(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010994366.0(22)申请日 2020.09.21
(83)生物保藏信息
CGMCC No.20232 2020.07.24
(71)申请人 中华全国供销合作总社昆明食用菌
研究所
地址 650032 云南省昆明市五华区政教路
14号
申请人 云南省供销合作社科学研究所(72)发明人 刘绍雄 刘春丽 罗孝坤 孙达锋
李建英 尚陆娥 张俊波 (74)专利代理机构 昆明知道专利事务所(特殊
普通合伙企业) 53116
代理人 姜开侠 姜开远
(51)Int.Cl.
A01G 18/00(2018.01)A01G 18/40(2018.01)A01G 18/20(2018.01)A01H 15/00(2006.01)C12N 1/14(2006.01)C12R 1/645(2006.01)
(54)发明名称
(57)摘要
本发明涉及一株金耳新菌株中菌金耳1号菌株及其栽培方法，具体涉及具体涉及一株金耳新菌株中菌金耳1号菌株（Tremella aurantialba=Naemateliaaurantialba ）ZJJE001，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏日：2020年7月24日，保藏编号：CGMCC No.20232，属于银耳科（Tremellaceae ），银耳属（T r e m e l l a）。本发明的永仁金耳（T r e m e l l a a u r a n t i a l b a =Naemateliaaurantialba ）ZJJE001的主要形态特征和生理生化性质为：该菌株的菌落在加富PDA 培养基上培养，子实体脑状，颜为乳白，孢子菌落呈酵母状；菌丝生长的pH为5.0‑8.0，菌丝生长温度为12℃‑28℃，子实体分化阶段的温度为15℃‑ 21℃。
权利要求书1页 说明书4页
序列表1页 附图2页
CN 111990164 A 2020.11.27
C N 111990164
A
1.一株金耳新菌株中菌金耳1号菌株（Tremella a ura n tia l ba=Na ema telia aurantialba）ZJJE001，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（C G M C C），保藏日：2020年7月24日，保藏编号：C G M C C N o.20232，属于银耳科（Tremellaceae），银耳属（Tremella）。
2.一种权利要求1所述的金耳新菌株中菌金耳1号菌株（Tremella aurantialba= Naematelia aurantialba）ZJJE001的栽培方法，其特征在于包括原种制备和出菇栽培步骤，具体包括：
A、原种制备：
1）母种制备：以野生金耳子实体为材料，在加富的PDA培养基上培养得到母种；
2）原种制备：将母种接种到原种培养料上于温度15
~25℃培养得到原种；
所述的原种培养料配方为：木屑70
~90份、麦麸10
~
25份、石灰1
~
3份、石膏1
~
3份、普钙1
~
3份；
B、出菇栽培：
1）出菇培养料制备：
将出菇培养料混合均匀，将含水量调至60
~65%，pH值为6.0
~
7.0得到出菇培养料；所述
的出菇培养料的配方为：木屑70
~90份、棉籽壳10
~
20份、麦麸10
~
25份、石灰1
~
3份、石膏1
~
3
份、普钙1
~3份；
2）接种培养：
将原种接种到出菇培养料中于温度15
~25℃培养3
~
7天至菌丝长满转入出菇房进行出
菇管理，在金耳子实体颜金黄时即采收。
3.根据权利要求2所述的的栽培方法，其特征在于A步骤1）中培养的温度为17
~22℃。
4.根据权利要求2所述的的栽培方法，其特征在于A步骤中所述的原种培养料的配方为
木屑80份、麦麸17份、石灰1份、石膏1份、普钙1份；含水量为60
~65%，pH值为6.0
~
7.0。
5.根据权利要求2所述的的栽培方法，其特征在于B步骤中所述的出菇培养料的配方
为：木屑80份、棉籽壳15份、麦麸10份、石灰2份、石膏2份、普钙2份，含水量为60
~
65%，pH值为
6.0
~7.0。
6.根据权利要求2所述的的栽培方法，其特征在于B步骤中所述的出菇管理是控制温度
为15
~20℃，湿度90
~
95%，光照200
~
600Lx。
权 利 要 求 书1/1页
CN 111990164 A
一种金耳新菌株中菌金耳1号菌株及其栽培方法
技术领域
[0001]本发明属于生物技术领域，具体涉及一种金耳新菌株中菌金耳1号菌株及其栽培方法。
