苯酚硫酸法测定多糖

苯酚—硫酸法测定党参总糖

1．材料与方法

1．1 材料与试剂，仪器

1.1.1 材料、试剂

党参（肉党、普通纹党、产于中寨的纹党）；95％乙醇；苯酚；浓硫酸均为分析纯。

1.1.2 仪器与设备

FA-2400分析天平，101A型电热鼓风干燥箱，Mb型可调式电热板，电热恒温水浴锅，SK5200H超声清洗器，UV-9100紫外-可见分光光度计

1.2 方法

1.2.2 供试品溶液的制备

取党参粉末2g，置圆底烧瓶中，加95％乙醇3次（20.20.20ml）每次2h,过滤，蒸干乙醇，残

渣用水溶解，在电热板上加热，提取3次（50.50.50ml）,每次2h，过滤，滤液置于50ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度摇匀。

1.2.3 标准溶液的配制

精密称取105℃干燥至恒重的D-无水葡萄糖10mg置于100 mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度摇匀，得0.1mg／mL的储备溶液，备用。

1.2.3 5％苯酚溶液的制备

精确量取6.3ml 80％的苯酚溶液转移至100ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀后置于棕试剂瓶中，备用。(实验室苯酚为师配好的80％的溶液，避光密封保存于冰箱中，用时水浴加热使其成为透亮的溶液)

1.2.4 标准曲线的制备

精确吸取葡萄糖标准液0、1、2、3、4、5、6 mL，分别置于10 mL容量瓶中，以蒸馏水补至 10 mL摇匀，依次吸取2ml加入试管中，加入苯酚液1.0 mL和浓硫酸光碟机5.0 mL，混匀，在

室温放置30 min后，于波长490 nm处测定吸光度值。以吸光度值为纵坐标，葡萄糖浓度为横坐标绘制标准曲线。

(10*10异形刷-2mg.ml*1/10=10*10-3mg.ml-1=10μg/ml.20.30.40.50.60)

1.2.5 样品的测定

准确吸取供试品溶液0.1 mL加水定容至10mL，精确吸取此稀释液2mL于试管中，按标准曲线制备的方法测定吸光度值，并根据回归方程，求得其浓度，计算样品中总糖的含量。（党参溶液的浓度=2/50*0.1/10=1/2500g.ml-1=1/2.5 mg.ml-1=400μg.ml-1）

2 结果与分析

2.1 标准曲线

标准曲线回归方程建立用紫外分光光度计，在4 9 0 n m 的波长处测定吸光度，以试剂空白参比实验。结果见表1

Y=0.062X-0.0542，r2=0.9826，以吸光度为纵坐标葡萄糖浓度为横坐标绘制标准曲线见图

2.2 样品中多糖含量测定结果

按上述多糖含量测定方法测的样品的吸光度，并按标准曲线测得的多糖含量占药材总量如下表。

上图所得的标准曲线，线性不好，按此曲线药材中所得糖含量也不高，并且当标准溶液液为10ml时，测不出吸光度，所以改变标液浓度浓度，取葡萄糖标准液0、1、2、3、4、5、6 mL按上述方法重做，所得的吸光如环模

西花蓟马

Y=0.135X-0.0185，r2=0.9937，以吸光度为纵坐标葡萄糖浓度为横坐标绘制标准曲线见图

样品中多糖含量测定结果

按上述多糖含量测定方法测的样品的吸光度，并按标准曲线测得的多糖含量占药材总量如下表。

本文发布于:2024-09-25 07:17:15，感谢您对本站的认可！

标签：标准含量浓度曲线

留言与评论（共有 0 条评论）