此说明书仅适用于此说明书仅适用于基因组基因组DNA 提取试剂盒提取试剂盒，，使用前请务必仔细阅读说明书有关内容使用前请务必仔细阅读说明书有关内容，，若有任何疑问若有任何疑问，，欢迎致电厦门欢迎致电厦门致致善生物科技有限公司生物科技有限公司（（4006618810*************）进行咨询进行咨询，，您也可以登录我们公司的网站您也可以登录我们公司的网站（（www.zsandx ）了解相关信息或者通过E-mail ( ****************) 与我们进行沟通与我们进行沟通。。
一 产品简介
基因组DNA 提取试剂盒采用本公司自行研制的磁珠，用于从抗凝全血、新鲜或冻存组织、培养细胞、石蜡包埋组织、唾液、培养细菌等一系列不同样品中分离、纯化高质量的基因组DNA。 我们根据磁珠的独特分离作用，提供了一个极其简便的操作程序：样品裂解、磁珠吸附、洗涤以及洗脱。在最适的试剂及操作条件下，可获得高质量DNA。该方法具有简便、快捷、高效等特点，整个提取过程无须使用苯酚、氯仿等有机溶剂。
品名
规格 货号 基因组DNA 提取试剂盒
100T 4hk001
裂解液DL 120ml ×2 磁粒 40ml 洗涤液 50ml ×5 洗脱液 45ml 缓冲液HTL 20ml ×1 二硫苏糖醇（DTT ） 10管，0.18g/管 说明书 1份 储存条件储存条件：：本试剂盒所有试剂（除DTT 外）均可以室温保存，应避免阳光直射。当室温低于15℃时，裂解液中可能有结晶析出，38℃水浴加热几分钟，恢复澄清后即可使用，提取效率不受影响。DTT 需要于冰箱4℃保存。本试剂盒有效期为12个月， 请于有效期内使用。
安全信息：试剂中含刺激性化合物，操作时应小心，避免沾染皮肤，眼睛和衣服，若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。
三 使用者自配试剂
DTT 溶液
使用浓度为1mol/L 。
试剂盒中每管粉末状DTT 加入去离子水配制成1200ul ，即为1mol/L ，建议现配现用，配制好的DTT 溶液当次未使用完，可保存于4℃最多两周。
未溶解的粉末状DTT 请务必于冰箱4℃保存。
四 使用者自备试剂和设备
磁性分离架；
可调微量加液器及相应吸头； 旋涡混合器 ； 无水乙醇（分析纯）；
新鲜新鲜、、冻存冻存组织组织组织
恒温水浴锅； 蛋白酶K 粉末；
RNase A （100 mg/ml ）（选择使用）。
石蜡包埋组织石蜡包埋组织
恒温水浴锅； 高速离心机； 蛋白酶K 粉末；
RNase A （100 mg/ml ）（选择使用）； 二甲苯；
封口膜。
四 操作步骤
(一).抗凝全血样本提取操作流程抗凝全血样本提取操作流程 1 产品技术规格产品技术规格 检材类型
最高起始 用量范围
第一次洗脱 第二次洗脱 总提取量
体积 浓度 体积 浓度 全血
200~500ul
180ul
25～70ng/ul
180ul
10～35ng/ul
5～12ug 本试剂盒为提取500ul 全血所设计，目标DNA 的产量决定于全血样品中白细胞的数量。对本试剂盒，所用500ul 全血样品中白细胞的数量不得多于5×106
磨具抛光个。 重要提示重要提示：：
客户可以根据使用需要选择洗脱一次和洗脱二次，两次洗脱的DNA 浓度如上，洗脱的DNA，根据使用需要单独收集或者将第一次和第二次洗脱的DNA 收集在同一管中。
