一种中药挥发油的制备方法和应用、挥发油制剂

1.本发明属于天然促透剂领域，具体涉及一种中药挥发油的制备方法和应用、挥发油制剂。

背景技术：

2.透皮给药系统指药物从特殊设计的装置释放，以一定的速率通过完整的皮肤，经毛细血管吸收入体循环而产生疗效的一类控释给药系统。经皮给药作为常用给药途径之一，具有给药方便、可避免首过效应、长时间维持恒定血药浓度等用药优势，使经皮给药拥有巨大的应用前景。促进经皮渗透的方法主要有：(1)物理方法：离子导入、电致孔、超声波导入、磁导入、微针技术等；(2)化学方法：使用经皮渗透促进剂、制成前药或成盐等；(3)药剂学方法：通过微粒载体如脂质体、纳米粒等。经皮渗透促进剂，能克服皮肤角质层的屏障作用，对皮肤作用短暂可逆、低刺激性、无物理方法造成的皮肤生理性损伤，故目前应用最广泛。其中的化学促透剂能有效克服皮肤角质层的屏障作用，极大拓展了透皮给药的应用范围，但高效的促透能力往往同时带来强烈的皮肤刺激性，故fda至今鲜有批准的化学促透剂上市。
3.近年来，中药挥发油作为经皮给药促透剂的研究已成热点，研究发现一些中药挥发油具有良好的透皮吸收促进效果，不少研究者尝试从天然产物提取物中筛选低皮肤刺激性的高效促透剂。但目前对于川芎挥发油、当归挥发油的提取纯化、透皮特性及促渗效果还没有相关的研究和报道。

