并悬浮在THF (5mL)和水(5mL)中。用隔膜密封小瓶并将氩气通过反应混合物鼓泡5min。将混合物加热至70℃并搅拌16h。将反应混合物冷却至室温，用20ml水稀释并用EtOAc萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干。油状残余物经由柱谱法纯化，得到3-(甲基硫烷基)-1-苯基-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮。产量：107mg浅黄固体(HPLC: 97.4%, Rt: 3.11min；LC-MS: [M+H]+ =275.9, Rt: 2.63min)。

然后将3-(甲基硫烷基)-1-苯基-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(107mg,0.38mmol)、偏高碘酸钠(244mg, 1.14mmol)和氯化钌(III) (11.8mg, 0.057mmol)置于小瓶中并悬浮在ACN (1.5mL)、四氯化碳(1.5mL)和水(3mL)中。混合物于室温下搅拌过夜。将反应混合物经硅藻土过滤并将固体用EtOAc洗涤3×。用水、饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤滤液，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干，获得3-甲磺酰-1-苯基-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮。产量：114mg浅黄固体(HPLC: 90.6%, Rt: 2.65min；LC-MS: [M+H]+ = 306.9, Rt:2.23min)。

然后将3-甲磺酰-1-苯基-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-酮(114.mg, 0.337mmol)置于小瓶中并溶解在MeOH (3mL)中。于氩气下加入硼氢化钠(25.5mg, 0.674mmol)并将混合物于RT下搅拌15min。用2mL饱和NH4Cl溶液淬灭反应，用20mL水稀释并用EtOAc萃取3×。合并有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干。油状残余物通过柱谱法纯化，获得3-甲磺酰-1-苯基-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇。产量：92.3mg无固体(HPLC:99.2, Rt: 2.61min，LC-MS: [M-H2O+H]+ = 290.9, Rt: 2.20min)。

对映异构体的制备分离通过SFC在Lux Amylose-1柱上进行，用CO2 : i-PrOH +0.5% DEA (80:20)作为洗脱剂，流速为20mL/min。将收集的具有产物的级分蒸发至干。将产物冻干过夜，获得无固体。

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ = 7.56-7.49 (m, 4H), 7.47-7.43 (m, 1H),5.39 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 5.20-5.16 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 2.78-2.63 (m, 2H),1.91-1.75 (m, 3H), 1.69-1.63 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M-H2O+H]+ = 290.9, Rt =2.19min；HPLC (方法A): 纯度97.6%, Rt = 2.59min，手性HPLC (方法A): 99.4% er, Rt= 9.64min。

已类似地获得(4S)-对映异构体。

(4S)-1-(3,5-二氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-6,7-二氢-4H-2-苯并噻吩-4-醇(23a)

按通用程序A和B制得无固体；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.42-7.34 (m,3H), 6.84 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.15-5.08 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 3.00-2.94 (m,2H), 2.47-2.28 (m, 1H), 2.25-2.13 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M-H2O+H]+ = 362.9,Rt = 2.33min；HPLC (方法A): 纯度>99.8%, Rt = 2.78min；手性SFC (方法B): >99% ee,Rt = 3.52min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-5,5-二氟-1-(3-氟苯基)-3-甲磺酰-6,7-二氢-4H-2-苯并噻吩-4-醇(37a)

按通用程序C制得无固体；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ = 7.56 (td, J = 8.1,6.1 Hz, 1H), 7.49-7.45 (m, 1H), 7.44-7.41 (m, 1H), 7.35-7.30 (m, 1H), 6.85-6.80 (m, 1H), 5.15-5.09 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 2.99-2.91 (m, 2H), 2.45-2.30(m, 1H), 2.24-2.14 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M-H2O+H]+ = 344.9, Rt = 2.28min；HPLC (方法A): 纯度>99%, Rt = 2.71min；手性SFC (方法B): 98.2% er, Rt = 6.37min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-5,5-二氟-1-(4-氟苯基)-3-甲磺酰-6,7-二氢-4H-2-苯并噻吩-4-醇(38a)

