1．取样最佳位置 PO
在平板上选取不同位置组织，用小刀切取1*2mm2的长方形样品。 蓝牙定位系统
Ps：取样时小心进行，切勿触碰样品表面，样品的培养基需全部刮除。
2．前固定
不同样品分别放入装有1mL2.5%戊二醛的1.5豪升的离心管中，常温固定5-6小时后于4℃冰箱中保存过夜。
Ps：戊二醛挥发性强，对人体有害。请于通风橱中进行。
顺桨3．冲洗
取出样品，立即放入装有1mL 0.1M PBS缓冲液的1.5豪升的离心管中，10分钟后换新PBS缓冲液，重复7-8次。
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Ps：整个实验过程中，溶液加入量均不超过1mL。4．后固定
取冲洗后的样品，立即放入装有按比例1 : 1（PBS 30uL: 锇酸30uL）配好的锇酸溶液的1.5豪升的离心管中，常温固定1-2小时。
Ps：锇酸挥发性强，对人体有害。请于通风橱中进行。
5．冲洗
刚构取出样品，立即放入装有1mL 0.1M PBS缓冲液的1.5豪升的离心管中，10分钟后换新PBS缓冲液，重复7-8次。
Ps：锇酸废液放入制定回收瓶中，切勿乱倒。
六．梯度脱水
配好浓度分别为：30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%的乙醇，吸出1.5豪升的离心管中的PBS缓冲液，按浓度顺序加入梯度乙醇，每一级浓度乙醇脱水10min，最后100%乙醇重复2-3次，保证样品绝对无水。 Ps：操作过程中切勿伤及样品，各个梯度乙醇现配现用。
七．置换
吸除1.5豪升的离心管中的100%乙醇，加入100%丙酮，持续置换10min，重复3次。
Ps：丙酮以及上一步的无水乙醇都需要现开现用，以防浓度变化，影响结果。
八．浸透
吸除离心管中的丙酮，按照总体积80uL，Spurr树脂：丙酮（1:3）的比例，将混液加入样品管中。间隔8小时以上，加入总体积80uL，Spurr 树脂：丙酮（1:1）比例的混液。间隔8小时以上，加入总体积80uL，
Spurr树脂：丙酮（3:1）比例的混液。即终体积为240uL。
Ps：一个样品一个样品的在干燥环境中操作，以防止样品受潮，同时操作过程中切勿伤及样品，下同。
九．摆放样品并聚合
按照样品数量在聚合板上的样品槽中加入纯Spurr树脂，将浸透液中的样品小心取出，放在样品槽靠边位置（方便切片）。聚合板放在70℃烘箱中聚合。
十．制备切片
切片捞在100目0.3%Formvar膜覆盖的镍网上。
11．染
染：用2%的醋酸铀25摄氏度染10min，用重蒸水洗3次，每次20min 再用柠檬酸铅25摄氏度染5min，用重蒸水洗3次，每次20min。推拉活动护栏
十二．电镜观察
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