一种外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料及其制备方法

1.本发明属于养殖技术领域，尤其涉及一种外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料及其制备方法。

背景技术：

2.蛋白质是生物体结构组成和新陈代谢的一类重要大分子物质，机体的组织在不断的生成和分解，当蛋白质的合成超过分解时便会导致蛋白质的沉积。对于理想蛋白模型的追求需要考虑各氨基酸的均衡配比，防止氨基酸的浪费或是缺失造成的水产动物生长缓慢、功能障碍的情况。
3.三疣梭子蟹，中国东部沿海地区重要的经济养殖蟹类，因其鲜美的味道深受喜爱。2021年梭子蟹的海水养殖产量已达105283t，主要集中于福建、江苏、浙江、山东、广东等省份。目前鱼类和虾类都有比较成熟的的商业饲料来满足高密度养殖的营养需求。相较之下海水蟹的饲喂以低值鱼虾贝为主，数量和质量均不稳定，易带入病原体，败坏水质，降低养殖动物的免疫能力。而直接用对虾饲料投喂，成效不高且价格昂贵。精氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、氨酸以及缬氨酸是甲壳动物饲料中的十种必需氨基酸，仍有5种三疣梭子蟹生长的必需氨基酸数据库空缺，因此急需寻一种经济且成效较好的商业饲料来满足的三疣梭子蟹养殖产业。

技术实现要素：

4.本发明的目的是提供一种外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，通过提高异亮氨酸在三疣梭子蟹饲料中的含量，提供一种营养均衡、提高蛋白利用的饲料，从而得到满足三疣梭子蟹养殖产业健康可持续发展的经济型饲料。
5.本发明的目的可通过下列技术方案来实现：一种外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，以占三疣梭子蟹饲料总重的重量百分比含量计，所述三疣梭子蟹饲料中含有1.1-1.4％异亮氨酸。
6.作为优选，由以下质量百分含量的原料组成：2.5-3.2％磷虾粉、2.5-3.2％鸡蛋粉，9.5-10.2％豆粕、4.5-5.2％玉米蛋白粉、27-28.5％玉米淀粉、6.5-7％必需氨基酸混合物、21-22％非必需氨基酸混合物、0.5-1％异亮氨酸、1.5-2.5％诱食剂、1-1.5％磷酸二氢钙、0.1-1.5％氯化胆碱、0.3-0.7％维生素预混料、0.5-1.2％矿物质预混料、1.75-2％鱼油、1.5-1.8％豆油、1.5-2％大豆卵磷脂、1.5-2％海藻酸钠、1-1.5％羧甲基纤维素，余量为鱼粉。
7.进一步地，由以下质量百分含量的原料组成：3％磷虾粉、3％鸡蛋粉，10％豆粕、5％玉米蛋白粉、28％玉米淀粉、6.89％必需氨基酸混合物、21.16％非必需氨基酸混合物、0.8％异亮氨酸、2％诱食剂、1.5％磷酸二氢钙、0.3％氯化胆碱、0.5％维生素预混料、1％矿物质预混料、1.73％鱼油、1.73％豆油、2％大豆卵磷脂、2％海藻酸钠、1.39％羧甲基纤维素，余量为鱼粉。
8.作为优选，以质量百分比计，所述必需氨基酸混合物由如下组分组成：26-26.8％精氨酸，5-5.5％组氨酸，4.2-4.5％亮氨酸，20-21％赖氨酸，9-10％蛋氨酸，10-10.5％苯丙氨酸，11-11.5％苏氨酸，3.2-3.5％氨酸，8-8.5％缬氨酸，余量为精氨酸
9.进一步地，以质量百分比计，所述必需氨基酸混合物由如下组分组成：26.5％精氨酸，5.4％组氨酸，4.41％亮氨酸，20.49％赖氨酸，9.68％蛋氨酸，10.25％苯丙氨酸，11.49％苏氨酸，3.42％氨酸，8.36％缬氨酸，余量为精氨酸。
10.进一步地，以质量百分比计，所述非必需氨基酸混合物由天冬氨酸和甘氨酸1:1混合得到。
11.作为优选，以质量百分比计，所述维生素预混料由如下组分组成：0.1-0.2％乙酸视黄酯、0.1-0.2％胆钙化醇、1-3％全rac-α-生育酚、0.5-1％甲萘醌、1-2％硫胺素、0.7-0.8％核黄素、2-4％抗坏血酸、1-1.5％盐酸吡哆醇、0.1-0.3％氰钴胺、3-5％叶酸、1.2-1.3％生物素、3.5-4.5％烟酸、1.5-1.8％d-钙泛酸盐、20-21％肌醇，余量为羧甲基纤维素。
