动物医学进展，２０２０，４１（１２）：９０ ９５ＰｒｏｇｒｅｓｓｉｎＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲殘殘
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文献综述
收稿日期：
２０２０ ０２ ２７ 基金项目：国家现代肉羊产业技术体系资助项目（ｎｙｔｙ
ｔｘ ３９）；内蒙科技专项“巴美肉羊产业化技术研究与集成应用”资助项目。
浮油回收机 作者简介：刘 丹（
１９９６－），女，内蒙古乌兰察布市人，硕士，主要从事动物传染病病原学与流行病学研究。 通讯作者刘 丹，李玲霞，吴锦艳，尚佑军
（中国农业科学院兰州兽医研究所，甘肃兰州７３００４６
） 摘 要：核苷酸结合结构域和富含亮氨酸重复序列家族［ｔｈｅｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｂｉｎｄｉｎｇｄ
拉丝钢板
ｏｍａｉｎａｎｄｌｅｕｃｉｎｅ ｒｉｃｈｒｅｐｅａｔ（ＬＲＲ） ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ（ＮＬＲ）ｆａｍｉｌｙ］成员以及ｐｙｒｉｎ和ＨＩＮ结构域（ＰＹＨＩＮ）家族成员形成的多蛋白复合物称为“炎性小体”。炎性小体的生化功能是激活半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶 １（Ｃａｓｐａｓｅ １），导致白细胞介素１β（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ １β，ＩＬ １β）和白细胞介素１８（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ １８，ＩＬ １８）等炎症因子的成熟过程，并诱发细胞焦亡（ｐｙｒｏｐｔｏｓｉｓ）的细胞死亡形式。其中核苷酸结合寡聚结构域（ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｂｉｎｄｉｎｇｏｌｉｇｏｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｄｏｍａｉｎ，ＮＯＤ）样受体家族３（ＮＯＤ ｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ＮＬＲＰ３）炎性小体可以被多种体内外刺激激活，且已有报道ＮＬＲＰ３炎性小体在机体免疫和临床疾病方面的重要作用，但其激活机制和调节机制尚不明确。论文对近年来ＮＬＲＰ３炎性小体激活和调控机制以及炎性小体活化途径的研究进展进行综述。 关键词： 核苷酸结合寡聚结构域样受体家族３炎性小体；激活途径；调节机制中图分类号：Ｓ８５２．４２；Ｓ８５４．５７
文献标识码：Ａ
文章编号：１００７ ５０３８（２０２０）１２ ００９０ ０６
迄今为止发现的炎性小体均含有凋亡相关微粒蛋白（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｓｐ
ｅｃｋ ｌｉｋｅｐｒｏｔｅｉｎｃｏｎ ｔａｉｎｉｎｇＣＡＲＤ，ＡＳＣ）、半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶（ｃａｓｐａｓｅ）以及一种ＮＯＤ样受体（ＮＯＤ ｌｉｋｅｒｅ ｃｅｐ
ｔｏｒ，ＮＬＲ）家族蛋白（如ＮＬＲＰ３）或ＨＩＮ２００家族蛋白（如ＡＩＭ２）
脉动测速中心
［１
］。当机体受到外来微生物感染（ｐａｔｈｏｇ
ｅｎ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｐａｔｔｅｒｎｓ，ＰＡＭＰｓ）或来自本身的损伤信号（ｄａｎｇ
ｅｒ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｍｏｌｅｃｕ ｌａｒｐａｔｔｅｒｎｓ，ＤＡＭＰｓ
）
刺激时，便会启动先天性免疫系统通过其表面的模式识别受体或感应系统激活炎症反应，促进Ｉ型干扰素（ｔｙｐ
ｅＩｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｓ）（ｉｎｔｅｒ ｆｅｒｏｎ α和ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ β）或炎症因子ＩＬ １β、ＩＬ １８和ＩＬ ３３等释放，
并促进淋巴细胞募集到原发感染部位，从而控制病原体［２
］。目前发现可以组成炎性小体的模式识别受体有５种，即ＮＬＲＰ１、ＮＬＲＰ３、ＮＬ
ＲＣ４、ＰＹＲＩＮ和ＡＩＭ２［３］
，其中，ＮＬＲＰ３炎性小体是
迄今研究最清楚、发现识别ＰＡＭＰｓ和细胞内危险信
