(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710725781.4
(22)申请日 2017.08.22
(71)申请人 云南清湖山农业科技有限公司
地址 650000 云南省禄劝屏山镇绿槐村民
委员会（禄劝农业园区）
(72)发明人 曾春林
(74)专利代理机构 云南派特律师事务所 53110
代理人 叶健
(51)Int.Cl.
C12N 1/14(2006.01)
C12R 1/645(2006.01)
(54)发明名称
(57)摘要
本发明公开了一种黑皮鸡枞菌液体菌种制
所述培养基为基准，所述培养基中含有麦芽营养
液300-400克、葡萄汁100-200克、蛋白胨1-3克、
石膏粉0.5-1克、构树发酵粉3-6克和余量的水；
(2)培养基灭菌；(3)菌种接种；(4)发酵培养；将
步骤(3)中振荡培养好的液体菌种置于发酵罐
中，在28℃～30℃的条件下，发酵培养3～5天。本
量为2.3g/100mL以上，且菌丝粗壮，泽微带琥
珀。权利要求书1页 说明书3页CN 107299063 A 2017.10.27
C N 107299063
A
1.一种黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)培养基配制；以1千克所述培养基为基准，所述培养基中含有麦芽营养液300-400克、葡萄汁100-200克、蛋白胨1-3克、石膏粉0.5-1克、构树发酵粉3-6克和余量的水；
(2)培养基灭菌；将步骤(1)所得培养基过滤后，置于灭菌器中灭菌；
(3)菌种接种；将步骤(2)中灭菌后的培养基冷却至18℃～22℃，接入黑皮鸡枞菌的菌丝，置于摇床上振荡培养；
(4)发酵培养；将步骤(3)中振荡培养好的液体菌种置于发酵罐中，在28℃～30℃的条件下，发酵培养3～5天。
2.如权利要求1所述的黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中以1千克所述培养基为基准，所述培养基中含有麦芽营养液350克、葡萄汁150克、蛋白胨2克、石膏粉0.7克、构树发酵粉4克和余量的水。
3.如权利要求1或2所述的黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法，其特征在于：所述麦芽营养液是将麦芽粗碎，加入50℃～52℃的水，保持1～2小时，然后升温至80℃～85℃保持3～5小时，冷却至室温，过滤，即得。
4.如权利要求3所述的黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法，其特征在于：所述麦芽与水的质量比为1:2～5。
5.如权利要求1或2所述的黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法，其特征在于：所述葡萄汁是将新鲜葡萄榨汁，过滤，即得。
6.如权利要求1或2所述的黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法，其特征在于：所述构树发酵粉是将构树果实，加入红糖水，置于22℃～25℃的条件下密封发酵3～6个月，过滤，浓缩干燥，即得。
7.如权利要求6所述的黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法，其特征在于：所述构树果实与红糖水的质量比为1:2～5；所述红糖水是将红糖加入3倍量的水中溶解获得。
8.如权利要求1所述的黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中灭菌的条件是在121℃的条件下保持45分钟。
权 利 要 求 书1/1页CN 107299063 A
黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法
技术领域
[0001]本发明涉及食用菌培育领域，具体涉及一种黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法。
背景技术
[0002]鸡枞菌是口蘑科真菌中的一种食用菌，含有人体必需的蛋白质、氨基酸、脂肪，具有补气益血、益胃等功效。
[0003]黑皮鸡枞学名烟灰鸡枞菌，属于鸡枞菌属中的一种。由于鸡枞菌肉质细嫩，气味浓香，味道鲜美，已难以满足市场需求。
[0004]黑皮鸡枞菌已实现人工栽培，目前主要是将菌种接入以锯木屑为主的培养基中进行培养，然后再置于菌棒中进行培育，主要存在菌丝生长速度慢，且产量低。
发明内容
[0005]本发明的目的在于提供一种生长速度快的黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法。[0006]为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：
[0007]一种黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法，包括如下步骤：
[0008](1)培养基配制；以1千克所述培养基为基准，所述培养基中含有麦芽营养液300-400克、葡萄汁100-200克、蛋白胨1-3克、石膏粉0.5-1克、构树发酵粉3-6克和余量的水；[0009](2)培养基灭菌；将步骤(1)所得培养基过滤后，置于灭菌器中灭菌；
[0010](3)菌种接种；将步骤(2)中灭菌后的培养基冷却至18℃～22℃，接入黑皮鸡枞菌的菌丝，置于摇床上振荡培养；
[0011](4)发酵培养；将步骤(3)中振荡培养好的液体菌种置于发酵罐中，在28℃～30℃的条件下，发酵培养3～5天。
[0012]作为优选，所述步骤(1)中以1千克所述培养基为基准，所述培养基中含有麦芽营养液350克、葡萄汁150克、蛋白胨2克、石膏粉0.7克、构树发酵粉4克和余量的水。
