粮油产品中黄曲霉毒素检测方法分析

粮油产品中黄曲霉毒素检测方法分析
付勇浩;汤志宏;王岩;苏昀
【期刊名称】《食品安全导刊》
四技术
【年(卷),期】2016(000)015
【总页数】2页(P109-110)
制动室【作 者】付勇浩;汤志宏;王岩;苏昀
【作者单位】驻马店市粮油质量检测中心;驻马店市粮油质量检测中心;驻马店市粮油质量检测中心;驻马店市粮油质量检测中心
【正文语种】中 文
黄曲霉毒素可以引发肝癌,其严重性不可小视。为了更好地测定粮油中黄曲霉毒素的含量,研究人员做了不懈努力,研究出了几种检测方法,以便最大限度地降低对人类的危害和环境的污染。以下作出了相应阐述。
黄曲霉毒素简称AFT,是一种由寄生曲霉和黄曲霉产生的剧毒物质,常见于食用油、玉米、花生等农产品中。在目前已知的100多种毒素中,黄曲霉毒素的毒性和稳定性是比较强的,可以致癌。在污染严重的地区,黄曲霉毒素在粮油中的含量严重超标,肝癌患者的人数也急剧增加,严重影响了人们的身体健康。黄曲霉毒素的分子结构复杂,分为B1、B2、C1和C2四种类型。因此,对黄曲霉毒素的研究也会有一定难度。
高效液相谱法(HPLO)
高效液相谱法检测精确,适合定量检测,在重现性和灵敏度方面均占优势且易于操作,适用于多种黄曲霉毒素的分离,检测效率高,具有一定的权威性。由于该种方法的检测结果比较精确,可以分辨黄曲霉毒素的类型,所以成为我国使用范围最广的检测黄曲霉毒素的方法。但HPLO存在一定的局限性,如检验周期长,技术要求高,试剂类型多,操作程序和样品的前处理都比较复杂。这就决定了该方法在现场化和操作方面相对逊。
薄层谱法(TLC)
作为我国测定食品及饲料中黄曲霉毒素含量的国家标准方法,TLC是一种利用分离分析技
术且应用广泛的传统检测方法。薄层扫描层析仪的应用替代了以往的目测方法,使检测结果更精确。TLC利用相应的提取剂提取不同样品中的黄曲霉毒素,萃取纯化后,将黄曲霉毒素层析于薄层板。
薄层分析法分为单项展开法和双向展开法。双向展开法虽然操作步骤多,时间长,但是可以更好地去除杂质,排除杂质对检测的影响,灵敏度较高。
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泰斯花粉阻隔剂免疫分析法
免疫分析法通过观察抗原抗体的化学反应来检测抗原抗体的含量。免疫化学分析法的操作简单,检测成本低,且便于掌握和学习。此外,这种方法的重现性好,较薄层谱法其灵敏性和特异性较高。免疫分析法有多种类型,包括酶联免疫(ELISA)、免疫亲和柱(RIA)-荧光光度法、免疫亲和柱(HPLC)法。
1 酶联免疫吸附法(ELISA)
由于酶具有催化作用,抗原抗体的反应具有特异性,待化学反应显后,依据显示的颜,再结合酶标仪的使用,即可测定粮油中黄曲霉毒素的含量。这就是ELISA的应用原理,
在国内外非常普遍的酶联免疫吸附法包括竞争法、双抗夹心法、生物酶标亲和素、间接法。在比较成熟的商品化试剂盒中,竞争法是检测黄曲霉毒素含量的常用方法之一,粮油中的黄曲霉抗体和单克隆抗体发生竞争,会使微孔条预包显,吸光值越多,黄曲霉毒素的含量越少,反之则越多。ELISA具有高效性,可快速检测大量粮油中黄曲霉毒素的含量,此外在饲料的测定中也被国标推荐。
2 免疫亲和柱(IAC)-荧光光度法
免疫亲和柱通过单克隆免疫亲和柱进行分离,载体蛋白与单克隆抗体联合后会将柱形填满,由此生成IAC,IAC会与黄曲霉毒素的抗原产生相应的特异性吸附。反应中抗原抗体的吸附关系越来越强烈,只有黄曲霉毒素被吸附,其余杂质均可通过柱子,再由极性有机溶剂洗脱吸附,借助紫外灯、荧光计检测黄曲霉毒素的含量。这种方法处理一个样品的平均时间大约是10到15分钟,缩减了检测时间,而且无需使用有异味和毒性的溶剂。在保证人员安全的前提下,也减少了对环境的污染。
3 免疫亲和柱(HPLC)法
近些年,免疫亲和柱和高效液相谱法结合成为检测黄曲霉毒素的常用方法之一。相比HPLC,该种方法的精确性、灵敏性及可靠性都有很大提升,同时也变得更加安全。除此之外,免疫亲和柱与高效液相谱法的结合提高了回收率和分离率,可以分离黄曲霉毒素与真菌毒素。
朱晓驰生物传感器法
生物传感器具有快速准确的特点,特异性和灵敏度也相对较高,且易于微型化。在诸多黄曲霉毒素研究者的钻研过程中,他们尝试了识别酶、抗体和DNA等多种元素的传感器,再结合导电聚合物、纳米技术和离子液体,拓宽了生物传感器的使用方法。但是该种方法的技术不够成熟,不能同时满足对稳定性和灵敏度的要求,还需要国内外研究者进一步努力,才可以用于黄曲霉毒素的检测中。
金标试纸法
金标试纸法是一种借助单克隆抗体设计的固相免疫法,黄曲霉毒素可以被一步式检测出来。金标试纸法的灵敏度比较高,操作迅速简捷,对黄曲霉毒素的测定只需5到10分钟,旋转机械故障诊断
检测精确度不小于85%。其次灵敏度也比较高,达到4 ng/mL,粮油中20 ng/ g的黄曲霉毒素可被检测出来。因为金标试纸法不需借助一些设备仪器,所以对检测场所没有特殊要求,农田、仓库、实验室均可作为检测场地。
吸附法
吸附法需要使用吸附剂,常见的吸附剂有活性炭和活性白土,因活性炭的成本较高,所以活性白土的使用更为广泛。因其存在网孔和内表面,所以吸附能力很强,可以有效吸附黄曲霉毒素,分离油脂,净化粮油。
食盐去毒法
这种方法常用于花生油中黄曲霉毒素的处理,方法极为简便。当油被加热至冒烟时加入适量食盐,出现爆锅,此时继续升温30秒,即可达到解毒目的。实验表明,相对精盐,粗盐的去毒能力更为强大。
黄曲霉毒素危害着人类的健康,人们也逐渐意识到这一点,因此,相关部门加强了对黄曲霉毒素的检测。从某种意义上,促进了检测技术的进步,在不断尝试中,检测技术取得了
一定成就,检测更为智能化,但是探索的脚步还在继续。

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标签:黄曲霉   毒素   检测   方法   抗体   粮油
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