号种类最多且最复杂的一种炎性小体，
它对多种刺激敏感，如颗粒物质、病毒ＲＮＡ和尼日利亚菌素等。
ＮＬＲＰ３炎性小体介导的炎症反应与机体加强对体内外病原微生物的防御和维持机体自身稳态关系
密切，因此，研究ＮＬＲＰ３的调控机制具有重要意义。
１ ＮＬＲＰ３炎性小体的经典途径
ＮＬＲＰ３炎性小体经典途径分为ＮＬＲＰ３ｐｒｉｍｉｎｇ以及ＮＬＲＰ３活化两个阶段。ＮＬＲＰ３ｐｒｉｍｉｎｇ有两种定义：一种是在静息状态下，细胞中ＮＬＲＰ３表达量处于极低水平，需要激活的ＮＦ κＢ转录出ＮＬＲＰ３ｍＲ ＮＡ，再进行翻译及翻译后修饰等，此过程称为ＮＬ
ＲＰ３ｐｒｉｍｉｎｇ［２
］，
也是ＮＬＲＰ３炎性小体活化的第一个信号；第二种是巨噬细胞在ＮＬＲＰ３激活剂的刺激下，ＮＬＲＰ３炎性小体没有活化，
而用微生物配体预处理则增强了ＮＬＲＰ３炎性小体的活化，
这种预处理被定义为ＮＬＲＰ３ｐｒｉｍｉｎｇ［４］。Ｎ
ＬＲＰ３的表达是通过激活ＮＦ κ
Ｂ，由ＴＬＲ配体等微生物组分或肿瘤坏死因子或ＩＬ β等内源性分子引发的，除此之外，ＦＡＳ相关死亡结构域蛋白（ＦＡＤＤ）和ｃａｓｐａｓｅ ８也能调节ｐｒｉｍｉｎｇ过
磁卡门禁机程中ＮＬＲＰ３表达的诱导。除了这种转录作用外，有证据表明ＮＬＲＰ３ｐｒｉｍｉｎｇ也在转录后水平上调节ＮＬＲＰ３活化过程。接头分子Ｍｙ
Ｄ８８、下游激酶ＩＬ １受体相关激酶１（ＩＲＡＫ１）以及ＩＲＡＫ４通过ｐｒｉｍｉｎｇ参与ＮＬＲＰ３激活的转录调控，而接头蛋白ＴＲＩＦ和
ＩＲＡＫ１在ｐｒｉｍｉｎｇ的转录后调控中起作用
［４ ６
］。此外，ＮＬＲＰ３在ｐｒｉｍｉｎｇ阶段去泛素化：Ｌｙ
ｓ ６３特异性去泛
素化酶ＢＲＣＣ３６（ＢＲＣＣ３）是一种含有ＪＡＭＭ结构域的Ｚｎ２＋金属蛋白酶，它可以促进ｐｒｉｍｉｎｇ过程中ＮＬ ＲＰ３去泛素化，并调节ＮＬＲＰ３活化［７］。因此，ｐｒｉｍｉｎｇ阶段对ＮＬＲＰ３活化的作用较为复杂。
ＮＬＲＰ３炎性小体激活的双信号模型（经典途径）：首先，微生物分子或内源性细胞因子激活ＴＬＲ４（Ｔｏｌｌ ｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒ４）信号通路，上调转录因子ＮＦ κＢ介导的ｐｒｏ ＩＬ １β、ｐｒｏ ＩＬ １８和ＮＬＲＰ３的表达量［８］，ｃａｓｐａｓｅ ８和ＦＡＳ相关死亡结构域蛋白（ＦＡＤＤ）参与ＮＦ κＢ激活途径的调控，而ＢＲＣＣ３和ＩＲＡＫ１不通过转录因子ＮＦ κＢ参与ＮＬＲＰ３炎性小体激活［９］。第二个信号是ＡＴＰ、孔毒素等刺激细胞内Ｋ＋流出，膜内外Ｋ＋浓度的变化是活化ＮＬ ＲＰ３所必需的。此外，线粒体膜内外的Ｃａ２＋变化超出某一程度引起的线粒体障碍的衍生信号，如活性氧（ｍｔＲＯＳ）、氧化线粒体ＤＮＡ（ｏｘｉｄｉｚｅｄｍｔＤＮＡ）或磷脂外化（ｅｘｔｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｃａｒｄｉｏ ｌｉｐｉｎ）也成为介导ＮＬＲＰ３激活的因素［９］。活化的ＮＬＲＰ３与ＡＳＣ寡聚形成ＡＳＣ斑点（ＡＳＣｓｐｅｃｋ）。ＡＳＣ斑点招募ｐｒｏ ｃａｓｐａｓｅ １，ｐｒｏ ｃａｓｐａｓｅ １的寡聚体自身切割形成成熟的ｃａｓｐａｓｅ １，在ｃａｓｐａｓｅ １的介导下，ｐｒｏ ＩＬ １β和ｐｒｏ ＩＬ １８分裂形成有活性的ＩＬ １β和ＩＬ １８并释放到细胞外。此外，ｃａｓｐａｓｅ １活化会引起一种独特的程序性细胞死亡，以细胞膜溶胀和炎症因子释放为主要特征，称为细胞焦亡（ｐｙｒｏｐ ｔｏｓｉｓ）［１０］，该作用的意义是让机体免疫细胞再次识别病原微生物产生免疫应答，这也是ＮＬＲＰ３炎性小体活化非经典途径。经典途径中，ＮＬＲＰ３炎性小体活化因素主要有Ｋ＋流出、Ｃａ２＋信号、活性氧（ＲＯＳ）、线粒体功能障碍和溶酶体破裂。 １．１ 离子信号和ＮＬＲＰ３炎性小体的激活
Ｋ＋流出：Ｋ＋流出是激活ＮＬＲＰ３炎性小体的必需条件。Ｋ＋外流是ＮＬＲＰ３识别刺激后巨噬细胞产生的应答反应，膜外过高的Ｋ＋浓度特异性地活化ＮＬＲＰ３炎性小体，研究发现，Ｋ＋外流是ＮＬＲＰ３激活的上游激动剂，且降低胞内Ｋ＋浓度足以激活ＮＬＲＰ３炎性小体［１１］，但胞内Ｋ＋浓度降低和ＮＬ ＲＰ３炎性小体活化之间的关联机制仍不清楚，例如，ＡＴＰ可以引起ｐａｎｎｅｘｉｎ １蛋白通道开放，使胞内Ｋ＋失调，促进ＮＬＲＰ３炎性小体的活化和组装［１２ １３］。此外，巨噬细胞内存在ＮＬＲＰ３活化突变（ＮＬＲＰ３Ｒ２５８Ｗ）的情况下，没有Ｋ＋外排，这表明细胞内Ｋ＋浓度的降低可能会导致ＮＬＲＰ３发生构象变化，这种构象变化由ＮＬＲＰ３活化突变引起［１４］。不能通过抑制细胞凋亡、焦亡或坏死阻止Ｋ＋外流。
