技术领域
本发明涉及一种多功能胶原蛋白纳米纤维修复膜及其制备方法。
背景技术
在外伤或者手术之后，伤口愈合以及对外伤口的纱布修复主要依托两个现象：上皮形成和肉芽组织收缩，而后者对于保护组织连续性和减小伤口大小至关重要。收缩时，相邻的肌纤维细胞会很快转变为成肌纤维细胞，其特点在于张力纤维和平滑肌动蛋白这两个标志会存在。尤其是，在伤口收缩期肌纤维细胞转变为成肌纤维细胞的这一异化过程会体现出一个重要的事情，即这个过程会通过机械应力和TGFβ1发信号来相互影响。具体来说，生长因子TGFβ1被认为是肌纤维细胞转变为成肌纤维细胞的直接诱因，这表明smad2和smad3的活化、smad复合体到细胞核的迁移以及αSMA表达的上调节。Lee等人报告了只有当用适量浓度的TGFβ1对肌纤维细胞进行短时间的刺激时，试管中的类成肌纤维细胞中的胶原蛋白凝胶基质会强烈地收缩，否则细胞将发生永久的纤维化。因此，通过短期控制TGFβ1 浓度的方式，对于某些伤口痊愈是有帮助的。 再生医学的最新方向目前主要集中在如何制备出类似细胞外基质(ECM)的细胞支架，从而实现在多维度空
间中，短暂控制可调节细胞功能的生长因子释放速率。静电纺丝是一种多功能的聚合物纳米生产技术，这让具有混合了活性生长因子并具有微纳米结构细胞支架变得很容易制备，同时此细胞支架又会作为模拟细胞外基质，并提供同样的尺度和功能。可以被广泛制成纳米纤维的典型聚合物包括：合成聚酯纤维，如聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚乙酸内酯(PCL)等，以及天然聚合物如明胶、蚕丝、壳聚糖和纯化I型胶原蛋白(以下简称胶原蛋白，Coll)等。而胶原蛋白作为细胞外基质的一种主要结构化蛋白质，已经被广泛应用到医疗器械方面，如伤口敷料、皮肤再生、药物缓释、角膜替代、组织工程支架等方面。
发明内容
本发明目的是提供一种多功能胶原蛋白纳米纤维修复膜及其制备方法，与直接静脉给药或口服用药相比，采用组织工程方式针对性给药可作为某一特定部位的长效药，这能够在增强药物效用的同时，缩小副作用和防止药物分解，本发明纳米纤维修复膜为含有TGFβ1生长因子的PCL/Coll静电纺丝纤维，可被用作一种特殊的止血材料兼人工细胞外基质(ECM)，通过调节PCL/Coll的混合比例研究其止血抑菌效果，同时控制TGFβ1的释放，从而调节成肌纤维细胞分化速率。该纳米修复膜集快速止血、长效抑菌、细胞修复为一体，有望为病人提供全功能伤口护理。
本发明采用的技术方案为：
一种多功能胶原蛋白纳米纤维修复膜的制备方法，包括如下步骤：
1)含生长因子胶原蛋白/聚己内酯溶液的配置
由于纯化I型胶原蛋白(以下简称胶原蛋白，Coll)可纺性差，因此加入聚己内酯(Polycaprolactone,PCL)进行混纺。将聚己内酯PCL按照5～15：100的质量比溶解于六氟异丙醇中得溶液A，将胶原蛋白Coll按照5～15：100的质量比溶解于六氟异丙醇中得溶液B；
再将溶液A和溶液B混合并利用磁力搅拌装置连续搅拌4-8h，直至得到均一透明的高分子PCL/Coll纺丝溶液。再将转化生长因子TGFβ1以10-3％～
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