PBS缓冲液的配制方法

PBS缓冲液配方
不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。
我们实验室的配方:
A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:
磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。
B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:
酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。
pH -- A液 (ml) -- B液(ml)
5.60 -- 9.50 -- 0.25
5.91 -- 9.00 -- 1.00
6.24 -- 8.00 -- 2.00
6.47 -- 7.00 -- 3.00
6.64 -- 6.00 -- 4.00
6.81 -- 5.00 -- 5.00
测试探针6.98 -- 4.00 -- 6.00
7.17 -- 3.00 -- 7.00
7.38 -- 2.00 -- 8.00
7.73 -- 1.00 -- 9.00
8.04 -- 0.50 -- 9.50
一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)
拉紧带
NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl
用于细胞培养的PBS需含有氯化钾自动启闭阀
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可0.01M
弯头制作PBS缓冲液
称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。以下是我的总结: 
母液的配制: 
0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水
0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水
各种浓度PB(pH=7.4)的配制:
先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可,如:
0.1M PB(PH=7.4) :取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。 
若需要 NaCL 的话,加入 NaCL 至0.9%(g/100ml)即可。 
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 :
pH       0.2M NaH2PO4(ml)   0.2M Na2HPO4(ml)
5.7             93.5                          6.5
5.8             92                             8           
5.9             90                             10
6.0             87.7                          12.3
6.1             85                             15
6.2             81.5                          18.5
6.3             77.5                          22.5
6.4             73.5                          26.5
6.5             68.5                          31.5
6.6             62.5                          37.5行为监控
6.7             56.5                          43.5
6.8             51                            49
6.9              45                           55
7.0              38                           62
7.1              33                           67
7.2             28                            72
7.3              23                           77
www.77zizi7.4              19ml                         81ml
7.5              16                           84
7.6              13                           87
7.7             10.5                          0.5
7.8              8.5                          91.5
7.9             7                              93
8.0             5.3                           94.7 
磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB),磷酸氢二钠和磷酸二氢钠缓冲液配方

本文发布于:2024-09-22 22:35:27,感谢您对本站的认可!

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