Ｃａ２＋信号：研究证明，ＡＴＰ刺激小鼠巨噬细胞后，Ｃａ２＋螯合剂ＢＡＰＴＡ ＡＭ抑制ＩＬ １β的分泌，间接说明Ｃａ２＋信号与ＮＬＲＰ３炎性小体的激活有关。随后的研究发现，ＮＬＲＰ３刺激物（ＡＴＰ、颗粒物和尼日利亚菌素）在刺激ＮＬＲＰ３炎性小体活化的过程中引起Ｃａ２＋动员，阻断Ｃａ２＋信号同时抑制了ＮＬ ＲＰ３炎性小体的活化，而不抑制其他炎性小体激活，说明Ｃａ２＋信号对ＮＬＲＰ３炎性小体的激活作用是特异的［１５］。内质网是细胞内主要的Ｃａ２＋库，因此Ｃａ２＋在ＮＬＲＰ３炎性小体活化阶段起到了关键作用，一个重要试验依据是，去掉内质网上Ｃａ２＋释放通道肌醇１，４，５ 三磷酸受体（ＩＰ
３Ｒ
）的ｓｈＲＮＡ或用药物抑制其活性会减弱Ｃａ２＋动员和ＮＬＲＰ３活化［１５］。细胞膜上进入ＳＯＣＥ通道的储存型Ｃａ２＋常与内质网上释放的Ｃａ２＋相耦合，活化ＮＬＲＰ３［１１］。此外，研究表明，细胞外Ｃａ２＋沉淀浓缩为磷酸钙晶体作为一种独立的ＮＬＲＰ３活化剂，通过破坏溶酶体膜激活ＮＬＲＰ３［１６］。值得注意的是，在细胞外ＲＰ ＭＩ培养基中添加Ｃａ２＋会产生Ｋ＋流出的现象［１１］，但迄今为止这种现象还没有得到解释。关于Ｃａ２＋是如何活化ＮＬＲＰ３这个问题，目前猜测它与ＮＬ ＲＰ３炎性小体的组装有关，但也有发现证明Ｃａ２＋和ＮＬＲＰ３的活化途径无关，如Ｙｕａｎ等比较了细胞质Ｋ＋浓度降低和细胞溶质Ｃａ２＋浓度升高对ＮＬＲＰ３的影响，发现Ｃａ２＋在ＮＬＲＰ３活化过程中基本上不是必要的［９］，因此目前Ｃａ２＋对ＮＬＲＰ３炎性小体活化有无影响仍存在较大争议。
１．２ 线粒体功能障碍和ＮＬＲＰ３炎性小体的激活研究发现，线粒体膜电位的变化与线粒体外膜蛋白２（ｍｉｔｏｆｕｓｉｎ２，Ｍｆｎ２）有关，在Ｍｆｎ２水平降低的细胞中，线粒体膜电位下降程度减弱，ＮＬＲＰ３炎性小体活化减少，ＩＬ １β的释放减弱；心磷脂，一种通常位于线粒体内膜的线粒体特异性磷脂，可以转移到外膜结合ＮＬＲＰ３的ＬＲＲ结构域，激活ＮＬＲＰ３，该反应对ＮＬＲＰ３炎性小体的激活很重要，ＲＯＳ依赖性和非依赖性激活剂都能诱导该反应发生［１７］；释放到胞质中的氧化线粒体ＤＮＡ与ＮＬＲＰ３相互作用并激活ＮＬＲＰ３，这种作用通常发生在ＮＬＲＰ３活化下游［１０］；线粒体相关受体蛋白ＭＡＶｓ是有效激活ＮＬＲＰ３炎性小体所
必需的非晶体激活剂，参与机体免疫应答，一项研究报道，ＮＬＲＰ３只有在识别可溶性刺激物（如ＡＴＰ和尼日利亚菌素）后才能与ＭＡＶｓ相互作用，活化ＮＬＲＰ３。有的论文中报道ＮＬＲＰ３在ＲＮＡ病毒刺激下才能与ＭＡＶｓ作用，活化ＮＬＲＰ３，因此，这个问题还存在一定争议，需进一
１
９
刘 丹等：ＮＬＲＰ３炎性小体及其相关机制研究进展
步研究确定［１８］。
１．３ 活性氧（ＲＯＳ）活化和ＮＬＲＰ３炎性小体的激活目前发现的所有ＮＬＲＰ３炎性小体激活剂都可以通过刺激线粒体促进线粒体呼吸作用和ＮＡＰＤＨ氧化酶产生ＲＯＳ［１３］。活性氧和线粒体在ＮＬＲＰ３炎性小体激活中的作用是一个长期争论的话题。研究发现，内质网（ＥＲ）应激可以增强人巨噬细胞中ＩＬ １β的分泌，ＩＬ １β分泌水平与ＲＯＳ产生量呈正比，激活ＮＬＲＰ３炎性小体的过程需要ＲＯＳ和Ｋ＋外排且与硫氧还原蛋白（ＴＲＸ）相互作用蛋白（ＴＸＮＩＰ）有关［１３］。ＮＬＲＰ３炎性小体刺激物刺激ＮＡＰＤＨ氧化酶产生ＲＯＳ，在ＲＯＳ作用下ＴＲＸ
从ＴＸＮＩＰ中分离，ＴＸＮＩＰ与ＮＬＲＰ３相互作用，激活ＮＬＲＰ３炎性小体，上述被认为是２型糖尿病发病机制中的重要因素［１２］，抑制ＴＸＮＩＰ可减弱葡萄糖诱导的胰腺β细胞中ＮＬＲＰ３的激活。
正常情况下ＮＬＲＰ３存在于胞质和内质网中，但在某些刺激下部分ＮＬＲＰ３转移到线粒体内［１６］：在ＬＰＳ或ＡＴＰ的刺激下，线粒体内ＮＬＲＰ３增加，线粒体内的Ｃａ２＋增多，过量的Ｃａ２＋会导致线粒体ＲＯＳ产生增加，超出机体清除能力、线粒体功能障碍、ＮＡＤ＋离子减少，导致线粒体膜电位下降，从而诱导α 微管蛋白（α ｔｕｂｕｌｉｎ）介导的ＡＳＣ ＮＬＲＰ３作用，ＮＬＲＰ３炎性小体开始组装活化；呼吸链抑制剂（如鱼藤酮）可以诱导线粒体功能障碍，线粒体膜电位下降，ＲＯＳ产生增多，活化ＮＬＲＰ３炎性小体［１６］。１．４ 溶酶体膜破坏和ＮＬＲＰ３炎性小体的激活颗粒物通过内吞作用破坏溶酶体膜，导致木瓜蛋白酶家族的溶酶体半胱氨酸蛋白酶———组织蛋白酶Ｂ释放到胞浆中，激活ＮＬＲＰ３炎性小体［１９］。几项研究表明，用组织蛋白酶Ｂ的化学抑制剂ＣＡ ０７４ Ｍｅ处理巨噬细胞可以抑制ＮＬＲＰ３的活化，进一步研究发现，用颗粒物刺激缺乏组织蛋白酶Ｂ的巨噬细胞后，ＮＬＲＰ３的活性没有影响［９］，说明组织蛋白酶Ｂ抑制剂抑制ＮＬＲＰ３炎性小体的激活可能是由于组织蛋白酶家族成员之间的非靶点效应或冗余所致，与上述结论相呼应的结论是，能被ＣＡ ０７４ Ｍｅ抑制剂抑制的组织蛋白酶对ＮＬＲＰ３的ｐｒｉｍｉｎｇ和活化过程均有促进作用［２０］。此外，组织蛋白酶Ｂ的ｓｉＲＮＡ和ｓｈＲＮＡ可