本试剂盒所用磁珠载体在一定范围内可以特异性的吸附承载DNA ，标本中核酸含量过高，会导致磁珠载体的凝聚，降低目标DNA 的提取量和纯度。
2 2 实验前试剂准备实验前试剂准备实验前试剂准备
配制洗涤液配制洗涤液：：用无水乙醇按照1：1体积比稀释洗涤液，即1份的洗涤液加入1份的无水乙
醇。稀释好后，做上标记表明为已加入乙醇的洗涤液，并确保瓶子盖严以防止挥发，配置好的洗涤液可置于室温保存6个月。
3 3 操作操作操作流程流程流程
重要提示重要提示：：在进行实验操作前在进行实验操作前，，请务必注意洗涤液中已经分别加入了无水乙醇请务必注意洗涤液中已经分别加入了无水乙醇，，并在使用前充分摇匀并在使用前充分摇匀。。 在吸取在吸取磁粒磁粒磁粒溶溶液前液前，，请务必注意要充分摇匀请务必注意要充分摇匀，，以确保以确保磁粒磁粒磁粒悬浮状态均匀悬浮状态均匀悬浮状态均匀。。 1
发动机摇臂取500ul 抗凝全血 （若为冻存的请待其完全解冻后再进行）于2ml 离心管中，加入800ul 的裂解液和60ul 的1M DTT
溶液，用取液器反复吹打或用旋涡混合仪使其充分混合5分钟，以使其完全裂解。 2
加入300ul 磁粒。在吸取在吸取磁粒磁粒磁粒前前，必须先涡旋振荡装必须先涡旋振荡装磁粒磁粒磁粒的试剂瓶的试剂瓶30秒，以确保以确保磁粒磁粒磁粒悬浮状态均匀悬浮状态均匀悬浮状态均匀。。用取液器反复吹打或用旋涡混合仪充分混匀，使磁粒始终保持悬浮状态5分钟。 3 将离心管放置于磁架上静置30秒，待磁粒完全吸附于离心管靠磁架一侧时方可吸去液体，液体尽量吸取干净。 4 从磁架上取下离心管，加入1200ul 裂解液，震荡混匀2分钟。
5 将离心管放置于磁架上静置30秒，待磁粒完全吸附于离心管靠磁架一侧时方可吸弃液体，液体尽量吸取干净。 6
从磁架上取下离心管，往离心管中加入1500ul 已加入乙醇的洗涤液，震荡混匀1分钟。将离心管放置于磁架上，磁性分离30秒，尽量吸弃液体。 7 重复步骤6二次。
8
离心管始终放在磁架上，室温晾干10—15分钟，每隔几分钟，可能会从磁粒中渗出液体，聚集在离心管底部，用取液器将这些液体及时取出。乙醇残留会抑制后续试验乙醇残留会抑制后续试验，，所以晾干时要确保乙醇挥发干净所以晾干时要确保乙醇挥发干净。。但也不要干燥太长时间但也不要干燥太长时间，，以免难以洗脱DNA 。晾干时间应根据磁粒用量晾干时间应根据磁粒用量、、实验室环境实验室环境、、温度等因素适当调节温度等因素适当调节，，以磁粒表面以磁粒表面、、离心管内壁没有明显液体离心管内壁没有明显液体、、磁粒表面成光滑状态为界。 9
向离心管中加入洗脱液180ul ，震荡混匀5-10分钟，使磁粒始终保持悬浮状态。
10 磁分离，将离心管放置于磁架上静置约30秒，待磁粒完全吸附于离心管靠磁架一侧时小心吸取液体放入新的离心管中，
即为提取的基因组DNA 溶液。使用者可根据使用需要选择进行第二次洗脱，操作方法同上。 重要提示重要提示：：
1.本操作步骤适用于500ul 全血提取，若标本使用量增加，则应按照相应的比例增加各种试剂的用量，以达到最佳提取目的。
2.所提取的DNA 若不立即使用，请于-20℃保存，以防DNA 降解。
(二).).新鲜新鲜新鲜、、冻存冻存组织样本提取操作流程组织样本提取操作流程组织样本提取操作流程 1 产品技术规格 检材类型 最高起始用量范围 洗脱液体积 浓度