12.进一步地，以质量百分比计，所述维生素预混料由如下组分组成：0.12％乙酸视黄酯、0.12％胆钙化醇、2％全rac-α-生育酚、0.9％甲萘醌、1.1％硫胺素、0.75％核黄素、3％抗坏血酸、1.2％盐酸吡哆醇、0.2％氰钴胺、4％叶酸、1.25％生物素、4.04％烟酸、1.6％d-钙泛酸盐、20.4％肌醇，余量为羧甲基纤维素。
13.作为优选，以质量百分比计，所述矿物质预混料由如下组分组成：0.4-0.5％柠檬酸铁，0.9-1.0％七水合硫酸锌、0.4-0.5％一水合硫酸锰、0.6-0.7％五水合硫酸铜、23-24％七水合硫酸锰、23-24％磷酸二氢钾、12-14％磷酸二氢钠、3-4％五水合乳酸钙、0.1-0.2％六水合氯化钴，余量为沸石粉。
14.进一步地，以质量百分比计，所述矿物质预混料由如下组分组成：0.457％柠檬酸铁，0.943％七水合硫酸锌、0.414％一水合硫酸锰、0.661％五水合硫酸铜、23.9％七水合硫酸锰、23.3％磷酸二氢钾、13.7％磷酸二氢钠、3.4％五水合乳酸钙、0.136％六水合氯化钴，余量为沸石粉。
15.作为优选，所述三疣梭子蟹饲料中的营养成分包括如下质量百分比的组分：45-45.5％粗蛋白，8-9％粗脂肪，27-28％碳水化合物，5-6％粗纤维，5-6％灰分、8-9％水分。
16.进一步地，所述三疣梭子蟹饲料中的营养成分包括如下质量百分比的组分：45.30％粗蛋白，8.02％粗脂肪，27.52％碳水化合物，5.03％粗纤维，5.40％灰分、8.73％水分。
17.本发明的另一个目的在于提供一种外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料的制备方法，所述制备方法具体包括如下步骤：
18.s1、预先将配方比例的大豆磷脂溶于鱼油和豆油，并混匀；
19.s2、将除大豆磷脂、鱼油、豆油外的其他原料预先粉碎并过60目筛，按配方准确称取，各种饲料成分按比重从小到大逐级混匀后，加入大豆磷脂、豆油与鱼油的混合物充分混匀后加质量为原料质量30％的水并充分混匀；
20.s3、将步骤s2混匀后的饲料原料放入自动制粒机中制成粒径大小为2mm和4mm的饲料颗粒，自然风干后得到三疣梭子蟹饲料。
21.与现有技术相比，本发明具有如下优点：
22.其一、异亮氨酸属于支链氨基酸，经脱氨反应后会释放到循环中供肝脏吸收和分
解代谢，再经过支链α-酮酸脱氢酶复合物作用氧化脱羧，经过一系列复杂反应最终进入三羧酸循环生成丙酰辅酶a和乙酰辅酶a。tor通路是一种主要的营养敏感通路，它接收和整合细胞中的氨基酸、生长因子、能量状态和应激信号，并调节细胞的生长和代谢。在鱼类和甲壳动物中已有大量的研究证实了tor通路与蛋白合成代谢紧密相关。异亮氨酸可刺激骨骼肌体外蛋白合成，通过激活mtor信号通路，包括磷酸化s6k1、4e结合蛋白1(4ebp1)和真核起始因子4e(eif4e)组装，部分调节mrna翻译中的蛋白质功能。也有研究表明异亮氨酸转氨产物可以降低心肌细胞中mtorc2的蛋白表达；
23.其二、梭子蟹肌肉为主要的可食用部分，有研究表明，鱼、蟹肌肉的纹理特征与肌纤维结构有关，还有研究报道异亮氨酸影响鱼类肌细胞的增殖和扩大，本发明通过外源增加异亮氨酸的含量，进一步提高较高直径的肌肉纤维频率，增加可食用性；
24.其三、本发明提供的异亮氨酸添加饲料所用原料来源充足，可规模化生产；
25.其四、本发明饲料配方营养均衡，多种蛋白原料混用且节约鱼粉用量，通过添加富含胆固醇的鸡蛋粉替代价格高昂的胆固醇，降低饲料成本；
26.其五、本发明为三疣梭子蟹养成期提供一种可增加蛋白质合成代谢，提高肌肉蛋白质沉积。
附图说明
27.图1为不同异亮氨酸含量的饲料对三疣梭子蟹肝胰腺蛋白合成代谢以及氨基酸转氨相关基因表达的影响；
28.图2为投喂不同异亮氨酸含量的饲料后，三疣梭子蟹肌纤维横切的切片图；
29.图3为不同异亮氨酸含量的饲料对三疣梭子蟹肌纤维密度的影响；
30.图4为不同异亮氨酸含量的饲料对三疣梭子蟹肌纤维直径频率的影响。
具体实施方式
31.为使本发明的上述目的、特征和优点能够更为明显易懂，下面结合附图对本发明的具体实施例做详细的说明。
32.实施例1
