趋化因子受体基因CCR5 ⊿32单抗在多发性硬化症中的的应用 摘要：趋化因子受体基因CCR5 可能在多发性硬化症的中枢神经系统的致病性T细胞中起着重要作用。我们假设趋化因子受体可能长期在抗迟发性抗原4抗体的T细胞转移中有着重要作用，因此，我们在多发性硬化症患者中用单抗法分析通过删除携带者的CCR5 ⊿32基因，结果细胞表面CCR5 ⊿32的表达量下降，从而降低了该疾病的发生。方法-在212个单抗的多发性硬化症的患者当中分析CCR5 ⊿32基因。结果-在通过用单抗一年或是首次48小时结果CCR5 ⊿32对复发频率影响不显著，多发性硬化症的等级划分（伸缩杆MSSS）在携带CCR5 ⊿32（p=0.031）基因的患者中显著低下。结论-CCR5 ⊿32基因在通过单抗的多发性硬化症患者中低疾病发生率没有明显的偶联型。我们发现多发性硬化症的等级划分得分较低的病人高尔夫球场围网
carrying CCR5 ⊿32 与其余的患者相比,这与先前的研究报告是一致的与更有利的疾病发生的过程，然而更进一步的对多发性硬化症患者的CCR5 ⊿32和疾病发性之间的关系研究之前需要证实这些。 引言
多发性硬化症是在青壮年间常见的一种临床型疾病，它是通过作用于中枢神经系统而引起炎
症反应，最后导致脱髓质和轴突损坏。在对发行硬化症的中枢神经系统中依次在粘附分子和趋化因子之间相互作用，导致淋巴细胞和其它单核分子引起治病，因此在炎症组织中特定趋化因子的表达有助于特异性分裂的免疫细胞在炎症部位表达出相应的位点。血管周围的炎症是典型的多发性硬化症的损伤，趋化因子和他们的受体在中枢神经系统的白细胞募集中起着重要作用，在一受体基因即趋化因子受体5（CCR5）在p21染体的3号位上，它主要是激活Th1细胞﹑巨噬细胞﹑树突细胞﹑小神经胶质细胞的表达。在大脑脱髓鞘的病变CCR5表面表达部位观察发现T辅助性细胞的1﹑监督性T细胞和单核细胞表达活跃。
删除CCR5罗口袜基因编码区片段的CCR5 ⊿32，保留细胞中的非功能性受体。CCR5 ⊿32在杂合个体的CCR5蛋白和在纯合个体中突变缺失CCR5的细胞表面表达量很低，在为治愈的MS疾病患者当中，CCR5 ⊿32携带者疾病复发的风险性比较低，T2缺失的负荷也比较小，后期疾病的形成和病情的发展速度都比较的缓慢。然而，对CCR5 ⊿32后期的研究发现，它对疾病有着不利的影响。
趋化因子受体5存在于人类免疫缺陷型病毒（HIV）中，现在已经被开发成HIV感染的CCR5 拮抗剂，，对这种疾病中发现，在对携带有CCR5 ⊿32基因的MS患者和对于携
带两个野生型等位基因的患者相比，它更具有防御疾病复发的作用，这可能提示着在用CCR5拮抗剂和标准疾病修饰相结合的方法提高了效率。我们假定在携带者中删除CCR5基因与没有携带者相比，其疾病复发率很小。这个假设的具有前沿性，后来在用单抗Danish患者CCR5 ⊿32基因的缓慢复发病中。
材料与方法
我们所用的是在哥本哈根的Rigshospitalet数据波的包括212个连续的单抗的患者，根据Danish规定，单抗的管理主要有一下几点（1）患者有两个或更多的复发记录，并且在最先的几年内在疾病修饰（DMT）中持续增加双立柱卧式带锯床2EDSS点。(2)患者是通过米托蒽醌调控也是因为米托蒽醌的剂量已积累达到上限或有疾病已经被米托蒽醌所激活了。（3）作为一中新型的方法将会迅速发展，对严重性RRMS定义是，在一年内达到两次或以上复发率的将禁用，在脑部一个或以上的钆增强核磁共振成像（MRI），或是与先前MRI相比T2缺陷负荷显著增加。所有患者都具有书面知情权限，并且也已得到地区伦理委员会的规则认可。
患者至少需要12个月的，所有的患者在通过3和6个月后，神经学家的检查，每年两次
比较。对于复发信息和残疾状况评分情况在Danish MS登记处记录，MS严重评分记录（MSSS），它是一种在计算所有MS患者中基于EDSS的疾病持续的措施。
方法
在EDTA管中获得静脉血样本，对全部血液用Macherey-Nage方法获得纯化DNA，量在10-600ng/ul范围之内，将DNA在-80°C下保存。首先用聚合酶链式反应（PCR）分析DNA太阳能沼气池，然后将DNA稀释到10 ng/ul的浓度。在容器中用PCR级联放大反应之20ul,然后与金粉PCR缓冲液等（从 Nærum, Denmark的生物技术部获得）相互混合，加入2.5uM的，每dNTP为200uM，每一PCR引物为0.2uM,1.2单位的Taq的DNA聚合酶和5ul的DNA 模板。
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