按通用程序C制得无固体；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.67-7.61 (m, 2H),7.39-7.32 (m, 2H), 6.81 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 5.15-5.08 (m, 1H), 3.44 (s, 3H),2.91 (dd, J = 8.8, 4.9 Hz, 2H), 2.47-2.29 (m, 1H), 2.24-2.12 (m, 1H)；LC-MS(方法A): [M-H2O+H] = 344.9, Rt = 2.72min；HPLC (方法A): 纯度>99%, Rt =2.72min；手性SFC (方法C): >99% ee, Rt = 5.09min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-1-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(39a)

按通用程序B制得无固体；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.08 (s, 1H), 6.78(d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.12-5.05 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.41 (s, 3H), 2.87-2.71(m, 2H), 2.47-2.31 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.26-2.12 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 362.9, Rt = 1.85min；HPLC (方法A): 纯度>99%, Rt = 2.17min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(40a)

按通用程序B制得无固体；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.22-8.20 (m, 1H),7.82 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.10-5.03 (m, 1H), 3.89(s, 3H), 3.39 (s, 3H), 2.99-2.90 (m, 1H), 2.89-2.78 (m, 1H), 2.49-2.32 (m,1H), 2.27-2.14 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 348.9, Rt = 1.82min；HPLC (方法A): 纯度99.1%, Rt = 2.12min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-1-(3,4-二氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(41a)

按通用程序C制得无固体；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.80-7.73 (m, 1H),7.64-7.55 (m, 1H), 7.48-7.42 (m, 1H), 6.88 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.15-5.07 (m,1H), 3.45 (s, 3H), 2.93 (dd, J = 8.8, 4.9 Hz, 2H), 2.47-2.26 (m, 1H), 2.25-2.13 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M-H2O+H]+ = 362.9, Rt = 2.36min；HPLC (方法A): 纯度99.2%, Rt = 2.91min；手性SFC (方法C): 97.9% er, Rt = 4.57min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

3-[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-1-基]-5-氟苯甲腈(42a)

按通用程序C制得无固体；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.02-7.97 (m, 2H),7.92-7.87 (m, 1H), 6.92 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.16-5.08 (m, 1H), 3.46 (s, 3H),2.98 (dd, J = 8.7, 4.9 Hz, 2H), 2.46-2.27 (m, 1H), 2.27-2.13 (m, 1H)；LC-MS(方法A): [M-H2O+H]+ = 369.8, Rt = 2.24min；HPLC (方法A): 纯度>99.9%, Rt =2.75min；手性SFC (方法C): 97.2% er, Rt = 3.71min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

4-[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-1-基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈(43a)

按通用程序B制得无固体；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.71-7.68 (m, 1H),7.33 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.10-5.03 (m, 1H), 3.81(s, 3H), 3.40 (s, 3H), 3.00-2.91 (m, 1H), 2.90-2.79 (m, 1H), 2.47-2.32 (m,1H), 2.26-2.14 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M-H2O+H] = 354.9, Rt = 2.11min；HPLC(方法A): 纯度96.9%, Rt = 2.55min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

4-[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-1-基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈(44a)

按通用程序C制得无固体；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.17 (dd, J = 2.0,1.3 Hz, 1H), 8.11 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 8.04 (t, J = 1.8 Hz, 1H), 6.93 (d, J =6.4 Hz, 1H), 5.16-5.08 (m, 1H), 3.46 (s, 3H), 2.99-2.94 (m, 2H), 2.45-2.26(m, 1H), 2.26-2.13 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M-H2O+H]+ = 385.8, Rt = 2.35min；HPLC (方法A): 纯度98.9%, Rt = 2.89min；手性SFC (方法C): 97.9% ee, Rt =4.57min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-1-(3-氯-5-氟苯基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(45a)

