单克隆抗体探针如何从基因文库中准确获取目的基因?

单克隆抗体探针如何从基因⽂库中准确获取⽬的基因?
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试题研究:2019年4⽉的选考试题中,选修部分还是相当有难度的,综合性强,应⽤性强,需要有选修部分知识的框架,特别是第(1)⼩题。
⼀、试题特点
太白参试题的情境是⽣物技术应⽤于“培育抗病品种”,技术涉及到基因⼯程技术、单克隆抗体技术、探针技术、植物组织培养技术(花粉离体培养技术和胚的离体培养技术)等,这其实也是教材中提到的植物细胞⼯程技术(基因⼯程、细胞融合、显微注射、植物组织培养)有关,另外,还有必修教材中的杂交育种、基因的表达等知识。
⼆、备考策略
在教学中,不仅需要关注技术的介绍,更重要的是需要关注技术的应⽤,需要创设情境⽤所学的知识解决问题。
三、单克隆抗体探针从基因⽂库中准确获取⽬的基因⽅法
试题的难点是单克隆抗体(单抗)探针如何从基因⽂库中准确获取⽬的基因,下⾯就此⽅法作⼀简单介绍:
支撑板
⽤单克隆抗体(单抗)探针筛选⽬的基因是重组DNA技术中的⼀项新⽅法,⽬前已在多个领域中得到应⽤。
1.为了获得某个特定基因,可以先提取mRNA,然后通过特定的单克隆抗体所识别的mRNA体外翻译系统的产物来确定特定的mRNA,然后反转录cDNA并克隆,得到单克隆抗体所识别蛋⽩的基因。
5460a2.克隆的DNA与被单克隆抗体通过体外翻译系统确定了的mRNA杂交,⽬的基因的DNA由于与单克隆抗体所确定的mRNA互补,其转录mRNA的作⽤被抑制,因⽽被抑制转录功能的基因,即为所筛选的基因。
3.⽤单克隆抗体提纯抗原,以分析抗原的全部或部分氨基酸序列,再推导出相应的DNA碱基序列,根
据DNA序列可以⼈⼯合成寡聚核苷酸探针,⽤此探针在基因组⽂库或cDNA⽂库中筛选单克隆抗体所识别抗原的基因。
附:2019年4⽉选考题:
回答与利⽤⽣物技术培育抗病品种有关的问题:
(1)通过抗病性强的植株获取抗病⽬的基因有多种⽅法。现已获得纯度⾼的抗病蛋⽩(可作为抗原),可通过技术获得特异性探针,并将中所有基因进⾏表达,然后利⽤该探针,出能与探针特异性结合的表达产物,进⽽获得与之对应的⽬的基因。
杨梅采摘机(2)将上述抗病基因通过转基因的⽅法导⼊植物的分⽣组织可获得抗病性强的植株。若在试管苗期间⽤分⼦⽔平⽅法判断抗病基因是否表达,应检测
文具盒生产过程(A.质粒载体    B.转录产物    C.抗性基因    D.病原微⽣物)
(3)植物细胞在培养过程中往往会发⽣,可利⽤这⼀特性筛选抗致病真菌能⼒强的细胞。筛选时在培养基中加⼊,并将存活的细胞进⼀步培养⾄再⽣植株。若利⽤培养建⽴的细胞系⽤于筛选,则可快速获得稳定遗传的抗病植株。
(4)⽤抗病品种与⾼产品种进⾏杂交育种过程中,有时会遇到因胚发育中⽌⽽得不到可育种⼦的情况。若要使该胚继续发育获得植株,可采⽤的⽅法是。
答案:(1)单克隆抗体基因⽂库(2)B    (3)变异⾼浓度的真菌(4)花粉离体(5)胚的离体培养
链接:如何基因⽂库中获取⽬的基因——浙江⾼考题的思考链接:如何通过构建基因⽂库来获取⽬的基因

本文发布于:2024-09-24 01:18:45,感谢您对本站的认可!

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