电极拉制手册

南方医科大学-神经生物教研室
电极拉制手册P-97的使用与维护
Gosss
2010-5-28
目录
玻璃微管的选择 (3)
拉制仪的结构与拉制原理 (3)
P-97电极拉制过程 (4)
功能参数设置 (5)
图像拼接器
膜片钳电极的拉制 (7)
移通智能手机>磁悬浮鼓风机原理P-97的日常维护 (8)
铂金片的更换 (8)
干燥剂的更换 (15)
玻璃微管的选择
我们一般都是选用Sutter公司生产的硼硅酸盐硬质玻璃管。我们现在选用的是:BF120-69-15:这是产品货号其中B为Borosilicate(硼硅酸盐)的缩写表示硬质玻璃、F 为Filament的缩写表示为有芯的玻璃毛胚管、120为外径1.2mm、69为内径0.69mm、15为玻璃管的长度15cm。
选用15cm的玻璃管是最为划算的,这是在中科院神经所所了解到的。Sutter的电极有三种长度分别为15,10,7.5cm他们的价格相差不多但15cm的点击可以截为两段也就能让其成本降低了一半。但这样存在一个问题!Sutter的玻璃管两端是经过加热处理的,所以很光滑。我们使用砂轮在玻璃管正中磨一下然后轻轻将玻璃管掰开,经过联系可以让断口较平整。但断口就会非常的锋利,在使用是会将记录电极银丝上的AgCl镀层刮掉。为了解决这一问题我们使用酒精灯适度加热断口断口微微烧红后就可以让其变得光滑了。
在做脑片膜片钳的实验时,我推荐使用外径1.2的玻璃管。因为脑片膜片钳要使用正置显微镜工作空间狭小选用细一些的电极可以略微的弥补空间狭小的问题。
在单细胞的试验中也可以选用BF150-86-15外径1.5的玻璃管,具体就要看你自己的喜好了。此外我们还是用过WPI的玻璃管,其也有规格同Sutter相似的玻璃管使用起来没有什么明显区别。
※严重推荐上面所提供的厚壁玻璃管,Sutter还有相应的薄壁玻璃管十分的不好用,很难拉出理想的电极。
※不推荐国产的玻璃管(如南京六和,北京正天易等),它们的玻璃管内壁没有经过妥善的清洗会有污染致使拉出的电极封接成功率比较低。虽然它们的比较便宜但电极损耗大综合起来成本并没有优势,并会严重影响你的实验效率和心情!
拉制仪的结构与拉制原理
Sutter公司的P97拉制仪是现今十分常用的电极拉制仪,它的电源开关在机身的左侧面的前部,使用起来还是蛮方便的。其结构如图:
1,干燥罐2,电极加热室3,牵拉臂4,显示屏5,数字操作键盘6,复位按钮其可大体分为四个系统:
1.加热系统,在电极加热室(2)中有铂金片通电后用来融化玻璃管。
2.空气冷却系统,压缩的空气进入干燥罐(2)然后再通过管道从铂金片下的小孔吹出用于冷却铂金片。干燥的空气可以电极加热室中的湿度降低以减少空气湿度对拉制的影响。
小型塑料封口机3.机械拉制系统,两侧牵拉臂(3)可以控制拉制时的力度和速度。
4.电子控制系统,(4. 5)用于控制拉制时的各种参数。
四个系统相互配合以完成精密的拉直过程,如下:
插板闸门
P-97电极拉制过程
拉制仪控制着四个物理量(如上图)。(1)两臂拉开电极的速度,(2)铂金片加热电极(HEAT 的值只是一个代表并不代表温度,往往同是P97不同机器之间会有较大的差异所以都要以Ramp为标准)。(3)拉力表示两臂拉开电极用力的大小。(4)气流用于冷却铂金片以使融化的电极凝固断裂。下面将整个电极拉制的过程描述如下,编号与图下方的数字相对应:1.启动拉制后首先你会听到有喷气声,这是P97给加热盒喷入一定时间的气体,干燥后的气体由铂金片下的小孔吹入目的是让拉制空间干燥(空气的湿度会影响电极拉制)。2.喷气持续一段时间后铂金片开始加热,加热的温度就是你所设定的HEAT值,这是你可以看到铂金片慢慢的变红发热,一会之后毛配管就会开始融化。
3.由于固定电极的两臂有一定的拉力(这个拉力并不是你所设定的PULL值,你可以认为这是本底的拉力)所以两臂会将电极拉开并且有一个加速的过程,当拉开的速度达到你所设定的VEL.值是铂金片就会停止加热并开始吹气冷却。
4.吹气的压力是在功能菜单中所设定的pressure大小,也就是显示面板上方所显示的P值。
吹气的时程如图也就是你所设定的TIME值。
5.在加热停止后40毫秒(如图加热轨迹)与吹气的同时两臂还会给与以持续一秒力度是你所设定的PULL值的拉力拉开电极。
经过上述的五个步骤就完成了一步的拉制。P97中称为一个line。一个完整的拉直过程往往包括多个line并称之为一个Loop。
对接焊缝当拉直过程完成后会显示如下的内容:
上面的显示表示,一步拉制(第二行)一次(第一行)加热时间6.05秒。
功能参数设置
P97有多个功能参数可供设置。开机后进入任何一个拉制程序然后按<CLR>按钮,屏幕显示如下内容:

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