按通用程序B制得无固体；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.59 (dt, J = 8.7,2.1 Hz, 1H), 7.56-7.53 (m, 1H), 7.54-7.49 (m, 1H), 6.90 (d, J = 6.5 Hz, 1H),5.15-5.08 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 2.96 (dd, J = 8.7, 4.9 Hz, 2H), 2.44-2.27(m, 1H), 2.25-2.13 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M-H2O+H]+ = 378.8, Rt = 2.51min；HPLC (方法A): 纯度98.8%, Rt = 3.09min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰-1-[1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基]-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(46a)

按通用程序B制得无固体；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.17-7.15 (m, 1H),6.92 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.16-5.09 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.48 (s, 3H),2.82-2.74 (m, 2H), 2.48-2.28 (m, 1H), 2.25-2.13 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M+H]+= 416.8, Rt = 2.32min；HPLC (方法A): 纯度98.1%, Rt = 2.80min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

类似地制备以下实施例：

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰-1-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇(47a)

按通用程序A制备；1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 7.58 (d, 1H), 6.83 (s,1H), 6.68 (d, 1H), 5.15 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.42 (d, 5H)；LC-MS (方法D): Rt= 0.88min, [M+H]+ = 335.0；HPLC (方法D): 纯度98.0%, Rt = 4.6min；手性HPLC (方法D): 99.3% ee, Rt = 2.20min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰-1-[1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基]-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇(48a)

按通用程序A制备；1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 6.94 (s, 1H), 5.23 (dd,1H), 4.04 (s, 3H), 3.48-3.34 (m, 5H)；LC-MS (方法E): Rt = 2.52min, [M+H]+ =403.0；HPLC (方法D): 纯度97.9%, Rt = 6.11min；手性HPLC (方法D): 99.9% ee, Rt =1.87min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-1-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇(49a)

按通用程序A制备；1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 6.82 (d, 1H), 6.44 (s,1H), 5.13 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.46 (s, 3H), 3.39 (m, 2H), 2.18 (s, 3H)；LC-MS (方法D): Rt = 0.942min, [M+H]+ = 349.0；HPLC (方法D): 纯度99.9%, Rt =4.93min；手性HPLC (方法D): 99.9% ee, Rt = 3.38min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-1-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(50a)

按通用程序B制备产物；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ = 6.85 (d, J = 6.5 Hz,1H), 6.37 (s, 1H), 5.14-5.08 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.46 (s, 3H), 2.80-2.70(m, 2H), 2.45-2.31 (m, 1H), 2.25-2.13 (m, 1H), 2.19 (s, 3H)；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 362.9, Rt = 1.91min；HPLC (方法A): 纯度94.1%, Rt = 2.29min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

5-[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-1-基]-1-甲基-1H-吡唑-3-甲腈(51a)

按通用程序B制备产物；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ = 7.38 (s, 1H), 6.92 (d,J = 6.6 Hz, 1H), 5.15-5.09 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.49-3.47 (m, 3H), 2.82-2.70 (m, 2H), 2.45-2.30 (m, 1H), 2.24-2.14 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M+H]+ =373.9, Rt = 2.02min；HPLC (方法A): 纯度99.6%, Rt = 2.48min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

3-[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-1-基]-1-甲基-1H-吡唑-4-甲腈(52a)

4-[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-1-基]-1-甲基-1H-吡唑-3-甲腈(53a)

3-[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-1-基]-1-甲基-1H-吡唑-5-甲腈(54a)

按通用程序B制备产物；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ = 7.59 (s, 1H), 6.82 (d,J = 6.7 Hz, 1H), 5.12-5.06 (m, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.42 (s, 3H), 3.17-3.08 (m,1H), 2.97-2.87 (m, 1H), 2.53-2.35 (m, 1H), 2.30-2.17 (m, 1H)；LC-MS (方法A):[M+H]+ = 373.9, Rt = 2.08min；HPLC (方法A): 纯度100.0%, Rt = 2.55min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-1-(2,6-二氟吡啶-4-基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(55a)

按通用程序B制备产物；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ = 7.47 (s, 2H), 6.91 (d,J = 6.5 Hz, 1H), 5.16-5.10 (m, 1H), 3.48 (s, 3H), 3.13-3.00 (m, 2H), 2.46-2.31 (m, 1H), 2.27-2.17 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 381.8, Rt = 2.22min；HPLC (方法A): 纯度100.0%, Rt = 2.75min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-1-(5-氯吡啶-3-基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(56a)