背景技术
[0002]金耳（Tremella aurantialba=Naemateliaaurantialba） 是珍稀的食（药）用菌之一，主要分布于我国云南、西藏等高海拔地区，野生资源非常稀有。近些年由于受消费者的青睐，野生金耳资源遭到过度采集，资源濒临灭绝。为了珍贵的金耳资源的可持续利用，20 世纪 80 年代，科学家开始探索金耳的人工栽培，但由于金耳自身生物学性状的特殊性和菌种制作的独特性导致了金耳菌种的不稳定，人工栽培金耳产量极低，产量也参差不齐。因此，开发一种能解决上述技术难题的产品是非常必要的。
发明内容
[0003]本发明的第一目的在于提供一种金耳新菌株中菌金耳1号菌株；第二目的在于提供所述的金耳新菌株中菌金耳1号菌株（Tremella aurantialba=Naemateliaaurantialba）ZJJE001的栽培方法。
[0004]除非另有说明外，本发明中所采用的百分数均为质量百分数。
[0005]本发明的第一目的是这样实现的，金耳新菌株中菌金耳1号菌株（Tremella aurantialba=Naemateliaaurantialba）ZJJE001，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏日：2020年7月24日，保藏编号：CGMCC No.20232，属于银耳科（Tremellaceae），银耳属（Tremella）。
[0006]——金耳新菌株中菌金耳1号菌株（T r e m e l l a a u r a n t i a l b a= Naemateliaaurantialba）ZJJE001的获得与鉴定
1、菌种分离及筛选
本发明通过对采集自楚雄州永仁县猛虎乡老房子组阿里地村，地理坐标：东经:101°30′56″，北纬：26°2′53″，海波：1864m，坡向：东南坡向，坡度：两边山体60～70°左右，沟面20°左右的野生金耳菌株进行菌种分离并驯化栽培。该野生金耳发生在麻栎树上，树直径50～60cm，由于山体滑坡麻栎树大约于2015年11～12月份左右倒在水沟上，空气较为湿润，树林郁闭度高，弱光照。该野生金耳发生在麻栎树上，树直径50～60cm，由于山体滑坡麻栎树大约于2015年11～12月份左右倒在水沟上，空气较为湿润，树林郁闭度高，弱光照。[0007]采集到的金耳子实体，在超净台内在加富PDA培养基斜面试管接种组织块，24℃暗培养，挑选子实体长势较好的试管，制作原种，20℃培养，待长满原种瓶制作菌袋栽
培出耳；出耳后选取金黄子实体性状较好的子实体组织分离菌种；通过多次不断的栽培出菇选育，最终获得一株栽培性状稳定的菌株中菌金耳1号，菌株编号为ZJJE001。
[0008]2、菌株ZJJE001的鉴定
用CTAB法提取ZJJE001子实体分离的孢子基因组DNA，并以1%的琼脂糖凝胶电泳后经
GelRed染后进行检测；以提取到的总DNA为模板，采用Mix混合试剂（湖南擎科生物技术有限公司），以I T S4（5’—T C C T C C G C T T A T T G A T A T G—3’）和I T S5（5’—GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG—3’）为引物扩增Internal Transcribed Spacer (ITS)序列。PCR扩增体系为(25 μL)：2×Mix 12.5μl， 10 μM引物各0.5 μL，ddH2O 11 μL，DNA模板0.5 μL。反应程序为：95℃预变性5 min，进入35个扩增循环：95℃ 变性 40 sec，50℃退火40 sec，72℃延伸1 min，然后72℃ 延伸10 min，4℃保藏；以1%的琼脂糖凝胶电泳后进行检测，送至擎科生物技术完成测序。
[0009]所得到的ZJJE001测序结果经过双向拼接后获得ZJJE001—409bp序列如SEQ ID NO：1所示。
[0010]将序列在GeneBank中，应用BLAST（ww.ncbi.v/BLAST）进行同源性搜索，与数据库中各菌株序列进行相似性分析，与数据库中已有的Tremella aurantialba的
各个菌株相应序列一致性（Identities）都达到97%
~100%。从GeneBank数据库下载同属的4
个物种和香菇的ITS序列，且使用MEGA7软件构建NJ系统发育树，使用默认参数，Bootstrap 检验为1000次。
[0011]本发明的第二目的是这样实现的，包括原种制备和出菇栽培步骤，具体包括：
A、原种制备：
1）母种制备：以野生金耳子实体为材料，在加富的PDA培养基上培养得到母种；
