(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910359928.1
(22)申请日 2019.04.30
(71)申请人 福州大学
地址 350108 福建省福州市闽侯县上街镇
福州大学城学院路2号福州大学新区
(72)发明人 邵敬伟 廖羽琴 周敏 沈志春
张永杰
(74)专利代理机构 福州元创专利商标代理有限
公司 35100
代理人 蔡学俊 林文弘
(51)Int.Cl.
A61K 47/42(2017.01)
A61K 31/145(2006.01)
A61K 47/26(2006.01)
A61P 35/00(2006.01)
(54)发明名称
及其在抗肿瘤领域的应用
(57)摘要
本发明属于生物制药技术领域，具体涉及一
种小分子蛋白自组装纳米复合物的制备及在抗
肿瘤领域的应用。本发明公开了这种纳米复合物
的制备方法，首先通过静电吸附作用将聚阳离子
体，再通过溶剂交换法载入药物双硫仑，制备纳
米复合物，粒径小于200 nm，粒子分散均匀，稳定
性良好，显著提高乳腺癌细胞对药物的摄取，增
强药物对乳腺癌细胞的杀伤作用，本发明具体涉
及小分子蛋白纳米复合物的构建及其在抗肿瘤
方面的应用。
权利要求书1页 说明书8页序列表1页 附图6页CN 110051853 A 2019.07.26
C N 110051853
A
权 利 要 求 书1/1页CN 110051853 A
1.一种小分子蛋白自组装纳米复合物，其特征在于：基于小分子鱼精蛋白Prota、靶向适配体核酸分子Ap和化学药物双硫仑DSF自组装形成的双硫仑/适配体-鱼精蛋白纳米复合物DSF/Ap-prota；
所述核酸分子Ap的序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种如权利要求1所述的小分子蛋白自组装纳米复合物的制备方法，其特征在于：首先基于正电荷的鱼精蛋白Prota与负电荷的适配体核酸分子Ap，通过静电吸附作用形成稳定纳米载体Ap-prota，再通过溶剂交换法将双硫仑DSF与纳米载体自组装成双硫仑/适配体-鱼精蛋白纳米复合物 DSF/Ap-prota。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
（1）称取2 mg的双硫仑溶解于1mL甲醇中，配制得到浓度为2 mg/mL的双硫仑储备液，备用；
（2）称取3.3 mg的小分子鱼精蛋白溶解于1 mL的ddH2O中，配制得到浓度为10 mM的小分子鱼精蛋白储备液并稀释至1 μM，备用；
（3）将10 μM核酸适配体溶液用ddH2O稀释至1 μM，备用； （4）将10 μL步骤（3）制得的核酸适配体溶液和一定量的步骤（2）制得的鱼精蛋白溶液逐滴加入到ddH2O中，超声30 min，获得混合溶液A；
（5）取50 µL步骤（1）制备得到的双硫仑溶液，与甲醇混合后，得到混合溶液B，将混合溶液B逐滴加入到步骤（3）混合溶液A中，经超声后，挥干甲醇，即得双硫仑/适配体-鱼精蛋白纳米复合物溶液。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤（4）所述混合溶液A中，鱼精蛋白终浓度为0-80 nM。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤（5）所述超声时间为20-120min。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述混合溶液A为水相，所述混合溶液B为有机相甲醇，水相体积为700- 950 μL，甲醇体积为50-300μL，甲醇/水的体积比为30: 70、27:73、20:80、6:94或 5:95。
7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
（1）称取2 mg的双硫仑溶解于1 mL甲醇中，配制得到浓度为2 mg/mL的双硫仑储备液，备用；
（2）称取3.3 mg的小分子鱼精蛋白溶解于1 mL的ddH2O中，配制得到浓度为10 mM的小分子鱼精蛋白储备液并稀释至1 μM，备用；
（3）将10 μM核酸适配体溶液稀释至1 μM，备用；
（4）将10 μL步骤（3）制得的核酸适配体溶液和50 µL步骤（2）的鱼精蛋白溶液逐滴加入到670 μL的ddH2O中，超声30 min，获得混合溶液A；
（5）取50 µL步骤（1）制备得到的双硫仑溶液，与220 μL的甲醇混合后，得到混合溶液B，将混合溶液B逐滴加入到步骤（3）混合溶液A中，超声60 min，挥干甲醇，即得双硫仑/适配体-鱼精蛋白纳米复合物溶液；
所述甲醇/水的体积比为27:73。
8.一种如权利要求1所述的小分子蛋白自组装纳米复合物在制备靶向抗肿瘤纳米药物中的应用。
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