33.一种外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，由以下质量百分含量的原料组成：秘鲁鱼粉8％、磷虾粉3％、鸡蛋粉3％，豆粕10％、玉米蛋白粉5％、玉米淀粉28％、必需氨基酸混合物6.89％、非必需氨基酸混合物21.75％、诱食剂2％、磷酸二氢钙1.5％、氯化胆碱0.3％、维生素预混料0.5％、矿物质预混料1％、鱼油1.73％、豆油1.73％、大豆卵磷脂2％、海藻酸钠2％、羧甲基纤维素1.60％；其中维生素预混料由如下组分组成：0.12％乙酸视黄酯、0.12％胆钙化醇、2％全rac-α-生育酚、0.9％甲萘醌、1.1％硫胺素、0.75％核黄素、3％抗坏血酸、1.2％盐酸吡哆醇、0.2％氰钴胺、4％叶酸、1.25％生物素、4.04％烟酸、1.6％d-钙泛酸盐、20.4％肌醇，余量为羧甲基纤维素；矿物质预混料由如下组分组成：0.457％柠檬酸铁，0.943％七水合硫酸锌、0.414％一水合硫酸锰、0.661％五水合硫酸铜、23.9％七水合硫酸锰、23.3％磷酸二氢钾、13.7％磷酸二氢钠、3.4％五水合乳酸钙、0.136％六水合氯化钴，余量为沸石粉；必需氨基酸混合物由如下组分组成：26.5％精氨酸，5.4％组氨酸，4.41％亮氨酸，20.49％赖氨酸，9.68％蛋氨酸，10.25％苯丙氨酸，11.49％苏氨酸，3.42％
氨酸，8.36％缬氨酸，余量为精氨酸；非必需氨基酸混合物由天冬氨酸和甘氨酸1:1混合得到；
34.在本实施例中，三疣梭子蟹饲料中的营养成分包括如下质量百分比的组分：44.94％粗蛋白，8.06％粗脂肪，27.92％碳水化合物，5.18％粗纤维，5.18％灰分、10％水分。
35.在本实施例中，以占三疣梭子蟹饲料总重的重量百分比含量计，含有0.69％异亮氨酸。
36.本实施例三疣梭子蟹饲料的制备方法具体包括如下步骤：
37.s1、预先将配方比例的大豆磷脂溶于鱼油和豆油，并混匀；
38.s2、将除大豆磷脂、鱼油、豆油外的其他原料预先粉碎并过60目筛，按配方准确称取，各种饲料成分按比重从小到大逐级混匀后，加入大豆磷脂、豆油与鱼油的混合物充分混匀后加质量为原料质量30％的水并充分混匀；
39.s3、将步骤s2混匀后的饲料原料放入自动制粒机中制成粒径大小为2mm和4mm的饲料颗粒，自然风干后得到三疣梭子蟹饲料。
40.实施例2
41.一种外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，由以下质量百分含量的原料组成：秘鲁鱼粉8％、磷虾粉3％、鸡蛋粉3％，豆粕10％、玉米蛋白粉5％、玉米淀粉28％、必需氨基酸混合物(除异亮氨酸外)6.89％、非必需氨基酸混合物(天冬氨酸和甘氨酸1:1混合)21.45％、异亮氨酸0.4％、诱食剂2％、磷酸二氢钙1.5％、氯化胆碱0.3％、维生素预混料0.5％、矿物质预混料1％、鱼油1.73％、豆油1.73％、大豆卵磷脂2％、海藻酸钠2％、羧甲基纤维素1.49％；其中维生素预混料由如下组分组成：0.12％乙酸视黄酯、0.12％胆钙化醇、2％全rac-α-生育酚、0.9％甲萘醌、1.1％硫胺素、0.75％核黄素、3％抗坏血酸、1.2％盐酸吡哆醇、0.2％氰钴胺、4％叶酸、1.25％生物素、4.04％烟酸、1.6％d-钙泛酸盐、20.4％肌醇，余量为羧甲基纤维素；矿物质预混料由如下组分组成：0.457％柠檬酸铁，0.943％七水合硫酸锌、0.414％一水合硫酸锰、0.661％五水合硫酸铜、23.9％七水合硫酸锰、23.3％磷酸二氢钾、13.7％磷酸二氢钠、3.4％五水合乳酸钙、0.136％六水合氯化钴，余量为沸石粉；必需氨基酸混合物由如下组分组成：26.5％精氨酸，5.4％组氨酸，4.41％亮氨酸，20.49％赖氨酸，9.68％蛋氨酸，10.25％苯丙氨酸，11.49％苏氨酸，3.42％氨酸，8.36％缬氨酸，余量为精氨酸；非必需氨基酸混合物由天冬氨酸和甘氨酸1:1混合得到；
42.在本实施例中，三疣梭子蟹饲料中的营养成分包括如下质量百分比的组分：45.84％粗蛋白，7.92％粗脂肪，27％碳水化合物，5.94％粗纤维，5.10％灰分、8.20％水分。
43.在本实施例中，以占三疣梭子蟹饲料总重的重量百分比含量计，含有1.06％异亮氨酸。
44.本实施例三疣梭子蟹饲料的制备方法具体包括如下步骤：
45.s1、预先将配方比例的大豆磷脂溶于鱼油和豆油，并混匀；