2）原种制备：将母种接种到原种培养料上于温度15
~25℃培养得到原种；
所述的原种培养料配方为：木屑70
~90份、麦麸10
~
25份、石灰1
~
3份、石膏1
~
3份、普钙1
~
3份；
B、出菇栽培：
1）出菇培养料制备：
将出菇培养料混合均匀，将含水量调至60
~65%，pH值为6.0
~
7.0得到出菇培养料；所述
的出菇培养料的配方为：木屑70
~90份、棉籽壳10
~
20份、麦麸10
~
25份、石灰1
~
3份、石膏1
~
3
份、普钙1
~3份；
2）接种培养：
将原种接种到出菇培养料中于温度15
~25℃培养3
~
7天至菌丝长满转入出菇房进行出
菇管理，在金耳子实体颜金黄时即采收。
[0012]本发明通过对采集野生金耳菌株进行菌种分离并驯化栽培。对其进行了形态学、生理生化性质和ITS分析，将该菌株命名为中菌金耳1号（Tremella aurantialba= Naemateliaaurantialba）ZJJE001，属于银耳科(Tremellaceae)，银耳属（Tremella)，于2020年7月24日，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心（CGMCC），保藏编号为：CGMCC NO.：20232。
[0013]本发明的永仁金耳（Tremella aurantialba=Naemateliaaurantialba）ZJJE001的主要形态特征和生理生化性质为：
该菌株的菌落在加富PDA培养基上培养，子实体脑状，颜为乳白，孢子菌落呈酵母状；菌丝生长的Ph为5.0-8.0，菌丝生长温度为12℃-28℃，子实体分化阶段的温度为15℃-21℃。
[0014]本发明优点：
1.利用菌株CGMCC NO.：20232制作菌种，发菌快，污染少，菌丝壮；
2.子实体出现时间早，分化快，且性状稳定；
3. 栽培周期短，商品性好，产量高，能实现规模化栽培，具有较高的应用价值。
附图说明
[0015]图1为系统发育树示意图；
图2为野生金耳子实体示意图；
图3为本发明所述的金耳1号子实体示意图。
具体实施方式
[0016]下面结合实施例和附图对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。
[0017]本发明所述的金耳新菌株中菌金耳1号菌株（T r e m e l la a u ra n t ia l ba= Naemateliaaurantialba）ZJJE001，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏日：2020年7月24日，保藏编号：CGMCC No.20232，属于银耳科（Tremellaceae），银耳属（Tremella）。
[0018]本发明所述的金耳新菌株中菌金耳1号菌株（T r e m e l la a u ra n t ia l ba= Naemateliaaurantialba）ZJJE001的栽培方法，其特征在于包括原种制备和出菇栽培步骤，具体包括：
A、原种制备：
1）母种制备：以野生金耳子实体为材料，在加富的PDA培养基上培养得到母种；
2）原种制备：将母种接种到原种培养料上于温度15
~25℃培养得到原种；
所述的原种培养料配方为：木屑70
~90份、麦麸10
~
25份、石灰1
~
3份、石膏1
~
3份、普钙1
~
3份；
B、出菇栽培：
1）出菇培养料制备：
将出菇培养料混合均匀，将含水量调至60
~65%，pH值为6.0
~
7.0得到出菇培养料；所述
的出菇培养料的配方为：木屑70
~90份、棉籽壳10
~
20份、麦麸10
~
25份、石灰1
~
3份、石膏1
~
3
份、普钙1
~3份；
2）接种培养：
将原种接种到出菇培养料中于温度15
~25℃培养3
~
7天至菌丝长满转入出菇房进行出
菇管理，在金耳子实体颜金黄时即采收。
[0019]A步骤1）中培养的温度为17
~22℃。
[0020]A步骤中所述的原种培养料的配方为木屑80份、麦麸17份、石灰1份、石膏1份、普钙
1份，含水量为60
~65%，pH值为6.0
~
7.0。
[0021]B步骤中所述的出菇培养料的配方为：木屑80份、棉籽壳15份、麦麸10份、石灰2份、
石膏2份、普钙2份，含水量为60
~65%，pH值为6.0
~
7.0。
[0022]B步骤中所述的出菇管理是控制温度为15
~20℃，湿度90
~
95%，光照200
~
600Lx。
[0023]下面以具体实施对本发明做进一步说明：
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