一种羊肚菌的培育方法与流程

1.本发明属于榨油技术领域，具体涉及一种羊肚菌的培育方法。

背景技术：

2.羊肚菌(morchella)，又称羊肚菜、羊肚蘑等，真菌学分类属盘菌目，羊肚菌科，羊肚菌属。其由羊肚状的可孕头状体菌盖和一个不孕的菌柄组成，菌盖表面有网状棱的子实层，边缘与菌柄相连，菌柄圆筒状、中空，表面平滑或有凹槽，形态酷似羊肚而得名。羊肚菌富含人体必需的8种氨基酸及维生素类，特别是羊肚菌含有c-3-氨基-l-脯氨酸、氨基异丁酸和2,4-二氨基异丁酸等稀有氨基酸，因而具有其独特风味，是世界上最著名的珍贵食用菌之一。它的人工驯化种植一直是国内、外菌物学家致力研究探索的课题之一。
3.羊肚菌的种植采用培育好的栽培袋进行栽培种植，在适宜的气候条件下种植，但是羊肚菌的栽培袋的培育在想要实现高产种植仍是需要探究的难题之一，因此怎样培育出优质和高产的羊肚菌栽培种是当下急需解决的难题。

技术实现要素：

4.针对上述不足，本发明的目的在于，提供一种羊肚菌的培育方法，其解决了现有技术中培育的栽培种质量和后期种植的产量较低的问题。
5.为实现上述目的，本发明所提供的技术方案是：
6.一种羊肚菌的培育方法，包括如下步骤：
7.s1、选择母种，采集5-10朵长势标准且完整的新鲜羊肚菌，防止阴凉处阴干2天，备用；
8.s2、分离，包括孢子粉分离和羊肚菌菌肚的组织分离，分离出孢子和组织备用；
9.s3、羊肚菌菌基培养，
10.s31、取水1500-2000ml，加入切好的土豆丝300-350g，煮沸后采用小火闷30分钟，观察熬好的溶液是否有1200ml，如不够加水继续熬制，取溶液1200ml，备用；
11.s32、将取出的1200ml溶液倒入锅内煮沸，放入琼脂20-30g，同时调至小火，搅拌至琼脂融化，放入葡萄糖20-30g，融化后，备用做冷凝实验，冷凝实验完成达到标准后，装入试管内，备用；
12.s33、装管后，用小拇指擦拭试管口，然后用棉花堵住，并用牛皮纸封住棉花端，装入高压锅内；
13.s34、当高压锅内的气压升至0.05pa时，打开手动气阀放气，重复两遍，然后等气压回升至0.17pa后自动放气，计时30min，然后把高压锅脱离火源，待气压回落至0.05pa的时候，打开手动气阀，降至0时，打开锅盖的2/10，利用锅的余热烘干试管；
14.s35、制备无菌水和无菌纸，用原种瓶，装入自来水，用棉花堵住瓶口，并采用牛皮纸覆盖瓶口，然后放入高压锅内采用步骤s34中的方法进行蒸；
15.s4、剪开羊肚菌菌肚的中间部分，分出小块，装入步骤s3中的羊肚菌菌基中通过试
管进行培养；
16.s5、提纯，选出长势较好的菌核试管，把试管口在打开前用火烧至5秒，把试管有组装处和前端勾出不要，选取长势好的菌核勾出放入新的培养基中进行二次培养；
17.s6、杂交，将提纯后且没有二次感染的试管转入到步骤s2中装有分离孢子的三角杯中，并放入分离出的组织放入三角杯中的一侧，同步骤采用多个不同的试管进行杂交；
18.s7、复壮，取出长势较好的三角杯，提取前需灼烧瓶口进行消毒处理，勾取离组织堆放最远，且长势较好的菌核，放入新的试管待长满菌核；
19.s8、转原种瓶，将长好的试管，转至准备好的原中瓶中，瓶口在接种后密封处理，防止感染杂菌，待7-15天后长出菌核；