以促进ｃａｓｐａｓｅ １成熟［２１，２２］，某些情况下组织蛋白酶Ｌ能够补偿缺失的组织蛋白酶Ｂ，其作用方式与溶酶体膜破裂后释放的组织蛋白酶Ｂ类似［１２］；组织蛋白酶Ｃ可以补充ｃａｓｐａｓｅ １的活性，对组织蛋白酶Ｃ的功能还需进一步确定。值得一提的是，在ＮＬＲＰ３活化阶段，Ｋ＋流出也与颗
粒物质引起的吞噬作用有关，然而，颗粒物质诱导的溶酶体破裂与Ｋ＋流出之间的关联机制仍有待确定。此外，溶酶体内具有高浓度的Ｃａ２＋，失稳可能导致溶酶体Ｃａ２＋释放，从而触发Ｃａ２＋释放和随后的ＮＬＲＰ３激活［９］。
２ 非经典炎性小体途径
非经典的ＮＬＲＰ３炎性小体活化不依赖于ＴＬＲ４信号通路活化，它是由ｃａｓｐａｓｅ １１介导的细胞炎性死亡，即细胞焦亡（ｐｙｒｏｐｔｏｓｉｓ），是细胞的一种程序性死亡，细胞死亡后的内容物释放后，活化ＮＬＲＰ３炎性小体引起机体发生炎症反应。革兰氏阴性菌的脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）通过感染进入胞质，结合ｃａｐａｓｅ １１的ＣＡＲＤ区域并激活ｃａｓｐａｓｅ １１（结合人类的ｃａｓｐａｓｅ４和ｃａｓｐａｓｅ ５的ＣＡＲＤ区域），活化的ｃａｓｐａｓｅ １１通过切割ｐａｎｎｅｘｉｎ １的胞质区打开ｐａｎｎｅｘｉｎ １通道（一种细胞膜上的ＡＴＰ通道），向膜外释放ＡＴＰ，膜内的ＡＴＰ向胞内的Ｋ＋提供能量激活，
ｃａｓｐａｓｅ １促进ＮＬＲＰ３炎性小体的组装与活化，并释放白细胞介素 １β（ＩＬ １β）；膜外释放的ＡＴＰ激活膜上Ｐ２Ｘ７受体，并以自分泌或旁分泌的方式打开Ｐ２Ｘ７孔，破坏细胞膜诱导细胞焦亡［２３］。值得一提的是，胞质内活化的ｃａｓｐａｓｅ １１和ｃａｓｐａｓｅ １将ｇａｓｄｅｒｍｉｎＤ（ＧＳＤＭＤ）裂解成两个片段（Ｎ片段和Ｃ片段），ＧＳＤＭＤ Ｎ片段可以在细胞脂质膜上形成孔隙，即通过损伤细胞膜引起细胞焦亡［２４ ２５］。
３ ＮＬＲＰ３炎性小体其他途径
人单核细胞ＴＬＲ４识别ＬＰＳ后活化ＮＬＲＰ３炎性小体并释放ＩＬ １β和ＩＬ １８的过程包含两条不同的通路，一条是微生物通过自分泌机制激活ＮＬＲＰ３炎性小体来实现，ＬＰＳ诱导人单核细胞释放内源性ＡＴＰ，激活Ｐ２Ｘ７受体，ＮＬＲＰ３炎性小体激活和ＩＬ １β成熟［２６］。另一条又分为两种途径：一种是ＴＬＲ４ ＭｙＤ８８途径，ＴＬＲ４识别ＬＰＳ后，该信号在接头分子ＭｙＤ８８处理下，基因转录活化ＮＬＲＰ３，组装ＮＬＲＰ３炎性小体；另一种是ＴＬＲ４ ＴＲＩＦ途径，接头蛋白ＴＲＩＦ接收这一信号后，经过ＲＩＰＫ１和ＦＡＳ相关死亡结构域蛋白（ＦＡＤＤ）及ｃａｓｐａｓｅ ８分子组装ＮＬＲＰ３炎性小体，对该信号进行应答。这一途径与由ＡＴＰ、造孔毒素或微粒物质活化ＮＬＲＰ３炎性小体途径的显著不同是不需要Ｋ＋参与，这一过程不诱导产生焦亡［２６］。
４ ＮＬＲＰ３炎性小体的正向调节
目前报道的调节ＮＬＲＰ３炎性小体活化的分子主要有双链ＲＮＡ依赖性蛋白激酶（ＰＫＲ）、鸟苷酸
２
９动物医学进展 ２０２０年 第４１卷 第１２期（总第３３０期）
结合蛋白５（ＧＢＰ５）和ＮＩＭＡ相关激酶７（Ｎｅｋ７）。
据报道，ＰＫＲ可以调节所有已知炎性小体的激活，包括ＮＬＲＰ１、ＮＬＲＰ３、ＮＬＲＣ４和ＡＩＭ２［２７］，但具体调节机制还没证实。ＧＢＰ５对由ＡＴＰ、尼日利亚菌素和细菌引起的ＮＬＲＰ３炎性小体活化有促进作用，但对颗粒物激活的ＮＬＲＰ３炎性小体没有作用，但另一项研究发现，在ＧＢＰ５分子缺乏的小鼠巨噬细胞中，ＮＬＲＰ３炎性小体也能正常激活［２８］，所以该分子在这一过程中的作用还存在争议。
Ｎｅｋ７是一种丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，已知可促进有丝分裂纺锤体的形成和细胞因子的产生，是有丝分裂进行的必要条件［２９］。所有ＮＬＲＰ３刺激所诱导的ＮＬＲＰ３炎性小体激活都需要Ｎｅｋ７参与，包括ＡＴＰ和尼日利亚菌素，而ＮＬＲＣ４和ＡＩＭ２炎性小体活化则与Ｎｅｋ７无关。有研究证明，Ｎｅｋ７可以控制ＮＬＲＰ３的寡聚、ＡＳＣ颗粒的形成和钾流出下游ｃａｓｐａ
ｓｅ １的激活，且突变的巨噬细胞（ＮＬＲＰ３Ｒ２５８Ｗ）中ＮＬＲＰ３的激活也需要Ｎｅｋ７参与。研究发现，Ｎｅｋ７与ＮＬＲＰ３的ＬＲＲ结构域相互作用控制ＮＬＲＰ３寡聚、ＡＳＣ斑点形成和Ｋ＋外流以及下游的ｃａｓｐａｓｅ １活化，且所有ＮＬＲＰ３刺激物诱导的ＮＬＲＰ３炎性小体活化都需要Ｎｅｋ７，而Ｎｅｋ７缺陷则导致ＩＬ １β分泌减少，免疫细胞的募集减弱［２９］。Ｎｅｋ７是ＮＬＲＰ３炎性小体激活的正向调节因子，但具体激活机制还不明确，有待进一步研究。
表１ ＮＬＲＰ３炎性小体激活的其他负反馈调节因素及相关机制
