一种单子叶植物miRNA高效沉默载体的构建方法

（19）中华人民共和国国家知识产权局

	（12）发明专利申请
		（10）申请公布号 CN109207510A（43）申请公布日 2019.01.15

（21）申请号 CN201811094016.8

（22）申请日 2018.09.19

（71）申请人深圳大学

地址 518054 广东省深圳市南山区南海大道3688号

（72）发明人唐贵良;杨晓玉;李琳;罗淋淋;刘琳;罗光宇

（74）专利代理机构深圳市韦恩肯知识产权代理有限公司

代理人李玉平

（51）Int.CI

权利要求说明书说明书幅图

（54）发明名称

一种单子叶植物miRNA高效沉默载体的构建方法

（57）摘要

本发明属于基因工程技术领域，要解决传统STTM系统中常用的35S启动子仅在双子叶植物组织中高效表达,在单子叶植物的表达则较弱，不适用于单子叶植物的miRNA沉默的问题。本发明公开了一种单子叶植物miRNA高效沉默载体的构建方法，其包括以下步骤：S1,针对单子叶植物的目标miRNA,制备与之对应的STTM；S2,将S1所述STTM克隆至克隆载体，以获得启动子‑STTM‑终止子结构；S3,通过双酶切的方式将S2所述启动子‑STTM‑终止子结构克隆至双元载体。本发明的构建方法连接效率高，简便可靠，并可避免引入不必要的转基因成分，所构建的单子叶植株STTM载体可高效地沉默单子叶植物miRNA的表达，更有利于后续转基因植株的表型观察和结果解释。

法律状态