[0013]作为优选，所述麦芽营养液是将麦芽粗碎，加入50℃～52℃的水，保持1～2小时，然后升温至80℃～85℃保持3～5小时，冷却至室温，过滤，即得。麦芽营养液为菌丝生长提供适宜的生长环境和所需的营养物质，经发明人试验，在省略麦芽营养液的情况下，菌丝生长较差，菌丝生物量为1.3g/100mL左右。
[0014]作为优选，所述麦芽与水的质量比为1:2～5。
[0015]作为优选，所述葡萄汁是将新鲜葡萄榨汁，过滤，即得。葡萄中含有多种维生素，含糖分高，能促进菌丝生长。经发明人试验，在省略葡萄汁的情况下，菌丝生长较差，菌丝生物量为1.6g/100mL左右，所得菌丝呈白。
[0016]作为优选，所述构树发酵粉是将构树果实，加入红糖水，置于22℃～25℃的条件下密封发酵3～6个月，过滤，浓缩干燥，即得。构树果实中含有大量可溶性多糖和黄酮类物质，甜度高、不酸，还含有多种微量元素。经发明人试验，在省略构树发酵粉的情况下，菌丝生长较差，菌丝生物量为0.8g/100mL左右。
[0017]作为优选，所述构树果实与红糖水的质量比为1:2～5；所述红糖水是将红糖加入3倍量的水中溶解获得。
[0018]作为优选，所述步骤(2)中灭菌的条件是在121℃的条件下保持45分钟。
[0019]上述技术方案产生的有益效果在于：
[0020]采用麦芽营养液、葡萄汁、蛋白胨、石膏粉和构树发酵粉制成的液体培养基，各组分共同作用，能使菌丝生长速度快，菌丝生物量为2.3g/100mL以上，且菌丝粗壮，泽微带琥珀。
具体实施方式
[0021]为进一步说明本发明公开的技术方案，以下通过实施例来说明：
[0022]实施例1：
[0023]一种黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法，包括如下步骤：
[0024](1)培养基配制；所述步骤(1)中以1千克所述培养基为基准，所述培养基中含有麦芽营养液350克、葡萄汁150克、蛋白胨2克、石膏粉0.7克、构树发酵粉4克和余量的水。其中，麦芽营养液是将麦芽粗碎，加入3质量倍的51℃的水，保持1.5小时，然后升温至82℃保持4小时，冷却至室温，过滤，即得。
[0025]葡萄汁是将新鲜葡萄榨汁，过滤，即得。
[0026]构树发酵粉是将构树果实，加入红糖水，置于24℃的条件下密封发酵5个月，过滤，浓缩干燥，即得。所述构树果实与红糖水的质量比为1:4；所述红糖水是将红糖加入3倍量的水中溶解获得。
[0027](2)培养基灭菌；将步骤(1)所得培养基过滤后，置于灭菌器中灭菌；灭菌的条件是在121℃的条件下保持45分钟。
[0028](3)菌种接种；将步骤(2)中灭菌后的培养基冷却至20℃，接入黑皮鸡枞菌的菌丝，置于摇床上振荡培养；
[0029](4)发酵培养；将步骤(3)中振荡培养好的液体菌种置于发酵罐中，在29℃的条件下，发酵培养4天。
[0030]经检测，菌丝生物量为2.6g/100mL，且菌丝粗壮，泽微带琥珀。
[0031]实施例2：
[0032]一种黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法，包括如下步骤：
[0033](1)培养基配制；以1千克所述培养基为基准，所述培养基中含有麦芽营养液400克、葡萄汁200克、蛋白胨3克、石膏粉1克、构树发酵粉6克和余量的水；所述麦芽营养液是将麦芽粗碎，加入5质量倍的52℃的水，保持2小时，然后升温至85℃保持5小时，冷却至室温，过滤，即得。
[0034]所述葡萄汁是将新鲜葡萄榨汁，过滤，即得。
[0035]所述构树发酵粉是将构树果实，加入红糖水，置于25℃的条件下密封发酵6个月，过滤，浓缩干燥，即得。所述构树果实与红糖水的质量比为1:5；所述红糖水是将红糖加入3倍量的水中溶解获得。
[0036](2)培养基灭菌；将步骤(1)所得培养基过滤后，置于灭菌器中灭菌；灭菌的条件是在121℃的条件下保持45分钟。
[0037](3)菌种接种；将步骤(2)中灭菌后的培养基冷却至22℃，接入黑皮鸡枞菌的菌丝，置于摇床上振荡培养；
[0038](4)发酵培养；将步骤(3)中振荡培养好的液体菌种置于发酵罐中，在30℃的条件下，发酵培养5天。
[0039]经检测，菌丝生物量为2.3g/100mL，且菌丝粗壮，泽微带琥珀。
[0040]实施例3：
[0041]一种黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法，包括如下步骤：
[0042](1)培养基配制；以1千克所述培养基为基准，所述培养基中含有麦芽营养液300克、葡萄汁100克、蛋白胨1克、石膏粉0.5克、构树发酵粉3克和余量的水；所述麦芽营养液是将麦芽粗碎，加入2质量倍的50℃的水，保持1小时，然后升温至80℃保持3小时，冷却至室温，过滤，即得。
[0043]所述葡萄汁是将新鲜葡萄榨汁，过滤，即得。
[0044]所述构树发酵粉是将构树果实，加入红糖水，置于22℃的条件下密封发酵3个月，过滤，浓缩干燥，即得。所述构树果实与红糖水的质量比为1:2；所述红糖水是将红糖加入3倍量的水中溶解获得。
[0045](2)培养基灭菌；将步骤(1)所得培养基过滤后，置于灭菌器中灭菌；灭菌的条件是在121℃的条件下保持45分钟。
[0046](3)菌种接种；将步骤(2)中灭菌后的培养基冷却至18℃，接入黑皮鸡枞菌的菌丝，置于摇床上振荡培养；
[0047](4)发酵培养；将步骤(3)中振荡培养好的液体菌种置于发酵罐中，在28℃的条件下，发酵培养3天。
[0048]经检测，菌丝生物量为2.4g/100mL，且菌丝粗壮，泽微带琥珀。
[0049]上述实施例的液体菌种制种时间相比传统的固态菌种，大大得到了缩短，产能提高了50％，种植黑皮鸡枞菌的大棚利用率也至少提高了30％，还大大节省了人力，有效降低了成本。所得液体菌种接种于菌棒上，15天左右菌丝长满菌棒，再过8天左右菌丝达到生理成熟，生长速度提高显著。
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