总提取量 组织 10～20mg 180ul 50～110 ng/ul 10～20ug 小鼠尾 大鼠尾
1.2cm 0.6cm
180ul 180ul
50～110 ng/ul 50～110 ng/ul尼龙纤维植绒拭子
10～20ug 10～20ug
重要提示：本试剂盒所用磁粒载体在一定范围内可以特异性的吸附承载DNA ，标本中核酸含量过高，会导致磁
粒载体的凝聚，降低目标DNA 的提取量和纯度。对于不同类型动物检材，起始用量有所不同。理论上，动物组织检材用量不得多于20mg ，实验用小鼠尾检材用量不得多于1.2cm 、大鼠尾检材用量不得多于0.6cm 。
2 2 实验前试剂准备实验前试剂准备实验前试剂准备 蛋白酶蛋白酶K K 配制配制：：每20mg蛋白酶K 粉末中加入1ml 的去离子水，充分溶解后，按可以被5整除的体积分装。配置好的蛋白酶K 于-20℃保存，使用时应避免反复冻融。
配制洗涤液配制洗涤液：：用无水乙醇按照1：1体积比稀释洗涤液，即1份的洗涤液加入1份的无水乙醇。稀释好后，做上标记表明为已加入乙醇的洗涤液，并确保瓶子盖严以防止挥发，配置好的洗涤液可置于室温保存6个月。 3 3 样品的预处理样品的预处理样品的预处理 3.1 3.1 消化处理消化处理消化处理
组织组织：：取10～20mg 新鲜组织，充分剪碎后加入2ml 离心管中，加入200ul 的缓冲液HTL 、20ul 蛋白酶K 、10ul RNase （选择使用），于56℃过夜消化处理至组织消化完全。
鼠尾鼠尾：：取0.6cm （大鼠）或1.2cm(小鼠)尾，充分剪碎后加入2ml 离心管中，加入200ul 的缓冲液HTL 、20ul 蛋白酶K 、10ul RNase （选择使用），于56℃过夜消化处理至组织消化完全。
特别提示特别提示：： 对于较难处理的样品，可以按照上面方法消化处理3～4h ，然后再加入15～30 ul 蛋白酶K 过夜处理。 4 4 操作流程操作流程操作流程
重要提示重要提示：：在进行实验操作前在进行实验操作前，，请务必注意洗涤液中已经分别加入了无水乙醇请务必注意洗涤液中已经分别加入了无水乙醇，，并在使用前充分摇匀并在使用前充分摇匀。。 在吸取在吸取磁粒磁粒磁粒溶溶液前液前，，请务必注意要充分摇匀请务必注意要充分摇匀，，以确保以确保磁粒磁粒磁粒悬浮状态均匀悬浮状态均匀悬浮状态均匀。。 1 向消化完全的组织溶液中加入800ul 裂解液，用取液器反复吹打或用旋涡混合仪使其充分混合5分钟，以使其完全裂解。 2
加入300ul 磁粒。在吸取在吸取磁粒磁粒磁粒前前，必须先涡旋振荡装必须先涡旋振荡装磁粒磁粒磁粒的试剂瓶的试剂瓶30秒，以确保以确保磁粒磁粒磁粒悬浮状态均匀悬浮状态均匀悬浮状态均匀。。用取液器反复吹打或用旋涡混合仪充分混匀，使磁粒始终保持悬浮状态5分钟。 3 将离心管放置于磁架上静置30秒，待磁粒完全吸附于离心管靠磁架一侧时方可吸去液体，液体尽量吸取干净。 4 从磁架上取下离心管，加入1200ul 裂解液，震荡混匀2分钟。
5 将离心管放置于磁架上静置30秒，待磁粒完全吸附于离心管靠磁架一侧时方可吸弃液体，液体尽量吸取干净。 6
从磁架上取下离心管，往离心管中加入1500ul 已加入乙醇的洗涤液，震荡混匀1分钟。将离心管放置于磁架上，磁性分离30秒，尽量吸弃液体。 7 重复步骤6二次。
8