技术实现要素：

4.本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种中药挥发油的制备方法和应用、挥发油制剂，本发明提供的制备方法得到的中药挥发油纯度高，具有良好的透皮特性以及促透作用。
5.为了解决上述问题，本发明提供了如下技术方案：
6.本发明提供了一种中药挥发油的制备方法，包括以下步骤：
7.将中药饮片和水混合，进行回流提取，得到中药挥发油粗品；
8.将所述中药挥发油粗品依次进行脱水和减压蒸馏，得到所述中药挥发油；
9.所述中药饮片为川芎饮片和/或当归饮片。
10.优选地，所述中药饮片与水的质量比为1：6～12。
11.优选地，所述回流提取的时间为8～14h。
12.优选地，所述回流提取后，还包括将回流提取后得到的产物采用乙酸乙酯进行收集。
13.优选地，所述脱水采用的脱水剂包括无水硫酸钠、无水硫酸钙、无水硫酸镁和无水硫酸铜中的一种或多种。
14.优选地，所述减压蒸馏的真空度为-0.05～-0.5mpa，温度为35～55℃。
15.本发明还提供了上述技术方案所述的中药挥发油在制备药物促透剂中的应用。
16.本发明还提供了一种挥发油制剂，其特征在于，包括中药挥发油和磷酸盐缓冲液；
17.所述中药挥发油为上述技术方案所述制备方法制备得到的中药挥发油。
18.优选地，所述挥发油制剂还包括乙醇；
19.所述乙醇在挥发油制剂中的体积百分含量为0～50％。
20.优选地，所述挥发油制剂中中药挥发油的体积百分含量为0.5～10％。
21.本发明提供了一种中药挥发油的制备方法，包括以下步骤：将中药饮片和水混合，进行回流提取，得到中药挥发油粗品；将所述中药挥发油粗品依次进行脱水和减压蒸馏，得到所述中药挥发油；所述中药饮片为川芎饮片和/或当归饮片。本发明提供的制备方法所得的中药挥发油纯度高。同时，该制备方法得到的川芎挥发油、当归挥发油和川芎-当归挥发油具有促透皮吸收作用，无刺激性，能够作为优良的化学促透剂；且由于其所含的成分多为小分子脂溶性化合物，其自身也具有较好的透皮吸收特性。
具体实施方式
22.本发明提供了一种中药挥发油的制备方法，包括以下步骤：
23.将中药饮片和水混合，进行回流提取，得到中药挥发油粗品；
24.将所述中药挥发油粗品依次进行脱水和减压蒸馏，得到所述中药挥发油；
25.所述中药饮片为川芎饮片和/或当归饮片。
26.在本发明中，若无特殊说明，所有制备原料均为本领域技术人员熟知的市售产品。
27.本发明将中药饮片和水混合，进行回流提取，得到中药挥发油粗品。
28.在本发明中，所述中药饮片为川芎饮片和/或当归饮片；当所述中药饮片为川芎饮片和当归饮片时，本发明对所述川芎饮片和当归饮片的配比没有任何特殊的限定，按任意配比进行混合即可。在本发明的实施例中，所述中药饮片具体为川芎饮片或当归饮片。本发明对所述中药饮片的规格没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的市售产品即可。
29.进行所述混合前，本发明还优选包括将中药饮片进行粉碎；所述粉碎后得到的中药饮片的粒径优选为1～10mm，更优选为2～9mm，最优选为5～8mm；本发明对所述粉碎的方式没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的过程进行并使中药饮片的粒度满足上述要求即可。在本发明实施例中，所述粉碎具体为将中药饮片粉碎至饮片粒径为6mm或10mm。
30.在本发明中，所述中药饮片与水的质量比优选为1：6～12，更优选为1：7～11，最优选为1：8～10。本发明对所述混合的条件没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的过程进行即可。在本发明中，所述回流提取的时间优选为8～14h，更优选为9～13h，最优选为10～12h。本发明对所述回流提取的条件没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的过程进行即可。在回流提取后，本发明还优选包括收集所得产物；所述产物收集优选采用乙酸乙酯。
31.得到所述中药挥发油粗品后，本发明将所述中药挥发油粗品依次进行脱水和减压蒸馏，得到所述中药挥发油。
32.在本发明中，所述脱水采用的脱水剂优选包括无水硫酸钠、无水硫酸钙、无水硫酸
镁和无水硫酸铜中的一种或多种，更优选包括无水硫酸钠、无水硫酸钙和无水硫酸镁中的一种或多种。当所述脱水剂为上述具体选择中的两种以上时，本发明对上述具体物质的配比没有任何特殊的限定，按任意配比进行混合即可。在本发明的实施例中，所述脱水剂具体为无水硫酸钠。在本发明中，所述脱水剂与中药饮片的质量比为1：25～50，更优选为1：30～45，最优选为1：35～40。
33.所述脱水完成后，本本发明还优选包括过滤；本发明对所述过滤的条件没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的过程进行即可。
34.在本发明中，所述减压蒸馏的真空度优选为-0.05～-0.5mpa，更优选为-0.07～-0.3mpa，最优选为-0.09～-0.1mpa；温度优选为35～55℃，更优选为40～50℃，最优选为42～48℃；时间优选为0.5～4h，更优选为1～3h，最优选为1.5～2h。