20.s9、栽培种，将长好的原种瓶转移至新的栽培袋即可。
21.采用上述技术方案，通过孢子粉分离和羊肚菌菌肚的组织分离，分别分离出孢子粉和羊肚菌菌肚的组织，并培育出优质的羊肚菌培养基，对培育出的菌核进行提纯、并将孢子粉和组织进行杂交、复壮等工序，选出优质的菌核，最后转移到栽培袋内进行种植，该方法培育出的羊肚菌栽培袋通过层层筛选出优质菌核，提高了后期羊肚菌种植的产量，同时减少了病害的发生概率。
22.优选的，所述步骤s2中的分离法包括了孢子粉分离法和组织分离法；
23.所述孢子粉分离法用于分离孢子粉到三角杯中，且在早上8点-10点之间弹射孢子，温度在15-20摄氏度；
24.所述组织分离法包括如下步骤：
25.a、用酒精清洗阴干的羊肚菌，搅拌清洗10秒后捞出；
26.b、然后将用酒精清洗后的羊肚菌在纯净水中搅拌清洗后捞出；
27.c、用无菌纸把羊肚菌擦干。
28.优选的，所述步骤s32中放入琼脂后如采用小火融化困难时，可加大火量至完全融化；且在做冷凝实验时，采用勺子盛满一勺放入水中静置2分钟，观察熬制的羊肚菌菌基的冷凝情况，需保证羊肚菌菌基不能太老或太嫩，太老的羊肚菌菌基太硬，菌丝无法生长，太软的羊肚菌菌基在菌丝生长会产生很多气生菌丝。
29.优选的，所述步骤s4中在试管进行培养，24小时菌丝生长明显，备用。
30.优选的，所述步骤s34中当高压锅内的气压升至0.05pa时，打开手动气阀放气，重复两遍，用于排出高压锅中的冷空气，保证高压锅内的问题为真实温度，当高压锅脱离火源，利用锅的余热烘干试管的时间为30min。
31.相对于现有技术，本发明的有益效果为：
32.本发明采用孢子粉分离和羊肚菌菌肚的组织分离同时完成，分别分离出孢子粉和羊肚菌菌肚的组织，并培育出优质的羊肚菌培养基，对培育出的菌核进行提纯、并将孢子粉和组织进行杂交、复壮等工序，选出优质的菌核，最后转移到栽培袋内进行种植，该方法培育出的羊肚菌栽培袋通过层层筛选出优质菌核，提高了后期羊肚菌种植的产量，同时减少了病害的发生概率。
附图说明
33.附图是用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具
体实施方式一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。在附图中：
34.图1是孢子粉和羊肚菌组织进行杂交的视图。
具体实施方式
35.为详细说明本发明的技术内容、构造特征、所实现目的及效果，以下结合实施方式并配合附图详予说明。
36.实施例1
37.一种羊肚菌的培育方法，包括如下步骤：
38.s1、选择母种，采集5-10朵长势标准且完整的新鲜羊肚菌，防止阴凉处阴干2天，备用；
39.s2、分离，包括孢子粉分离和羊肚菌菌肚的组织分离，分离出孢子和组织备用；
40.所述分离法包括了孢子粉分离法和组织分离法；
41.所述孢子粉分离法用于分离孢子粉到三角杯中，且在早上8点-10点之间弹射孢子，温度在15摄氏度；
42.所述组织分离法包括如下步骤：
43.a、用酒精清洗阴干的羊肚菌，搅拌清洗10秒后捞出；
44.b、然后将用酒精清洗后的羊肚菌在纯净水中搅拌清洗后捞出；
45.c、用无菌纸把羊肚菌擦干。
46.s3、羊肚菌菌基培养，
