小鼠实验操作

小鼠实验操作
一、 实验动物的选择原则
  1、尽量选择与人体结构、机能、代谢及疾病特征相似的动物;
   2、选用的实验动物的解剖、生理特点应符合实验目的;
  3、根据人与实验动物对同一刺激的反应差异;选用具有明显反应的动物;
   4、 根据生物医学研究必须达到的精确度;选用结构功能简单又能反映研究指标的动物;
   5、选用患有人类类似疾病的近交系或突变系动物;
   6、选用与实验设计、技术条件、实验方法等相适应的标准化动物;
   7、在不影响实验目的与结果的前提下;选择最易获得、最经济、便于操作管理的动物;
   8、 供实验用的动物应具备质量合格证..
图像型火焰探测器
二、常用实验动物的特点
1、小白鼠 
是实验室最常用的一种动物..易于大量繁殖;且价廉;适用需要大量动物的实验;如药物筛选、半数致死量测定、药物效价比较、抗感染、抗肿瘤药物及物的研究等..
 2、 大白鼠
与小白鼠相似..一些在小白鼠身上不便进行的实验可选用大白鼠;如药物抗炎作用的实验常选用大白鼠踝关节制备关节炎的模型..此外;也可用大白鼠直接记录血压、作胆管插管;或用大白鼠观察药物的亚急性或慢性毒性..大白鼠的血压和人相近;且稳定;现常用于抗高血压药物实验..
3、豚鼠 
是实验室常用动物之一..对组织胺很敏感;容易致敏;常用于平喘药和抗组胺药的实验..对结核菌亦敏感;故也用于抗结核药的研究..此外还用于离体心脏及平滑肌实验;其乳头肌和心房常用于电生理特性及心肌细胞动作电位实验;研究抗心律失常药物的机理..
三、实验动物选择的注意事项
  由于动物对外界刺激的反应存在个体差异;在选择实验动物时;还应注意动物的年龄、体重、性别、生理状态、健康状况及其品系、等级等因素对实验的影响..
二、实验动物的性别鉴别与编号
  一、 实验动物的性别鉴别
接种棒
  药理学实验常用的动物中;较大的动物如家兔、猫、犬等可以从生殖器分辨其性别;而较小的动物如小白鼠、大白鼠、豚鼠等的性别鉴别;通常以肛门与生殖孔之间的距离来判断;距离近者为雌性;距离远者为雄性..
  二、实验动物的编号
  药理实验中常用多只动物同时进行实验;为避免混乱应将动物进行编号..实验动物编号的目的在于将观察范围内的同种动物进行区别;以便于观察..常用的方法有染法、耳缘剪孔法、烙印法和号牌法等;可根据实验目的、动物种类和具备的条件选用;一般编号应具有清晰
易辨、简便耐久的特点..猫、犬、兔等较大的动物可用特别的号码牌固定于身上..小白鼠、大白鼠及白家兔等用黄涂于动物不同部位进行染标记而编号..例如在小白鼠;右前肢皮肤外侧涂标记为1号;腹部右外侧皮肤涂标记为2号;右后肢皮肤外侧涂标记为3号;头部皮肤涂标记为4号;背部正中皮肤标记为5号;尾巴根部标记为6号;7、8、9号在左侧同1、2、3号;第10号不涂黄..大白鼠的编号与小白鼠相同..
第二节  实验动物的捉拿、给药和处死方法
一、小白鼠、大白鼠
  1、捉拿法:小白鼠 可采取双手法和单手法两种形式..
  双手法:右手提起鼠尾;放在鼠笼盖或其他粗糙面上;向后方轻拉;小白鼠则将前肢固定于粗糙面上..此时迅速用左手拇指和食指捏住小白鼠颈背部皮肤图1;并以小指与手掌尺侧夹持其尾根部;固定于手中..
  单手法:小白鼠置于笼盖上;先用左手食指与拇指抓住鼠尾;手掌尺侧及小指夹住尾根部;然后用左手拇指与食指捏住颈部皮肤..
大白鼠 容易激怒咬人;捉持时左手应戴防护手套或用厚布盖住大鼠;先用右手抓住鼠尾;再用左手拇指和食指握住头部;其余手指与手掌握住背部和腹部图2..不要用力过大;切勿捏其颈部;以免窒息致死..
  2、给药方法
小白鼠
 1、灌胃po:左手固定小鼠;右手持灌胃器;灌胃针头自口角进入口腔;紧贴上腭插入食道图3;如遇阻力;将灌胃针头抽回重插;以防损伤..常用灌胃量为0.1~0.2 ml/10g..
2、皮下注射ih:可用腹部、背部、腹股沟的皮下;此处皮肤比较松弛;也可由助手协助..注药量一般为0.1~0.2 ml/10g..
3、肌肉注射im:一人抓住小鼠头部皮肤和尾巴;另一人持连4号针头的注射器;将针头刺入后腿外侧肌肉..注射量一般不超过0.1~0.2 ml/只..
4、静脉注射iv:将小鼠置入固定器;酒精涂擦尾部;以使血管扩张..自尾部末端刺入;刺入血管后抽针芯可见回血..常用注射量为0.1~0.2 ml/10g..
5、腹腔注射ip:将小鼠固定后;从下腹部外侧进针;深度较皮下注射深图4..常用注射量为0.1~0.2 ml/10g..
  大鼠 灌胃、腹腔注射、皮下注射及尾静脉注射与小鼠相似..静脉注射也可在麻醉下行舌下静脉注射..
 3、处死方法
1、颈椎脱位法: 杂物门