按通用程序B制备产物；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ = 8.74-8.74 (m, 1H),8.73-8.72 (m, 1H), 8.22 (t, J = 2.1 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.16-5.10 (m, 1H), 3.46 (s, 3H), 2.97 (dd, J = 8.7, 4.9 Hz, 2H), 2.45-2.30 (m,1H), 2.24-2.15 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 379.8, Rt = 2.09min；HPLC (方法A): 纯度98.5%, Rt = 2.55min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰-1-(5-甲基吡啶-3-基)-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(57a)

按通用程序B制备产物；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ = 8.59 - 8.57 (m, 1H),8.52 - 8.50 (m, 1H), 7.87 - 7.85 (m, 1H), 6.84 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.16 -5.10 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 2.96 (dd, J = 8.8, 4.8 Hz, 2H), 2.44 - 2.31 (m,1H), 2.38 - 2.37 (m, 3H), 2.24 - 2.15 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 359.9,Rt = 1.73min；HPLC (方法A): 纯度99.2%, Rt = 1.98min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-5,5-二氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(58a)

按通用程序B制备产物；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ = 8.70 - 8.69 (m, 1H),8.68 - 8.66 (m, 1H), 8.08 - 8.05 (m, 1H), 6.87 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.16 -5.11 (m, 1H), 3.46 (s, 3H), 2.98 (dd, J = 8.7, 4.9 Hz, 2H), 2.45 - 2.30 (m,1H), 2.25 - 2.15 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 363.9, Rt = 1.95min；HPLC (方法A): 纯度100.0%, Rt = 2.35min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

5-[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-1-基]吡啶-3-甲腈(59a)

按通用程序B制备产物；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9.10 (d, J = 1.9 Hz,1H), 9.05 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.62 - 8.60 (m, 1H), 6.89 (d, J = 6.5 Hz, 1H),5.17 - 5.10 (m, 1H), 3.47 (s, 3H), 3.02 - 2.96 (m, 2H), 2.45 - 2.28 (m, 1H),2.26 - 2.13 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 370.9, Rt = 1.90min；HPLC (方法A):纯度95.6%, Rt = 2.31min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

6-[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-1-基]-4-甲基吡啶-2-甲腈(60a)

(4S)-1-(6-氯-5-氟吡啶-3-基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(61a)

按通用程序B制备产物；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.53 - 8.51 (m, 1H),8.28 (dd, J = 9.4, 2.1 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.16 - 5.09 (m,1H), 3.46 (s, 3H), 3.01 - 2.96 (m, 2H), 2.46 - 2.28 (m, 1H), 2.26 - 2.14 (m,1H)；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 397.8, Rt = 2.25min；HPLC (方法A): 纯度100.0%, Rt= 2.77min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰-1-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(62a)

按通用程序B制备产物；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9.10 - 9.08 (m, 1H),9.08 - 9.06 (m, 1H), 8.46 - 8.43 (m, 1H), 6.89 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.18 -5.11 (m, 1H), 3.47 (s, 3H), 3.02 - 2.95 (m, 2H), 2.48 - 2.28 (m, 1H), 2.26 -2.13 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 413.8, Rt = 2.18min；HPLC (方法A): 纯度100.0%, Rt = 2.67min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-1-(2-氯-6-氟吡啶-4-基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(63a)

按通用程序B制备产物；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.78-7.75 (m, 1H),7.54-7.52 (m, 1H), 6.91 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.16-5.09 (m, 1H), 3.47 (s, 3H),3.12-2.98 (m, 2H), 2.45-2.31 (m, 1H), 2.28-2.15 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M+H]+= 397.8, Rt = 2.28min；HPLC (方法A): 纯度100.0%, Rt = 2.82min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

6-氯-4-[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-1-基]吡啶-2-甲腈(64a)

