[19]
中华人民共和国国家知识产权局
[12]发明专利申请公布说明书
[11]公开号CN 101134940A
[43]公开日2008年3月5日
[21]申请号200710016703.3[22]申请日2007.07.22
[21]申请号200710016703.3
[71]申请人樊立
地址265500山东省烟台市福山区福山高新区振
中街298号
[72]发明人樊立 [51]Int.CI.C12N 1/14 (2006.01)
权利要求书 1 页 说明书 3 页
[54]发明名称
产方法
[57]摘要
本发明属于一种中国冬虫夏草真菌－蝙蝠蛾被
成分复杂，发酵周期不稳定，工艺模糊等。解决该
技术问题采用的技术方案要点是：将菌种植入液体
培养基置于摇床上，温度16－18℃培养至30％以上
的菌丝浓度，一级种子罐，温度13－18℃，通入无
菌空气，保压0.06－0.15MPa，进行培养，二级种
子罐；温度13－18℃，持续通入无菌空气，保压0.
03－0.1MPa，进行扩大培养，三级种子罐，温度13－
18℃，通入无菌空气，保压0.03－0.1MPa，进行扩
大培养，发酵罐，温度13－18℃，通入无菌空气，
保压0.03－0.1MPa，进行扩大培养，进行提取；培
养基为：碳源2.5－6％、氮源1.0－6％、无机盐0.
02－0.2％、生长因子0.1－1.0％、其余为水分。
本发明可应用于蝙蝠蛾被毛孢的发酵生产，具有生
产工艺稳定，发酵周期合理等优点。
200710016703.3权 利 要 求 书第1/1页 1.一种中国冬虫夏草真菌-蝙蝠蛾被毛孢的发酵生产方法，其特征在于根据需求量逐级放大培养，将菌种植入液体培养基置于摇床上，温度16-18℃培养至30％以上的菌丝浓度，然后转入一级种子罐，温度13-18℃，持续通入无菌空气，保压0.06-0.15M P a，进行培养，10-15天后转入二级种子罐；温度13-18℃，持续通入无菌空气，保压0.03-0.1MPa，进行扩大培养，10-15天后转入三级种子罐，温度13-18℃，持续通入无菌空气，保压0.03-0.1MPa，进行扩大培养，10-15天后转入发酵罐，温度13-18℃，持续通入无菌空气，保压0.03-0.1MPa，进行扩大培养，10-15天后进行过滤、制粒、烘干、包装；上述发酵过程中的培养基各种成分的重量百分含量为：碳源2.5-6％、氮源1.0-6％、无机盐0.02-0.2％、生长因子0.1-1.0％、其余为水分。
2.根据权利要求1所述一种中国冬虫夏草真菌-蝙蝠蛾被毛孢的发酵生产方法，其特征在于所述的培养基中碳源包括：玉米粉、葡萄糖粉、蛋白胨、氮源包括：蚕蛹粉、蛋白胨、无机盐包括：磷酸二氢钾、硫酸镁、生长因子包括：酵母浸出汁、牛肉膏。
3.根据权利要求1或2所述一种中国冬虫夏草真菌-蝙蝠蛾被毛孢的发酵生产方法，其特征在于所述的培养基各种成分的重量百分含量为：蚕蛹粉1.5-2.5％、玉米粉0.5-2.0％、葡萄糖粉2.5-3.5％、(鱼)蛋白胨0.2-0.3％、(肉)蛋白胨0.5-1.0％、酵母浸出汁0.1-1.0％、磷酸二氢钾0.01-0.04％、硫酸镁0.01-0.03％、其余为水。
200710016703.3说 明 书第1/3页一种中国冬虫夏草真菌-蝙蝠蛾被毛孢的发酵生产方法
技术领域：本发明属于“冬虫夏草”类的保健食品或药品的生产方法。 背景技术：蝙蝠蛾被毛孢，是从青海新鲜“冬虫夏草”中分离得到的麦角菌科真菌冬虫夏草的无性世代——蝙蝠蛾被毛孢菌种，该菌种经中华人民共和国卫生部(卫发监发[2001]84号文批准列入了“可用于保健食品的真菌菌种名单”，中国科学院微生物研究所鉴定为“蝙蝠蛾被毛孢”(Hirsutella hepialid Chen et Shen)，经液体发酵培养所得菌丝体的干燥粉末。是天然“冬虫夏草”人工替代品。具有“补肺益肾，止血化痰功能。用于久咳虚喘，劳嗽咯血，阳痿遗精，腰膝酸痛”。现代医学发现，还具有镇静、抗惊厥、降压、改善心肌缺血、抗衰老、提高免疫力、双向调节人体内分泌、抗排异和抗肺癌、淋巴癌、肝癌的作用，其药用价值越来越引起国内外药学界的重视。目前市场上含有蝙蝠蛾被毛孢菌粉的药品有百令胶囊、百令片、百令颗粒、百令咀嚼片。含有蝙蝠蛾被毛孢菌粉的保健食品有蝙蝠蛾被毛孢菌粉、蝙蝠蛾被毛孢菌丝胶囊等。
