实验室常用溶液的配置
Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL
称取500mg于10mL超纯水中溶解，抽滤后1mL分装到离心管中，于-30℃冻存 X-gal：贮存浓度为20mg/mL
称取20mgX-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中，-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存，不需要过滤除菌 IPTG：贮存浓度为0.84mol/L
称取2gIPTG溶于8mL超纯水中，用水定容到10mL，用0.22um的一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中并于-30℃保存
CaCl2：贮存浓度为1mol/L
称取1.11gCaCl（或者CaCl:2H2O1.4698g）溶于8mL超纯水中，定容到10mL，用0,22um的
一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中，并于-30℃保存
LB培养基：
胰蛋白胨（Tyrtone）10g/L
酵母提取物（YeastExtraction）5g/L
氯化钠10/L
根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6，然后高压蒸汽灭菌，注意及时从灭菌锅中取出
无DNA酶的RNA酶：
将胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mmol/LTris-Cl（PH7.5）、15mmol/LNaCl中，配成10mg/mL的浓度，于100℃加热15min，缓慢冷却至室温，分装成小份保存于-20℃
Bradford贮存液
95%乙醇100mL
88%磷酸200mL
G2500.35g
室温下可储存，一般4℃
Bradford工作液
Bradford贮存液30mL
双蒸水425mL
95%乙醇15mL混合罐
88%磷酸30mL
储存于4℃
KCl300mM22.37g
KH2PO450mM6.81g
EDTA1mM0.292g(EDTA-2Na-2H2O)0.372g
定容至1L，调pH至8.0
包涵体洗涤液
KCl300mM22.37g
KH2PO450mM6.81g
EDTA5mM1.46g(EDTA-2Na-2H2O)1.86g
尿素2M120g
TritonX-1000.5%5ml
脱氧胆酸钠盐0.1%1g
定容到1L调pH至8.0
匀浆缓冲液（pH=7.5）
成分：
20mMHEPES0.002mol=0.476g加入0.952g 1.5mMMgCl20.00015mol=0.0036g加入0.0072g
0.2mMEDTA0.00002mol=0.00584g加入0.01168g
0.1MNaCl0.01mol=0.58g加入1.16g
0.5mM钒酸钠0.00005mol=0.0092g加入0.0184g
加100mL水进行溶解，NaOH调pH至7.5
0.2mMDTT总体积500μL加入0.1μL
0.4mMPMSF总体积500μL加入20μL
1%SDS加入50μL10%SDS
其中DTT和PMSF匀浆之前加入，SDS匀浆之后离心之前加入
DTT配成1M母液，溶于0.01M乙酸钠（pH=5.2）中，过滤除菌
PMSF配成10mM母液，溶于异丙醇冰浆机
10*PBS
NaCl80.0669g
KCl2.0129g硬件加密设备
Na2HPO414.1960g
KH2PO42.4496g
水定容至1L，使用时稀释10倍，用NaOH调pH至7.4 43,137mMNaCl,and2.7mMKCl
转膜缓冲液（含有SDS）
1L剂量
甘氨酸2.9g
Tris5.8g
SDS0.37g
甲醇200mL
水800mL
10×蛋白电泳缓冲液
1L剂量
Tris碱(Mr121.14)30.2g
甘氨酸(Mr75.07)188g
SDS(Mr288.38)10g
加水至1L
用时稀释10倍即可
30％丙稀酰胺
1L剂量
丙烯酰胺290g
N,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g
溶于600ml蒸馏水中，加热至37℃溶解，补足体积至1L，过滤，且pH不大于7.0
1MTris-Cl（pH6.8）
60.55gTris碱溶解于400ml蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500ml
1.5MTris-Cl（pH8.8）
90.83gTris碱溶解于400ml蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500ml。加约14.5ml浓盐酸，再调整到500ml体积
1MDTT
用20mL0.01mol/L乙酸钠溶液（pH=5.2）溶解3.09gDTT，过滤除菌后分装
考马斯亮蓝R-250染液
在90mL甲醇：水（1:1）和10mL冰乙酸混合液中溶解0.25g考马斯亮蓝R-250，过滤后室温保存
蛋白酶K（20mg/mL）
凝胶珠
灭菌的50mMTris（pH8.0），1.5mM乙酸钙溶解，配置成浓度为20mg/mL的溶液，-20℃保存
流式缓冲液PBS+5%FBS+0.02%sodiumazide
