广东化工2021年第1期· 110 · www.gdchem 第48卷总第435期
戴荣俭，胡杰雄，陈婷*，蔡荣钦
(广东心宝药业科技有限公司研发部，广东广州510535)
[摘要]目的：优化龟鹿补肾片配方和制备工艺。方法：根据片剂成型指标评价进行龟鹿补肾片配方的筛选，在确定配方后以多指标综合评价进一步确定制备工艺。结果：最终确定龟鹿补肾片制备工艺为加入15 %(w/w)的80 %乙醇制软材，过14目筛进行制粒，颗粒干燥后整粒16目，加入4 %的交联聚维酮(XL)和1 %二氧化硅混匀压制成片。结论：根据片剂成型指标及多指标综合评价的方法，能快速确定龟鹿补肾片的配方和制备工艺有效，符合大规模生产的需求。
[关键词]龟鹿补肾片；工艺优化；交联聚维酮；多指标综合评价
[中图分类号]TQ [文献标识码]A [文章编号]1007-1865(2021)01-0110-03
Guilu Bushen Tablet Study on Pelleting Process
Dai Rongjian, Hu Jiexiong, Chen Ting*, Cai Rongqin
(Research and Development Department Guangdong Xinbao Pharm-tech Co., Ltd., Guangzhou 510535, China) Abstract:Objective: To optimize the formulation and preparation technology of Guilu Bushen tablet. Methods: The formula of Guilu Bushen tablet was selected according to the evaluation of tablet forming index, and the preparation process was further determined by multi-index comprehensive evaluation. Results: Finally, the preparation process of Guilu Bushen tablet was as follows: adding 15 %(w/w)80 % ethanol to make soft material, granulating after 14 mesh sieve, drying the whole grain 16 mesh, adding 4 % Crospovidone (XL) and 1 % silica to mix and press into pieces. Conclusion: The formula and preparation technology of Guilu Bushen tablet can be determined quickly according to the method of tablet forming index and multi-index comprehensive evaluation.
Keywords: Guilu Bushen tablet；process optimization；Crospovidone；Comprehensive evaluation of multiple indicators
龟鹿补肾片由菟丝子、淫羊藿、续断、锁阳、狗脊、酸枣仁、制何首乌、炙甘草、陈皮、鹿角胶、熟地黄、龟甲胶、金樱子、蜜黄芪、山药、覆盆子等十六味药材组成，具有壮筋骨，益气血，补肾的功效，用于身体虚弱，精神疲乏，腰腿酸软，头晕目眩，夜多小便，健忘失眠等症[1]。龟鹿补肾片制剂过程中，容易出现崩解时间偏高且硬度偏低的情况，为解决龟鹿补肾片崩解时限偏高和硬度不足问题， 经过前期数据积累，发现组方中鹿角胶、龟甲胶对崩解和硬度影响较为明显，同时鹿角胶、龟甲胶粉碎过程容易受热堵塞筛网，难以单独粉碎，而低温粉碎可以保证处方中龟甲胶、鹿角胶的收率；对龟甲胶、鹿角胶的利用更加充分[2]，可充分结合低温粉碎的优点对龟鹿补肾片加以利用。本实验在药材提取和低温粉碎完成的基础上，根据片剂成型指标，通过单因素实验，评价并筛选龟鹿补肾片配方，在确定配方后以多指标综合评价进一步确定制备工艺，为大规模生产打下基础。