46.s2、将除大豆磷脂、鱼油、豆油外的其他原料预先粉碎并过60目筛，按配方准确称取，各种饲料成分按比重从小到大逐级混匀后，加入大豆磷脂、豆油与鱼油的混合物充分混匀后加质量为原料质量30％的水并充分混匀；
47.s3、将步骤s2混匀后的饲料原料放入自动制粒机中制成粒径大小为2mm和4mm的饲
料颗粒，自然风干后得到三疣梭子蟹饲料。
48.实施例3
49.一种外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，由以下质量百分含量的原料组成：秘鲁鱼粉8％、磷虾粉3％、鸡蛋粉3％，豆粕10％、玉米蛋白粉5％、玉米淀粉28％、必需氨基酸混合物(除异亮氨酸外)6.89％、非必需氨基酸混合物(天冬氨酸和甘氨酸1:1混合)21.16％、异亮氨酸0.8％、诱食剂2％、磷酸二氢钙1.5％、氯化胆碱0.3％、维生素预混料0.5％、矿物质预混料1％、鱼油1.73％、豆油1.73％、大豆卵磷脂2％、海藻酸钠2％、羧甲基纤维素1.39％；其中维生素预混料由如下组分组成：0.12％乙酸视黄酯、0.12％胆钙化醇、2％全rac-α-生育酚、0.9％甲萘醌、1.1％硫胺素、0.75％核黄素、3％抗坏血酸、1.2％盐酸吡哆醇、0.2％氰钴胺、4％叶酸、1.25％生物素、4.04％烟酸、1.6％d-钙泛酸盐、20.4％肌醇，余量为羧甲基纤维素；矿物质预混料由如下组分组成：0.457％柠檬酸铁，0.943％七水合硫酸锌、0.414％一水合硫酸锰、0.661％五水合硫酸铜、23.9％七水合硫酸锰、23.3％磷酸二氢钾、13.7％磷酸二氢钠、3.4％五水合乳酸钙、0.136％六水合氯化钴，余量为沸石粉；必需氨基酸混合物由如下组分组成：26.5％精氨酸，5.4％组氨酸，4.41％亮氨酸，20.49％赖氨酸，9.68％蛋氨酸，10.25％苯丙氨酸，11.49％苏氨酸，3.42％氨酸，8.36％缬氨酸，余量为精氨酸；非必需氨基酸混合物由天冬氨酸和甘氨酸1:1混合得到；
50.在本实施例中，三疣梭子蟹饲料中的营养成分包括如下质量百分比的组分：45.30％粗蛋白，8.02％粗脂肪，27.52％碳水化合物，5.03％粗纤维，5.40％灰分、8.73％水分。
51.在本实施例中，以占三疣梭子蟹饲料总重的重量百分比含量计，含有1.32％异亮氨酸。
52.本实施例三疣梭子蟹饲料的制备方法具体包括如下步骤：
53.s1、预先将配方比例的大豆磷脂溶于鱼油和豆油，并混匀；
54.s2、将除大豆磷脂、鱼油、豆油外的其他原料预先粉碎并过60目筛，按配方准确称取，各种饲料成分按比重从小到大逐级混匀后，加入大豆磷脂、豆油与鱼油的混合物充分混匀后加质量为原料质量30％的水并充分混匀；
55.s3、将步骤s2混匀后的饲料原料放入自动制粒机中制成粒径大小为2mm和4mm的饲料颗粒，自然风干后得到三疣梭子蟹饲料。
56.实施例4
57.一种外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，由以下质量百分含量的原料组成：秘鲁鱼粉8％、磷虾粉3％、鸡蛋粉3％，豆粕10％、玉米蛋白粉5％、玉米淀粉28％、必需氨基酸混合物(除异亮氨酸外)6.89％、非必需氨基酸混合物(天冬氨酸和甘氨酸1:1混合)20.87％、异亮氨酸1.2％、诱食剂2％、磷酸二氢钙1.5％、氯化胆碱0.3％、维生素预混料0.5％、矿物质预混料1％、鱼油1.73％、豆油1.73％、大豆卵磷脂2％、海藻酸钠2％、羧甲基纤维素1.28％；其中维生素预混料由如下组分组成：0.12％乙酸视黄酯、0.12％胆钙化醇、2％全rac-α-生育酚、0.9％甲萘醌、1.1％硫胺素、0.75％核黄素、3％抗坏血酸、1.2％盐酸吡哆醇、0.2％氰钴胺、4％叶酸、1.25％生物素、4.04％烟酸、1.6％d-钙泛酸盐、20.4％肌醇，余量为羧甲基纤维素；矿物质预混料由如下组分组成：0.457％柠檬酸铁，0.943％七水合硫酸锌、0.414％一水合硫酸锰、0.661％五水合硫酸铜、23.9％七水合硫酸锰、23.3％磷
酸二氢钾、13.7％磷酸二氢钠、3.4％五水合乳酸钙、0.136％六水合氯化钴，余量为沸石粉；必需氨基酸混合物由如下组分组成：26.5％精氨酸，5.4％组氨酸，4.41％亮氨酸，20.49％赖氨酸，9.68％蛋氨酸，10.25％苯丙氨酸，11.49％苏氨酸，3.42％氨酸，8.36％缬氨酸，余量为精氨酸；非必需氨基酸混合物由天冬氨酸和甘氨酸1:1混合得到；
