一种生脉注射液精制方法与流程

1.本发明涉及一种中药制剂的制备方法，特别涉及一种生脉注射液的精制方法，属于医药技术领域。

背景技术：

2.生脉注射液具有益气养阴，复脉固脱。用于气阴两亏，脉虚欲脱的心悸、气短、四肢厥冷、汗出、脉欲绝及心肌梗塞、心源性休克、感染性休克等具有上述证候者。
3.生脉注射液由红参、麦冬和五味子组成，含有人参皂苷、麦冬皂苷、麦冬多糖、五味子甲素、五味子乙素等多种有效成分。现有的制备方法，皂苷纯度低，提取效率还有待提高。
4.因此，很有必要在现有技术的基础之上，针对每味中药，研发其新的制备方法，得到有效成分含量高，杂质少，安全性高的生脉注射液。

技术实现要素：

5.发明目的：本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种有效成分含量高，杂质少，疗效和安全性更好的生脉注射液精制方法。
6.技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：
7.一种生脉注射液的精制方法，包括以下步骤：
8.(1)按重量份数称取红参，加乙醇浸泡，然后连续回流提取，合并乙醇提取液，减压浓缩，加入正丁醇萃取，合并萃取液，减压浓缩，得正丁醇萃取物，上大孔吸附树脂柱，依次采用水、不同浓度的乙醇梯度洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，得到人参提取物；
9.(2)按重量份数称取麦冬，加水煎煮提取，合并水提液，浓缩，加乙醇，放置沉淀，离心，得麦冬多糖；取水提取后的麦冬药渣，加乙醇连续回流提取，浓缩，得到乙醇提取物，上大孔吸附树脂柱，依次采用水、不同浓度乙醇梯度洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，得到麦冬皂苷类提取物；
10.(3)按重量份数称取五味子，加乙醇回流提取，收集乙醇提取液，浓缩，依次加石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取液，浓缩既得五味子提取物；
11.(4)取步骤(1)人参提取物、步骤(2)麦冬多糖和麦冬皂苷类提取物、步骤(3)五味子提取物，采用超滤膜过滤，灭菌制备成注射液。
12.作为优选方案，以上所述的一种生脉注射液的精制方法，其包括以下步骤：
13.(1)按重量份数称取红参，加10～20倍量的乙醇浸泡1～3小时，然后连续回流提取1～3次，每次1～2小时，合并乙醇提取液，减压浓缩，加入3～6倍量的正丁醇萃取3次，合并萃取液，减压浓缩，得正丁醇萃取物，上大孔吸附树脂柱，依次采用水、浓度10％～80％乙醇梯度洗脱，收集浓度30％～60％乙醇洗脱液，浓缩，得到人参提取物；
14.(2)按重量份数称取麦冬，加8～15倍量的水煎煮提取1～3次，每次1～3小时，合并水提液，浓缩，加乙醇，使乙醇含量达70～80％，放置沉淀，离心，得麦冬多糖；取水提取后的麦冬药渣，加8～15倍量的乙醇连续回流提取1～3次，每次1～3小时，浓缩，得到乙醇提取
物，上大孔吸附树脂柱，依次采用水、浓度 20％～80％乙醇梯度洗脱，收集浓度50％～80％乙醇洗脱液，浓缩，得到麦冬皂苷类提取物；
15.(3)按重量份数称取五味子，加10～20倍量的乙醇回流提取1～3次，每次 1～2小时，收集乙醇提取液，浓缩，依次加2～6倍量体积的石油醚、乙酸乙酯萃取2～3次，取乙酸乙酯萃取液，浓缩既得五味子提取物；
16.(4)取步骤(1)人参提取物、步骤(2)麦冬多糖和麦冬皂苷类提取物、步骤(3)五味子提取物，采用超滤膜过滤，灭菌制备成注射液。
17.作为优选方案，以上所述的一种生脉注射液的精制方法，包括以下步骤：
18.(1)按重量份数称取红参，加20倍量的乙醇浸泡2小时，然后连续回流提取3次，每次1小时，合并乙醇提取液，减压浓缩，加入4倍量的正丁醇萃取3 次，合并萃取液，减压浓缩，得正丁醇萃取物，上大孔吸附树脂柱，依次采用水、浓度10％～80％乙醇梯度洗脱，收集浓度30％～60％乙醇洗脱液，浓缩，得到人参提取物；