1 仪器设备及原辅料
1.1 仪器设备
安捷伦1260高效液相谱仪、AL204电子分析天平(梅特勒-托利多(上海)有限公司)、MS105DU电子分析天平(梅特勒-托利多(上海)有限公司)、ME303电子分析天平(梅特勒-托利多(上海)有限公司)；HNY-350L超声波清洗器(华南超声设备有限公司)，ME103E千分之一电子天平(梅特勒-托利多(上海)有限公司)，YD-35智能片剂硬度仪(天津市鑫洲科技有限公司)，ZB-ID智能崩解仪(天津市精拓仪器科技有限公司)，CH-200槽型混合机(江阴市宏达粉体设备有限公司)，YK-160J摇摆颗粒机(江阴市宏达粉体设备有限公司)，CT-C-II热风循环烘箱(南京福能机械设备有限公司)，YK-160B摇摆颗粒机(江阴市宏设备有限公司)，EYH-2000二维混合机(江阴市宏达粉体设备有限公司)，GZPS-83全自动双出料高速压片机(北京翰林航宇科技发展股份公)，JGB-150D高效包衣锅(温州市健牌药业机械制造有限公司)。
1.2 原料
龟鹿补肾片水提干膏粉，批号A180510，由广东心宝药业科技有限公司提供；龟鹿补肾片药材细粉，批号A180510，由广东心宝药业科技有限公司提供。
1.3 辅料
纯化水，交联聚维酮(XL)，95 %乙醇，羧甲基淀粉钠(CMS-Na)，淀粉，二氧化硅、滑石粉、硬脂酸镁。
2 方法及结果
2.1 指标检测方法
2.1.1 粒度检测
采用20目和60目筛对制粒干燥所得的干颗粒进行过筛，并根据颗粒的粒度分布范围分别称重，粒度分布比例(%)=所属粒度范围的颗粒重量/干颗粒总重量[3]。
2.1.2 休止角检测
根据固定漏斗检测法，把龟鹿补肾片干颗粒倒入漏斗，直到漏斗下面的颗粒圆锥体顶部接触到漏斗口，测出此时颗粒圆锥体的高度H，测出颗粒圆锥底部的直径(R)[4]，根据tanx=2H/R即得休止角x。
2.1.3 崩解时限检测
采用ZB-ID智能崩解仪，按照2015年版《中国药典》中的崩解时限检查法[5]对崩解时限进行测定。
2.1.4 硬度检测
采用YD-35片剂硬度仪进行测定。
2.2 评价指标的确定
2.2.1 片剂成型主要受外观、片重差异、崩解时限和硬度等指
标影响，且各指标间相互作用，例如硬度过大会导致崩解时限超标，崩解快但硬度却略显不足等，同时应易于制粒，含量、浸出物检测应符合检验要求，故需要对片剂成型建立一套综合评价指标[6]，为工艺研究提供可靠的基础数据进行客观评价。
2.2.2 龟鹿补肾片的外观应完整无残损，颜均匀一致，崩解时限35 min，每片含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H40O15)计，不得少于0.25 mg[7]；在符合崩解时限的情况下片剂硬度越高越好；休止角
越小、粒度分布越集中越有利于稳定压片片重；故采用以下指标对龟鹿补肾片进行评价(见表1、2)。
表1 片剂成型指标评价
Tab.1 Evaluation of tablet molding index
项目名称指标单位评价方法
湿颗粒性状细粉少、不成条状、不结块，易于整粒过筛细粉多、结块、成条0分，符合规定2分，居中1分
片剂
硬度千克/kg 数值的0.5倍崩解时限分钟/min 倒数的100倍含量毫克/mg 数值的10倍
[收稿日期] 2020-11-04
[作者简介] 戴荣俭(1985-)，男，广东江门，本科，主要研究方向为中药固体制剂技术及新药开发。*为通讯作者。
2021年第1期广东化工
第48卷总第435期www.gdchem · 111 ·
表2 多指标综合评价
Tab.2 Comprehensive evaluation of multiple indicators
项目名称指标单位评价方法
湿颗粒性状细粉少、不成条状、不结块，易于整粒过筛细粉多、结块、成条0分，符合规定2分，居中1分