按通用程序B制备产物；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ = 8.37 (d, J = 1.5 Hz,1H), 8.12 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.15 - 5.10 (m, 1H),3.48 (s, 3H), 3.12 - 3.02 (m, 2H), 2.44 - 2.30 (m, 1H), 2.27 - 2.17 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 404.8, Rt = 2.24min；HPLC (方法A): 纯度97.4%, Rt =2.79min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-1-(5-氯-6-甲氧基吡啶-3-基)-5,5-二氟-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(65a)

按通用程序B制备产物；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ = 8.34 (d, J = 2.2 Hz,1H), 8.18 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.15-5.09 (m, 1H),4.01 (s, 3H), 3.44 (s, 3H), 2.93 (dd, J = 9.0, 5.0 Hz, 2H), 2.45-2.29 (m,1H), 2.23-2.14 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M+H]+ = 409.9, Rt = 2.35min；HPLC (方法A): 纯度99.4%, Rt = 2.91min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

(4S)-5,5-二氟-1-(3-氟苯基)-3-甲磺酰-4,5,6,7-四氢-2-苯并噻吩-4-醇(66a)

按通用程序B制备产物；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ = 7.56 (td, J = 8.1, 6.1Hz, 1H), 7.49 - 7.45 (m, 1H), 7.44 - 7.41 (m, 1H), 7.35 - 7.30 (m, 1H), 6.85- 6.80 (m, 1H), 5.15 - 5.09 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 2.99 - 2.91 (m, 2H), 2.45- 2.30 (m, 1H), 2.24 - 2.14 (m, 1H)；LC-MS (方法A): [M-H2O+H]+ = 344.9, Rt =2.28min；HPLC (方法A): 纯度100.0%, Rt = 2.71min。

已类似地获得(4R)-对映异构体。

化合物67a和68a的合成

向用惰性氮气氛吹扫并保持的50-mL圆底烧瓶中放入化合物4 (2.00g, 9.18mmol,1.00当量, 95%)、四氢呋喃(15.0mL, 175.89mmol, 19.17当量, 95%)、(甲基硫烷基)钠(812mg, 11.01mmol, 1.20当量, 95%)。所得溶液于25℃下搅拌2h。将残余物施加到硅胶柱上，使用乙酸乙酯/石油醚(1:10)。合并收集的级分并真空浓缩。这产生1.6g (77%) 1-氯-3-(甲基硫烷基)-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮，为红固体。

向用惰性氮气氛吹扫并保持的25-mL圆底烧瓶中放入1-氯-3-(甲基硫烷基)-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(200mg, 0.88mmol, 1.0当量, 96%)、二氯甲烷(5mL,74.72mmol, 85当量, 95%)、m-CPBA (638mg, 3.51mmol, 4.00当量, 95%)。所得溶液于25℃下搅拌2h。用4×10mL乙酸乙酯萃取所得溶液并合并有机层。将残余物施加到硅胶柱上，使用乙酸乙酯/石油醚(1/5)。合并收集的级分并真空浓缩。这产生220mg (90%) 1-氯-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮，为白固体。

向用惰性氮气氛吹扫并保持的500-mL圆底烧瓶中放入1-氯-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(4.00g, 15.412mmol, 1.00当量, 96.6%)、乙烷-1,2-二醇(1.51g,23.118mmol, 1.50当量, 95%)、TsOH (0.56g, 3.1mmol, 0.20当量, 95%)、甲苯(100mL,939.9mmol, 60.98当量, 100%)。所得溶液于125℃下搅拌16h。浓缩所得混合物。将残余物施加到硅胶柱上，使用乙酸乙酯/石油醚(1:3)。这产生4g (85.2%) 1-氯-3-甲磺酰-5,6-二氢螺[环戊并[c]噻吩-4,2-[1,3]二氧戊环]，为黄固体。