19.(2)按重量份数称取麦冬，加12倍量的水煎煮提取3次，每次2小时，合并水提液，浓缩，加乙醇，使乙醇含量达80％，放置沉淀，离心，得麦冬多糖；取水提取后的麦冬药渣，加12倍量的乙醇连续回流提取2次，每次2小时，浓缩，得到乙醇提取物，上大孔吸附树脂柱，依次采用水、浓度20％～80％乙醇梯度洗脱，收集浓度60％～80％乙醇洗脱液，浓缩，得到麦冬皂苷类提取物；
20.(3)按重量份数称取五味子，加15倍量的乙醇回流提取2次，每次2小时，收集乙醇提取液，浓缩，依次加5倍量体积的石油醚、乙酸乙酯萃取3次，取乙酸乙酯萃取液，浓缩既得五味子提取物；
21.(4)取步骤(1)人参提取物、步骤(2)麦冬多糖和麦冬皂苷类提取物、步骤(3)五味子提取物，采用超滤膜过滤，灭菌制备成注射液。
22.作为优选方案，以上所述的生脉注射液的精制方法，所述的步骤(1)和步骤(2)大孔吸附树脂柱的类型为d101型或ab型。
23.作为优选方案，以上所述的生脉注射液的精制方法，所述的红参、麦冬、五味子的重量比为1～2:4～8:4～12。
24.本发明的技术效果：
25.本发明提供的生脉注射液的精制方法，根据红参、麦冬、五味子所含有效成分的性质，采用特定的制备方法进行提取分离纯化，得到的红参中的总皂苷纯度高(≥92％)、麦冬的总多糖和麦冬皂苷含量高(≥87％)，并且五味子中的木质素类成分含量高(≥88％).临床疗效更加，并且本发明提供的工艺步骤可实现工业化生产，具有质量稳定、成本低廉等优点。
具体实施方式
26.下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种非实质性的修改均落于本技术所附权利要求所限定的范围。
27.实施例1
28.1、一种生脉注射液的精制方法，其特征在于，包括以下步骤：
29.(1)按重量份数称取红参10份，加20倍量的乙醇浸泡2小时，然后连续回流提取3次，每次1小时，合并乙醇提取液，减压浓缩，加入4倍量的正丁醇萃取3次，合并萃取液，减压浓缩，得正丁醇萃取物，上d101型大孔吸附树脂柱，依次采用水、浓度10％、20％、30％、40％、60％、80％乙醇梯度洗脱，收集浓度30％、40％、60％乙醇洗脱液，浓缩，得到人参提取物(纯度93％)；
30.(2)按重量份数称取麦冬40份，加12倍量的水煎煮提取3次，每次2小时，合并水提液，浓缩，加乙醇，使乙醇含量达80％，放置沉淀，离心，得麦冬多糖；取水提取后的麦冬药渣，加12倍量的乙醇连续回流提取2次，每次2小时，浓缩，得到乙醇提取物，上d101型大孔吸附树脂柱，依次采用水、浓度20％、40％、 60％、70％、80％乙醇梯度洗脱，收集浓度60％、70％和80％乙醇洗脱液，浓缩，得到麦冬皂苷类提取物(纯度89％)；
31.(3)按重量份数称取五味子20份，加15倍量的乙醇回流提取2次，每次2 小时，收集乙醇提取液，浓缩，依次加5倍量体积的石油醚、乙酸乙酯萃取3 次，取乙酸乙酯萃取液，浓缩既得五味子提取物(纯度88％)；
32.(4)取步骤(1)人参提取物、步骤(2)麦冬多糖和麦冬皂苷类提取物、步骤(3)五味子提取物，采用超滤膜过滤，105℃灭菌制备成注射液。
33.(3)指标成分理化检测：
34.分别依据《中华人民共和国药典》2020版总皂苷的测定法、粗多糖的苯酚
‑ꢀ
硫酸分光光度测定法和木质素类测定方法，对按上述方法制备得到的生脉注射液中、总皂苷、粗多糖以及五味子甲素4等成分进行检测结果如表1所示，含量均高于限量标准。
35.表1本发明制备得到的生脉注射液中指标性成分含量(％)
36.检验项目含量人参皂苷(以人参皂苷re计)8.12％粗多糖(以葡萄糖计)3.92％麦冬总皂苷7.31％五味子甲素2.47％
37.实施例2
38.1、一种生脉注射液的精制方法，其特征在于，包括以下步骤：
