(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910166072.6
(22)申请日 2019.03.06
地址 225300 江苏省泰州市高港区永安洲
镇高永工业园
(72)发明人 李赟高 岳皋愚 江小妹 刘毅
(51)Int.Cl.
C12P 7/62(2006.01)
(54)发明名称一种利用酶膜反应器耦合萃取制备r-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的方法(57)摘要本发明涉及一种 利用酶膜反应器耦合萃取制备r -2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的方法，该方法包括以下步骤：（1）将固定液泵入酶膜反应器中，在20℃下循环30min -2h。（2）将酮基还原酶以及葡萄糖脱氢酶溶于pH7.0的磷酸缓冲液中，使两者酶活都为10ku/L -100ku/L，随后泵入酶膜反应器中，并在10-20℃下循环1h -3h。（3）将含有浓度为5%-30%的2-氧代-4-苯基丁酸乙酯、浓度为50-300g/L的葡萄糖泵入酶膜反应器，并进行循环。温度控制为20-40℃，pH控制在5.0-8.0。酶反应时间为6-24h，（4）待酶催化反应开始后，立即在膜的另一侧通入有机溶剂，并进行循环。温度控制为20-40℃，膜间压差控制在0.02-0.5Mpa。待酶膜反应器中不含有产物时，整个工艺过程结
束。权利要求书1页 说明书3页 附图1页CN 109929885 A 2019.06.25
C N 109929885
A
权 利 要 求 书1/1页CN 109929885 A
1.一种利用酶膜反应器耦合萃取制备r-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤： （1）将固定液泵入酶膜反应器中，在20℃下循环30min-2h；
（2）将酮基还原酶以及葡萄糖脱氢酶溶于pH7.0的磷酸缓冲液中，使两者酶活都为10ku/L-100ku/L，随后泵入酶膜反应器中，并在10-20℃下循环1h-3h；
（3）将含有浓度为5%-30%的2-氧代-4-苯基丁酸乙酯、浓度为50-300g/L的葡萄糖泵入酶膜反应器，并进行循环；
温度控制为20-40℃，pH控制在5.0-8.0，
酶反应时间为6-24h；
（4）待酶催化反应开始后，立即在膜的另一侧通入有机溶剂，并进行循环，
温度控制为20-40℃，膜间压差控制在0.02-0.5Mpa，
待酶膜反应器中不含有产物时，整个工艺过程结束。
2.一种利用酶膜反应器耦合萃取制备r-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的方法，其特征在于：所述的膜，可以是陶瓷膜、混合纤维酯微孔滤膜、硝酸纤维素滤膜、聚偏氟乙烯滤膜、醋酸纤维素滤膜、再生纤维素滤膜、聚酰胺滤膜、聚四氟乙烯滤膜以及聚氯乙烯滤膜以及上述材料的改性复合膜。
3.一种利用酶膜反应器耦合萃取制备r-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的方法，其特征在于：所述权利1和权利2所述的膜的截留精度为1kD-100kD。
4.一种利用酶膜反应器耦合萃取制备r-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的方法，其特征在于：所述步骤（2）所使用的酮基还原酶和葡萄糖脱氢酶可以是酶粉、酶液、基因工程菌中的一种或多种。
5.一种利用酶膜反应器耦合萃取制备r-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的方法，其特征在于：所述步骤（1）所使用的固定液可以是戊二醛、环氧氯丙烷、己二胺、顺丁烯二酸、双偶氮苯。
6.一种利用酶膜反应器耦合萃取制备r-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的方法，其特征在于：所述步骤（3）所述的有机溶剂可以是乙酸乙酯、醋酸丁酯、甲苯、二甲苯、辛醇、氯仿、异丙醇、正己烷、环己烷、正丁醇、异丁醇、邻苯二甲酸二丁酯中的一种或者两种。
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