向用惰性氮气氛吹扫并保持的30-mL圆底烧瓶中放入1-氯-3-甲磺酰-5,6-二氢螺[环戊并[c]噻吩-4,2-[1,3]二氧戊环] (500mg, 1.671mmol, 1当量, 98.5%)、(3-氯-5-氟苯基)硼酸(442.4mg, 2.410mmol, 1.44当量, 95%)、Pd(PPh3)4 (291.7mg, 0.240mmol,0.14当量, 95%)、Na2CO3 (359.3mg, 8148mmol, 4876当量, 95%)、二氧六环(10mL,112.14mmol, 67.11当量, 95%)、H2O (1mL, 52.733mmol, 31.56当量, 95%)。所得溶液于80℃下搅拌3h。真空浓缩所得混合物。粗产物(515mg)通过快速制备谱法纯化。这产生0.515g (62.4%) 1-(3-氯-5-氟苯基)-3-甲磺酰-5,6-二氢螺[环戊并[c]噻吩-4,2-[1,3]二氧戊环]，为黄固体。

向用惰性氮气氛吹扫并保持的50-mL圆底烧瓶中放入1-(3-氯-5-氟苯基)-3-甲磺酰-5,6-二氢螺[环戊并[c]噻吩-4,2-[1,3]二氧戊环] (510mg, 0.816mmol, 1当量,62.2%)、DCM (4mL, 59.774mmol, 73.27当量, 95%)、TFA (140uL, 1.79mol, 95%)。所得溶液于25℃下搅拌60min。真空浓缩所得混合物。将残余物溶解在30mL EtOAc中。所得混合物用30ml NaHCO3和1×30mL NaCl溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥混合物并真空浓缩。这产生360mg (61.4%) 1-(3-氯-5-氟苯基)-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮，为黄固体。

在60℃下向30mL微波管中加入1-(3-氯-5-氟苯基)-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(300mg, 0.424mmol, 1当量, 48.7%)、甲醇(10mg, 0.296mmol, 0.7当量,95%)、选择性氟试剂 (705mg, 1.891mmol, 4.46当量, 95%)和H2SO4 (0.1mg, 1.782mmol,4.21当量, 95%)。所得混合物于60℃下在氮气氛下搅拌90min。将残余物溶解在EtOAc(50mL)中。所得混合物用2×30mL NaCl溶液洗涤并用无水Na2SO4干燥。过滤后，减压浓缩滤液。残余物通过制备-TLC (PE/EtOAc 5:1)纯化，得到1-(3-氯-5-氟苯基)-5-氟-3-甲磺酰-4,4-二甲氧基-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩 (130mg, 62.9%)，为黄油。

于室温下向10mL微波管中加入1-(3-氯-5-氟苯基)-5-氟-3-甲磺酰-4,4-二甲氧基-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩 (10mg, 0.020mmol, 1当量, 83.8%)、DCM (2.5mL)和TFA(170uL, 2.29mol, 95%)。所得混合物于室温下在氮气氛下搅拌60min，然后减压浓缩。将残余物溶解在EtOAc (10mL)中。所得混合物用1×5mL NaHCO3洗涤。所得混合物用1×5mLNaCl洗涤并用无水Na2SO4干燥。过滤后，减压浓缩滤液。减压浓缩所得混合物。这产生1-(3-氯-5-氟苯基)-5-氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(10.9mg, 89.3%)，为黄固体。

为了获得化合物67a，向用惰性氮气氛吹扫并保持的25-mL圆底烧瓶中放入1-(3-氯-5-氟苯基)-5-氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(150.00mg, 0.332mmol,1.00当量, 80.3%)、DCM (10.00mL, 117.739mmol, 473.78当量, 100%)、HCOOH (48.26mg,0.996mmol, 3当量, 95%)、TEA (70.73mg, 0.664mmol, 2当量, 95%)、RuCl(对伞花烃)[(R,R)-Ts-DPEN] (22.23mg, 0.033mmol, 0.1当量, 95%)。所得溶液于0℃下搅拌5h。用NaHCO3将溶液的pH值调节至7。所得溶液用3×30mL乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥并浓缩。粗产物通过制备-HPLC、然后通过手性SFC纯化，获得化合物67a，为白固体。该化合物展示出熔点为138-140℃。