离心管始终放在磁架上，室温晾干10—15分钟，每隔几分钟，可能会从磁粒中渗出液体，聚集在离心管底部，用取液器将这些液体及时取出。乙醇残留会抑制后续试验乙醇残留会抑制后续试验，，所以晾干时要确保乙醇挥发干净所以晾干时要确保乙醇挥发干净。。但也不要干燥太长时间但也不要干燥太长时间，，以免难以洗脱DNA 。晾干时间应根据磁粒用量晾干时间应根据磁粒用量、、实验室环境实验室环境、、温度等因素适当调节温度等因素适当调节，，以磁粒表面以磁粒表面、、离心管内壁没有明显液体离心管内壁没有明显液体、、磁粒表面成光滑状态为界。 9
向离心管中加入洗脱液180ul ，震荡混匀5-10分钟，使磁粒始终保持悬浮状态。
10 磁分离，将离心管放置于磁架上静置约30秒，待磁粒完全吸附于离心管靠磁架一侧时小心吸取液体放入新的离心管中，
即为提取的基因组DNA 溶液。使用者可根据使用需要选择进行第二次洗脱，操作方法同上。 (三).). 石蜡包埋组织石蜡包埋组织样本提取操作流程样本提取操作流程样本提取操作流程 1 产品技术规格
检材类型
最高起始 用量范围
第一次洗脱 第二次洗脱 总提取量
体积 浓度
体积 浓度 石蜡包埋石蜡包埋组织组织 10～20mg 180ul
40～120ng/ul
180ul
20～60ng/ul
10～30ug
重要提示重要提示：：
本试剂盒所用磁珠载体在一定范围内可以特异性的吸附承载DNA ，标本中核酸含量过高，会导致磁珠载体的凝聚，降低目标DNA 的提取量和纯度。对于不同类型石蜡包埋组织，起始用量有所不同。理论上，石蜡包埋组织用量不得多于20mg 。
客户可以根据使用需要选择洗脱一次和洗脱二次，两次洗脱的DNA 浓度如上，洗脱的DNA，根据使用需要单独收集或者将第一次和第二次洗脱的DNA 收集在同一管中。
2 2 实验前试剂准备实验前试剂准备实验前试剂准备 蛋白酶蛋白酶K K 配制配制：：每20mg蛋白酶K 粉末中加入1ml 的去离子水，充分溶解后，按可以被5整除的体积分装。配置好的蛋白酶K 于-20℃保存，使用时应避免反复冻融。
配制洗涤液配制洗涤液：：用无水乙醇按照1：1体积比稀释洗涤液，即1份的洗涤液加入1份的无水乙醇。稀释好后，做上标记表明为已加入乙醇的洗涤液，并确保瓶子盖严以防止挥发，配置好的洗涤液可置于室温保存6个月。 3 3 样品的预处理样品的预处理样品的预处理 3.1 样品的准备样品的准备
1. 切片：用手术刀将石蜡块周围多余的石蜡切除，将含组织的蜡块切成5-10μm 的薄片。
2. 称重：称取10～20mg(不超过20mg)的样本放于1.5ml 离心管中。
3.2 3.2 脱蜡脱蜡脱蜡、、消化处理消化处理
1. 向样本中加入1ml 二甲苯，56℃水浴15min ,12000rpm 离心 2min ，小心吸弃上清（不要吸到切片），保留切片。
2. 根据蜡块的熔解情况及样本切片的大小，可选择性重复步骤1一到两次。
3. 加入1ml 无水乙醇旋涡混匀30s , 12000rpm 离心 2min ，小心吸弃上清（不要吸到切片）。
4. 重复步骤3一次。
5. 打开离心管管盖，在室温下（或37℃）放置10～15min至沉淀中的乙醇完全挥发。
6. 向每份样本中加入150ul 的缓冲液HTL 、15ul 蛋白酶K 、5ul R N ase A（选择使用），封口膜封口后于56℃消化处理至组织
完全消化（可选择过夜消化处理）。