47.s31、取水2000ml，加入切好的土豆丝300g，煮沸后采用小火闷30分钟，观察熬好的溶液是否有1200ml，如不够加水继续熬制，取溶液1200ml，备用；
48.s32、将取出的1200ml溶液倒入锅内煮沸，放入琼脂20-30g，同时调至小火，搅拌至琼脂融化，放入葡萄糖30g，融化后，备用做冷凝实验，冷凝实验完成达到标准后，装入试管内，备用；其中，当放入琼脂后如采用小火融化困难时，可加大火量至完全融化；且在做冷凝实验时，采用勺子盛满一勺放入水中静置2分钟，观察熬制的羊肚菌菌基的冷凝情况，需保证羊肚菌菌基不能太老或太嫩，太老的羊肚菌菌基太硬，菌丝无法生长，太软的羊肚菌菌基在菌丝生长会产生很多气生菌丝。
49.s33、装管后，用小拇指擦拭试管口，然后用棉花堵住，并用牛皮纸封住棉花端，装入高压锅内；
50.s34、当高压锅内的气压升至0.05pa时，打开手动气阀放气，重复两遍，用于排出高压锅中的冷空气，保证高压锅内的问题为真实温度，然后等气压回升至0.17pa后自动放气，计时30min，然后把高压锅脱离火源，待气压回落至0.05pa的时候，打开手动气阀，降至0时，打开锅盖的2/10，利用锅的余热烘干试管，利用锅的余热烘干试管的时间为30min。
51.s35、制备无菌水和无菌纸，用原种瓶，装入自来水，用棉花堵住瓶口，并采用牛皮纸覆盖瓶口，然后放入高压锅内采用步骤s34中的方法进行蒸；
52.s4、剪开羊肚菌菌肚的中间部分，分出小块，装入步骤s3中的羊肚菌菌基中通过试管进行培养，24小时菌丝生长明显；
53.s5、提纯，选出长势较好的菌核试管，把试管口在打开前用火烧至5秒，把试管有组装处和前端勾出不要，选取长势好的菌核勾出放入新的培养基中进行二次培养；
54.s6、杂交，将提纯后且没有二次感染的试管转入到步骤s2中装有分离孢子的三角杯中，并放入分离出的组织放入三角杯中的一侧，同步骤采用多个不同的试管进行杂交；见图1。
55.s7、复壮，取出长势较好的三角杯，提取前需灼烧瓶口进行消毒处理，勾取离组织堆放最远，且长势较好的菌核，放入新的试管待长满菌核；
56.s8、转原种瓶，将长好的试管，转至准备好的原中瓶中，瓶口在接种后密封处理，防止感染杂菌，待7-15天后长出菌核；
57.s9、栽培种，将长好的原种瓶转移至新的栽培袋即可。
58.实施例2
59.一种羊肚菌的培育方法，包括如下步骤：
60.s1、选择母种，采集5-10朵长势标准且完整的新鲜羊肚菌，防止阴凉处阴干2天，备用；
61.s2、分离，包括孢子粉分离和羊肚菌菌肚的组织分离，分离出孢子和组织备用；
62.所述分离法包括了孢子粉分离法和组织分离法；
63.所述孢子粉分离法用于分离孢子粉到三角杯中，且在早上8点-10点之间弹射孢子，温度在20摄氏度；
64.所述组织分离法包括如下步骤：
65.a、用酒精清洗阴干的羊肚菌，搅拌清洗10秒后捞出；
66.b、然后将用酒精清洗后的羊肚菌在纯净水中搅拌清洗后捞出；
67.c、用无菌纸把羊肚菌擦干。
68.s3、羊肚菌菌基培养，
69.s31、取水1500ml，加入切好的土豆丝350g，煮沸后采用小火闷30分钟，观察熬好的溶液是否有1200ml，如不够加水继续熬制，取溶液1200ml，备用；
