土壤中放线菌的分离和纯化实验报告

土壤中放线菌分离和纯化实验报告
    土壤中放线菌的分离和纯化实验报告土壤是一个很复杂,有许多层次的生态系统。要想从事物体内分离得到目标产物,必须在特定条件下进行,而不能凭空臆断。因此,实验室分离放线菌所需设备也应根据这些原则来选择和准备,如果单凭某种条件就妄加判断那么往往会导致实验失败或造成人力财力上的浪费。
    一、样品制备与培养基配制1.取土称量,充分混匀;取干燥疏松的盆或缸或其它容器,将盛装样品的容器放入水中浸泡24小时以上并每天换水数次直至发出清香气味为止。2.称取少量样品于蒸馏水中,混合均匀。3.挑取含水量适当的样品接种于经灭菌消毒的马铃薯种子培养基平板上。4.将经过灭菌消毒的培养皿置于恒温箱或酒精灯上加热使之软化。5.软化后的样品立即倒入100毫升灭菌马铃薯琼脂培养基中。6.迅速摇动平板混匀,冷却至45℃左右,用无菌操作法倒平板并贴签标记好。二、增菌接种三、初代培养和测试计算平板上的菌落数,挑取相同的稀释度再按照步骤一继续培养。然后检查各种参数及观察培养结果,对比最终的数值,以判断微生物对放线菌的敏感程度和产率。四、菌种保藏采集长期保存的菌种可采用50℃的马铃薯培养基,将菌液接入0.7%-0.8%琼脂斜面中,斜面凝固后将斜
面置冰箱中低温保存。五、影响实验结果的主要因素环境条件和杂菌污染的因素都会严重地影响放线菌的分离纯化效果,如果只注意控制某个方面,忽视了另外两个条件都难以获得满意的结果,故要求分析工作者既要认真仔细又要灵活掌握,对那些关键性的技术环节和易受外界干扰因素影响的项目应给予足够的重视,这里只简略说明几点。(1)温度是决定分离效果的主要因素之一。通常情况下,分离放线菌要在25℃~28℃,湿度60%~70%的条件下进行,温度高达40℃,不但有碍于菌株的正常繁殖,还会导致菌种死亡。
    2.采用多菌种混合分离的办法更能提高效率。(3)琼脂浓度的影响在各种放线菌的分离中,无论是直接法还是间接法,均以琼脂培养基的营养丰富、无机盐和生长因子较多等优良特性著称,故为放线菌分离的常规方法,由于它在生长过程中氧化葡萄糖产酸,故利用这一特点来抑制微生物的呼吸,同时利用无机盐提供电子使酶钝化,因而提高了实验效果,并且减轻了劳动强度。

本文发布于:2024-09-24 16:27:06,感谢您对本站的认可!

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