35.本发明提供的制备方法所得的川芎挥发油或当归挥发油纯度高。同时，该制备方法得到的川芎挥发油和当归挥发油具有促透皮吸收作用，无刺激性，能够作为优良的化学促透剂；且由于其所含的成分多为小分子脂溶性化合物，其自身也具有较好的透皮吸收特性。
36.本发明还提供了上述技术方案所述的中药挥发油在制备药物促透剂中的应用。
37.本发明提供了一种挥发油制剂，其特征在于，包括中药挥发油和磷酸盐缓冲液；
38.所述中药挥发油包上述技术方案所述制备方法制备得到的中药挥发油。
39.在本发明中，所述挥发油制剂还优选包括乙醇。在本发明中，所述乙醇在挥发油制剂中的体积百分含量优选为0～50％，更优选为10～40％，最优选为20～30％。在本发明中，所述乙醇的作用是增强溶解度和乳化程度。
40.在本发明中，所述挥发油制剂中中药挥发油的体积百分含量优选为0.5～10％，更优选为1～8％，最优选为2～6％。在本发明中，所述中药挥发油为上述技术方案所述的中药挥发油；当所述中药挥发油为上述中药挥发油中的两种以上时，本发明对上述具体物质的配比没有任何特殊的限定，按任意配比进行混合即可。在本发明的实施例中，所述中药挥发油按照体积百分含量计具体为0.5％、1％、2％、3％、4％的川芎挥发油、0.5％、1％、2％、3％、4％的当归挥发油、2％当归-0.5％川芎挥发油、2％当归-1％川芎挥发油、2％川芎-0.5％当归挥发油或2％川芎-1％当归挥发油。
41.本发明提供的挥发油制剂将上述技术方案所述的高纯度中药挥发油制备为浓度恰当的挥发油制剂，一方面能够展现出良好的透皮吸收特性以及促透皮吸收作用，另一方面避免浓度过高带来的刺激性气味以及资源浪费。
42.为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的中药挥发油的制备方法和应用、挥发油制剂进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
43.实施例1
44.将川芎饮片1kg切碎至粒径为6mm，加入10kg水，加热回流12h，采用乙酸乙酯收集挥发油。重复上述步骤，对10kg川芎饮片进行分次提取，将乙酸乙酯收集液混合，加入0.1kg无水硫酸钠脱水，过滤后减压蒸馏2h，所述减压蒸馏的压力为-0.09mpa，温度为45℃，制备得到川芎挥发油。
45.实施例2
46.将当归饮片1kg切碎至粒径为10mm，加入10kg水，加热回流12h，采用乙酸乙酯收集
挥发油。重复上述步骤，对10kg当归饮片进行分次提取，将乙酸乙酯收集液混合，加入0.1kg无水硫酸钠脱水，过滤后减压蒸馏2h，所述减压蒸馏的压力为-0.09mpa，温度为45℃，制备得到当归挥发油。
47.实施例3
48.取实施例1制得的川芎挥发油，加入磷酸盐缓冲液和乙醇，分别制成川芎挥发油制剂a1～a5，其中，川芎挥发油体积百分含量分别为0.5％(a1)、1％(a2)、2％(a3)、3％(a4)、4％(a5)，乙醇的体积百分含量均为15％。
49.实施例4
50.取实施例2制得的当归挥发油，加入磷酸盐缓冲液和乙醇，分别制成当归挥发油制剂b1～b5，其中，当归挥发油体积百分含量分别为0.5％(b1)、1％(b2)、2％(b3)、3％(b4)、4％(b5)，乙醇的体积百分含量均为15％。
51.实施例5
52.取实施例1制得的川芎挥发油和实施例2制得的当归挥发油，加入磷酸盐缓冲液和乙醇，分别制成川芎-当归挥发油制剂c1～c4，其中，中药挥发油的体积百分含量分别为2％当归-0.5％川芎挥发油(c1)、2％当归-1％川芎挥发油(c2)、2％川芎-0.5％当归挥发油(c3)和2％川芎-1％当归挥发油(c4)，乙醇的体积百分含量均为15％。
53.测试例1
54.本实验采用franz扩散池法进行体外透皮实验，研究挥发油的经皮渗透情况。包括以下步骤：
55.离体皮肤制备：取雄性小鼠，剃去腹部毛，脱颈处死，取其剑突以下腹部去毛皮肤。除去皮下黏膜和脂肪组织，用生理盐水冲洗至皮肤洗液无白浑浊，滤纸吸干皮肤表面生理盐水，冷冻备用。
56.将制备好的离体皮肤分别固定在franz扩散池的供药池和接受池之间，供药池中分别加入1ml的挥发油制剂a1～a5、b1～b5、c1～c4，接收池中加入接收液(15％乙醇-生理盐水)，排空气泡，池外水浴循环加热(37
±
0.5)℃，300rpm磁力搅拌。分别于1、2、4、6、8、10h取样，每次取样后补足等体积的接收液并排空气泡。取样液体过0.45μm针头滤器后测定藁本内酯的含量。
57.按以下公式计算接收液中指标成分的单位面积累计释放量(qn)，公式中，cn为第n个取样点测得的药物浓度(μg
·
ml-1
)；v为接收液的体积；ci为第i个取样点测得的药物浓度(μg
·
ml-1
)；vi为取样体积；a为渗透面积。并以单位面积累计释放量为纵坐标，时间为横坐标，进行回归，所得的直线斜率为稳态透皮速率jss(μg
·
cm-2
·
h-1
)。
[0058][0059]
实验结果如表1～3所示：
[0060]
表1不同浓度川芎挥发油制剂经皮渗透性结果