58.在本实施例中，三疣梭子蟹饲料中的营养成分包括如下质量百分比的组分：45.73％粗蛋白，7.95％粗脂肪，27.08％碳水化合物，4.97％粗纤维，5.15％灰分、9.12％水分。
59.在本实施例中，以占三疣梭子蟹饲料总重的重量百分比含量计，含有1.78％异亮氨酸。
60.本实施例三疣梭子蟹饲料的制备方法具体包括如下步骤：
61.s1、预先将配方比例的大豆磷脂溶于鱼油和豆油，并混匀；
62.s2、将除大豆磷脂、鱼油、豆油外的其他原料预先粉碎并过60目筛，按配方准确称取，各种饲料成分按比重从小到大逐级混匀后，加入大豆磷脂、豆油与鱼油的混合物充分混匀后加质量为原料质量30％的水并充分混匀；
63.s3、将步骤s2混匀后的饲料原料放入自动制粒机中制成粒径大小为2mm和4mm的饲料颗粒，自然风干后得到三疣梭子蟹饲料。
64.实施例5
65.一种外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，由以下质量百分含量的原料组成：秘鲁鱼粉8％、磷虾粉3％、鸡蛋粉3％，豆粕10％、玉米蛋白粉5％、玉米淀粉28％、必需氨基酸混合物(除异亮氨酸外)6.89％、非必需氨基酸混合物(天冬氨酸和甘氨酸1:1混合)20.58％、异亮氨酸1.6％、诱食剂2％、磷酸二氢钙1.5％、氯化胆碱0.3％、维生素预混料0.5％、矿物质预混料1％、鱼油1.73％、豆油1.73％、大豆卵磷脂2％、海藻酸钠2％、羧甲基纤维素1.17％；其中维生素预混料由如下组分组成：0.12％乙酸视黄酯、0.12％胆钙化醇、2％全rac-α-生育酚、0.9％甲萘醌、1.1％硫胺素、0.75％核黄素、3％抗坏血酸、1.2％盐酸吡哆醇、0.2％氰钴胺、4％叶酸、1.25％生物素、4.04％烟酸、1.6％d-钙泛酸盐、20.4％肌醇，余量为羧甲基纤维素；矿物质预混料由如下组分组成：0.457％柠檬酸铁，0.943％七水合硫酸锌、0.414％一水合硫酸锰、0.661％五水合硫酸铜、23.9％七水合硫酸锰、23.3％磷酸二氢钾、13.7％磷酸二氢钠、3.4％五水合乳酸钙、0.136％六水合氯化钴，余量为沸石粉；必需氨基酸混合物由如下组分组成：26.5％精氨酸，5.4％组氨酸，4.41％亮氨酸，20.49％赖氨酸，9.68％蛋氨酸，10.25％苯丙氨酸，11.49％苏氨酸，3.42％氨酸，8.36％缬氨酸，余量为精氨酸；非必需氨基酸混合物由天冬氨酸和甘氨酸1:1混合得到；
66.在本实施例中，三疣梭子蟹饲料中的营养成分包括如下质量百分比的组分：45.57％粗蛋白，7.84％粗脂肪，27.56％碳水化合物，6.29％粗纤维，5.05％灰分、7.69％水分。
67.在本实施例中，以占三疣梭子蟹饲料总重的重量百分比含量计，含有2.03％异亮氨酸。
68.本实施例三疣梭子蟹饲料的制备方法具体包括如下步骤：
69.s1、预先将配方比例的大豆磷脂溶于鱼油和豆油，并混匀；
70.s2、将除大豆磷脂、鱼油、豆油外的其他原料预先粉碎并过60目筛，按配方准确称
取，各种饲料成分按比重从小到大逐级混匀后，加入大豆磷脂、豆油与鱼油的混合物充分混匀后加质量为原料质量30％的水并充分混匀；
71.s3、将步骤s2混匀后的饲料原料放入自动制粒机中制成粒径大小为2mm和4mm的饲料颗粒，自然风干后得到三疣梭子蟹饲料。
72.实施例6
73.一种外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，由以下质量百分含量的原料组成：秘鲁鱼粉8％、磷虾粉3％、鸡蛋粉3％，豆粕10％、玉米蛋白粉5％、玉米淀粉28％、必需氨基酸混合物(除异亮氨酸外)6.89％、非必需氨基酸混合物(天冬氨酸和甘氨酸1:1混合)20.28％、异亮氨酸1.6％、诱食剂2％、磷酸二氢钙1.5％、氯化胆碱0.3％、维生素预混料0.5％、矿物质预混料1％、鱼油1.73％、豆油1.73％、大豆卵磷脂2％、海藻酸钠2％、羧甲基纤维素1.06％；其中维生素预混料由如下组分组成：0.12％乙酸视黄酯、0.12％胆钙化醇、2％全rac-α-生育酚、0.9％甲萘醌、1.1％硫胺素、0.75％核黄素、3％抗坏血酸、1.2％盐酸吡哆醇、0.2％氰钴胺、4％叶酸