动物蛋白质的胃蛋白酶消化率（体外消化）
一、适用范围：
本方法适用于动物性原料品质的判定。
卡头
二、原理：
用脱脂的样本在一个热的胃蛋白酶溶液中，稳定地不断搅拌约16小时，予以消化。测定它的蛋白质含量。这种方法不能用于植物蛋白质饲料原料或混合饲料，因为，它们所含复杂的碳水化合物是不能被胃蛋白酶消化的。将溶解了的蛋白质全部作为可消化的，并用其对粗蛋白质的百分率来表示。 三、设备：
1、恒温水浴振荡器：45±2℃。
2、测定粗蛋白质的全套设备。
3、过滤装置。
4、索氏脂肪浸提器。
焊锡线
四、试剂：
除测定粗蛋白质用的试剂外，尚需以下试剂：
1、0.2%胃蛋白酶溶液的配制：先稀释6.1ml盐酸到1L。在使用前，现配0.2%deepbit胃蛋白酶溶液。
2、所有胃蛋白酶应具有1：3000的活性。
3、加热稀盐酸至42—45℃，然后加入胃蛋白酶2g,轻轻地搅动，使其溶解（此时不要加热！）。即得在0.75mol/L盐酸中的0.2%胃蛋白酶溶液。
五、测定步骤：
1、准确称取1g脱脂试样，放入300ml碘量瓶内，加入经过预热（42—45℃）的0.2%胃蛋白酶溶液150ml，盖好塞子，在45℃下边搅拌边消化16小时，消化后用滤纸过滤，然后用温水洗净滤纸上的不消化物。将不消化物连同滤纸转入消化管中，按照测定粗蛋白质含量
的方法，测定不消化物中的粗蛋白质含量。
2、另取1份脱脂分析试样，按照测定粗蛋白质含量的方法，测定其粗蛋白质含量。然后，根据消化的和不消化的粗蛋白质含量计算出试样的胃蛋白酶消化率。
六、测定结果计算与分析：
1、计算：
动物蛋白质胃蛋白酶消化率（%）=A-B×100
A
式中：A—试样中粗蛋白质的含量（%）。
B—试样中的不消化物粗蛋白质的含量（%）。
2、分析：
合格的鱼粉，其粗蛋白质的胃蛋白酶消化率应不小于85%；羽毛粉应在75%以上。
植物油脂检验不皂化物测定法GB5535-85
本标准适用于商品植物油不皂化物的测定。
油脂中不皂化物即油脂皂化时，与碱不起作用的，不溶于水的物质，包括留醇，脂溶性维生素的素等。
一、仪器和用具：
锥形瓶：250ml
冷凝管
恒温水浴锅
电炉
分液漏斗：250ml
量筒：50ml
索氏抽提器
电热恒温烘箱
烧杯、试剂瓶等
天平：感量0.001g
二、试剂：
1.0N氢氧化钾乙醇溶液
联络柜0.5N氢氧化钾水溶液
乙醇、乙醚
中性乙醚乙醇混合液(2：1)
三、操作方法：
称取混匀试样5g（W）注入锥形瓶中，加1.0NKOH乙醇溶液50ml，连接冷凝管，在水浴锅上煮沸约30min，煮到溶液清澈透明为止。用50ml蒸馏水将皂化液转移入分液漏斗中，加入50ml乙醚，趋温热时猛烈摇动1min后，静止分层。将下层皂化液放入第二只分液漏斗中，每次用50ml乙醚提取两次。合并乙醚提取液，加水20ml轻轻旋摇，待分层后，放出水层，每次再加水20ml猛烈振摇洗涤两次。
先后用0.5NKOH水溶液和水各20ml，充分振摇洗涤一次，如此再洗涤两次。最后用水洗至加酚酞指示剂时不显红为止。
用索氏抽提器回收乙醚，将抽提瓶中的残留物在105℃温度下烘1h，冷却称重，再烘30min，直至恒重为止。将儿重后的残留物溶于30ml中性乙醚乙醇中，用0.02N氢氧化钾滴定至粉红。
四、结果计算：
油脂中不皂化物含量按下列公式计算：
不皂化物（%）=
式中：W1——残留物重量，g
W——试样重量，g
无触点稳压电源V——滴定所消耗的氢氧化钾溶液体积，ml
N——氢氧化钾溶液的当量浓度
0.28——每毫克当量的油酸重量，g
双试验结果允许差不超过0.2%，求其平均数，即为测定结果。测定结果取小数点后第一位。
过氧化值的测定
一、适用范围：
本方法适用于油脂及动物性原料的测定。
二、原理：
油脂氧化过程中，产生的过氧化物，与碘化钾作用，生成游离碘；以硫代硫酸钠溶液滴定，计算含量。
三、试剂：
1、饱和碘化钾溶液：称取14g碘化钾，加10ml水溶解，必要时微热加速溶解，冷却后贮于棕瓶中。现用现配。
2、冰乙酸混合液：量取40ml，加60ml冰乙酸，混匀。
3、0.02mol/L硫代硫酸钠标准溶液：称取5g硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O）（或3g无水硫代硫酸钠），溶于1000ml水中，缓缓煮沸10分钟，冷却。放置两周后过滤备用。
4、1%淀粉指示剂：称取可溶性淀粉0.5g，加入少许水调成糊状倒入50ml沸水中调匀，煮沸，现用现配。
四、测定步骤：
精确称取2—3g混匀的样品，置于250ml碘量瓶中，加30ml冰乙酸混合液，使样品
完全溶解；加入1.00ml饱和碘化钾溶液。紧密塞好瓶塞，并轻轻振摇0.5min，然后在暗处放置5min，取出加75ml水，摇匀。立即用硫代硫酸钠标准溶液滴定，至淡黄时，加1ml淀粉指示剂，继续滴定至蓝消失为终点。同时作空白试验。
五、测定结果的计算与分析：
1、计算：
X=[（V-V0）×N×0.1269]/m
式中：X—样品的过氧化值，%。
V—样品消耗硫代硫酸钠溶液的体积，ml。
V0—空白消耗硫代硫酸钠溶液的体积，ml。
N—硫代硫酸钠标准溶液的麾尔浓度，mol/L。
0.1269—1N硫代硫酸钠1ml相当于碘的克数。
2、分析：
油脂新鲜，其过氧化值不应大于0.15%。
附：0.02mol/L硫代硫酸钠标准溶液的标定
1、标定：
精确称取0.15g于120℃烘3小时至恒重的基准重铬酸钾，置于碘量瓶中，溶于25ml水，加2g碘化钾及20ml硫酸溶液（20%），摇匀，于暗处放置10min。加150m水，用配制好的硫代硫酸钠溶液滴定。近终点时加3ml淀粉指示液(5g/L)，继续滴定至溶液由蓝变为亮绿。同时作空白试验。
2、计算:
mhhpaC=
式中：C—硫代硫酸钠标准溶液之物质的量浓度，mol/L。
m—重铬酸钾之质量，g。
V1—硫代硫酸钠溶液之用量，ml。
V0—空白试验硫代硫酸钠标准溶液之用量，ml。
0．04903—与1.00ml硫代硫酸钠标准溶液【C=1.0mol/L】相当的以克表示的重铬酸钾的质量。
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