Ｔａｂｌｅ１ ＯｔｈｅｒｎｅｇａｔｉｖｅｆｅｅｄｂａｃｋｒｅｇｕｌａｔｏｒｓｏｆＮＬＲＰ３ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｄｒｅｌａｔｅｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ
ＮＬＲＰ３炎性小体活化的负向调节因素
ＮｅｇａｔｉｖｅｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｆａｃｔｏｒｓｏｆＮＬＲＰ３ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎ
调节机制
Ｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ
ＩＦＮ γ诱导一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）产生一氧化氮（ＮＯ）
Ｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ（ＮＯ）ｂｙｉＮＯＳｉｎｄｕｃｅｄｂｙＩＦＮ γＮＯ抑制ＮＬＲＰ３和线粒体活性氧的生成、线粒体膜电位的变化［１６，１８］
ＮＯｃａｎｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＮＬＲＰ３，ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌＲＯＳａｎｄｔｈｅｃｈａｎｇｅｏｆｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｍｅｍｂｒａｎｅｐｏｔｅｎｔｉａｌ［１６，１８］
骨髓样细胞中ｍｉＲＮＡ ２３３Ｍｉｒｎａ ２３３ｉｎｍｙｅｌｏｉｄｃｅｌｌｓ
骨髓样细胞中ｍｉＲＮＡ ２３３ｔ特异性靶向于ＮＬＲＰ３ｍＲＮＡ的３′ ＵＴＲ（ｕｎｔｒａｎｓｌａｔｅｄｒｅｇｉｏｎ）区，抑制ＮＬＲＰ３ｍＲＮＡ翻译表达［２］
Ｉｎｍｙｅｌｏｉｄｃｅｌｌｓ，ｍｉＲＮＡ ２３３ｔｉｓｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙｔａｒｇｅｔｅｄａｔｔｈｅ３′ ＵＴＲ（ｕｎｔｒａｎｓｌａｔｅｄｒｅｇｉｏｎ）ｒｅｇｉｏｎｏｆＮＬＲＰ３ｍＲＮＡａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｓｔｈｅｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＮＬＲＰ３ｍＲＮＡ［２］
ＭＩＲ１７（ｍｉＲＮＡ１７）ｍｉＲＮＡ１７负向调节ＴＸＮＩＰｍＲＮＡ的稳定性［１０］
ｍｉＲＮＡ１７ｎｅｇａｔｉｖｅｌｙｒｅｇｕｌａｔｅｓｔｈｅｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆＴＸＮＩ
ＰｍＲＮＡ［１０］
成熟Ｔ细胞
ＭａｔｕｒｅＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅＣＤ４０ ＣＤ４０Ｌ与巨噬细胞的相互作用产生抑制作用，具体机制还不清楚［１７］
ＴｈｅｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎＣＤ４０ ＣＤ４０Ｌａｎｄｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｐｒｏｄｕｃｅｓｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ，ａｎｄｔｈｅｓｐｅｃｉｆｉｃｍｅｃｈａｎｉｓｍｉｓｕｎｃｌｅａｒ［１７］
水果和蔬菜中含有的水溶性非淀粉多糖（ＷＳＰ）
Ｗａｔｅｒ ｓｏｌｕｂｌｅｎｏｎ ｓｔａｒｃｈｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｉｎｆｒｕｉｔｓａｎｄｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ
ＷＳＰ降低胆固醇晶体（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｃｒｙｓｔａｌｓ，ＣＣ）介导的巨噬细胞中ＩＬ １β、趋化因子的释放和活性Ｃａｓｐａｓｅ １水平［３０］
ＷＳＰｒｅｄｕｃｅｄｔｈｅｒｅｌｅａｓｅｏｆＩＬ １β，ｃｈｅｍｏｋｉｎｅａｎｄｃａｓｐａ
ｓｅ １ｉｎｍａｃ ｒｏｐｈａｇｅｓｍｅｄｉａｔｅｄｂｙｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｃｒｙｓｔａｌｓ（ＣＣ）［３０］