、1.25％生物素、4.04％烟酸、1.6％d-钙泛酸盐、20.4％肌醇，余量为羧甲基纤维素；矿物质预混料由如下组分组成：0.457％柠檬酸铁，0.943％七水合硫酸锌、0.414％一水合硫酸锰、0.661％五水合硫酸铜、23.9％七水合硫酸锰、23.3％磷酸二氢钾、13.7％磷酸二氢钠、3.4％五水合乳酸钙、0.136％六水合氯化钴，余量为沸石粉；必需氨基酸混合物由如下组分组成：26.5％精氨酸，5.4％组氨酸，4.41％亮氨酸，20.49％赖氨酸，9.68％蛋氨酸，10.25％苯丙氨酸，11.49％苏氨酸，3.42％氨酸，8.36％缬氨酸，余量为精氨酸；非必需氨基酸混合物由天冬氨酸和甘氨酸1:1混合得到；
74.在本实施例中，三疣梭子蟹饲料中的营养成分包括如下质量百分比的组分：45.93％粗蛋白，7.62％粗脂肪，27.57％碳水化合物，5.43％粗纤维，5.16％灰分、8.29％水分。
75.在本实施例中，以占三疣梭子蟹饲料总重的重量百分比含量计，含有2.38％异亮氨酸。
76.本实施例三疣梭子蟹饲料的制备方法具体包括如下步骤：
77.s1、预先将配方比例的大豆磷脂溶于鱼油和豆油，并混匀；
78.s2、将除大豆磷脂、鱼油、豆油外的其他原料预先粉碎并过60目筛，按配方准确称取，各种饲料成分按比重从小到大逐级混匀后，加入大豆磷脂、豆油与鱼油的混合物充分混匀后加质量为原料质量30％的水并充分混匀；
79.s3、将步骤s2混匀后的饲料原料放入自动制粒机中制成粒径大小为2mm和4mm的饲料颗粒，自然风干后得到三疣梭子蟹饲料。
80.试验部分：
81.1、试验过程
82.将实施例1-6制得的三疣梭子蟹饲料对三疣梭子蟹进行喂食，喂食的具体步骤为：选取180只初始体重为16.30
±
0.01g的三疣梭子蟹随机分配到水泥池(6.8m
×
3.8m
×
1.7m)中的180个塑料筐中(35cm
×
30cm
×
35cm)，投喂实施例1至实施例6中的三疣梭子蟹饲料，1个饲料组分为3个平行组，每个平行组10只蟹，养殖实验持续6周，每天08:00和18:00各投喂一次，喂食蟹体重的6％-8％，其中养殖实验前3周喂食粒径大小为2mm的三疣梭子蟹饲料，养殖实验后3周喂食粒径大小为4mm的三疣梭子蟹饲料，每天清理并统计残饵数、蜕壳数和
死亡蟹重，实验结束后统计存活率，测定每只蟹的体重，计算增重率、特定生长率和蜕壳率，测定肌肉常规组分、肝胰腺蛋白合成代谢和氨基酸转氨关键基因表达，观察肌肉纤维在光学显微镜下的结构性状并测定异亮氨酸水平对三疣梭子蟹肌纤维密度(n/mm2)和肌纤维直径频率(％)的影响。
83.2、试验结果
84.上述试验的试验结果如表1-表3及图1、图2、图3和图4所示，其中表1为不同异亮氨酸含量的三疣梭子蟹饲料对三疣梭子蟹的存活率、末重、增重率的影响结果表；表2为不同异亮氨酸含量的三疣梭子蟹饲料对三疣梭子蟹的特定生长率和蜕壳率的影响结果表；表3为不同异亮氨酸含量的三疣梭子蟹饲料对肌肉常规组分的影响；图1为不同异亮氨酸含量的饲料对三疣梭子蟹肝胰腺蛋白合成代谢以及氨基酸转氨相关基因表达的影响；图2为投喂不同异亮氨酸含量的饲料后，三疣梭子蟹肌纤维横切的切片图；图3为不同异亮氨酸含量的饲料对三疣梭子蟹肌纤维密度的影响；图4为不同异亮氨酸含量的饲料对三疣梭子蟹肌纤维直径频率的影响。
85.表1：不同异亮氨酸含量的三疣梭子蟹饲料对三疣梭子蟹的存活率、末重、增重率的影响结果表
[0086][0087][0088]
表2：不同异亮氨酸含量的三疣梭子蟹饲料对三疣梭子蟹的特定生长率和蜕壳率的影响结果表
[0089]
组别特定生长率(％)蜕壳率(％)实施例10.93
±
0.08a0.97
±
0.05
ab
实施例21.18
±
0.03
bc
1.03
±
0.02b实施例31.14
±
0.02
bc
1.09
±
0.02b实施例41.22
±
0.01c1.03
±
0.02b实施例51.03
±
0.00
ab
1.26
±
0.00c实施例61.04
±
0.04
abc
0.88
±
0.03a[0090]
表3：不同异亮氨酸含量的三疣梭子蟹饲料对肌肉常规组分的影响结果表
[0091]
组别干物质(％)粗蛋白(％)粗脂肪(％)粗灰分(％)实施例120.06
±
0.4782.24
±
0.19a2.97
±
0.382.08
±