Water45mL
20%叠氮钠50μL
10*PBS5mL
FBS2.5mL
文献常见配方：PBS+0.5-1%BSA（5-10%FBS）+0.1%sodiumazide
酸酐
称取50g重铬酸钾（KCrO4）溶于80mL双蒸水中，90℃中溶解2h，每半小时搅拌促进溶解，溶解完成后，加入1000mL硫酸，分装于2个瓶子中。注意使用过程中，如果其中一瓶的效果不好，不要混合使用。使用5次，就要重配。
滴管
酸酐中浸泡24h，自来水冲洗至无明显可见颜，自来水正反面各20遍，双蒸水正反面各20遍，复印纸中包裹，烘干，加棉花塞和胶头，单独包装，灭菌，烘干。
双抗（青霉素和链霉素）
0.8g链霉素和80WU青霉素，一起溶于8mlPBS，单位分别为10^5ug/ml和10^5U/ml，然后稀释10倍，分别为10^4ug/ml和10^4U/ml，使用时，按照1%加入，分别为100ug/ml与100U/ml
培养基I
2%FCS，1%双抗，128uL/40mL肝素钠，RPMI1640
培养基II
0.1%FCS，1%双抗，128uL/40mL肝素钠，RPMI1640
完全培养基
10%FCS（5%FCS+5%鱼血清），1%双抗
LPS
称取2mgLPS溶于1mLPBS中，0.22μm滤膜过滤，硅化离心管，-20℃保存
1*Turk染液
GentianVioler（结晶紫）50mg
AceticAcid（冰乙酸）5mL
男性自卫慰器自己制作Water495mL
1%钠
1g钠溶于100mL的PBS中，充分混匀，避光保存（80ug/g用量）
诱导小鼠腹腔巨噬细胞所需溶液
硫代硫酸盐肉汤培养基(Thioglycollatebroth)：
称取3g，加入到100ml纯水中，高温121℃灭菌15min，然后冷却到室温，再重复2次，进行老化操作。此时已经溶解，呈现透明溶液。
冲洗液：
RPMI1640+1%双抗
培养基：
RPMI1640+10%FBS+1%双抗
氯化铵红细胞裂解液（10×的储存液）参考流式中文网
80.2gNH4Cl(1.5M)
8.4gNaHCO3(100mM)
3.7gEDTA二钠(10mM)
加水至900ml，然后用1M的HCl或1M的NaOH调节pH值至7.4。最后加水至1升。
该10*的储存液可在4℃保存6个月。
工作液的配制：在使用前蒸馏水稀释10倍即可。（1份储存液加上9份水）。工作液用来裂解红细胞。不能以<10*的浓度储存，否则会形成碳酸铵而失效。
ACK裂解液参考文献Dynamicvariationincyclingofhematopoieticstemcellsinsteadystateandinflammation,JEM,2011
ACK(Ammonium-Chloride-Potassium)LysingBuffer
AmmoniumChloride150mMMw53.5
PotassiumBicarbonate10mMMw100.1
EDTA0.1mMMw372.0
ACKLysisBuffer(1L)
Component Amount FinalConcentration
光端机箱NH4Cl 8.3g 0.15M
KHCO3 1.0g 10mM
EDTA 200ul0.5M 0.1mM
addddH2Oto800ml,adjustpHto7.2-7.4,finalizevolumeto1LwithddH20
RedBloodCellLysisUsingACKLysingBuffer
1)CollectwholebloodbyvenipunctureinEDTA-treatedcollectiontubes.
2)Pipette1mLEDTA-treatedwholebloodintoatubecontaining10-20mLofACKLysingBufferatroomtemperature.
3)AllowthebloodsampleplusACKLysingBuffertoincubateatroomtemperaturefor3–5minutes.Lysisoftheredcellsshouldbeevidentduringthisincubation.
4)Collectthewhitebloodcellsbycentrifugationat300xgfor5minutesatroomtemperature.
5)Aspiratethesupernatant,leavingapproximately50uLtoavoiddisturbingthepellet.
6)Gentlymixthecellsandtheremainingfluid,thenadd5mLcoldphosphatebufferedsaline.
7)Mixthecellsandphosphatebufferedsaline,andthencollectthecellsbycentrifugationat300xgfor5minutesat2-8°C.
8)Aspiratethesupernatantandresuspendthecellsinphosphatebufferedsaline,supplementedwithcarrierproteinifdesired,at2-8°C.
9)Thecellsarereadyforfurtheranalysis.
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