(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910405324.6
(22)申请日 2019.05.10
(71)申请人 赤峰蒙广生物科技有限公司
地址 024000 内蒙古自治区赤峰市红山区
高新技术产业开发区1幢
(72)发明人 张国银 何永进
(51)Int.Cl.
C12P 17/18(2006.01)
C12N 1/18(2006.01)
C07D 473/34(2006.01)
C12R 1/865(2006.01)
(54)发明名称
(57)摘要
本发明公开了种发酵生产腺嘌呤的方法，它
依次包括发酵培养、粗品提取和精品提取步骤；
所述的发酵培养是将腺嘌呤的种子接种到培养
基上，经过发酵，制得含有腺嘌呤的腺嘌呤发酵
液；所述的粗品提取是将腺嘌呤发酵液依次进行
发酵液灭活、固液分离、滤液浓缩、吸附洗脱、洗
脱液浓缩、降温结晶步骤，制得腺嘌呤粗品。所述
的精品提取是将腺嘌呤粗品加纯化水溶解，入活
性炭脱，结晶干燥，制得腺嘌呤精品。该方法原
料来源广，生产成本低，工艺技术成熟，绿环
保，产品纯度高，
适合工业化生产。权利要求书2页 说明书3页CN 110408661 A 2019.11.05
C N 110408661
A
权 利 要 求 书1/2页CN 110408661 A
1.一种发酵生产腺嘌呤的方法，它依次包括发酵培养、粗品提取和精品提取步骤；所述的发酵培养是将腺嘌呤的种子接种到培养基上，经过发酵，制得含有腺嘌呤的腺嘌呤发酵液；其特征在于：所述的培养基包含如下组分：葡萄糖10-30g/L，玉米浆20-100g/L，其他氮源20-80g/L，尿素1-5g/L，甘氨酸1-5g/L，硫酸镁0.5-1.5g/L，磷酸氢二钾2-10g/L，磷酸二氢钾2-10g/L，氯化钙1-5g/L，谷氨酸钠3-10g/L，微量元素5-16g/L，消泡剂0.15-0.5ml/L。
2.根据权利要求1所述的发酵生产腺嘌呤的方法，其特征在于：所述的培养基包含如下组分：葡萄糖15-25g/L，玉米浆40-80g/L，其他氮源30-60g/L，尿素2-4g/L，甘氨酸2-4g/L，硫酸镁0.8-1.2g/L，磷酸氢二钾4-8g/L，磷酸二氢钾4-8g/L，氯化钙2-4g/L，谷氨酸钠5-8g/ L，微量元素8-12g/L，消泡剂0.25-0.4ml/L。
3.根据权利要求1所述的发酵生产腺嘌呤的方法，其特征在于：所述的其他氮源包括黄豆粉、大豆蛋白胨
、豆粕粉、植物多肽粉、酵母粉中的一种或多种。
4.根据权利要求3所述的发酵生产腺嘌呤的方法，其特征在于：所述的酵母粉优选啤酒酵母粉或者面包酵母粉。
5.根据权利要求4所述的发酵生产腺嘌呤的方法，其特征在于：所述的微量元素包含硫酸亚铁、钼酸钠、蛋氨酸、组氨酸、丙氨酸。
6.根据权利要求5所述的发酵生产腺嘌呤的方法，其特征在于：所述的粗品提取包括如下步骤：
S1、发酵液灭活：将腺嘌呤发酵液升温至60-95℃维持1-5小时，制得灭活的腺嘌呤发酵液；
S2、固液分离：将灭活的腺嘌呤发酵液采用过滤设备进行固液分离，制得腺嘌呤滤液；
S3、滤液浓缩：将腺嘌呤滤液使用超滤膜进行超滤浓缩，制得腺嘌呤滤液浓相；
S4、吸附洗脱：将腺嘌呤滤液浓相使用离子交换树脂吸附，再使用洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液；
S5、洗脱液浓缩：将洗脱液使用超滤膜进行超滤浓缩，浓缩至洗脱液中腺嘌呤含量为10-50g/L；制得腺嘌呤洗脱浓相；
S6、降温结晶：将腺嘌呤洗脱浓相降温至0-10℃，结晶干燥，制得腺嘌呤粗品。
7.根据权利要求6所述的发酵生产腺嘌呤的方法，其特征在于：在粗品提取的S2步骤中，所述的过滤设备为陶瓷膜过滤器、碟片离心机、卧螺离心机或者板框压滤机；采用陶瓷膜过滤器，使用50-500nm的陶瓷膜，操作压力0.1-0.4MPa，温度60-90℃；采用板框进行固液分离，需要加入硅藻土作为助滤剂，硅藻土加量为发酵液体积的2-10％(w/v)，过滤压力在0.05-0.4Mpa，过滤温度60-90℃。
8.根据权利要求7所述的发酵生产腺嘌呤的方法，其特征在于：在粗品提取的S3步骤中，使用分子量截留在3500-10000Da的超滤膜进行过滤，操作温度在10-45℃，压力0.5-1.5Mpa，最好使用卷式超滤膜芯，膜芯材料是聚醚砜或者聚丙烯腈。
9.根据权利要求8所述的发酵生产腺嘌呤的方法，其特征在于：在粗品提取的S4步骤中，所述的离子交换树脂为凝胶型201×4、凝胶型001×7、大孔型D113或者大孔型D213中的一种；所述的洗脱剂为氢氧化钠溶液、氨水溶液或者盐酸溶液中的一种。
10.根据权利要求9所述的发酵生产腺嘌呤的方法，其特征在于：所述的精品提取包括如下步骤：将腺嘌呤湿粗品加纯化水溶解，得腺嘌呤粗品水溶液，在腺嘌呤粗品水溶液加入
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