0.08
实施例219.08
±
0.4484.43
±
0.96
ab
2.51
±
0.402.12
±
0.22实施例318.83
±
0.3787.41
±
1.57
bc
2.84
±
0.432.08
±
0.09实施例418.53
±
0.8792.54
±
1.36d2.26
±
0.142.09
±
0.09实施例519.46
±
0.2392.44
±
0.24d2.15
±
0.382.04
±
0.04实施例619.88
±
0.6190.78
±
1.09
cd
2.04
±
0.332.06
±
0.09
[0092]
从表1和表2可以看出，实施例1至实施例6处理组的三疣梭子蟹存活率、末重、增重率、特定生长率和蜕壳率，结果显示实施例2至实施例4处理组的末重、增重率和特定生长率显著高于实施例1处理组(p《0.05)。实施例2至实施例5处理组的蜕壳率显著高于实施例6处理组(p《0.05)。但实施例1至实施例6处理组的三疣梭子蟹存活率无显著差异(p》0.05)。
[0093]
从表3可以看出，实施例3至实施例6处理组的肌肉粗蛋白含量显著高于实施例1处理组(p《0.05)。
[0094]
图1是不同异亮氨酸含量的饲料对三疣梭子蟹肝胰腺蛋白合成代谢以及氨基酸转氨相关基因表达的影响。结果显示，实施例3至实施例5的肝胰腺akt基因表达量显著高于实施例1、实施例2和实施例6。实施例3的肝胰腺pi3k、s6k1、bcat、alt和ast的基因表达量显著高于其它实施处理组；图2、图3和图4是不同异亮氨酸含量的饲料对三疣梭子蟹肌纤维密度(n/mm2)和肌纤维直径频率(％)的影响，从图2、图3和图4可以看出，实施例1的蟹的肌纤维密度明显最大，而实施例4的蟹的肌肉纤维密度最小，随着饲料中异亮氨酸水平从0.69％上升到2.38％，小于80微米的肌纤维直径的百分比明显下降，而与饲喂实施例1饲料的蟹相比，饲喂实施例2-6的蟹大于等于80且小于200微米的肌纤维直径的百分比更高，然而，在不同的处理组中，肌纤维直径大于或等于200微米的百分比没有显著差异。
[0095]
虽然本公开披露如上，但本公开的保护范围并非仅限于此。本领域技术人员，在不脱离本公开的精神和范围的前提下，可进行各种变更与修改，这些变更与修改均将落入本发明的保护范围。

技术特征：

1.一种外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，其特征在于，以占三疣梭子蟹饲料总重的重量百分比含量计，所述三疣梭子蟹饲料中含有1.1-1.4％异亮氨酸。2.如权利要求1所述的外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，其特征在于，由以下质量百分含量的原料组成：2.5-3.2％磷虾粉、2.5-3.2％鸡蛋粉，9.5-10.2％豆粕、4.5-5.2％玉米蛋白粉、27-28.5％玉米淀粉、6.5-7％必需氨基酸混合物、21-22％非必需氨基酸混合物、0.5-1％异亮氨酸、1.5-2.5％诱食剂、1-1.5％磷酸二氢钙、0.1-1.5％氯化胆碱、0.3-0.7％维生素预混料、0.5-1.2％矿物质预混料、1.75-2％鱼油、1.5-1.8％豆油、1.5-2％大豆卵磷脂、1.5-2％海藻酸钠、1-1.5％羧甲基纤维素，余量为鱼粉。3.如权利要求2所述的外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，其特征在于，由以下质量百分含量的原料组成：3％磷虾粉、3％鸡蛋粉，10％豆粕、5％玉米蛋白粉、28％玉米淀粉、6.89％必需氨基酸混合物、21.16％非必需氨基酸混合物、0.8％异亮氨酸、2％诱食剂、1.5％磷酸二氢钙、0.3％氯化胆碱、0.5％维生素预混料、1％矿物质预混料、1.73％鱼油、1.73％豆油、2％大豆卵磷脂、2％海藻酸钠、1.39％羧甲基纤维素，余量为鱼粉。4.如权利要求2所述的外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，其特征在于，以质量百分比计，所述必需氨基酸混合物由如下组分组成：26-26.8％精氨酸，5-5.5％组氨酸，4.2-4.5％亮氨酸，20-21％赖氨酸，9-10％蛋氨酸，10-10.5％苯丙氨酸，11-11.5％苏氨酸，3.2-3.5％氨酸，8-8.5％缬氨酸，余量为精氨酸。