饥饿时，机体氧化脂肪酸产生的β （ＢＨＢ）
β ｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｙｒｉｃａｃｉｄ（ＢＨＢ）ｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｏｘｉｄｉｚｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓｄｕｒ ｉｎｇｓｔａｒｖａｔｉｏｎＢＨＢ阻断中性粒细胞和巨噬细胞中ＮＬＲＰ３激活所必需的启动和激活信号。ＢＨＢ能够在ＮＬＲＰ３激活水平上控制炎症引起的痛风发作［３３］
ＢＨＢｂｌｏｃｋｓｔｈｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆＮＬＲＰ３ｉｎｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓａｎｄｍａｃｒｏｐｈａ ｇｅｓ．ＢＨＢｃａｎｃｏｎｔｒｏｌｇｏｕｔａｔｔａｃｋｉｎｄｕｃｅｄｂｙｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎａｔｔｈｅｌｅｖ ｅｌｏｆＮＬＲＰ３ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ［３３］
中药补骨脂中的主要成分补骨脂异黄酮
Ｐｓｏｒａｌｅｎｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ，ｍａｉｎｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆ犘狊狅狉犪犾犲犪犮狅狉狔犾犻犳狅犾犻犪外墙陶土板
补骨脂异黄酮抑制Ｃａｓｐａｓｅ １ｐ２０的产生，抑制Ｃａｓｐａｓｅ １ｐ２０对ＩＬ １β的成熟
作用［３４］该药可用于临床上的风湿性关节炎
ＰｓｏｒａｌｅｎｉｓｏｆｌａｖｏｎｅｃａｎｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＣａｓｐａｓｅ １Ｐ２０ａｎｄｔｈｅｍａｔｕｒａｔｉｏｎｏｆＩＬ １βｂｙｃａｓｐａｓｅ １Ｐ２０［３４］Ｉｔｃａｎｂｅｕｓｅｄｔｏｔｒｅａｔｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ
５ ＮＬＲＰ３炎性小体活化的负向调节
ＮＬＲＰ３炎性小体负向调节的机理主要是通过阻断炎性小体的组装抑制ＮＬＲＰ３炎性小体复合物的形成：有些分子含有可以与ＮＬＲＰ３炎性小体ＣＡＲＤ和ＰＹＤ结构域结合的区域，因此可以在ＮＬＲＰ３炎性小体组装过程中与其他结构域竞争结合这两个结构域［２］。如ＰＯＰ１（ＰＹＤ ｏｎｌｙ ｐｒｏ ｔｅｉｎｓ）和热蛋白Ｐｒｙｉｎ通过与ＡＳＣ结合抑制ＮＬＲＰ３炎性小体复合物的组装［３０，３１］，ＰＯＰ２通过阻断
采访麦克风３
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刘 丹等：ＮＬＲＰ３炎性小体及其相关机制研究进展
ＴＮＦ α介导的ＮＦ κＢ通道激活，抑制ＮＬＲＰ３炎性小体激活。ＣＯＰｓ（ＣＡＲＤ ｏｎｌｙｐｒｏｔｅｉｎｓ）家族的ＣＡＲＤ区域与ｃａｓｐａｓｅ １ＣＡＲＤ区域相似度很高，包括ＣＯＰ１、ＩＮＣＡ、Ｉｃｅｂｅｒｇ和ｃａｓｐａｓｅ １２等，它们与ｃａｓｐａｓｅ １结合阻止ｃａｓｐａｓｅ １寡聚来抑制ＮＬ ＲＰ３组装激活［２］。ＰＹＮＯＤ蛋白含有ＰＹＤ区和ＮＡＣＨＴ区，缺少ＬＲＲ区，虽然ＰＹＮＯＤ的ＮＡＣＨＴ区在自身寡聚化后与ＡＳＣ结合，但不募集活化ｐｒｏ ｃａｓｐａｓｅ １，从而抑制ＩＬ １β的产生［８］。
自噬是真核生物体内物质循环利用的过程：损坏的蛋白或细胞器被自噬小泡包裹后，送入溶酶体（动物）或液泡（酵母和植物）中进行降解并得以循环利用。自噬通过各种机制抑制ＮＬＲＰ３炎性小体激活，包括通过去除内源性ＮＬＲＰ３炎性小体激动剂的来源、抑制活性氧的产生、去除受损线粒体。相反，缺乏自噬体组件的细胞，如ＡＴＧ１６Ｌ、ＩＣ３Ｂ和Ｂｅｃｌｉｎ １，促进ＮＬＲＰ３炎性小体激活［３２］。此外，ＩＬ １β促进自噬，参与炎性小体激活的负反馈机制［３０］。研究发现组织蛋白酶Ｂ对自噬有负向调节作用，ｃａｓｐａｓｅ １可以抑制细菌刺激后炎性小体激活引起的自噬。关于ＮＬＲＰ３炎性小体活化的负向调节因素还有很多，详见表１。
６ 展望
感染期间炎性小体的激活对机体有保护作用，但某些内源性刺激引起的非调节性ＮＬＲＰ３炎性小体
的激活很大程度上对机体有害，如痛风、动脉粥样硬化和２型糖尿病等疾病都是由机体内源性刺激引起非正常炎症反应而引起的自身免疫病，控制这些疾病就应该从控制非正常炎性小体的产生着手，故而研究ＮＬＲＰ３炎性小体的致病机理对医学具有重要意义。
