双层杯透射电镜样品制备过程
组织取材(60s内),体积<1mm3,之后进行如下步骤 幼儿园门禁1) 前固定: 3%戊二醛2h或过夜。
2) 漂洗:磷酸缓冲液,3次,10min/次。
加热膜
3) 后固定:1%锇酸固定液,2h。
硅片清洗4) 漂洗:(同上)。
5) 梯度脱水:50%丙酮,70%丙酮,80%丙酮, 90%丙酮两次,各10min 。100%丙酮两次,各15min。
6) 渗透:丙酮/包埋剂(1:1,1:2),室温各1h。丙酮/包埋剂1:3, 4度过夜。纯包埋剂,4度过夜。 7) 包埋:纯包埋剂(37度,45度,60度各24h)。
取出包埋块,进行超薄切片,片厚70nm。分别采用醋酸双氧铀对切片进行染30min,双蒸水漂洗3-5次,之后用柠檬酸铅染10min,双蒸水漂洗3-5次。待切片干燥后,透射电镜观察。 教室直播系统
切片机型号:Leica UC7 超薄切片机,速度1mm/s.
透射电镜型号:日立高新 HT7700,电压80kv 电流10μa.
>风湿油