70.s32、将取出的1200ml溶液倒入锅内煮沸，放入琼脂20-30g，同时调至小火，搅拌至琼脂融化，放入葡萄糖20-30g，融化后，备用做冷凝实验，冷凝实验完成达到标准后，装入试管内，备用；其中，当放入琼脂后如采用小火融化困难时，可加大火量至完全融化；且在做冷凝实验时，采用勺子盛满一勺放入水中静置2分钟，观察熬制的羊肚菌菌基的冷凝情况，需保证羊肚菌菌基不能太老或太嫩，太老的羊肚菌菌基太硬，菌丝无法生长，太软的羊肚菌菌基在菌丝生长会产生很多气生菌丝。
71.s33、装管后，用小拇指擦拭试管口，然后用棉花堵住，并用牛皮纸封住棉花端，装入高压锅内；
72.s34、当高压锅内的气压升至0.05pa时，打开手动气阀放气，重复两遍，用于排出高压锅中的冷空气，保证高压锅内的问题为真实温度，然后等气压回升至0.17pa后自动放气，计时30min，然后把高压锅脱离火源，待气压回落至0.05pa的时候，打开手动气阀，降至0时，打开锅盖的2/10，利用锅的余热烘干试管，利用锅的余热烘干试管的时间为30min。
73.s35、制备无菌水和无菌纸，用原种瓶，装入自来水，用棉花堵住瓶口，并采用牛皮纸覆盖瓶口，然后放入高压锅内采用步骤s34中的方法进行蒸；
74.s4、剪开羊肚菌菌肚的中间部分，分出小块，装入步骤s3中的羊肚菌菌基中通过试管进行培养，24小时菌丝生长明显；
75.s5、提纯，选出长势较好的菌核试管，把试管口在打开前用火烧至5秒，把试管有组装处和前端勾出不要，选取长势好的菌核勾出放入新的培养基中进行二次培养；
76.s6、杂交，将提纯后且没有二次感染的试管转入到步骤s2中装有分离孢子的三角杯中，并放入分离出的组织放入三角杯中的一侧，同步骤采用多个不同的试管进行杂交；
77.s7、复壮，取出长势较好的三角杯，提取前需灼烧瓶口进行消毒处理，勾取离组织堆放最远，且长势较好的菌核，放入新的试管待长满菌核；
78.s8、转原种瓶，将长好的试管，转至准备好的原中瓶中，瓶口在接种后密封处理，防止感染杂菌，待7-15天后长出菌核；
79.s9、栽培种，将长好的原种瓶转移至新的栽培袋即可。
80.实施例3
81.一种羊肚菌的培育方法，包括如下步骤：
82.s1、选择母种，采集5-10朵长势标准且完整的新鲜羊肚菌，防止阴凉处阴干2天，备用；
83.s2、分离，包括孢子粉分离和羊肚菌菌肚的组织分离，分离出孢子和组织备用；
84.所述分离法包括了孢子粉分离法和组织分离法；
85.所述孢子粉分离法用于分离孢子粉到三角杯中，且在早上8点-10点之间弹射孢子，温度在18摄氏度；
86.所述组织分离法包括如下步骤：
87.a、用酒精清洗阴干的羊肚菌，搅拌清洗10秒后捞出；
88.b、然后将用酒精清洗后的羊肚菌在纯净水中搅拌清洗后捞出；
89.c、用无菌纸把羊肚菌擦干。
90.s3、羊肚菌菌基培养，
91.s31、取水1700ml，加入切好的土豆丝325g，煮沸后采用小火闷30分钟，观察熬好的溶液是否有1200ml，如不够加水继续熬制，取溶液1200ml，备用；