综上所述，本文主要总结了近年来对ＮＬＲＰ３炎性小体的激活、调节及其与疾病相关方面的研究进展。正是由于炎性小体一系列复杂的机制引起多种疾病使得及研发新药趋于疑难化。因此，需要继续致力于炎性反应的研究，进一步为炎症性疾病的开启新的思路。
参考文献：
［１］ Ｂ．ＷＡＮＧ，Ｑ．ＹＩＮ．ＡＩＭ２ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｄｒｅｇｕｌａ ｔｉｏｎ：Ａｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ［Ｊ］．ＪＳｔｒｕｃｔＢｉｏｌ，２０１７，２００：２７９ ２８２．
［２］ 刘 雯，郭文洁，徐 强，ｅｔａｌ．ＮＬＲＰ３炎性小体调控机制研究进展［Ｊ］．药学学报，２０１６，５１（１０）：１５０５ １５１２．
［３］ ＱＩＮＧＬＩＮＧＧ，ＹＩＮＧＷ，ＹＵＡＮＹＵＡＮＨ，ｅｔａｌ．Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓｅ ｃｒｅｔｉｏｎａｎｄｐｙｒｏｐｔｏｓｉｓｏｆｔｈｙｒｏｉｄｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｃｅｌｌｓｍｅｄｉａｔｅｄｂｙ
ｅｎｈａｎｃｅｄＮＬＲＰ３，ＮＬＲＰ１，ＮＬＲＣ４，ａｎｄＡＩＭ２ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅｓ
ａｒｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ［Ｊ］．ＦｒｏｎｔＩｍｍｕ ｎｏｌ，２０１８，９：１１９７．
［４］ ＹＡＮＧＳＭ，ＫＡＳＭ，ＷＵＨＬ，ｅｔａｌ．Ｔｈｒｏｍｂｏｍｏｄｕｌｉｎｄｏｍａｉｎ１ａｍｅｌｉｏｒａｔｅｓｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙｉｎｍｉｃｅｖｉａａｎｔｉ ＮＦ κＢ／ＮＬ ＲＰ３ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅ ｍｅｄｉａｔｅｄｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｏｆＮＲＦ２ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ，２０１４，５７（０２）：４２４ ４３４．
［５］ ＦＥＲＮＡＮＤＥＳ ＡＬＮＥＭＲＩＴ，ＫＡＮＧＳ，ＡＮＤＥＲＳＯＮＣ，ｅｔａｌ．Ｃｕｔｔｉｎｇｅｄｇｅ：ＴＬＲｓｉｇｎａｌｉｎｇｌｉｃｅｎｓｅｓＩＲＡＫ１ｆｏｒｒａｐｉｄａｃｔｉｖａ ｔｉｏｎｏｆｔｈｅＮＬＲＰ３ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅ［Ｊ］．ＪＩｍｍｕｎｏｌ，２０１３，１９１（０８）：３９９５ ３９９９．
［６］ ＬＩＮＫＭ，ＨＵＷ，ＴＲＯＵＴＭＡＮＴＤ，ｅｔａｌ．ＩＲＡＫ １ｂｙｐａｓｓｅｓｐ
ｒｉｍｉｎｇａｎｄｄｉｒｅｃｔｌｙｌｉｎｋｓＴＬＲｓｔｏｒａｐｉｄＮＬＲＰ３ｉｎｆｌａｍｍａ ｓｏｍｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＰｒｏｃＮａｔＡｃａｄＳｃｉ，２０１４，１１１（０２）：７７５ ７８０．［７］ ＰＹ，Ｂ?Ｎ?ＤＩＣＴＥ？Ｆ，ＫＩＭＭＳ，ｅｔａｌ．ＤｅｕｂｉｑｕｉｔｉｎａｔｉｏｎｏｆＮＬ ＲＰ３ｂｙＢＲＣＣ３ｃｒｉｔｉｃａｌｌｙｒｅｇｕｌａｔｅｓｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．ＭｏｌＣｅｌｌ，２０１３，４９（０２）：３３１ ３３８．
［８］ ＥＬＬＩＯＴＴＥＩ，ＳｕｔｔｅｒｗａｌａＦＳ．ＩｎｉｔｉａｔｉｏｎａｎｄｐｅｒｐｅｔｕａｔｉｏｎｏｆＮＬＲＰ３ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｄａｓｓｅｍｂｌｙ［Ｊ］．ＩｍｍｕｎｏｌＲｅｖ，２０１５，２６５：３５ ５２．
［９］ ＨＥＹ，ＨＡＲＡＨ，Ｎ?？ＥＺ，ｅｔａｌ．ＭｅｃｈａｎｉｓｍａｎｄｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＮＬＲＰ３ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＴｒｅｎｄｓＢｉｏｃｈｅｍＳｃｉ，２０１６：Ｓ０９６８０００４１６３０１４８７．