5.如权利要求4所述的外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，其特征在于，以质量百分比计，所述必需氨基酸混合物由如下组分组成：26.5％精氨酸，5.4％组氨酸，4.41％亮氨酸，20.49％赖氨酸，9.68％蛋氨酸，10.25％苯丙氨酸，11.49％苏氨酸，3.42％氨酸，8.36％缬氨酸，余量为精氨酸。6.如权利要求2所述的外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，其特征在于，以质量百分比计，所述维生素预混料由如下组分组成：0.1-0.2％乙酸视黄酯、0.1-0.2％胆钙化醇、1-3％全rac-α-生育酚、0.5-1％甲萘醌、1-2％硫胺素、0.7-0.8％核黄素、2-4％抗坏血酸、1-1.5％盐酸吡哆醇、0.1-0.3％氰钴胺、3-5％叶酸、1.2-1.3％生物素、3.5-4.5％烟酸、1.5-1.8％d-钙泛酸盐、20-21％肌醇，余量为羧甲基纤维素。7.如权利要求2所述的外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，其特征在于，以质量百分比计，所述矿物质预混料由如下组分组成：0.4-0.5％柠檬酸铁，0.9-1.0％七水合硫酸锌、0.4-0.5％一水合硫酸锰、0.6-0.7％五水合硫酸铜、23-24％七水合硫酸锰、23-24％磷酸二氢钾、12-14％磷酸二氢钠、3-4％五水合乳酸钙、0.1-0.2％六水合氯化钴，余量为沸石粉。8.如权利要求1-7任一所述的外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，其特征在于，所述三疣梭子蟹饲料中的营养成分包括如下质量百分比的组分：45-45.5％粗蛋白，8-9％粗脂肪，27-28％碳水化合物，5-6％粗纤维，5-6％灰分、8-9％水分。9.如权利要求8所述的外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，其特征在于，所述三疣梭子蟹饲料中的营养成分包括如下质量百分比的组分：45.30％粗蛋白，8.02％粗脂肪，27.52％碳水化合物，5.03％粗纤维，5.40％灰分、8.73％水分。10.一种如权利要求1-7任一所述的外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体包括如下步骤：s1、预先将配方比例的大豆磷脂溶于鱼油和豆油，并混匀；
s2、将除大豆磷脂、鱼油、豆油外的其他原料预先粉碎并过60目筛，按配方准确称取，各种饲料成分按比重从小到大逐级混匀后，加入大豆磷脂、豆油与鱼油的混合物充分混匀后加质量为原料质量30％的水并充分混匀；s3、将步骤s2混匀后的饲料原料放入自动制粒机中制成粒径大小为2mm和4mm的饲料颗粒，自然风干后得到外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料。

技术总结

本发明公开了一种外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料，以占三疣梭子蟹饲料总重的重量百分比含量计，三疣梭子蟹饲料中含有1.1-1.4％异亮氨酸，具体由以下质量百分含量的原料组成：2.5-3.2％磷虾粉、2.5-3.2％鸡蛋粉，9.5-10.2％豆粕、4.5-5.2％玉米蛋白粉、27-28.5％玉米淀粉、6.5-7％必需氨基酸混合物、21-22％非必需氨基酸混合物、0.5-1％异亮氨酸、1.5-2.5％诱食剂、1-1.5％磷酸二氢钙、0.1-1.5％氯化胆碱、0.3-0.7％维生素预混料、0.5-1.2％矿物质预混料、1.75-2％鱼油、1.5-1.8％豆油、1.5-2％大豆卵磷脂、1.5-2％海藻酸钠、1-1.5％羧甲基纤维素，余量为鱼粉，本发明还提供了外源添加异亮氨酸的三疣梭子蟹饲料三疣梭子蟹饲料的制备方法，本发明通过提高异亮氨酸在三疣梭子蟹饲料中的含量，从而得到满足三疣梭子蟹养殖产业健康可持续发展的经济型饲料。梭子蟹养殖产业健康可持续发展的经济型饲料。梭子蟹养殖产业健康可持续发展的经济型饲料。