(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810940344.9
(22)申请日 2018.08.17
(71)申请人 蔡树威
地址 471000 河南省洛阳市洛龙区军民路
八一公寓西5单元315室
(72)发明人 蔡树威 锁现民 丁志敏 侯军
刘学忠 谢晓琳 刘俊丽 蔡成顺
(74)专利代理机构 郑州中科鼎佳专利代理事务
所(特殊普通合伙) 41151
代理人 蔡佳宁
(51)Int.Cl.
A01G 18/00(2018.01)
A01G 18/20(2018.01)
(54)发明名称
(57)摘要
本发明属于食用菌液体菌种技术领域，公开
的一种金耳液体菌种的制作方法，是选取一个金
耳子实体，再用麸皮、木屑、葡萄糖、硫酸镁、琼脂
管培养基得到斜面试管菌种；再将金耳液体菌种
管母钟内的菌种划分为小块，然后将菌种块接种
到抽滤瓶中；再将抽滤瓶放置于电磁摇床上培
养，得到抽滤瓶液体原种；再将金耳液体菌种培
养液进放入发酵罐中灭菌处理，再将抽滤瓶液体
原种接种到发酵罐中；再往发酵罐中通入无菌空
气培养，即得到金耳液体菌种。本发明得到的金
耳菌液体菌种具有萌发快、活力高、污染率低的
优点，在用于栽培金耳时的，
大大缩短制种时间。权利要求书1页 说明书2页CN 108990704 A 2018.12.14
C N 108990704
A
1.一种金耳液体菌种的制作方法，其特征在于，其步骤如下：
步骤一、制作斜面试管培养基其成分如下：15-18份麸皮、60-75份木屑、15-20份葡萄糖、0.5-0.85份硫酸镁，20-25份琼脂；
步骤二、选取无病虫害的优质金耳取菌柄中间的组织，在无菌的环境里接种到斜面试管培养基上，并于21℃～25℃恒温恒湿培养7天～10天，得到试管菌种；
步骤三、将15-18份麸皮、60-75份木屑、15-20份葡萄糖、0.5-0.85份硫酸镁制成金耳液体摇瓶培养液，然后装入抽滤瓶中，121-123℃高温灭菌处理40分钟，再将斜面母种试管培养基上的菌种划分为0.6cm*0.6cm片块状，在无菌环境下接种到抽滤中，每个抽滤瓶瓶中接种4块～6块菌种块；所述抽滤瓶使用前用臭氧杀菌40～45min，然后在黑暗环境里22℃～25℃恒温恒湿静止培养72小时～96小时；
步骤四、静止培养后的抽滤瓶瓶放置于电磁摇床上，在23℃～25℃下培养84小时～96小时，得到抽滤瓶液体原种；
步骤五、发酵罐培养液由一下成分组成：10-20份玉米淀粉、10-15份麸皮、20-22份葡萄糖、10-14份玉米粉、0.5-1份磷酸二氢钾、0.5-0.9份硫酸镁，将配置后的培养液放入发酵罐中灭菌处理，然后将抽滤瓶液体原种接种到发酵罐中；
步骤六、往发酵罐中通入恒温去湿处理后的无菌空气，通入无菌空气后的压力为0.02MPa～0.05MPa，空气流量控制在0.5-1:1，最后在24℃～25℃下培养96小时～100小时，制作成金耳液体菌种。
权 利 要 求 书1/1页CN 108990704 A
一种金耳液体菌种的制作方法
技术领域
[0001]本发明属于食用菌液体菌种技术领域，涉及一种金耳液体菌种的制作方法。
背景技术
[0002]目前，国内食用菌金耳菌品质好，营养价值高，国内食用菌金耳菌种的生产都是采用固体菌种，固体菌种生产流程是试管种到原种需要30-40天，原种到栽培种40-50天。用固体菌种生产，生产周期长，污染率高，菌种菌龄不一致，萌发慢。
发明内容
[0003]为克服现有技术的不足，加快食用菌事业的发展，本发明提供一种金耳液体菌种的制作方法。
[0004]为了实现上述目标，本发明采用如下技术方案：
一种金耳液体菌种的制作方法，其步骤如下：
步骤一、制作斜面试管培养基其成分如下：15-18份麸皮、60-75份木屑、15-20份葡萄糖、0.5-0.85份
