仪器： 索氏提取器，容量瓶（10mL、50mL、100mL），移液管（1mL、10mL），吸耳球，三口烧瓶（250mL），球形冷凝管，分液漏斗，蒸馏装置，抽滤装置，恒温水浴锅，电加热套，分析天平，分光光度计，烘箱，粉碎机。
试剂： 中药决明子，芦丁，乙醇，甲醇，丙酮，石油醚，蒸馏水， NaNO2、Al(N03)3， NaOH。 步骤：
将芦丁于120℃下干燥至恒重，准确称取芦丁标准样品0.0150g，用30％乙醇溶解，定溶于50mL，得浓度为0.300mg/mL芦丁标准液。准确吸取芦丁标准液0mL、1.0mL、鞋架2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL于10mL容量瓶中，加入5%NaNO2液0.3mL，摇匀，放置6min后加入10%Al(N03)3溶液0.3mL，摇匀，放置6min后加入4%NaOH溶液4.0mL，再用30%乙醇定容，摇匀，以30%乙醇为空白参比， l0min后用lcm比皿于510nm测定吸光度A，得到芦丁
标样含量Y(μg/mL)与吸光度A间的关系，画出标准曲线。
2. 决明子中黄酮平均含量的提取及测定
决明子中总黄酮平均含量的测定。分3次分别准确称取3.0决明子粉末，用滤纸包住并用棉线捆好，置于索氏提取器中，用100mL乙醇体积浓度75％，80℃水浴加热回流，当索氏提取器中的溶液由黄接近无时，取出用滤纸包住的决明子粉末，蒸馏回收乙醇至近干，加水约80mL溶解，加入20mL石油醚脱2次，弃去醚层。加水于100mL容量瓶中定容，作为待测液。取待测液5.0mL于50mL容量瓶中，用30％乙醇定容，取2.0mL于10mL容量瓶中，以下按照测定芦丁标准液吸光度的方法测定吸光度A。重复pvc再生颗粒3次，结果取平均值。从决明子中提取的黄酮含量可按下列公式计算：
M(%)=[Y×(100/5)×(50/2)×10×10-6×100]/w
式中：100/5 和50/2—稀释倍数；w—决明子重(g)。提取率(%)=(提取黄酮含量/决明子中总黄酮的平均含量)×100。
3. 决明子中总黄酮的提取及测定
准确称取3.0g决明子粉末置于磨口三颈烧瓶中，按照设计的配方加入一定量的提取剂，在一定温度下回流提取一定时间，趁热减压抽滤，滤渣加适量水洗涤、过滤．合并清液后得提取液，再蒸馏，回收溶剂至近干，再按照2中的步骤配置待测液，以下按照测定芦丁标准液吸光度的方法测定吸光度A，计算黄酮提取率。
4. 提取溶剂的选择
分别用沸水、碱性水溶液(pH值9.0，80℃)、70％乙醇溶液(80℃)、70％甲醇溶液(80℃)、70％丙酮溶液(80℃)回流浸提3.0h，料液比为1:25分别提取，测定其吸光度，计算其提取率分别。
5. 影响提取效果的因素
(1).乙醇浓度对浸提效果的影响
分别采用45%、55%、65%、75%、80%、85%、90%的乙醇浓度按3的操作步骤进行试验，在80℃下，回流提取时间为3.5h，料液比为1:20，提取决明子中黄酮类化合物的试验，得出乙醇浓度对提取效果的影响。 (2).提取温度对浸提效果的影响
分别采用40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃、100℃的提取温度按3的操作步骤进行试验，以浓度为75%的乙醇为提取剂，回流提取时间为3.5h，料液比为1:20，提取决明子中黄酮类化合物的试验，得出提取温度对提取效果的影响。
(3).料液比对浸提效果的影响
分别采用1:5、1:10、1:15、1:20、1:25、1:30、1:35(g:mL)的料液比例按3的操作步骤进行试验，以浓度为75%的乙醇为提取剂，回流提取时间为3.5h，提取温度为80℃时，提取决明子中黄酮类化合物的试验，得出料液比对提取效果的影响。
(4).提取时间对浸提效果的影响
分别采用1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h、3.5h、4.0h的提取温度按3的操作步骤进行试验，以浓度为75%的乙醇为提取剂，提取温度为80℃，料液比为1:25，提取决明子中黄酮类化合物的试验，得出提取时间对提取效果的影响。
表1 单因素实验条件表
| 乙醇浓度 | 提取温度 | 料液比 | 提取时间 |
| 80℃下、回流3.5h、料液比1:20g:mL | 75%乙醇、回流3.5h、料液比1:20 | 80℃下，75%乙醇，回流3.5h | 80℃下、75%乙醇、料液比1:25 |
1 | 45% | 40℃ | 1:5 g:mL | 1.0h |
2 | 55% | 50℃ | 1:10 g:mL | 1.5 h |
3 | 电子加速器辐照 65% | 60℃ | 1:15 g:mL | 2.0 h |
4 | 75% | 70℃ | 1:20 g:mL | 2.5 h |
5 | 80% | 80℃ | 1:25 g:mL | 3.0 h |
6 | 85% | 90℃ | 1:30 g:mL | 3.5 h |
7 | 90% | 100℃ | 1:35 g:mL | 4.0 h |
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6. 正交试验确定提取的最佳条件
为了全面考查影响因素，设计了4因素3水平的正交试验，试验因素水平见表2，L9(34)正交表见表3，实验条件见表4。
表2 正交实验因素水平表
水平 | 因素 |
乙醇体积分数（A） | 温度（B） | 料液比（C） | 浸提时间（D） |
% | ℃ | g:mL | ip网络电话系统h |
1 | 65 | 70 | 1:20 | 2.5 |
2 | 75 | 80 | 1:25 | 3.0 |
3 | 85 | 90 | 1:30 | 3.5 |
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表3 L9(34)正交表
| A | B | C | D |
1 | 1 | 1 | 1 | 1 |
2 | 1 | 2 | 2 | 2 |
3 | 1 | 3 | 3 | 束胸衣3 |
4 | 电子仓单交易 2 | 1 | 2 | 3 |
5 | 2 | 2 | 3 | 1 |
6 | 2 | 3 | 1 | 2 |
7 | 3 | 1 | 3 | 2 |
8 | 3 | 2 | 1 | 3 |
9 | 3 | 3 | 2 | 1 |
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表4 实验条件
| 乙醇体积分数% | 温度℃ | 料液比g:mL | 浸提时间h |
1 | 65% | 70℃ | 1:20g:mL | 2.5h |
2 | 65% | 80℃ | 1:25g:mL | 3.0h |
3 | 65% | 90℃ | 1:30g:mL | 3.5h |
4 | 75% | 70℃ | 1:25g:mL | 3.5h |
5 | 75% | 80℃ | 1:30g:mL | 2.5h |
6 | 75% | 90℃ | 1:20g:mL | 3.0h |
7 | 85% | 70℃ | 1:30g:mL | 3.0h |
8 | 85% | 80℃ | 1:20g:mL | 3.5h |
9 | 85% | 90℃ | 1:25g:mL | 2.5h |
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