术者左手持镊子或用拇指、食指固定小鼠头后部;右手捏住鼠尾;用力向后
上方牵拉;听到鼠颈部喀擦声即颈椎脱位;脊髓断裂;鼠瞬间死亡..
  2、打击法:用手抓住鼠的尾并提起;朝地面用力撞击鼠头致死也可用小木锤用力打击鼠头
  3、吸入麻醉法:吸过量的乙醚..
快装舞台
  4、大量放血法:可采用眼眶动、静脉放血致死..
    5、空气栓塞法:将空气急速注入静脉致死..小白鼠可注入0.3-0.5ml空气..
三、豚鼠 
1、捉拿法:
豚鼠性情温顺不咬人;可用左手直接从背侧握持前部躯干;体重小者用一只手捉持;体重大者宜用双手;右手托住臀部图6
2、给药方法
批量控制器
灌胃见图6、皮下注射、肌肉注射及腹腔注射方法基本同小鼠;给药量稍多..静脉注射可选后脚掌外侧静脉或颈外静脉
3、处死方法
豚鼠可采用注射麻醉法;即注射钠麻醉处死..豚鼠可注射麻醉剂量的3倍以上的量腹腔内注射..还可采用吸入麻醉法..
第二节    实验动物的取血方法
一、小鼠和大鼠
  1、剪尾取血法:
将清醒鼠装入深颜的布袋中;将鼠身裹紧;露出尾巴;用酒精涂擦或用温水浸泡使血管扩张;剪断尾尖后;尾静脉血即可流出;用手轻轻地从尾根部向尾尖挤捏;可取到一定量的血液..取血后;用棉球压迫止血..也可采用交替切割尾静脉方法取血..用一锋利刀片在尾尖部切破一段尾静脉;静脉血即可流出;每次可取0.3~0.5 ml;供一般血常规实验..三根尾静脉可替换切割;由尾尖向根部切割..由于鼠血易凝;需要全血时;应事先将抗凝剂置于采血管中;如用血细胞混悬液;则立即与生理盐水混合..
  2、眼球后静脉丛取血法:
左手持鼠;拇指与中指抓住颈部皮肤;食指按压头部向下;阻滞静脉回流;使眼球后静脉丛充血;眼球外突..右手持1%肝素溶液浸泡过的自制吸血器;从内呲部刺入;沿内下眼眶壁;向眼球后推进4~5 mm;旋转吸血针头;切开静脉丛;血液自动进入吸血针筒;轻轻抽吸血管防止负压压迫静脉丛使抽血更困难;拔出吸血针;放松手压力;出血可自然停止..也可用特制的玻璃取血管管长7~10 cm;前端拉成毛细管;内径0.1~1.5 mm;长为1 cm;后端管径为0.6 cm..必要时可在同一穿刺孔重复取血..此法也适用豚鼠和家兔..
  3、眼眶取血法:
左手持鼠;拇指与食指捏紧头颈部皮肤;使鼠眼球突出;右手持弯镊或止血钳;钳夹一侧眼球部;将眼球摘出;鼠倒置;头部向下;此时眼眶很快流血;将血滴入预先加有抗凝剂的玻璃管内;直至流血停止..此法由于取血过程中动物未死;心脏不断跳动;一般可取鼠体重4%~5%的血液量;是一种较好的取血方法;但只适用一次性取血..
  4、心脏取血:
动物仰卧固定于鼠板上;用剪刀将心前区毛剪去;用碘酒、酒精消毒此处皮肤;在左侧第3~4肋间用左手食指摸到心搏;右手持连有4~5号针头的注射器;选择心搏最强处穿刺;当针头正确刺入心脏时;鼠血由于心脏跳动的力量;血自然进入注射器..
  5、断头取血:
实验者带上棉手套;用左手抓紧鼠颈部位;右手持剪刀;从鼠颈部剪掉鼠头迅速将鼠颈端向下;对准备有抗凝剂的试管;收集从颈部流出的血液;小鼠可取血0.8~1.2 ml;大鼠可取血5~10 ml..
  6、颈动静脉、股动静脉取血:
麻醉动物背位固定;一侧颈部或腹股沟部去毛;切开皮肤;分离出静脉或动脉;注射针沿动静脉走向刺入血管..20 g小鼠可抽血0.6 ml;300 g大鼠可抽血8 ml..也可把颈静脉或颈动脉用镊子挑起剪断;用试管取血或注射器抽血;股静脉连续多次取血时;穿刺部位应尽量靠近股静脉远心端..
  二、豚鼠
  1、心脏取血:
需二人协作进行;助手以两手将豚鼠固定;腹部面向上;术者用左手在胸骨左侧触摸到心脏搏动处;一般在第4~6肋间、选择心跳最明显部位进针穿刺..针头进入心脏;则血液随心跳而进入注射器内;取血应快速;以防在试管内凝血..如认为针头已刺入心脏;但还未出血时;可将针头慢慢退出一点即可..失败时应拔出重新操作;切忌针头在胸腔内左右摆动;以防损伤心脏和肺脏而致动物死亡..此法取血量大;可反复采血..
  2、背中足静脉取血:
助手固定动物;将其右或左后肢膝关节伸直提到术者面前;术者将动物脚背用酒精消毒;出
背中足静脉;以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端;右手拿注射针刺入静脉;拔针后立即出血;呈半球状隆起;用纱布或棉花压迫止血..可反复取血;两后肢交替使用..皮带盘

本文发布于:2024-09-22 04:17:29,感谢您对本站的认可!

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