包边带干颗粒粒度分布(20~60目) 百分比(%) 百分数数值的0.1倍休止角角度(°) 倒数的100倍
片剂
外观药片完整无残损、泽均匀残损不完整0分，出现花斑、麻面0分，符合规定2分，居中1分硬度千克(kg) 数值的0.5倍
崩解时限分钟(min) 倒数的100倍含量毫克(mg) 数值的10倍
2.3 配方筛选
由于龟鹿补肾片干膏粉粘性高不易溶解，且龟鹿补肾片药材细粉含有胶类容易黏连，流动性差，故需加入崩解剂改善崩解时间和加入润滑剂提高流动性。常用崩解剂用量范围在3 %~5 %[8]，常用润滑剂用量范围在0.1 %~2 %，故设崩解剂占片重的4 %，润滑剂占片重的1 %，要求崩解时限在35 min以下。
2.3.1 片剂制备：
通过内加法，把崩解剂与龟鹿补肾片水提干膏粉和龟鹿补肾片药材细粉混合，加入浓度80 %乙醇制成软材后过14目筛，干燥，整粒16目，压制成0.416 g的素片，按片剂成型指标评价进行崩解剂筛选实验，其中崩解剂从淀粉、羧甲基淀粉钠和交联聚维酮(XL)中筛选，用量上限为4 %(见表3)；再对崩解剂的加入方法进行考察：内加法、外加法和内外加法(见表4)。
2.3.2 选取淀粉、羧甲基淀粉钠和交联聚维酮(XL)以内加法分别与龟鹿补肾片水提干膏粉和龟鹿补肾片药材细粉混合进行崩解剂筛选实验，崩解剂加入量为4 %。
表3 崩解剂筛选结果
Tab.3 Screening results of disintegrants
配方淀粉/% 羧甲基淀粉钠/% 交联聚维酮(XL)/% 湿颗粒性状(评分) 含量/mg硬度/kg 崩解/min 综合评断头锁
分
1 4 颗粒多，易于整粒(2) 0.38 5.8 41 11.14
2 4 颗粒多，易于整粒(2) 0.39 5.8 38 11.43
3 4 颗粒多，易于整粒(2) 0.38 5.9 33 11.78 2.3.3 从表3可以看出崩解剂对湿颗粒含量影响较小，配方3评分较高，故选取交联聚维酮(XL)作为崩解剂。
2.3.4 从表4可以看出加入方法对湿颗粒含量、硬度影响较小，但外加法崩解时限最短，故选择外加法作为崩解剂加入方法。
表4 崩解剂加入方法筛选结果
Tab.4 Screening results of disintegrant addition method
加入方法湿颗粒性状(评分) 含量/mg 硬度/kg 崩解/min 综合评分内加法颗粒多，易于整粒(2) 0.38 6.1 33 11.88 外加法颗粒多，易于整粒(2) 0.37 5.9 29 12.1 内外加法颗粒多，易于整粒(2) 0.38 5.9 32 11.88
2.4 根据已有配方并在此基础上，采用多指标综合评价进行筛选，对湿颗粒性状，干颗粒粒度、休止角和片剂外观进行考察：由于配方中的龟鹿补肾片水提干膏占比较高，需选用不同浓度乙醇进行制粒，对干燥温度和水分进行控制，筛选出适合的乙醇浓度(见表5)，并在此基础上对乙醇加入比例进行考察(见表6)；由于干颗粒粒度分布受整粒筛网目数影响，需选用不同目数筛网进行整粒，筛选出适合的整粒筛网目数；通过对干颗粒休止角的测量，润滑剂加入比例为干颗粒重量的1 %，从滑石粉、硬脂酸镁和二氧化硅中进行筛选。
2.4.1 乙醇浓度和加入比例筛选：从表5可以看出乙醇浓度在80 %附近时制粒效果较好。
表5 乙醇浓度筛选结果
Tab.5 Ethanol concentration screening results
乙醇浓度/% 湿颗粒性状(评分) 粒度分布(20~60目，%)片剂外观(评分) 含量/mg 硬度/kg 崩解/min综合评分
90 可制粒，细粉多(0) 62 药片完整无残损、泽均匀(2)0.38 5.8 33 17.93
85 可制粒，细粉较多(1) 68 药片完整无残损、泽均匀(2)0.37 6.0 31 19.73
80 颗粒多，易于整粒(2) 71 药片完整无残损、泽均匀(2)0.38 6.0 30 21.23
75 粗条较多，较难整粒(1) 53 药片完整无残损、泽均匀(2)0.39 5.9 33 18.18