硫酸镁，20-25份琼脂；
步骤二、选取无病虫害的优质金耳取中间的组织，在无菌的环境里接种到斜面试管培养基上，并于21℃～25℃恒温恒湿培养7天～10天，得到试管菌种；
步骤三、将15-18份麸皮、60-75份木屑、15-20份葡萄糖、0.5-0.85份硫酸镁制成金耳液体摇瓶培养液，然后装入抽滤瓶中，121-123℃高温灭菌处理40分钟，再将斜面母种试管培养基上的菌种划分为0.6cm*0.6cm片块状，在无菌环境下接种到抽滤中，每个抽滤瓶瓶中接种4块～6块菌种块；所述抽滤瓶使用前用臭氧杀菌40～45min，然后在黑暗环境里22℃～25℃恒温恒湿静止培养72小时～96小时；
步骤四、静止培养后的抽滤瓶瓶放置于电磁摇床上，在23℃～25℃下培养84小时～96小时，得到抽滤瓶液体原种；
步骤五、发酵罐培养液由一下成分组成：10-20份玉米淀粉、10-15份麸皮、20-22份葡萄糖、10-14份玉米粉、0.5-1份磷酸二氢钾、0.5-0.9份硫酸镁，将配置后的培养液放入发酵罐中灭菌处理，然后将抽滤瓶液体原种接种到发酵罐中；
步骤六、往发酵罐中通入恒温去湿处理后的无菌空气，通入无菌空气后的压力为0.02MPa～0.05MPa，空气流量控制在0.5-1:1，最后在24℃～25℃下培养96小时～100小时，制作成金耳液体菌种。
[0005]由于采用如上技术方案，本发明具有如下优越性：
本发明提出的一种金耳液体菌种的制作方法，是首先选取一个金耳子实体再用麸皮、木屑、葡萄糖、硫酸镁、琼脂制作斜面试管培养基；然后将金耳组织接种到试管培养基得到斜面试管菌种；再将金耳液体菌种培养液灭菌处理后分装到抽滤瓶中，在将斜面试管母钟内的菌种划分为小块，然后将菌种块接种到抽滤瓶中；再将抽滤瓶放置于电磁摇床上培养，得到抽滤瓶液体原种；再将抽滤瓶液体原种接种到发酵罐中，通入无菌空气培养，即得到金
耳液体菌种。该方法得到的金耳菌液体菌种具有萌发快、活力高、污染率低的优点，在用于栽培金耳时的，大大缩短制种时间。
具体实施方式
[0006]一种金耳液体菌种的制作方法，其步骤如下：步骤一制作斜面试管培养基其成分如下：20-28份麸皮、65-70份木屑、16-22份红糖、0.6-1份磷酸二氢钾，20-25份琼脂；步骤二选取无病虫害的优质牛金耳取中间的组织，在无菌的环境里接种到斜面试管培养基上，并于27℃～29℃恒温恒湿培养6天～9天，得到试管菌种；步骤三、将20-28份麸皮、65-70份木屑、16-22份红糖、0.6-1份磷酸二氢钾制成金耳液体培养液装入抽滤瓶中123-125℃高温灭菌处理，在将斜面母种试管培养基上的菌种划分为0.5cm*0.5cm块状，在无菌环境下接种到抽滤中，每个抽滤瓶瓶中接种6块～8块菌种块；所述抽滤瓶
使用前用臭氧杀菌40～45min，然后在黑暗环境里27℃～29℃恒温恒湿静止培养3天～5天；步骤五、静止培养后的抽滤瓶瓶放置于电磁摇床上，在26℃～29℃下培养5天～7天，得到抽滤瓶液体原种；步骤六，发酵罐培养液由一下成分组成：10-25份黄豆粉、15-18份麸皮、16-22份葡萄糖、12-16份玉米粉、0.6-1份磷酸二氢钾、0.4-0.8份硫酸镁，将配置后的培养液放入发酵罐中灭菌处理，然后将抽滤瓶液体原种接种到发酵罐中；步骤五、往发酵罐中通入恒温去湿处理后的无菌空气，通入无菌空气后的压力为0.03MPa～0.08MPa，空气流量控制在0.6-1:1，最后在26℃～28℃下培养5天～7天，制作成金耳液体菌种。
[0007]液体菌种从试管到发酵罐只需17-22天。发酵罐的液体菌种直接替代固体种的栽培种用。其萌发快、活力高、污染率低、生产周期短、产量高。
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