7. 12000rpm 离心 5min 去除杂质，小心转移上清至一新的2ml 离心管中。 8. 封口膜封口，90℃处理 60min 。 4 4 操作流程操作流程操作流程
重要提示重要提示：：在进行实验操作前在进行实验操作前，，请务必注意洗涤液中已经分别加入了
无水乙醇请务必注意洗涤液中已经分别加入了无水乙醇，，并在使用前充分摇匀并在使用前充分摇匀。。 在吸取在吸取磁粒磁粒磁粒溶溶液前液前，，请务必注意要充分摇匀请务必注意要充分摇匀，，以确保以确保磁粒磁粒磁粒悬浮状态均匀悬浮状态均匀悬浮状态均匀。。 1 向消化处理过的组织溶液中加入800ul 裂解液，用取液器反复吹打或用旋涡混合仪使其充分混合5分钟，使其完全裂解。 2
加入300ul 磁粒。在吸取在吸取磁粒磁粒磁粒前前，必须先涡旋振荡装必须先涡旋振荡装磁粒磁粒磁粒的试剂瓶的试剂瓶30秒，以确保以确保磁粒磁粒磁粒悬浮状态均匀悬浮状态均匀悬浮状态均匀。。用取液器反复吹打或用旋涡混合仪充分混匀，使磁粒始终保持悬浮状态5分钟。 3 将离心管放置于磁架上静置30秒，待磁粒完全吸附于离心管靠磁架一侧时方可吸去液体，液体尽量吸取干净。 4 从磁架上取下离心管，加入1200ul 裂解液，震荡混匀2分钟。
5 将离心管放置于磁架上静置30秒，待磁粒完全吸附于离心管靠磁架一侧时方可吸弃液体，液体尽量吸取干净。 6
从磁架上取下离心管，往离心管中加入1500ul 已加入乙醇的洗涤液，震荡混匀1分钟。将离心管放置于磁架上，磁性分离30秒，尽量吸弃液体。 7 重复步骤6二次。
8
离心管始终放在磁架上，室温晾干10—15分钟，每隔几分钟，可能会从磁粒中渗出液体，聚集在离心管底部，用取液器将这些液体及时取出。乙醇残留会抑制后续试验乙醇残留会抑制后续试验，，所以晾干时要确保乙醇挥发干净所以晾干时要确保乙醇挥发干净。。但也不要干燥太长时间但也不要干燥太长时间，，以免难以洗脱DNA 。晾干时间应根据磁粒用量晾干时间应根据磁粒用量、、实验室环境实验室环境、、温度等因素适当调节温度等因素适当调节，，以磁粒表面以磁粒表面、、离心管内壁没有明显液体离心管内壁没有明显液体、、磁粒表面成光滑状态为界。 9
向离心管中加入洗脱液180ul ，震荡混匀5-10分钟，使磁粒始终保持悬浮状态。
10 磁分离，将离心管放置于磁架上静置约30秒，待磁粒完全吸附于离心管靠磁架一侧时小心吸取液体放入新的离心管中，
即为提取的基因组DNA 溶液。使用者可根据使用需要选择进行第二次洗脱，操作方法同上。 (四).). 细菌基因组DNA 提取提取操作流程操作流程操作流程 1 产品技术规格产品技术规格 检材类型
起始用量范围 第一次洗脱
预绞丝
第二次洗脱
总提取量
体积 浓度 体积 浓度 培养细菌
吹管系数2~6ml
180ul
20～80 ng/ul
180ul
10～40ng/ul
金属粉末涂料5～20ug
本试剂盒为提取2~6ml 培养细菌所设计，目标DNA 的产量决定于细菌的培养环境和目标细菌的浓度。对本试剂盒，所用1ml 培养细菌样品中的细菌的数量不得多于1×109
个。
重要提示重要提示：： 客户可以根据使用需要选择洗脱一次和洗脱二次，两次洗脱的DNA 浓度如上，洗脱的DNA，根据使用需要单独收集或者将第一次和第二次洗脱的DNA 收集在同一管中。
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