70 易结块，无法整粒NA NA NA NA NA NA 注：NA表示无数值
表6 乙醇加入比例筛选结果
Tab.6 Screening results of ethanol addition ratio 乙醇加入比例/%(w/w) 湿颗粒性状评分
5 可制粒，细粉过多0
10 可制粒，细粉较多 1
15 颗粒多，易于整粒 2
20 粗条较多，较难整粒 1
25 粗条多，难于整粒0 注：w表示重量
从表6可知，加入15 %左右的80 %乙醇进行制粒，效果较好。
2.4.2 整粒筛网目数、湿颗粒干燥温度和干颗粒水分控制：从表7可知，整粒过程使用16目筛网效果较
好，粒度(20~60目)分布比较集中，片剂外观也符合要求。由于采用乙醇进行制粒，温度不宜过高，一般控制在60~80 ℃，干燥温度低于60 ℃，干燥时间较长，高过80 ℃，由于水提干膏占比高容易结块，故干燥温度选择70 ℃；干颗粒水分要求控制在5 %~7 %，水分过高容易黏冲，过低容易裂片。
表7 整粒筛网目数对粒度和外观的影响
Tab.7 Effect of mesh number on particle size and appearance
筛网目数粒度分布(20~60目，%) 外观(评分) 综合评分
14 62 药片完整无残损、泽均匀(2) 8.2
16 73 药片完整无残损、泽均匀(2) 9.3
18 70 药片完整无残损、泽均匀(2) 9
20 65 药片完整无残损、泽均匀(2) 8.5
2.4.3 在单因素试验筛选基础上进行正交试验，以确定龟鹿补肾片的最佳制备工艺。设计3因素3水平(A：乙醇浓度77 %/80 %/83 %，B：加入比例12 %/15 %/18 %，C：筛网目数14/16/18)正交试验，结果(见表8)。
表8 制备龟鹿补肾片工艺的正交试验结果及分析
Tab.8 Orthogonal Test Results and Analysis of Preparation of Guilu Bushen Tablets
A
乙醇浓度/%
B
加入比例/%
C
筛网目数
评分结果
湿颗粒性压铆螺钉
状(评分)
粒度分布
(20~60目，%)
含量/mg片剂外观(评分)硬度/kg 崩解/min综合评分
1 77 1
2 14 粗条较多，
较难整粒(1)
58 3.8 药片完整无残
损、泽均匀(2)
5.6 31 18.63
2 77 15 16 粗条较多，
较难整粒(1)
56 3.8 药片完整无残
损、泽均匀(2)
氯离子含量测定方法5.7 31 18.48
3 77 18 18
粗条多，
难于整粒(0)
51 3.9 颜不均匀，
有麻点(0)
5.4 33 14.73
4 80 12 16
可制粒，
细粉较多(1)
73 3.9 药片完整无残
损、泽均匀(2)
5.8 29 20.55
5 80 15 18 粗条较多，
较难整粒(1)
62 3.8 药片完整无残
损、泽均匀(2)
5.9 32 19.08
6 80 18 14
颗粒多，
易于整粒(2)
68 3.8 药片完整无残
损、泽均匀(2)隐藏式水箱
6.1 29 21.10
7 83 12 18
可制粒，
细粉较多(1)
61 3.8 药片完整无残
损、泽均匀(2)
5.9 32 18.98
8 83 15 14
颗粒多，
易于整粒(2)
72 3.9 药片完整无残
损、泽均匀(2)
6 30 21.43
9 83 18 16
颗粒多，
易于整粒(2)
58 3.8 药片完整无残
损、泽均匀(2)
5.8 31 19.73
K151.83 58.15 61.16 ∑Xi K260.72 58.98 58.75 172.69 K360.13 55.55 52.78 P
R 2.96 1.14 2.79 3313.45 K122686.55 3381.32 3740.23 QT K223687.11 3479.13 3451.55 3345.03 K323616.11 3086.29 2785.76 ST Qi 3329.92 3315.58 3325.85 31.58 Si 16.48 2.13 12.40
