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常见缓冲液的配制

附溶液配制方法：

pH7.2 0.01mol/L PBS

KH2PO4 0.38g

Na2HPO4 1.02g(或Na2HPO4·12H2O2.58g)

NaCl 8.0g

蒸馏水加至 1000mL

两辊矫直机

pH7.4 PBS/T

NaCl 8.0g

KH2PO4 0.2g

Na2HPO4·12H2O(或Na2HPO4·7H2O) 2.89g（或2.16g）

KCl 0.2g

吐温20 0.5mL

蒸馏水加至 1000mL

pH9.6碳酸盐缓冲液

Na2CO3 1.59g

NaHCO3 2.93g 蒸馏水加至 1000mL

0.075mol/L氯化钾低渗液

氯化钾 0.559g，蒸馏水 100ml

甲醇冰醋酸（3:133链）固定液

甲醇 3份
冰醋（乙）酸 1份

姬姆萨染液

Giemsa原液 1ml
1/15mol/L磷酸缓冲液（喷雾面膜pH6.8或7.4）10ml

2.3% 柠檬酸钠溶液

柠檬酸钠（Na C H O ·2H O） 2.3g
蒸馏水 100ml

明胶显影液

明胶粉 0.2g
三蒸水 10ml
甲酸 0.1ml

1% 醋酸

冰醋（乙）酸 1ml

蒸馏水 99ml

H"o"33342-若丹明123染液

H"o"33342（Hoechst 33342）0.25μg 若丹明123（Rhodamine 123） 1.0μg PBS 1ml

DPH贮备液

DPH（1.6-Dipnenyl-1,3, 5hexatriene, 4.65mg）
四氢呋喃 10ml

DPH工作液(2×10-6mol/L)

DPH贮备液 0.1ml
PBS 100ml

FDA贮备液

二醋酸脂荧光素(Fluorescein diacetate,FDA) 5.0mg
丙酮 1ml

FDA工作液

FDA贮备液 0.1ml
PBS 100ml

M-缓冲液（pH7.2）

咪唑50mmol/L 3.404g
氯化钾50mmol/L 3.7g
氯化镁（MgCl ·6H O）0.5mol/L 101.65mg
EGTA(乙二醇双（a-氨基乙基）醚四乙酸) 1mmol/L 380.35mg
EDTA(乙二胺四乙酸) 0.1mmol/L 29.22mg
疏基乙醇1mmol 0.07ml
4mol/L甘油292ml
蒸馏水加至1000ml

1% TritonX-100液

Triton X-100（聚乙二醇辛基苯基醚） 1ml
M-缓冲液 99ml

3% 戊二醛液

戊二醛25% 3ml
PBS 液（pH7.2） 97ml

0.2% 考马斯亮蓝R250染液

考马斯亮蓝R250（Coomassie brilliant blue R250） 0.2g

甲醇 46.5ml
冰醋（乙）酸 7ml
蒸馏水 46.5ml

生理盐水(0.85%氯化钠)

氯化钠 8.5g

三蒸水 1000ml

0.25mol/L蔗糖水溶液（含0.003mol/L氯华钙）

蔗糖 85.5g
无水氯华钙 0.33g
蒸馏水 1000ml

0.17mol/L氯化铵液

氯化铵 4.574g
蒸馏水 500ml

0.17mol/L硝酸钠液

硝酸钠铜包铝漆包线 7.224g 蒸馏水 500ml

0.12mol/L硫酸钠液

硫酸钠（Na SO ·H O） 19.333g
蒸馏水 500ml

0.12mol/L草酸铵液

草酸铵（（NH ）C o ·H O） 8.527g
蒸馏水 500ml

0.17mol/L醋酸铵液

醋酸铵 6.552g
蒸馏水 500ml金属防水接头

0.32mol/L葡萄糖液

葡萄糖 28.83g
蒸馏水 500ml

0.32mol/L甘油液

火车鹤管

甘油（C H (OH) ·1.26g/ml) 11.7ml
蒸馏水 500ml

0.32mol/L乙醇液

无水乙醇 9.33ml
蒸馏水 500ml

0.32mol/L丙醇液

正丙醇（比重0.803） 11.976ml
蒸馏水 500ml

化学名：2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid

中文名：羟乙基哌嗪乙硫磺酸

分子式：C8H18N2O4S

HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。其最大优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的PH值.在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中.大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙黄,碱性培养液呈深红.HEPES有些昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒. 原则上,HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度CO2培养环境的限制.实际操作中并非如此简单. 溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长也是很重要的。

HEPES使用方法有两种：

(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌.每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH 调pH至7.2,滤过除菌后使用.此时HEPES的使用浓度为10 mmol/L.

(2)亦可配成 100 x 贮存液（l mol/L），使用前取 99ml培养液加入 lml贮存液，最终应用浓度仍为10mmol/L。l mol/L（100 x）HEPES贮存液配制方法:取23.8g HEPES溶于90ml双蒸水中,用lN NaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶（2ml/瓶）

,4℃或-20℃保存.

本文发布于:2024-09-22 12:52:30，感谢您对本站的认可！

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