中国专利(专利号Z L97110448.4)公开了一种“中国冬虫夏草真菌的发酵生产方法”，该方法虽然能通过发酵生产出蝙蝠蛾被毛孢菌丝，但客观上存在培养基成份复杂，发酵周期不稳定，工艺参数模糊，没有对通气压力进行控制，发酵温度控制范围太大，染菌率高，收率低，成本高等问题。
发明内容：本发明的目的就是提出一种含有蝙蝠蛾被毛孢发酵制备方法的技术方案，以解决背景技术存在的：培养基成份复杂，发酵周期不稳定，工艺参数模糊，没有对通气压力进行控制，发酵温度控制范围太大，染菌率高，收率低，成本高等问题。解决该问题所采用的技术方案是：一种中国冬虫夏草真菌-蝙蝠蛾被毛孢的发酵生产方法，其特征在于根据需求量逐级放大培养，将菌种植入液体培养基置于摇床
上，温度16-18℃培养至30％以上的菌丝浓度，然后转入一级种子罐，温度13-18℃，持续通入无菌空气，保压0.06-0.15M P a，进行培养，10-15
天后转入二级种子罐；温度13-18℃，持续通入无菌空气，保压0.03-0.1M P a，进行扩大培养，10-15天后转入三级种子罐，温度13-18℃，持续通入无菌空气，保压0.03-0.1M P a，进行扩大培养，10-15天后转入发酵罐，温度13-18℃，持续通入无菌空气，保压0.03-0.1M P a，进行扩大培养，10-15天后进行过滤、制粒、烘干、包装；上述发酵过程中的培养基各种成分的重量百分含量为：碳源2.5-6％、氮源1.0-6％、无机盐0.02-0.2％、生长因子0.1-1.0％、其余为水分。其中，所述的培养基中碳源包括：玉米粉、葡萄糖粉、蛋白胨、氮源包括：蚕蛹粉、蛋白胨、无机盐包括：磷酸二氢钾、硫酸镁、生长因子包括：酵母浸出汁、牛肉膏。所述培养基具体的各种成分的重量百分含量为：蚕蛹粉1.5-2.5％、玉米粉0.5-2.0％、葡萄糖粉2.5-3.5％、(鱼)蛋白胨0.2-0.3％、(肉)蛋白胨0.5-1.0％、酵母浸出汁0.1-1.0％、磷酸二氢钾0.01-0.04％、硫酸镁0.01-0.03％、其余为水。本发明与现有技术比较所具有的有益效果是：由于采用上述技术方案，简化且明确了培养基成份，发酵周期稳定，工艺参数清楚明确，对通气压力、发酵温度进行科学合理地控制，经实践，生产中染菌率显著降低，收率显著增高，成本显著降低。使得发酵方法更简单、易于控制、具可操作性。
具体实施方式：
实施例1、将蝙蝠蛾被毛孢菌种植入液体培养基置于摇床上，温度17℃培养至30％的菌丝浓度，然后转入一级种子罐，温度15℃，持续通入无菌空气，保压0.08M P a，进行扩大培养，11天后转入二级种子罐；温度15℃，持续通入无菌空气，保压0.08M P a，进行扩大培养，12天后转入三级种子罐，温16℃，持续通入无菌空气，保压0.05M P a，进行培养，13天后进行提取(过滤、制粒、烘干、包装)。培养基为：蚕蛹粉1.5％玉米粉2.0％、葡萄糖粉3.0％、(鱼)蛋白胨0.3％、(肉)蛋白胨0.5％、酵母浸出汁0.5％、磷酸二氢钾0.01％、硫酸镁0.01％、其余为水。
实施例2、将蝙蝠蛾被毛孢菌种植入液体培养基置于摇床上，温度16℃培养
至32％的菌丝浓度，然后转入一级种子罐，温度15℃，持续通入无菌空气，保压0.09M P a，进行扩大培养，14天后转入二级种子罐；温度14℃，持续通入无菌空气，保压0.09M P a，进行扩大培养，15天后转入三级种子罐，温度14℃，持续通入无菌空气，保压0.05M P a，进行培养，10天后转入发酵罐，温度13℃，持续通入无菌空气，保压0.1M P a，进行培养，10天后进行提取(过滤、制粒、烘干、包装)。培养基为：蚕蛹粉2.0％玉米粉1.5％、葡萄糖粉3.5％、(鱼)蛋白胨0.3％、(肉)蛋白胨0.8％、牛肉膏0.6％、磷酸二氢钾0.03％、硫酸镁0.03％、其余为水。
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