92.s32、将取出的1200ml溶液倒入锅内煮沸，放入琼脂25g，同时调至小火，搅拌至琼脂融化，放入葡萄糖25g，融化后，备用做冷凝实验，冷凝实验完成达到标准后，装入试管内，备用；其中，当放入琼脂后如采用小火融化困难时，可加大火量至完全融化；且在做冷凝实验时，采用勺子盛满一勺放入水中静置2分钟，观察熬制的羊肚菌菌基的冷凝情况，需保证羊肚菌菌基不能太老或太嫩，太老的羊肚菌菌基太硬，菌丝无法生长，太软的羊肚菌菌基在菌丝生长会产生很多气生菌丝。
93.s33、装管后，用小拇指擦拭试管口，然后用棉花堵住，并用牛皮纸封住棉花端，装入高压锅内；
94.s34、当高压锅内的气压升至0.05pa时，打开手动气阀放气，重复两遍，用于排出高压锅中的冷空气，保证高压锅内的问题为真实温度，然后等气压回升至0.17pa后自动放气，计时30min，然后把高压锅脱离火源，待气压回落至0.05pa的时候，打开手动气阀，降至0时，打开锅盖的2/10，利用锅的余热烘干试管，利用锅的余热烘干试管的时间为30min。
95.s35、制备无菌水和无菌纸，用原种瓶，装入自来水，用棉花堵住瓶口，并采用牛皮纸覆盖瓶口，然后放入高压锅内采用步骤s34中的方法进行蒸；
96.s4、剪开羊肚菌菌肚的中间部分，分出小块，装入步骤s3中的羊肚菌菌基中通过试
管进行培养，24小时菌丝生长明显；
97.s5、提纯，选出长势较好的菌核试管，把试管口在打开前用火烧至5秒，把试管有组装处和前端勾出不要，选取长势好的菌核勾出放入新的培养基中进行二次培养；
98.s6、杂交，将提纯后且没有二次感染的试管转入到步骤s2中装有分离孢子的三角杯中，并放入分离出的组织放入三角杯中的一侧，同步骤采用多个不同的试管进行杂交；
99.s7、复壮，取出长势较好的三角杯，提取前需灼烧瓶口进行消毒处理，勾取离组织堆放最远，且长势较好的菌核，放入新的试管待长满菌核；
100.s8、转原种瓶，将长好的试管，转至准备好的原中瓶中，瓶口在接种后密封处理，防止感染杂菌，待7-15天后长出菌核；
101.s9、栽培种，将长好的原种瓶转移至新的栽培袋即可。
102.采用本方法中培育出的羊肚菌栽培袋进行种植时，通过孢子粉分离法可分离出孢子粉备用，同时通过组织分离法分离出羊肚菌羊肚中间位置的组织，并将分离出的组织在培养的羊肚菌培养基中进行培养，且该培养基能适应菌核的高质量生长，提高了菌核的质量，通过提纯，同时将分离出的孢子粉和培育的组织进行杂交，得到更优的菌种，并在复壮等工序中层层筛选较优的菌核，提高了后期栽培袋种植时的出菇率和产量。本实施例1、实施例2和实施例3中亩产新鲜羊肚菌可达600-700斤，相比于现有市面羊肚菌产量300斤左右，提高了两倍有余。

技术特征：

1.一种羊肚菌的培育方法，其特征在于，包括如下步骤：s1、选择母种，采集5-10朵长势标准且完整的新鲜羊肚菌，防止阴凉处阴干2天，备用；s2、分离，包括孢子粉分离和羊肚菌菌肚的组织分离，分离出孢子和组织备用；s3、羊肚菌菌基培养，s31、取水1500-2000ml，加入切好的土豆丝300-350g，煮沸后采用小火闷30分钟，观察熬好的溶液是否有1200ml，如不够加水继续熬制，取溶液1200ml，备用；s32、将取出的1200ml溶液倒入锅内煮沸，放入琼脂20-30g，同时调至小火，搅拌至琼脂融化，放入葡萄糖20-30g，融化后，备用做冷凝实验，冷凝实验完成达到标准后，装入试管内，备用；s33、装管后，用小拇指擦拭试管口，然后用棉花堵住