鲎试剂灵敏度复核标准操作规程

范围：鲎试剂

职责：检验室对本规程的实施负责

正文：

1.内毒素标准溶液的制备

1.1取细菌内毒素国家标准品（NSE）或内毒素工作标准品（WSE）一支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，再用砂轮在瓶颈上部轻轻划痕，75%酒精棉球擦拭后启开，防止玻璃屑落入瓶内。

光端机箱1.2按标准品使用说明书用移液管加入规定量的细菌内毒素检查用水（BET）溶解其内容物，用封口膜将瓶口封严。置旋涡混合器上混合15分钟，然后制备成所需浓度的细菌内毒素标准溶液即

2.0λ、1.0λ、0.5λ、0.25λ（λ为所复核鲎试剂的标示灵敏度），每稀释一步均应在旋涡混合器上混合30秒。若为NSE，可按其使用说明书将其稀释至规定浓度后分装并保存。

2.待复核鲎试剂的准备茂发跳跳糖

2.1在制备内毒素标准溶液的同时，取0.1ml/支的鲎试剂18支轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，用砂轮在瓶颈轻轻划痕，75%乙醇棉球擦拭后启开备用，防止玻璃屑落入瓶内，加入0.1mlBET水复溶，使内容物充分溶解，避免产生气泡。

2.2若待复核鲎试剂的规格不是0.1ml/支时，按标示量加入BET水复溶，将复溶后的鲎试剂溶液混匀后每0.1ml分配到10×75mm凝聚管中，要求至少分配18支管备用。

3.加样

3.1将已充分溶解的待复核鲎试剂18支（管）放在试管架上，排成5列，其中4支（管）4列分别加入2.0λ、1.0λ、0.5λ、0.25λ的内毒素标准溶液；2支（管）1列分别加入BET水。内毒素标准溶液和BET水的加样量均为0.1ml/支。

4.加样结束后，用封口膜封口，轻轻混匀，避免产生气泡，连同试管架放入

制造业采购37±1℃水浴或适宜恒温器中，试管架保持水平状态，保温60±2分钟，观察结果。

光触媒滤网5.鲎试剂灵敏度复核

如最大浓度2.0λ4管均为阳性，最低浓度0.25λ4管均为阴性，阴性对照为阴性，按下式计算反应终点浓度的几何平均值即为鲎试剂灵敏度的复核结果（λc）。

砂轮网片λc＝lg- 1 （∑X/4）

式中X为反应终点浓度的对数值（lg）。反应终点浓度是系列浓度递减的内毒素溶液中最后一个呈阳性结果的浓度。降噪咪头

6.结果判断

——当λ在0.5λ～2.0λ（包括0.5λ和2.0λ）时，方可用于干扰实验和供试品细菌内毒素检查，并以λ（标示灵敏度）为该批鲎试剂的灵敏度。

7.结果计算和判断举例

λ＝lg- 1 （∑ X s/4）

＝lg- 1 [（lg0.125+ lg0.25+ lg0.0625+ lg0.125）/4]

＝0.125（EU/ ml）

λs在0.5λ～2.0λ范围内，符合规定。

本文发布于:2024-09-22 12:46:21，感谢您对本站的认可！

标签：浓度内毒素试剂细菌复核落入试管架结果

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