为了制备足够量的材料以还获得化合物68a，向用惰性氮气氛吹扫并保持的25-mL圆底烧瓶中加入1-(3-氯-5-氟苯基)-5-氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-酮(150.00mg, 0.332mmol, 1.00当量, 80.3%)、DCM (10.00mL, 117.739mmol, 473.78当量,100%)、HCOOH (48.26mg, 0.996mmol, 3当量, 95%)、TEA (70.73mg, 0.664mmol, 2当量,95%)、RuCl(对伞花烃)[(R,R)-Ts-DPEN] (22.23mg, 0.033mmol, 0.1当量, 95%)。所得溶液于0℃下搅拌5h。用NaHCO3将溶液的pH值调节至7。所得溶液用3×30mL乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥并浓缩。粗产物通过制备-HPLC、然后通过手性SFC纯化，获得化合物68a，为白固体。该化合物展示出熔点为135-137℃。

(4S,5S)-1-(3-氯-5-氟苯基)-5-氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇(67a)

1H NMR (300 MHz, 甲醇-d4, ppm): δ = 7.46 (s, 1H), 7.35 - 7.31 (m, 2H),5.40 - 5.32 (m, 1H), 5.24 - 5.14 (m, 1H), 3.56 - 3.49 (m, 1H), 3.34 (S, 3H),3.19 - 2.97 (m, 1H)；LC-MS (方法D): Rt = 1.24 min, [M+44]+ = 408.7；HPLC (方法D): 纯度99.6%, Rt = 6.42min；手性SFC (方法G): Rt = 2.30min, er = 94.9%。

(4S,5R)-1-(3-氯-5-氟苯基)-5-氟-3-甲磺酰-4H,5H,6H-环戊并[c]噻吩-4-醇(68a)

1H NMR (300 MHz, 甲醇-d4, ppm): δ = 7.46 (s, 1H), 7.41 - 7.27 (m, 2H),5.52 - 5.27 (m, 1H), 5.24 - 5.18 (m, 1H), 3.69 - 3.40 (m, 1H), 3.35 (s, 3H),3.16 - 3.00 (m, 1H)；LC-MS (方法D): Rt = 1.30 min, [M+44]+ = 408.7；HPLC (方法D，运行时间延长至21min): 纯度97.0%, Rt = 14.56min；手性SFC (方法G): Rt =1.92min, er = 100%。

以下实施例涉及药剂：

实施例A：注射小瓶

使用2N盐酸将100g式I的活性成分和5g磷酸氢二钠在3 l重蒸馏水中的溶液调节至pH6.5，无菌过滤，转移到注射小瓶中，在无菌条件下冻干并在无菌条件下密封。每个注射小瓶含5mg活性成分。

实施例B：栓剂

将20g式I的活性成分与100g大豆卵磷脂和1400g可可脂的混合物熔化，倒入模具中并让其冷却。每个栓剂含20mg活性成分。

实施例C：溶液

由1g式I的活性成分、9.38g NaH2PO4∙2H2O、28.48g Na2HPO4∙12H2O和0.1g苯扎氯铵在940ml重蒸馏水中制备溶液。调节pH至6.8，将溶液补足至1 l并通过辐射灭菌。该溶液可以滴眼剂形式使用。

实施例D：软膏

在无菌条件下混合500mg式I的活性成分与99.5g凡士林。

实施例E：片剂

以常规方式将1kg式I的活性成分、4kg乳糖、1.2kg马铃薯淀粉、0.2kg滑石粉和0.1kg硬脂酸镁的混合物压制成片剂，使得每片片剂含10mg活性成分。

实施例F：糖衣丸

类似于实施例E压制片剂，随后以常规方式包被以蔗糖、马铃薯淀粉、滑石粉、黄芪胶和染料的包衣。

实施例G：胶囊

将2kg式I的活性成分以常规方式并入到硬明胶胶囊中，使得每个胶囊含20mg活性成分。

实施例H：安瓿

将1kg式I的活性成分在60 l重蒸馏水中的溶液无菌过滤，转移到安瓿中，在无菌条件下冻干并在无菌条件下密封。每个安瓿含10mg活性成分。