，并用牛皮纸封住棉花端，装入高压锅内；s34、当高压锅内的气压升至0.05pa时，打开手动气阀放气，重复两遍，然后等气压回升至0.17pa后自动放气，计时30min，然后把高压锅脱离火源，待气压回落至0.05pa的时候，打开手动气阀，降至0时，打开锅盖的2/10，利用锅的余热烘干试管；s35、制备无菌水和无菌纸，用原种瓶，装入自来水，用棉花堵住瓶口，并采用牛皮纸覆盖瓶口，然后放入高压锅内采用步骤s34中的方法进行蒸；s4、剪开羊肚菌菌肚的中间部分，分出小块，装入步骤s3中的羊肚菌菌基中通过试管进行培养；s5、提纯，选出长势较好的菌核试管，把试管口在打开前用火烧至5秒，把试管有组装处和前端勾出不要，选取长势好的菌核勾出放入新的培养基中进行二次培养；s6、杂交，将提纯后且没有二次感染的试管转入到步骤s2中装有分离孢子的三角杯中，并放入分离出的组织放入三角杯中的一侧，同步骤采用多个不同的试管进行杂交；s7、复壮，取出长势较好的三角杯，提取前需灼烧瓶口进行消毒处理，勾取离组织堆放最远，且长势较好的菌核，放入新的试管待长满菌核；s8、转原种瓶，将长好的试管，转至准备好的原中瓶中，瓶口在接种后密封处理，防止感染杂菌，待7-15天后长出菌核；s9、栽培种，将长好的原种瓶转移至新的栽培袋即可。2.如权利要求1所述的一种羊肚菌的培育方法，其特征在于，所述步骤s2中的分离法包括了孢子粉分离法和组织分离法；所述孢子粉分离法用于分离孢子粉到三角杯中，且在早上8点-10点之间弹射孢子，温度在15-20摄氏度；所述组织分离法包括如下步骤：a、用酒精清洗阴干的羊肚菌，搅拌清洗10秒后捞出；b、然后将用酒精清洗后的羊肚菌在纯净水中搅拌清洗后捞出；c、用无菌纸把羊肚菌擦干。3.如权利要求1所述的一种羊肚菌的培育方法，其特征在于，所述步骤s32中放入琼脂后如采用小火融化困难时，可加大火量至完全融化；且在做冷凝实验时，采用勺子盛满一勺放入水中静置2分钟，观察熬制的羊肚菌菌基的冷凝情况，需保证羊肚菌菌基不能太老或太嫩，太老的羊肚菌菌基太硬，菌丝无法生长，太软的羊肚菌菌基在菌丝生长会产生很多气生
菌丝。4.如权利要求1所述的一种羊肚菌的培育方法，其特征在于，所述步骤s4中在试管进行培养，24小时菌丝生长明显，备用。5.如权利要求1所述的一种羊肚菌的培育方法，其特征在于，所述步骤s34中当高压锅内的气压升至0.05pa时，打开手动气阀放气，重复两遍，用于排出高压锅中的冷空气，保证高压锅内的问题为真实温度，当高压锅脱离火源，利用锅的余热烘干试管的时间为30min。

技术总结

本发明公开了一种羊肚菌的培育方法，包括如下步骤：S1、选择母种；S2、分离，包括孢子粉分离和羊肚菌菌肚的组织分离，分离出孢子和组织；S3、羊肚菌菌基培养；S4、剪开羊肚菌菌肚的中间部分，分出小块，装入羊肚菌菌基中通过试管进行培养；S5、提纯，选出长势较好的菌核试管；S6、杂交，将提纯后且没有二次感染的试管转入到步骤S2中装有分离孢子的三角杯中；S7、复壮；S8、转原种瓶；S9、栽培种，将长好的原种瓶转移至新的栽培袋即可。本发明培育出的羊肚菌栽培袋通过层层筛选出优质菌核，提高了后期羊肚菌种植的产量，同时减少了病害的发生概率。同时减少了病害的发生概率。同时减少了病害的发生概率。