39.(1)按重量份数称取红参10份，加15倍量的乙醇浸泡1.5小时，然后连续回流提取2次，每次2小时，合并乙醇提取液，减压浓缩，加入3倍量的正丁醇萃取3次，合并萃取液，减压浓缩，得正丁醇萃取物，上d101型大孔吸附树脂柱，依次采用水、浓度10％、20％、30％、40％、60％、80％乙醇梯度洗脱，收集浓度30％、40％、60％乙醇洗脱液，浓缩，得到人参提取物(纯度93％)；
40.(2)按重量份数称取麦冬40份，加10倍量的水煎煮提取2次，每次2小时，合并水提液，浓缩，加乙醇，使乙醇含量达70％，放置沉淀，离心，得麦冬多糖；取水提取后的麦冬药渣，加10倍量的乙醇连续回流提取2次，每次1小时，浓缩，得到乙醇提取物，上d101型大孔吸附树脂柱，依次采用水、浓度20％、40％、 60％、70％、80％乙醇梯度洗脱，收集浓度60％、70％和80％乙醇洗脱液，浓缩，得到麦冬皂苷类提取物(纯度88％)；
41.(3)按重量份数称取五味子20份，加12倍量的乙醇回流提取3次，每次2 小时，收集乙醇提取液，浓缩，依次加4倍量体积的石油醚、乙酸乙酯萃取3 次，取乙酸乙酯萃取液，浓
缩既得五味子提取物(纯度88％)；
42.(4)取步骤(1)人参提取物、步骤(2)麦冬多糖和麦冬皂苷类提取物、步骤(3)五味子提取物，采用超滤膜过滤，105℃灭菌制备成注射液。
43.(3)指标成分理化检测：
44.分别依据《中华人民共和国药典》2020版总皂苷的测定法、粗多糖的苯酚
‑ꢀ
硫酸分光光度测定法和木质素类测定方法，对按上述方法制备得到的生脉注射液中、总皂苷、粗多糖以及五味子甲素4等成分进行检测结果如表1所示，含量均高于限量标准。
45.表2本发明制备得到的生脉注射液中指标性成分含量(％)
46.检验项目含量人参皂苷(以人参皂苷re计)7.98％粗多糖(以葡萄糖计)3.64％麦冬总皂苷7.20％五味子甲素2.21％
47.实施例3
48.1、一种生脉注射液的精制方法，其特征在于，包括以下步骤：
49.(1)按重量份数称取红参10份，加12倍量的乙醇浸泡1小时，然后连续回流提取3次，每次1小时，合并乙醇提取液，减压浓缩，加入5倍量的正丁醇萃取3次，合并萃取液，减压浓缩，得正丁醇萃取物，上d101型大孔吸附树脂柱，依次采用水、浓度10％、20％、30％、40％、60％、80％乙醇梯度洗脱，收集浓度30％、40％、60％乙醇洗脱液，浓缩，得到人参提取物(纯度92％)；
50.(2)按重量份数称取麦冬40份，加12倍量的水煎煮提取3次，每次1小时，合并水提液，浓缩，加乙醇，使乙醇含量达75％，放置沉淀，离心，得麦冬多糖；取水提取后的麦冬药渣，加15倍量的乙醇连续回流提取3次，每次1小时，浓缩，得到乙醇提取物，上d101型大孔吸附树脂柱，依次采用水、浓度20％、40％、 60％、70％、80％乙醇梯度洗脱，收集浓度60％、70％和80％乙醇洗脱液，浓缩，得到麦冬皂苷类提取物(纯度88％)；
51.(3)按重量份数称取五味子20份，加15倍量的乙醇回流提取2次，每次3 小时，收集乙醇提取液，浓缩，依次加5倍量体积的石油醚、乙酸乙酯萃取3 次，取乙酸乙酯萃取液，浓缩既得五味子提取物(纯度87％)；
52.(4)取步骤(1)人参提取物、步骤(2)麦冬多糖和麦冬皂苷类提取物、步骤(3)五味子提取物，采用超滤膜过滤，105℃灭菌制备成注射液。
53.(3)指标成分理化检测：
54.分别依据《中华人民共和国药典》2020版总皂苷的测定法、粗多糖的苯酚
‑ꢀ
硫酸分光光度测定法和木质素类测定方法，对按上述方法制备得到的生脉注射液中、总皂苷、粗多糖以及五味子甲素4等成分进行检测结果如表1所示，含量均高于限量标准。
55.表3本发明制备得到的生脉注射液中指标性成分含量(％)
56.检验项目含量人参皂苷(以人参皂苷re计)7.72％粗多糖(以葡萄糖计)3.51％麦冬总皂苷7.08％
五味子甲素2.28％
57.以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