［１０］ ＺＨＡＮＧＸ，ＦＡＮＣ，ＺＨＡＮＧＨ，ｅｔａｌ．ＭＬＫＬａｎｄＦＡＤＤａｒｅｃｒｉｔｉｃａｌｆｏｒｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ
ｄｉｓｅａｓｅａｎｄａｃｔｉｖａｔｉｎｇｔｈｅＮＬＲＰ３ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ
Ｒｅｐｏｒｔｓ，２０１６，１６（１２）：３２４７ ３２５９．
［１１］ ＫＡＴＳＮＥＬＳＯＮＭＡ，ＲＵＣＫＥＲＬＧ，ＲＵＳＳＯＨＭ，ｅｔａｌ．Ｋ＋ｅｆｆｌｕｘａｇｏｎｉｓｔｓｉｎｄｕｃｅＮＬＲＰ３ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎｉｎｄｅ
ｐｅｎｄｅｎｔｌｙｏｆＣａ２＋ｓｉｇｎａｌｉｎｇ［Ｊ］．ＪＩｍｍｕｎｏｌ，２０１５，１９４（０８）：
３９３７ ３９５２．
［１２］ ＪＯＥＫ，ＫＩＭＪＫ，ＳＨＩＮＤＭ，ｅｔａｌ．ＭｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｒｅｇｕｌａｔｉｎｇＮＬＲＰ３ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＣｅｌｌＭｏｌ
Ｉｍｍｕｎｏｌ，２０１６，１３：１４８ １５９．
［１３］ Ｍ．ＢＲＵＣＨＡＲＤ，Ｇ．ＭＩＧＮＯＴ，Ｖ．ＤＥＲＡＮＧＥＲＥ，ｅｔａｌ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ｔｒｉｇｇｅｒｅｄｃａｔｈｅｐｓｉｎＢｒｅｌｅａｓｅｉｎｍｙｅｌｏｉｄ
ｄｅｒｉｖｅｄｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｃｅｌｌｓａｃｔｉｖａｔｅｓｔｈｅＮｌｒｐ３ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅ
ａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｓｔｕｍｏｒｇｒｏｗｔｈ［Ｊ］．ＮａｔＭｅｄｉ，２０１３，１９：５７ ６４．［１４］ ＬＯＯＣＫＪ，ＬＡＭＰＲＥＣＨＴＰ，ＴＩＭＭＡＮＮＣ，ｅｔａｌ．Ｇｅｎｅｔｉｃｐｒｅｄｉｓ ｐｏｓｉｔｉｏｎ（ＮＬＲＰ３Ｖ１９８Ｍｍｕｔａｔｉｏｎ）ｆｏｒＩＬ １ ｍｅｄｉａｔｅｄｉｎｆｌａｍ
ｍａｔｉｏｎｉｎａｐａｔｉｅｎｔｗｉｔｈＳｃｈｎｉｔｚｌｅｒｓｙｎｄｒｏｍｅ［Ｊ］．ＪＡｌｌｅｒｇＣｌｉｎ
Ｉｍｍｕｎｏｌ，２０１０，１２５（０２）：５００ ５０２．
［１５］ ＬＥＥＧＳ，ＳＵＢＲＡＭＡＮＩＡＮＮ，ＫＩＭＡＩ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｃａｌｃｉｕｍ ｓｅｎｓｉｎｇｒｅｃｅｐｔｏｒｒｅｇｕｌａｔｅｓｔｈｅＮＬＲＰ３ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅｔｈｒｏｕｇｈ
Ｃａ～（２＋）ａｎｄｃＡＭＰ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２０１２，４９２（７４２７）：１２３ １２７．［１６］ ＫＩＭＹＫ，ＫＯＰＰＵＬＡＳ，ＳＨＩＭＤＷ，ｅｔａｌ．ＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｒｃｔｉｕｍｉａｐｐａｅｘｔｒａｃｔｏｎＮＬＲＰ３ｉｎｆｌａｍｍａ
ｓｏｍｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｂａｓｅｄＣｏｍｐｌｅｍｅｎｔＡｌｔｅｒｎａｔ
Ｍｅｄ，２０１８，２０１８（０４）：１ １０．
［１７］ ＩＹＥＲＳ，ＨＥＱ，ＪＡＮＣＺＹＪ，ｅｔａｌ．ＭｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｃａｒｄｉｏｌｉｐｉｎｉｓｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒＮｌｒｐ３ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，
２０１３，３９（０２）：３１１ ３２３．
［１８］ ＳＵＴＴＥＲＷＡＬＡＦＳ，ＨＡＡＳＫＥＮＳ，ＣＡＳＳＥＬＳＬ．Ｍｅｃｈａ
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９动物医学进展 ２０２０年 第４１卷 第１２期（总第３３０期）
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