目的:确立无患子皂苷提取的最佳方法,使其能投入工业化生产,要求提取方法简单,成本低,产率高。
目前无患子有效成分的提取方法:
●超滤法
●酶法
●微波萃取法
●超声波法
●甲醇,无水乙醇,水提取法
提取方法分析与比较:
1.超滤法
无患子果皮洗净、晾干、粉碎后,用水提取三次,合并水提液,加入壳聚糖絮凝剂除杂,将絮凝后的水提液超滤分离,渗透液在60℃烘干得灰白粉末即为产品。
2.酶法
将无患子果皮洗净、烘干、粉碎。准确称取一定量的无患子粉末, 用蒸馏水作为溶剂以1:5固液比放于三口烧瓶中。加酶后恒温回流提取一定时间。将提取液高温灭酶后絮凝沉降。离心后取清液用紫外-可见分光光度法检测提取液中的无患子皂苷含量。简报器
3.微波萃取法
前期处理→水预处理→乙醇提取→乙醇去除→酸性水解→中和→水分去除→萃取剂萃取→萃取剂去除→干燥→产品。
4.超声波法
取无患子果晾干、剥壳及粉碎,称取15克置于锥形瓶中,加水250ml,采用超声波提取法
互动教学系统提取50min,超声波功率为100W,温度为室温(在提取过程中,水温上升14℃左右,该温度对超声波提取有机物的结果不造成影响);提取完毕后,再加入等量的无患子,将超声波提取器里的温水换成冷水,超声波继续提取50min;这样连续进行四次,最后,抽滤除去滤渣,得到无患子提取的浓缩液。
5.泡沫分离法
泡沫分离装置
图1为间歇式泡沫分离的实验装置示意图。泡沫分离柱的内径47mm、高度700mm。空气经压缩
机压缩后,由转子流量计控制其流量,通过气体分布器,分散成气泡由柱底通入无患子皂苷粗提液。泡沫沿柱体上升,到达柱顶后经过泡沫溢出管进入泡沫收集装置,每次实验时间持续到产生的泡沫不能从装置中溢出为止。测量收集液的体积,烘干后所得产品用分光光度法检测其皂苷含量。
6.甲醇,无水乙醇,水提取法
取无患子果皮100.0g, 放入500 ml广口瓶,用工业甲醇浸泡(甲醇满过果皮),浸泡时间为4d。甲醇液与无患子倒入组织捣碎机捣碎,棉纱布过滤,并用手挤压出捣碎物中剩余甲醇,
残渣再用新甲醇浸泡2 d。棉纱布过滤,手挤压出捣碎物中剩余甲醇,甲醇液合并。再加无患子果皮100 g,重复以上步骤,合并甲醇液。分批分量在45℃ 下降压浓缩至无甲醇,合并浓缩物。无水乙醇和水的提取方法与步骤与甲醇的提取方法与步骤相同。
六种无患子有效成分提取方法的比较
提取方法 | PH值 | 温度 | 试剂 | 提取所需时间 | 实验操作难易 | 实验条件要求 | 实验仪器 | 产率 | 成本高低 | 工业化生产难易 |
超滤法 | 酸性 | 25℃ | 1%壳聚糖-醋酸溶液 | | 容易 | 流速30L/h,压力0.08Mpa | 6K超滤膜 | 72.47% | 较高 | 较容易 |
酶法 | 4.7 | 50℃ | 纤维素酶,果胶酶,淀粉酶 | 25h | 容易 | 要求高 | 紫外可见光光度计,光电分析天平,恒温水浴锅,PH计,离心机,电热恒温鼓风干燥箱 | 变速箱试验台86.59% | 低 | 容易 |
微波萃取法 | 中性 | 80℃ | 正丁醇 | 30min | 较容易 | 要求高 | 微波炉,恒温水浴锅,循环真空泵,电热鼓风干燥箱 | 16.9% | 很高 | 困难 |
超声波法 | 中性 智能防盗窗 | 室温 | 水 | 3~4h | 较容易 | 要求高 | 超声波发生器 | | 很高 | 较困难 |
泡沫分离法 | 4.8 | 30℃ | 正丁醇 | 2h | 较难 | 要求高 | 泡沫分离装置 | 69.42% | 高 滚珠丝杠电动推杆 | 困难 |
甲醇,无水乙醇,水提取法 | 中性 | 60℃ | 乙醇 | 3h | 容易 | 要求较低 | 旋转蒸发器,电热鼓风干燥箱,夜宵谱仪,粉碎机 | 9.32% | 低 | 容易 |
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建议方法:酶法
采用酶法提取无患子皂苷的较优工艺条件为:纤维素酶用量为无患子粉末质量的0.1%,酶提时间25h,酶提温度50℃,PH值4.7。此时,无患子皂苷提取率达到86.59%,比未加酶处理时提高了19.63%
●试剂与仪器
试剂:盐酸、氢氧化钠、香兰素、冰醋酸、高氯酸等均为分析纯;纤维素酶(酶活力>15000u/g)、淀粉酶(酶活力>10000u/g)、果胶酶(酶活力>50u/g)
仪器:UV-2550型紫外可见分光光度计;FA2004N型光电分析天平;HH型数显恒温水浴锅;FE20/EL20型实验室pH计;TDL-5-A、TDL-40B型离心机;DHG-9146型电热恒温鼓风干燥箱。
阻燃双面胶●实验方法
将无患子果皮洗净、烘干、粉碎,准确称取一定量的无患子粉末,用蒸馏水作为溶剂以1:5
固液比放于三口烧瓶中,加酶后恒温回流提取一段时间。将提取液高温灭酶后絮凝沉降,离心后取清液用紫外可见光光度法检测提取液中的无患子皂苷含量。
报告人:戴何静
时间:2011.7.11