[0061][0062][0063]
由表1可见，挥发油中指标性成分藁本内酯的经皮渗透呈零级动力学过程，累计透过量与时间线性关系良好，r值均大于0.9，0.5％、1％、2％、3％、4％的川芎挥发油制剂在10h内稳态透皮速率jss(μg
·
cm-2
·
h-1
)分别为32.46
±
2.98、33.54
±
2.33、48.23
±
6.53、39.82
±
9.43、44.45
±
4.59。
[0064]
表2不同浓度当归挥发油制剂经皮渗透性结果
[0065][0066]
由表2可见，挥发油中指标性成分藁本内酯的经皮渗透呈零级动力学过程，累计透过量与时间线性关系良好，r值均大于0.9，0.5％、1％、2％、3％、4％的当归挥发油制剂在10h内稳态透皮速率jss(μg
·
cm-2
·
h-1
)分别为17.25
±
1.36、26.78
±
13.36、25.35
±
1.09、27.49
±
3.40、27.84
±
3.03。
[0067]
表3不同浓度川芎-当归挥发油制剂经皮渗透性结果
[0068][0069][0070]
由表3可见，挥发油中指标性成分藁本内酯的经皮渗透呈零级动力学过程，累计透过量与时间线性关系良好，r值均大于0.9，2％当归-0.5％川芎挥发油制剂、2％当归-1％川芎挥发油制剂、2％川芎-0.5％当归挥发油制剂和2％川芎-1％当归挥发油制剂在10h内稳态透皮速率jss(μg
·
cm-2
·
h-1
)分别为35.10
±
6.18、24.79
±
0.57、33.21
±
4.25、32.04
±
4.16。
[0071]
测试例2
[0072]
本实验采用franz扩散池法进行体外透皮实验，以白藜芦醇为指标，研究挥发油的促透作用。包括以下步骤：
[0073]
离体皮肤制备：取雄性小鼠，剃去腹部毛，脱颈处死，取其剑突以下腹部去毛皮肤。除去皮下黏膜和脂肪组织，用生理盐水冲洗至皮肤洗液无白浑浊，滤纸吸干皮肤表面生理盐水，冷冻备用。
[0074]
分别在制剂a1～a5、b1～b5、c1～c4中加入一定量的白藜芦醇提取物，白藜芦醇浓度为2mg
·
ml-1
，命为制剂a1*～a5*、b1*～b5*、c1*～c4*。
[0075]
将制备好的离体皮肤分别固定在franz扩散池的供药池和接受池之间，供药池中分别加入1ml的制剂a1*～a5*、b1*～b5*、c1*～c4*，接收池中加入接收液(15％乙醇-生理盐水)，排空气泡，池外水浴循环加热(37
±
0.5)℃，300rpm磁力搅拌。分别于1、2、4、6、8、10h取样，每次取样后补足等体积的15％乙醇-生理盐水并排空气泡。取样液体过0.45μm针头滤器后测定白藜芦醇的含量。
[0076]
按以下公式计算接收液中指标成分的单位面积累计释放量(qn)，公式中，cn为第n个取样点测得的药物浓度(μg
·
ml-1
)；v为接收液的体积；ci为第i个取样点测得的药物浓度(μg
·
ml-1
)；vi为取样体积；a为渗透面积。并以单位面积累计释放量为纵坐标，时间为横坐标，进行回归，所得的直线斜率为稳态透皮速率jss(μg
·
cm-2
·
h-1
)。
[0077]
[0078]
实验结果如表4～6所示：
[0079]
表4不同浓度川芎挥发油制剂促白藜芦醇体外透皮作用结果
[0080][0081]
由表4可见，白藜芦醇的经皮扩散呈零级动力学过程，累计透过量与时间线性关系良好，r值均大于0.9，且0.5％、1％、2％、3％、4％川芎挥发油制剂对白藜芦醇体外透皮作用均有良好的促进作用，与空白组比较计算增透倍数ef值分别为2.63、2.57、4.51、4.05、3.80。
[0082]
表5不同浓度当归挥发油制剂促白藜芦醇体外透皮作用结果
[0083][0084]
由表5可见，白藜芦醇的经皮扩散累计透过量与时间线性关系稍差，r值范围为0.7945～0.9105，但0.5％、1％、2％、3％、4％当归挥发油对白藜芦醇体外透皮作用均有良好的促进作用，与空白组比较计算增透倍数ef值分别为3.02、18.68、19.11、18.19、19.34。
[0085]
表6不同浓度川芎-当归挥发油制剂促白藜芦醇体外透皮作用结果
[0086][0087][0088]
由表6可见，川芎-当归挥发油制剂对白藜芦醇体外透皮作用均有良好的促进作用，且白藜芦醇的经皮扩散呈零级动力学过程，累计透过量与时间线性关系良好，均大于0.9，2％当归-0.5％川芎挥发油制剂、2％当归-1％川芎挥发油制剂、2％川芎-0.5％当归挥发油制剂和2％川芎-1％当归挥发油制剂与空白组比较计算增透倍数ef值分别为7.52、4.05、7.36、6.90。
[0089]
综上可知，川芎挥发油、当归挥发油和川芎-当归挥发油具有良好的经皮渗透作用，对白藜芦醇透皮作用均具有良好的促进作用。川芎-当归挥发油存在自身具有药效、皮肤渗透性及促透皮作用的优势。
[0090]
本发明提供的制备方法能够得到高纯度中药挥发油，且该制备方法得到的川芎挥发油、当归挥发油和川芎-当归挥发油能够作为优良的化学促透剂和透皮吸收药物，具有良好的应用前景。
[0091]
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。