技术特征：

1.一种生脉注射液的精制方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）按重量份数称取红参，加乙醇浸泡，然后连续回流提取，合并乙醇提取液，减压浓缩，加入正丁醇萃取，合并萃取液，减压浓缩，得正丁醇萃取物，上大孔吸附树脂柱，依次采用水、不同浓度的乙醇梯度洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，得到人参提取物；（2）按重量份数称取麦冬，加水煎煮提取，合并水提液，浓缩，加乙醇，放置沉淀，离心，得麦冬多糖；取水提取后的麦冬药渣，加乙醇连续回流提取，浓缩，得到乙醇提取物，上大孔吸附树脂柱，依次采用水、不同浓度乙醇梯度洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，得到麦冬皂苷类提取物；（3）按重量份数称取五味子，加乙醇回流提取，收集乙醇提取液，浓缩，依次加石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取液，浓缩既得五味子提取物；（4）取步骤（1）人参提取物、步骤（2）麦冬多糖和麦冬皂苷类提取物、步骤（3）五味子提取物，采用超滤膜过滤，灭菌制备成注射液。2.根据权利要求1所述的一种生脉注射液的精制方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）按重量份数称取红参，加10~20倍量的乙醇浸泡1~3小时，然后连续回流提取1~3次，每次1~2小时，合并乙醇提取液，减压浓缩，加入3~6倍量的正丁醇萃取3次，合并萃取液，减压浓缩，得正丁醇萃取物，上大孔吸附树脂柱，依次采用水、浓度10%~80%乙醇梯度洗脱，收集浓度30%~60%乙醇洗脱液，浓缩，得到人参提取物；（2）按重量份数称取麦冬，加8~15倍量的水煎煮提取1~3次，每次1~3小时，合并水提液，浓缩，加乙醇，使乙醇含量达70~80%，放置沉淀，离心，得麦冬多糖；取水提取后的麦冬药渣，加8~15倍量的乙醇连续回流提取1~3次，每次1~3小时，浓缩，得到乙醇提取物，上大孔吸附树脂柱，依次采用水、浓度20%~80%乙醇梯度洗脱，收集浓度50%~80%乙醇洗脱液，浓缩，得到麦冬皂苷类提取物；（3）按重量份数称取五味子，加10~20倍量的乙醇回流提取1~3次，每次1~2小时，收集乙醇提取液，浓缩，依次加2~6倍量体积的石油醚、乙酸乙酯萃取2~3次，取乙酸乙酯萃取液，浓缩既得五味子提取物；（4）取步骤（1）人参提取物、步骤（2）麦冬多糖和麦冬皂苷类提取物、步骤（3）五味子提取物，采用超滤膜过滤，灭菌制备成注射液。3.根据权利要求2所述的一种生脉注射液的精制方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）按重量份数称取红参，加20倍量的乙醇浸泡2小时，然后连续回流提取3次，每次1小时，合并乙醇提取液，减压浓缩，加入4倍量的正丁醇萃取3次，合并萃取液，减压浓缩，得正丁醇萃取物，上大孔吸附树脂柱，依次采用水、浓度10%~80%乙醇梯度洗脱，收集浓度30%~60%乙醇洗脱液，浓缩，得到人参提取物；（2）按重量份数称取麦冬，加12倍量的水煎煮提取3次，每次2小时，合并水提液，浓缩，加乙醇，使乙醇含量达80%，放置沉淀，离心，得麦冬多糖；取水提取后的麦冬药渣，加12倍量的乙醇连续回流提取2次，每次2小时，浓缩，得到乙醇提取物，上大孔吸附树脂柱，依次采用水、浓度20%~80%乙醇梯度洗脱，收集浓度60%~80%乙醇洗脱液，浓缩，得到麦冬皂苷类提取物；（3）按重量份数称取五味子，加15倍量的乙醇回流提取2次，每次2小时，收集乙醇提取液，浓缩，依次加5倍量体积的石油醚、乙酸乙酯萃取3次，取乙酸乙酯萃取液，浓缩既得五味
子提取物；（4）取步骤（1）人参提取物、步骤（2）麦冬多糖和麦冬皂苷类提取物、步骤（3）五味子提取物，采用超滤膜过滤，灭菌制备成注射液。4.根据权利要求1～3任一项所述的生脉注射液的精制方法，其特征在于：所述的步骤（1）和步骤（2）大孔吸附树脂柱的类型为d101型或ab型。5.根据权利要求1～3任一项所述的生脉注射液的精制方法，其特征在于，所述的红参、麦冬、五味子的重量比为1~2:4~8:4~12。

技术总结

本发明公开了一种生脉注射液的精制方法，本发明根据红参、麦冬、五味子所含有效成分的性质，采用特定的乙醇提取，正丁醇萃取和大孔树脂洗脱，得到纯度高的人参总皂苷。采用特定的水提醇沉得到纯度高的麦冬多糖，并且采用乙醇提取和大孔树脂洗脱，得到纯度高的麦冬皂苷，并采用乙醇提取，乙酸乙酯萃取，得到含量高的木质素类五味子素。本发明组合物配方科学合理，选以常见药食两用原材料，经动物功能性试验及人体实验试验证明具有很好的辅助降血脂功能，且安全可靠，无毒副作用，适合长期服用。适合长期服用。