由表8中可知，各因素显著性顺序为A＞C＞B，最佳工艺条件为A2B2C1，即80 %乙醇加入比例15 %，筛网目数14目。
2.4.4 润滑剂的筛选
以上各种配方干颗粒的休止角均大于40°，表明流动性较差[9]，需加入润滑剂以改善流动性，从硬脂酸镁、二氧化硅和滑石粉中进行筛选，加入比例为1 %。
表9 润滑剂的筛选结果
Tab.9 Screening results of lubricants
种类休止角/° 外观(评分) 评分硬脂酸镁30.7 完整有光泽，颜均匀，无斑点(2) 5.26
二氧化硅31.8 完整有光泽，颜均匀，无斑点(2) 5.14
滑石粉34.9 完整有光泽，颜均匀，无斑点(2) 4.87
从表9可以看出硬脂酸镁及二氧化硅效果较佳，由于龟鹿补肾片药材细粉含有胶类容易黏连，而且二氧化硅的助流作用高于硬脂酸镁[10]，故选用二氧化硅作为润滑剂。
2.5 通过对龟鹿补肾片的配方进行单因素、多因素评价筛选，龟鹿补肾片制备工艺为上述配方物料以15 %(w/w)的80 %乙醇制粒，14目筛制湿粒，70 ℃干燥至水分5 %~7 %，16目筛整粒，加入4 %的交联聚维酮(XL)、1 %的二氧化硅，压制成片(1000片，片重0.416 g)。
3 讨论
(1)由于龟鹿补肾片水提干膏粉和龟鹿补肾片药材细粉配比所得片剂崩解时限不合格，但降低龟鹿补肾片水提干膏粉和龟鹿补肾片药材细粉用量会对含量有一定影响，要求崩解剂在崩解时限合格的情况下加入比例不能太高，同时要求制粒过程可操作性强；综合上述情况，采用片剂成型指标评价对配方进行评价评分，在崩解时限、含量合格的前提下尽量提高硬度，以提升龟鹿补肾片的片剂质量。
(2)由于润滑剂浓度和用量对制粒操作的难易以及片剂成型也有较大影响，经过筛选发现80 %乙醇制粒效果最佳，应与龟鹿补肾片水提干膏粉与药材细粉的比例有关，其中水提干膏粉的比例较大，故不宜采用过低的乙醇浓度，但乙醇浓度过高也会导致制粒后颗粒黏合性降低从而导致硬度降低；干燥温度
和水分控制参考以往文献，乙醇浓度、用量和制粒筛网目数三个因素一同经过正交试验验证到最佳制备工艺条件，即80 %乙醇加入比例15 %，制粒筛网目数14目，可使龟鹿补肾片多指标综合评价最高。润滑剂选用二氧化硅，虽用量受限，但能预防粘冲，且休止角度可降低到合适的程度。
(3)本研究先采用片剂成型评价指标对龟鹿补肾片的配方进行筛选，获得龟鹿补肾片水提干膏粉和龟鹿补肾片药材细粉之间配比用量；再采用多指标综合评价，以外观、含量、硬度、崩解时限、湿颗粒性状、粒度和休止角为指标对片剂质量进行考察获得最优工艺，该工艺稳定可靠，符合产品质量要求，可操作性强，可进行工业化大生产。
(下转第114页)
2.2 灵芝孢子粉对癫痫脑组织IL-1β与自噬的影响
3 讨论
癫痫是一种以反复神经放电为特征的临床症状。我国约有900万的癫痫患者，在各个年龄段均可发病，但青少年的发病率较高。因此，研究癫痫的发病机制，有效癫痫，探索方法具有重要意义。IL-1家族由7种激动剂(例如：IL-1α和β)和3类受体拮抗剂组成[4]，其中，IL-1β在脑损伤和癫痫中的研究最为广泛。如果自噬过度上调时，将促进细胞进一步的死亡，因此过度上调的自噬有时对机体可能起着有害的作用[5]，因此在神经系统损伤修复中自噬发挥双向调节的作用。本次实验有前期实验研究的基础，进一步研究灵芝孢子粉对癫痫大鼠模型海马神经元自噬体IL-1β、LC3B 和Beclin-1蛋白表达水平的影响，发现灵芝孢子粉可以通过升高自噬相关蛋白并降低IL-1β的表达改善癫痫。
综上所述，灵芝孢子粉可能通过改变海马区相关蛋白IL-1β、LC3B 和Beclin-1表达，激活细胞自噬，改善其癫痫症状。以上相关机制的研究，为灵芝孢子粉抗癫痫的提供了理论支持，为癫痫患者的预防和提供了新的思路。
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(上接第112页)
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