技术特征：

1.一种中药挥发油的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将中药饮片和水混合，进行回流提取，得到中药挥发油粗品；将所述中药挥发油粗品依次进行脱水和减压蒸馏，得到所述中药挥发油；所述中药饮片为川芎饮片和/或当归饮片。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述中药饮片与水的质量比为1：6～12。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述回流提取的时间为8～14h。4.根据权利要求1～3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述回流提取后，还包括将回流提取后得到的产物采用乙酸乙酯进行收集。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述脱水采用的脱水剂包括无水硫酸钠、无水硫酸钙、无水硫酸镁和无水硫酸铜中的一种或多种。6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述减压蒸馏的真空度为-0.05～-0.5mpa，温度为35～55℃。7.权利要求1～6任一项所述制备方法制备得到的中药挥发油在制备药物促透剂中的应用。8.一种挥发油制剂，其特征在于，包括中药挥发油和磷酸盐缓冲液；所述中药挥发油为权利要求1～6任一项所述制备方法制备得到的中药挥发油。9.如权利要求8所述的挥发油制剂，其特征在于，所述挥发油制剂还包括乙醇；所述乙醇在挥发油制剂中的体积百分含量为0～50％。10.如权利要求8所述的挥发油制剂，其特征在于，所述挥发油制剂中中药挥发油的体积百分含量为0.5～10％。

技术总结

本发明属于天然促透剂领域，具体涉及一种中药挥发油的制备方法和应用、挥发油制剂。本发明提供了一种中药挥发油的制备方法，包括以下步骤：将中药饮片和水混合，进行回流提取，得到中药挥发油粗品；将所述中药挥发油粗品依次进行脱水和减压蒸馏，得到所述中药挥发油；所述中药饮片为川芎饮片和/或当归饮片。本发明提供的制备方法所得的中药挥发油纯度高。同时，该制备方法得到的川芎挥发油、当归挥发油和川芎-当归挥发油具有促透皮吸收作用，无刺激性，能够作为优良的化学促透剂；且由于其所含的成分多为小分子脂溶性化合物，其自身也具有较好的透皮吸收特性。有较好的透皮吸收特性。